肝细胞生长因子受体在高糖诱导肾I间质成纤维细胞中的表达及其意义

目的体外观察高糖刺激成纤维细胞时,肝细胞生长因子(HGF)受体c-met的表达及HGF/c-met系统的活性.方法高糖刺激细胞后,采用RT-PCR方法分析HGF、c-met mRNA水平.Western印迹分析c-met蛋白质.同时检测外源加入HGF对TGF-β、c-met表达影响,以及采用抗c-met抗体处理后的表达.结果高糖刺激早期HGF、c-met mRNA快速上升.另外,c-met mRNA、蛋白水平明显上调.HGF可以诱导c-met表达,同时降低TGF-β表达.结论c-met局部上调在糖尿病肾脏损伤过程中起重要作用.     

葡萄糖对人牙周膜成纤维细胞OPG、RANKLmRNA表达的影响

目的：以体外培养的人牙周膜成纤维细胞（HPDLF）为研究对象,观察不同浓度的葡萄糖对HPDLF中骨保护素（OPG）、核因子KB受体活化剂配体（RANKL）mRNA表达的影响,探讨葡萄糖在牙槽骨吸收中的作用。方法：组织块法体外原代培养HPDLF并鉴定,选择4-8代的HPDLF作为实验的靶细胞,不同浓度的葡萄糖（0、5．5、11．1、16．7、22．2、33．3mmol／1）干预HPDLF,半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测HPDLF中OPG、RANKL mRNA的表达。结果：高浓度的葡萄糖可下调HPDLF中OPG mRNA的表达,呈剂量依赖性;可上调RANKL mRNA的表达,也呈剂量依赖性,且使RANKL／OPG mRNA的比值随着葡萄糖浓度的增高而呈现持续上升的趋势。结论：糖尿病时,牙周组织中高浓度的葡萄糖,可下调OPG的表达,上调RANKL的表达,使RANKL／OPG的比值升高,调节破骨细胞分化,刺激骨吸收,导致牙槽骨的破坏,加重牙周病的病情。     

黄芪对高糖作用下肾间质成纤维细胞表达HGF的影响

目的：在体外研究高糖刺激人肾脏间质成纤维细胞时，ＨＧＦ、ＴＧＦ－β的表达以及黄芪延缓糖尿病肾病与其的相关性。方法：将人肾脏间质成纤维细胞分别培养于不同浓度的葡萄糖中，于 ２４ ｈ后用 ＲＴ－ＰＣＲ方法检测ＨＧＦ ｍＲＮＡ的转录水平，继而用不同浓度的 ＨＧＦ刺激细胞来现察 ＴＧＦ－βｍＲＮＡ的表达。随即用黄芪药物血清刺激细胞，观察ＨＧＦ的表达情况。结果：高浓度葡萄糖培养的细胞早期就有ＨＧＦ表达，之后表达逐渐下降，而ＴＧＦ－β在此之后出现表达上升。同时外源性ＨＧＦ可以抑制ＴＧＦ－βｍＲＮＡ的表达。黄芪含药血清可以显著刺激细胞表达ＨＧＦ。结论：高糖刺激后可以诱导ＨＧＦ表达，该表达的上升是一种有益的防御反应。此外，外源性加入ＨＧＦ可以降低ＴＧＦ－β的表达，从而促进细胞外基质的降解。黄芪通过诱导ＨＧＦ的产生，起到抗纤维化的作用，从而延缓糖尿病肾病的进展。     

Glibenclamide stimulates and glucose inhibits glucagon release induced by calcium deprivation

The effects of low extracellular calcium levels on glibenclamide- and glucose-induced A-, B-, and D-cell secretion were investigated using the perfused pancreas preparation of the rat. At normal (2.6 mM) calcium, glucagon secretion was unaffected by glibenclamide (1 microgram/ml) and transiently suppressed by glucose (6.7 and 16.7 mM). Reduction of extracellular calcium to 0.24 mM promptly and persistently enhanced glucagon secretion in the presence of 3.3 mM glucose; this effect of low calcium was, however, diminished (P less than 0.001) by 54% and 61% when the glucose concentration was increased to 6.7 and 16.7 mM, respectively. In contrast, glibenclamide enhanced the glucagon response to calcium reduction, a twofold stimulation by the drug being observed at all glucose concentrations. Reduction of calcium to 0.24 mM failed to inhibit first-phase glibenclamide or glucose-induced insulin release; second phase was, however, inhibited whether induced by glibenclamide (in the presence of 6.7 mM glucose) or by glucose 16.7 mM per se. Reduction of calcium uniformly and completely abolished glibenclamide and glucose-induced somatostatin responses. It is concluded that: (1) the glucagon response induced by calcium deprivation is inhibited by glucose but potentiated by glibenclamide, and (2) reversal of a D-cell paracrine effect could underlie the glibenclamide effect.     

红细胞生成素对高糖诱导肾小管细胞凋亡的影响

目的 探讨红细胞生成素（EPO）是否可以抑制高糖诱导的大鼠近端肾小管上皮细胞凋亡及其相关机制。 方法 传代培养大鼠近端肾小管上皮细胞（NRK-52E）,分为正常对照组（NC组）、渗透浓度对照组（OC组）、高糖组（HG组）、高糖+EPO 50 U/ml组（E1组）和高糖+EPO 100 U/ml组（E2组）。免疫荧光检测NRK-52E细胞有无EPO受体（EPOR）表达。Western印迹检测高糖对EPOR表达的影响。流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡指数。荧光探针CM-H2DCFDA检测细胞内活性氧（ROS）的水平。RT-PCR检测bcl-2、bax、capases-3 mRNA的表达。 结果 （1）NRK-52E细胞表达EPOR,且高糖可刺激EPOR表达增加。（2）高糖可诱导NRK-52E细胞凋亡,与葡萄糖相同渗透浓度的甘露醇不能明显诱导细胞凋亡。E1、E2组细胞早、晚期凋亡率显著低于HG组（P < 0.05）。（3）高糖刺激 NRK-52E细胞后,细胞内ROS产生增多,bcl-2 mRNA的表达下调,bax、caspase-3 mRNA的表达上调。EPO可以抑制细胞内ROS的产生,上调bcl-2 mRNA 表达,下调bax、caspase-3 mRNA 表达。 结论 EPO可能通过EPOR的介导,缓解高糖诱导的氧化应激,上调bcl-2 mRNA表达,下调bax、caspase-3 mRNA表达,抑制NRK-52E细胞凋亡。     

钙通道阻滞剂对低温保存大鼠肝脏的保护作用

目的：研究钙通道阻滞剂是否减轻低温保存下肝细胞的钙超载并起到保护肝脏的作用。方法：低温保存大鼠肝细胞于不同时限,按保存液的不同成分分组：（1）对照组：DMEM液;（2）实验Ⅰ组：DMEM液＋Verapamil(维拉帕米）;（3）实验Ⅱ组：DMEM液＋Nifedipine(硝苯地平）;（4）实验Ⅲ组：DMEM液＋Diltiazem(硫氮卓酮）。用Fura-2法测定低温保存下的大鼠肝细胞内钙和肝功能,并在光镜和电镜下观察肝脏的结构。结果：细胞内钙及肝功能测定,各实验组与对照组差异显著;组织学观察,保存0－48h各实验组损伤明显低于对照组。结论钙通道阻滞剂对低温保存肝脏有保护作用,且三类药物中帕米作用最强,硝苯地平和硫氮卓酮次之。     

氧自由基清除剂对ESWL肾损伤保护作用的临床观察

目的 探讨氧自由基清除剂古拉定在ESWI。肾损伤的保护作用。方法 24例肾结石患者分两组，对照组12例ESWL前不做任何处理。治疗组12例在ESWL前1h肌注古拉定．剂量600mg。二组分别于ESWL前1天，ESWL后第1、4、7天取血、尿标本。血标本计算过氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)，尿标本计算β2-MG。结果 治疗组术后第1、4天血SOD降低幅度和MDA升高幅度均明显低于对照组。结论 在ESWL过程中存在氧自由基对肾脏的损伤，加用外源性氧自由基清除剂可有效地抑制这种损伤．从而对受治肾起保护作用。     

霉酚酸酯对高糖所致大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响

霉酚酸酯（MMF）是一种新型的免疫抑制剂。本研究旨在探讨MMF对不同浓度葡萄糖所致的系膜细胞增殖及细胞外基质增多是否有抑制作用。     

The effects of low-level laser irradiation on cellular viability and proliferation of human skin fibroblasts cultured in high glucose mediums

Delayed wound healing is one of the most challenging complications of diabetes mellitus (DM) in clinical medicine. This study has aimed to evaluate the effects of low-level laser therapy (LLLT) on human skin fibroblasts (HSFs) cultured in a high glucose concentration. HSFs were cultured either in a concentration of physiologic glucose (5.5 mM/l) or high glucose media (11.1 and15?mM/l) for either 1 or 2 weeks after which they were subsequently cultured in either the physiologic glucose or high concentration glucose media during laser irradiation. LLLT was carried out with a helium–neon (He–Ne) laser unit at energy densities of 0.5, 1, and 2 J/cm², and power density of 0.66 mW/cm² on 3 consecutive days. HSFs’ viability and proliferation rate were evaluated with the dimethylthiazol-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. The LLLT at densities of 0.5 and 1 J/cm² had stimulatory effects on the viability and proliferation rate of HSFs cultured in physiologic glucose (5.5 mM/l) medium compared to their control cultures (p?=?0.002 and p?=?0.046, respectively). All three doses of 0.5, 1, and 2 J/cm² had stimulatory effects on the proliferation rate of HSFs cultured in high glucose concentrations when compared to their control cultures (p?=?0.042, p?=?0.000, and p?=?0.000, respectively). This study showed that HSFs originally cultured for 2 weeks in high glucose concentration followed by culture in physiologic glucose during laser irradiation showed enhanced cell viability and proliferation. Thus, LLLT had a stimulatory effect on these HSFs.     

右美托咪定对脂多糖诱导的脓毒症大鼠全身炎症反应和肺损伤的影响

目的观察脂多糖(LPS)对大鼠血浆和肺组织中的炎性因子和Toll样受体4(TLR4)表达的影响及右美托咪定的干预作用。方法雄性SD大鼠40只,250~300g,随机分为四组。Control组(n=10)生理盐水1ml·kg~(-1)·h~(-1)大鼠尾静脉泵注6h;DEX组(n=10)右美托咪定(负荷量6.5μg·kg~(-1)·h~(-1),10min;5μg·kg~(-1)·h~(-1)维持)大鼠尾静脉泵注6h;LPS组(n=10)经大鼠尾静脉注射7.5mg/kg的LPS后继续生理盐水泵注6h;LPS+DEX组(n=10)经大鼠尾静脉注射7.5mg/kg的LPS后泵注右美托咪定6h。以6h为实验终结点,并于此时行右心室取血和肺组织标本的制备。采用ELISA法检测血浆IL-1、IL-6、TNF-α浓度,Western blot法检测肺组织TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、NF-κB蛋白含量;检测大鼠肺组织湿/干比(W/D);并用Murakami法评测肺损伤程度。结果与Control组比较,LPS组大鼠血浆IL-1、IL-6和TNF-α浓度明显升高,肺组织中的TLR4、MyD88、NF-κB蛋白含量明显升高(P0.01),肺W/D明显升高;LPS+DEX组上述指标差异均无统计学意义。Control组和DEX组未见明显肺损伤,LPS组肺间质水肿、炎性细胞浸润明显,LPS+DEX组肺损伤程度明显减轻(P0.01)。结论 LPS的刺激可以明显升高大鼠血浆中炎性因子以及肺组织中TLR4的表达水平,右美托咪定的干预可以减轻这一趋势,缓解大鼠的全身炎症和肺水肿的程度。     

褪黑素对大鼠腹膜透析相关性腹膜纤维化的影响

目的观察褪黑素(melatonin,MT)对大鼠腹膜透析相关性腹膜纤维化的影响。方法将38只雄性SD大鼠分为对照组(6只)、腹膜纤维化模型组(8只)、模型+低剂量MT(5mg·kg~(-1)·d~(-1))腹腔给药组(8只)、模型+中剂量MT(10mg·kg~(-1)·d~(-1))腹腔给药组(8只)、模型+高剂量MT(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))腹腔给药组(8只)。腹腔注射4.25%腹膜透析液100 ml·kg~(-1)·d~(-1)建立腹膜纤维化大鼠模型。实验第28天行4h腹膜平衡实验(peritoneal equilibration test,PET),量取超滤量(ultrafiltration,UF),检测腹透液尿素氮浓度(dialysate urea nitrogen concentration,D)、血浆尿素氮浓度(plasma urea nitrogen concentration,Purea)、初始腹膜透析液葡萄糖浓度(D0)、4 h后透出液葡萄糖浓度(D4),并计算D/Purea、D4/D0。取大鼠壁层腹膜组织行HE和Masson染色,采用免疫组化方法检测转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1),胶原Ⅰ(collagenⅠ,Col-Ⅰ)和α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达。结果 4 h PET显示模型组与对照组相比,UF和D4/D0明显减少(P0.05),D/Purea明显增加(P0.05);MT各给药组与模型组比较,UF和D4/D0明显增加(P0.05),D/Purea明显减少(P0.05);HE和Masson染色显示对照组腹膜菲薄,间皮细胞连接紧密,模型组腹膜明显增厚,部分可见间皮细胞缺失,间皮下可见胶原沉积,MT各给药组上述腹膜病理改变较模型组明显减轻;免疫组化显示模型组TGF-β1、Col-Ⅰ、α-SMA表达明显高于对照组(P0.05),MT各给药组表达明显低于模型组(P0.05)。结论 MT能通过改善腹膜的结构和功能来发挥其对抗大鼠腹膜纤维化的作用并能抑制TGF-β1、Col-Ⅰ和α-SMA表达。     

褪黑素抑制高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞凋亡

目的探讨褪黑素（MT）对于高糖诱导的肾小球系膜细胞（MC）凋亡中的作用及机制。方法光学显微镜观察大鼠MC凋亡的形态学变化;流式AnnexinV／PI双染法检测不同浓度MT对大鼠MC细胞凋亡率的影响;免疫细胞化学检测细胞色素C的表达改变。结果MT对30mmol／L葡萄糖诱导的MC高凋亡率有明显的抑制作用,呈剂量依赖性关系;并能明显抑制细胞色素C的表达。结论MT可抑制高糖诱导的大鼠MC高凋亡率,这种作用部分通过调控细胞色素C来实现的。     

脱氢抗坏血酸对高糖诱导系膜细胞产生氧自由基的影响

目的 探讨脱氢抗坏血酸(DHA)对高糖诱导系膜细胞产生氧自由基(ROS)的影响。 方法 (1)原代培养大鼠系膜细胞；(2)以Fe3+还原法检测细胞内抗坏血酸(AA)和DHA浓度，观察系膜细胞摄取AA和DHA的情况及葡萄糖、葡萄糖转运蛋白(GLUT)抑制剂细胞松弛素B对其的影响；(3)采用激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内ROS，观察高糖诱导系膜细胞ROS产生的情况及不同浓度DHA对其的影响；(4)采用凝胶电泳迁移率法(EMSA)检测活性蛋白1(AP-1)和DNA的结合活性，观察DHA对高糖诱导的系膜细胞内AP-1 活性的影响。结果 (1)AA不能由细胞外进入系膜细胞，而DHA可以进入，并且随着细胞外葡萄糖浓度的增加，其进入速度减慢；细胞松弛素B则完全抑制了DHA进入到系膜细胞。(2)高糖快速诱导系膜细胞ROS产生增多；DHA抑制了高糖的这种作用，并且该抑制作用在≤4 mmol/L的浓度范围内呈浓度依赖性。(3)DHA抑制了高糖诱导的系膜细胞内AP-1 的激活。 结论 (1)系膜细胞是依赖DHA利用Vit C的细胞型；DHA进入该细胞依赖GLUT介导，高糖可抑制其进入细胞。(2)DHA可有效抑制高糖诱导的系膜细胞ROS产生增多，并在一定范围内呈浓度依赖性。(3)DHA在抑制ROS产生的同时，也显著抑制了高糖诱导的AP-1 的激活。     

Paracrine anti‐fibrotic effects of neonatal cells and living cell constructs on young and senescent human dermal fibroblasts

Senescent cells observed in the area of chronic wounds have been proposed to affect wound healing. Therapeutic approaches against chronic wounds include, among others, the local application of living cell constructs (LCCs), containing fibroblasts and/or keratinocytes. Accordingly, the aim of the present work was to examine the effects of factors secreted by early passage neonatal fibroblasts and LCCs—in the form of a conditioned medium (CM)—on senescent adult dermal fibroblasts regarding functions related to the healing process, i.e., cell proliferation, alpha‐smooth muscle actin and metalloproteinase expression, and collagen synthesis. Target cells were fibroblasts senescent either due to subsequent divisions (replicative senescence) or due to an exogenous stress (stress‐induced premature senescence). No effect on the proliferation of senescent fibroblasts was observed, as expected. All CMs were found to inhibit overall collagen synthesis both in early passage and in senescent fibroblasts. The LCC‐derived CM was found to be more potent than fibroblast‐derived CMs and, furthermore, to inhibit alpha‐smooth muscle actin expression. In conclusion, these results may indicate anti‐contractile and anti‐fibrotic activities of factor(s) secreted by neonatal skin fibroblasts, and more intensely by LCCs on adult donor‐derived fibroblasts. These activities seem to persist during senescence of the target cells.     

高糖对大鼠肾成纤维细胞VEGF和PEDF表达的影响

目的探讨高糖对体外培养的大鼠肾成纤维细胞（NRK）血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）和色素上皮衍生因子（pigment epithelium derived factor,PEDF）表达的影响。方法采用RT-PCR分析方法,测定在不同浓度高糖、不同时间点NRK细胞VEGF与PEDF mRNA的表达。设5．6mmol／L葡萄糖组为正常对照组。结果与正常组相比,加入不同浓度高糖的各组NRK细胞VEGF mRNA的表达明显升高（P〈0．05）,PEDF mRNA的表达明显下降（P〈0．05）,呈剂量依赖性改变;随着各组作用时间的延长,VEGF mRNA的表达呈上升趋势（P〈0．05）,PEDF mRNA的表达呈下降趋势（P〈0．05）,呈时间依赖性改变;VEGF与PEDF之间呈明显负相关（r=-0．811,P〈0．05）。结论在高糖环境中,体外培养的NRK细胞VEGF和PEDF表达失衡,PEDF表达下降的同时VEGF表达增加,两者的表达失衡可能在糖尿病肾病（DN）的发生发展中起一定的作用。     

肝细胞生长因子受体在高糖诱导肾间质成纤维细胞中的表达及其意义

目的 体外观察高糖刺激成纤维细胞时，肝细胞生长因子（HGF）受体c-met的表达及HGF／c-met系统的活性。方法 高糖刺激细胞后，采用RT－PCR方法分析HGF、c-met mRNA水平。Western印迹分析c-met蛋白质。同时检测外源加入HGF对TGF－β、c-met表达影响，以及采用抗c-met抗体处理后的表达。结果 高糖刺激早期HGF、c-met mRNA快速上升。另外，c-met mRNA、蛋白水平明显上调。HGF可以诱导c-met表达，同时降低TGF－β表达。结论 c-met局部上调在糖尿病肾脏损伤过程中起重要作用。     

高糖及高糖波动对MG63细胞株氧化应激的影响

目的 研究波动性葡萄糖和恒定高葡萄糖对MG63细胞增殖、细胞周期及氧化应激的影响,探讨波动性葡萄糖造成糖尿病性骨质疏松症可能的发病机制.方法 体外培养的人成骨肉瘤MG63细胞株,随机分为正常对照NG组(葡萄糖浓度为5.5mmol/L),恒定高葡萄糖HG组(含葡萄糖33.3mmol/L),波动性葡萄糖FG组(5.5/33.3mmol/L),共作用24h.MTT比色分析法测定细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率.取MG63细胞培养上清液,以黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,以硫代巴比妥酸为底物检测丙二醛(MDA)含量.结果 (1)高糖及高糖波动可抑制MG63细胞的增殖,与高糖组相比,高糖波动组的抑制效应更加明显.(2)高糖及高糖波动可阻滞MG63细胞周期,使G1期细胞比例增加,S期比例减少,诱导细胞凋亡.高糖波动组作用更加明显.(3)高糖作用下MG63细胞SOD活性降低(P＜0.05),MDA水平升高(P＜0.05),高糖波动组更加明显.结论 波动性葡萄糖可加重高糖环境下MG63细胞的氧化应激状态,抑制成骨细胞增殖,阻滞其细胞周期,诱导细胞凋亡.此可能是糖尿病性骨质疏松症的一个重要的发病机制.     

丁酸钠对脂多糖诱导的急性肺损伤大鼠的肺保护研究

目的 探讨丁酸钠(sodium butyrate,SB)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性肺损伤(acute lunginjury,ALI)大鼠是否具有肺保护作用. 方法 40只雄性SD大鼠采用随机数字表法分成4组(每组10只):C组(对照组,静脉注射生理盐水2 ml/kg)、SB组(腹腔注射SB 500 mg/kg)、LPS组(静脉注射LPS 6 mg/kg)和SB+LPS组(于注射LPS后即刻和4h分别腹腔注射SB 500 mg/kg).6h后观察肺组织病理学变化,测定肺组织湿干重比(wet/dry weight ratio,W/D)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性、丙二醛(malonaldehyde,MDA)、一氧化氮(nitric oxide,NO)含量及血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素(interleukin,IL)-1β、IL-8、高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB-1)、IL-10含量. 结果 与LPS组比较,SB+LPS组肺组织损伤程度明显减轻,W/D下降(4.48±0.23vs4.20±0.11,P＜0.05),组织MPO活性、MDA和NO含量显著降低(0.84±0.05)vs(0.68±0.03),(5.75±0.19)vs(2.74±0.20),(41 ±4)vs(33±7) (P＜0.01),血清TNF-α、IL-1β、IL-8、HMGB-1含量降低(2350±121)vs(1150±154),(395±20)vs(203±18),(89±7)vs(50±5),(115± 12)vs(62±16) (P＜0.05),IL-10含量增加(281±25)vs(101±14)(P＜0.05). 结论 SB能够通过抑制中性粒细胞聚集和促炎症因子的产生,抑制肺部脂质过氧化和硝基化效应,从而减轻肺水肿和细胞损伤,发挥肺保护作用.     

脱氢抗坏血酸对高糖诱导肾小管上皮细胞产生氧自由基的影响

目的 探讨脱氢抗坏血酸(DHA)对高糖诱导肾小管上皮细胞产生氧自由基的影响&#65377;方法 (1)传代培养肾小管上皮细胞;(2)以Fe3+还原法检测细胞内抗坏血酸(AA)浓度,观察肾小管上皮细胞摄取AA和DHA的情况及葡萄糖和葡萄糖转运蛋白(GLUT)抑制剂细胞松弛素B(cytochalasin B)对其影响;(3)激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内氧自由基,观察高糖诱导肾小管上皮细胞氧自由基产生的情况及不同浓度DHA对其影响&#65377;结果 (1)AA不能由细胞外进入肾小管上皮细胞,而DHA可以进入,并且随着细胞外葡萄糖浓度的增加,其进入速度减慢&#65377;细胞松弛素B则完全抑制了DHA进入到肾小管上皮细胞, 而固定葡萄糖浓度(25 mmol/L)时,随着DHA浓度的增加,DHA进入细胞内的速度逐渐增快&#65377;(2)高糖快速诱导了肾小管上皮细胞氧自由基产生增多,DHA抑制了高糖的这种作用,并且该抑制作用在浓度小于&#65380;等于4 mmol/L的范围内呈浓度依赖性&#65377;结论 (1)肾小管上皮细胞是依赖DHA利用VitC的细胞型,DHA进入该细胞依赖GLUT介导,高糖可抑制其进入细胞;(2)DHA可有效抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞氧自由基产生增多,并在一定范围内呈浓度依赖性&#65377;     

高糖诱导足细胞发生上皮-间叶细胞转分化

目的 通过观察高糖是否引起小鼠足细胞发生上皮-间叶细胞转分化现象,探讨糖尿病肾小球损伤的可能机制。 方法 以小鼠永生化足细胞株为研究对象,予不同浓度葡萄糖（12.5、25、50 mmol/L）处理该细胞36 h,并设低糖（5.6 mmol/L）和甘露醇（50 mmol/L）处理组为对照组。采用蛋白免疫印迹和间接免疫荧光染色方法检测α平滑肌肌动蛋白 （α-SMA）、迁连蛋白（FN）、CD2相关蛋白（CD2AP）和Wilms’肿瘤1基因（WT-1）蛋白的表达。 结果 低糖（5.6 mmol/L）和甘露醇（50 mmol/L）处理条件下小鼠足细胞表达WT-1、CD2AP,基本不表达α-SMA和FN;而予不同浓度葡萄糖处理36 h后,足细胞中α-SMA和FN表达水平呈剂量依赖性上调（P < 0.05）。间接免疫荧光染色结果也显示,与低糖组相比,高糖组中 α-SMA阳性的足细胞比例显著增加（P < 0.05）。同时,蛋白免疫印迹结果还表明高糖可呈剂量依赖性方式下调WT-1和CD2AP的表达（P < 0.05）。 结论 在高糖条件下,足细胞发生向间叶细胞表型的转分化可能是引起足细胞功能失调,进而引起糖尿病肾小球损伤发生的作用机制之一。