非霍奇金淋巴瘤多药耐药的实验研究

目的 探讨初发非霍奇金淋巴瘤(NHL)mdrl mRNA及多药耐药蛋白P糖蛋白(P-gp)、肺耐药蛋白(LRP)和多药耐药相关蛋白(MRP)的表达频率及临床意义.方法 采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)半定量方法检测41例初治NHL患者淋巴结活组织中瘤细胞mdrl mRNA的表达,采用流式细胞仪免疫荧光法检测P-gP、LRP、MRP的表达,以13例反应性增生淋巴结患者作为对照组.并分析多药耐药蛋白表达与NHL临床特征的关系.结果 41例NHL患者中,11例mdrl mRNA表达阳性,8例P-gP表达阳性,7例MRP表达阳性,15例LRP表达阳性.NHL组与对照组比较,MRP阳性率差异无统计学意义(P=0.887),LRP阳性率明显增高(P=0.047).NHL患者淋巴结组织P-gP、MRP、LRP表达两两之间均不存在相关关系,P-gP表达与mdrl mRNA表达正相关(r=0.396,P=0.01).P-gP表达与临床分期、LDH水平有关(均P<0.05),而与恶性分级无关.MRP表达与临床分期、恶性分级、血清乳酸脱氢酶(LDH)水平均无关(均P>0.05),而LRP表达与三者均有关(均P<0.05).P-gP和LRP表达阳性患者的完全缓解(CR)率分别为37.5%和53.3%,低于阴性表达者(均P<0.05),化疗疗效较差,而MRP表达与化疗疗效无关.结论 P-gP、LRP可能是NHL原发耐药的主要因素,影响NHL患者的化疗疗效,而MBP与NHL原发耐药无关,不影响NHL患者的化疗疗效.     

初治急性白血病患者p170和MRP蛋白表达与预后的关系

目的：探讨多药耐药蛋白(p170)和多药耐药相关蛋白(MRP)表达与初治急性白血病(AL)患者化疗效果的关系。方法：用流式细胞仪检测29例初治AL患者骨髓单个核细胞中p170和MRP蛋白表达。结果：初治AL患者p170和MRP蛋白表达率分别为37.9％和41.4％；MRP蛋白阳性与阴性患者的首次完全缓解(CR)差异无显著性(P＞0.05)；而p170蛋白阳性与阴性患者的首次完全缓解(CR)有显著性差异(P ＜0.05)；p170和MRP蛋白两者之间无相关性。结论：作为预测初治AL患者化疗效果的敏感性指标，p170明显优于MRP蛋白。     

胃癌中P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白、肺耐药蛋白的表达及其意义

 目的　检测胃癌组织中P-糖蛋白（P-gp）、多药耐药相关蛋白（MRP）、肺耐药蛋白（LRP）的表达,分析其与胃癌临床病理因素的关系。方法　采用免疫组织化学SP法对59例胃癌患者癌组织进行研究。结果　在59例胃癌患者中P-gp阳性率最高[86.4 %（51例）],其次为LRP[84.7 %（50例）],二者呈正相关（r＝0.803）;MRP阳性率最低[27.1 %（16例）]。P-gp、MRP、LRP与分化程度无关（均P＞0.05）。P-gp与临床分期呈正相关（r＝0.742）,MRP、LRP均与胃癌浸润深度、淋巴结转移与否及分化程度无关。结论　P-gp、MRP、LRP在未接受化疗胃癌组织中高表达,提示胃癌中存在P-gp、MRP、LRP介导的原发性耐药。     

P-gp、PKC-α和MRP在上皮性卵巢癌中的表达及其临床意义

目的探讨P-gp、PKC-α和MRP在上皮性卵巢癌中的表达及其临床意义。方法运用免疫组织化学技术(S-P法)检测P-gp、PKC-α和MRP在50例上皮性卵巢癌、20例卵巢良性肿瘤和10例正常卵巢组织中的表达。结果P-gp、PKC-α和MRP三个指标在上皮性卵巢癌组织中阳性率分别为48.0%、56.0%、60.0%,显著高于正常卵巢和良性肿瘤(P<0.05);P-gp和PKC-α表达存在密切的相关关系(P<0.01);卵巢癌P-gp、PKC-α和MRP表达阳性者的化疗反应率分别为25.0%、25.0%、33.3%,低于阴性表达组(P<0.05);复发患者P-gp和PKC-α阳性表达率明显高于未复发的患者(P<0.05),MRP表达与复发无关(P>0.05)。单因素分析表明,P-gp、PKC-α和MRP与卵巢癌患者的生存期和不良预后有关。多因素分析表明,P-gp及三个指标共同表达与患者的生存率有关。结论卵巢恶性肿瘤中P-gp、PKC-α和MRP阳性表达与临床化疗耐药有关,并影响患者的生存率。联合检测三个指标对临床化疗疗效判断和患者预后估计具有积极的指导作用。     

非小细胞肺癌P-gp、LRP、MRP和GST-π表达及其临床意义

目的:探讨P-糖蛋白(P-gp)、肺耐药蛋白(LRP)、多药耐药相关蛋白(MRP)和谷光甘肽转移酶(GST-π)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其临床意义.方法:应用免疫组织化学S-P技术对86例治疗前非小细胞肺癌组织标本进行P-gp、LRP、MRP和GST-π表达的检测.结果: LRP和MRP在肺腺癌、鳞癌中的表达阳性率分别为77.78%、51.22%和80.00%、53.66%;LRP和MRP在不同组织类型中的表达有显著性差异(均P<0.05).P-gp和GST-π在肺腺癌和鳞癌中的表达阳性率分别为73.33% 、60.98%和80.00%、70.73%;P-gp和GST-π在不同组织类型中的表达无显著性差异(均P>0.05).所测4种耐药基因除P-gp外其余3种在中高分化和低分化组间表达阳性率有显著性差异(均P<0.01);4种耐药基因在TNM各分期中表达阳性率无显著性差异(均P>0.05).在肺腺癌和肺鳞癌中同时有2种、3种或4种耐药基因协同表达的阳性率分别为46.67%和34.15%、31.11%和24.39%、20.00%和17.07%,在肺腺癌和肺鳞癌中耐药基因共表达在各类型间无显著性差异(均P>0.05).结论:在非小细胞肺癌组织中存在不同程度的耐药,肺腺癌原发耐药高于肺鳞癌,其耐药是多途径多基因参与的过程.联合检测P-gp、LRP、MRP和GST-π耐药相关基因的表达,对化疗药物的选择及预后的评价具有重要的临床意义.     

肺癌组织中耐药相关基因的表达及其临床意义

目的：探讨肺癌组织中耐药相关基因的表达及其临床意义。方法：应用免疫组化技术检测治疗前肺癌组织标本中P-gp、MRP和LRP表达。结果：72例非小细胞肺癌中P-gp、MRP、LRP阳性率分别为61％,49％，65％，并有部分共表达。9例小细胞肺癌中P-gp、MRP、LRP阳性率分别为56％，22％，44％，也有部分共表达。在TNM各分期中P-gp、MRP、LRP阳性表达无明显差异（P＞0．05），随访中化疗有效组P-gp、MRP、LRP阳性表达分别为29％（4／14）、36％（5／14）、21％（3／14），无效组P-gp、MRP、LRP性表达分别为83％（20／24）、67％（16／24）、75％（18／24）。有效组P-gp、LRP表达低于无效组（P＜0．05），随访中死亡16例，P-gp、MRP、LRP阳性表达分别占43％（7／16），31％（5／16），64％（11／16）。LRP阳性组占比例最高，提示LRP阳性表达预后差，其与预后关系密切。结论：肺癌耐药为一多途径多基因参与的过程，联合检测肺癌组织中耐药相关基因的表达有助于判断化疗疗效及预后。     

儿童急性白血病初治患者LRP和MRP的表达及其临床意义

背景与目的:有研究发现肺耐药相关蛋白(lungresistanceprotein,LRP)和多药耐药相关蛋白(multidrugresistance鄄associatedporotein,MRP)的表达与白血病患儿耐药有关,而且患儿耐药不是由于一种耐药机制引起的。本研究旨在观察LRP和MRP在不同类型小儿白血病初治时的表达情况及其与临床疗效的关系。方法:应用逆转录鄄聚合酶链反应法(RT鄄PCR)检测38例不同类型儿童急性白血病[27例急性淋巴细胞白血病(acutelymphoblastic,ALL),11例急性非淋巴细胞白血病(acutenonlymphocyticleukemia,ANLL)]及6名正常儿童LRP、MRP基因的表达,结合患儿化疗后的完全缓解(CR)率分析两种基因表达的意义。结果:38例患儿化疗后CR26例(68.4%)。38例患儿中LRP基因表达阳性11例(28.9%),表达阴性27例(71.1%),6例正常对照儿童LRP基因阴性。LRP基因阳性患儿的CR率低于阴性者(分别为27.3%和85.2%,P<0.05)。MRP阳性者21例,6例正常对照儿童MRP基因阴性。MRP基因阳性者的CR率低于阴性者(分别为47.6%和94.1%,P<0.05)。27例ALL患儿中LRP阳性5例,11例ANLL患儿中LRP阳性6例(分别为18.5%和54.5%,P<0.05)。27例ALL患儿中MRP阳性16例;11例ANLL患儿MRP阳性5例(分别为59.3%和45.5%,P>0.05),ALL和ANLL中MRP的表达无显著性差异。LRP基因阳性患者的MRP阳性率与LRP阴性者MRP阳性率无显著性差异(分别为28.6%和29.4%,P>0.05),说明LRP基因与MRP基因之间无相关性。结论:LRP基因及MRP基因阳性儿童急性白血病者病情重、化疗缓解率低,儿童ANLL相对于ALL化疗缓解率低可能与LRP的表达有关。     

结肠癌细胞中miR-145-5p、miR-143-3p的表达变化对多药耐药的影响

目的:探讨人结肠癌细胞中miR-145-5p、miR-143-3p的表达发生变化后对P-gp和MRP的影响。方法:采用Western Blot和qRT-PCR法检测人结肠癌细胞分别转染miR-145-5p mimics/inhibitor、miR-143-3p mimics/inhibitor后P-gp 和MRP的表达。结果:转染miR-145-5p mimics后P-gp和MRP的蛋白和基因表达均降低（P<0.05）,转染miR-145-5p inhibitor后P-gp 和MRP的蛋白和基因表达均升高（P<0.05）。转染miR-145-5p mimics NC和miR-145-5p inhibitor NC后P-gp 和MRP的蛋白和基因表达无明显变化（P>0.05）。转染miR-143-3p mimics后P-gp和MRP的蛋白和基因表达均降低（P<0.05）,miR-143-3p inhibitor后P-gp和MRP的蛋白和基因表达均升高（P<0.05）。转染miR-143-3p mimics NC和miR-143-3p inhibitor NC后P-gp 和MRP的蛋白和基因表达无明显变化（P>0.05）。结论:miR-145-5p及miR-143-3p对多药耐药蛋白P-gp、MRP具有调控作用,参与了结肠癌的多药耐药。     

P-糖蛋白在非霍奇金淋巴瘤组织中的表达及意义

目的探讨非霍奇金淋巴瘤组织中P-gp(P-糖蛋白)的表达及临床意义。方法应用免疫组化法检测117例非霍奇金淋巴瘤组织中P-gp的表达及其与生存率的关系。结果初治组P-gp表达的阳性率为30.26%(23/76);复发/难治组阳性率高达68.29%(28/41),2组差异有统计学意义(P﹤0.05)。P-gp表达阳性者化疗后生存时间明显低于阴性表达者,与预后显著相关(P<0.01)。结论 P-gp在非霍奇金淋巴瘤组织中高表达是多药耐药产生的基础,动态监测P-gp能指导临床治疗及预后。     

膀胱癌组织中P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白、Bad的表达及其与临床病理的关系

目的：探讨膀胱癌组织中P-糖蛋白（P-gp）、多药耐药相关蛋白（MRP）和凋亡蛋白Bad的表达及其与临床病理之间的关系。方法：采用SP法检测67例膀胱癌组织及20例正常膀胱组织中P-gp、MRP和Bad的表达情况。结果：67例膀胱癌患者中P-gp、MRP和Bad的阳性率分别为65.7%（44/67）、58.2%（39/67）和62.7%（42/67）,而在正常膀胱粘膜中分别为10.0%（2/20）、5.0%（1/20）和5.0%（1/20）,二者比较均有统计学差异（P〈0.05）;35例初发膀胱癌组织中,P-gp、MRP和Bad阳性表达率分别为45.7%、48.6%、71.4%,与32例复发膀胱癌组织中的87.5%、68.8%、51.3%比较,亦均有显著性差异（P〈0.05）。P-gp与MRP表达无明显相关性（P〉0.05）。膀胱癌细胞分化程度越低,临床分期越高,P-gp阳性率越高（P〈0.05）,Bad表达越低,呈负相关关系。MRP与临床分期、组织分级无相关性。结论：P-gp过表达、Bad低表达在膀胱癌复发中可能具有一定的协同作用。     

P-gp、MRP1、BCRP在晚期NSCLC中的表达及意义

[目的]探讨P-gp、MRP1、BCRP在晚期非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,及其与NSCLC患者临床病理特征及化疗效果的关系。[方法]采用免疫组化SP法检测32例晚期NSCLC患者治疗前肿瘤标本中P-gp、MRP1、BCRP的表达。所有患者接受以铂类为主的化疗方案2个周期,分析P-gp、MRP1、BCRP表达情况与患者临床病理特征及化疗效果的关系。[结果]NSCLC肿瘤中P-gp、MRP1和BCRP阳性表达率分别为46.88%、75.00%和46.88%。腺癌中P-gp表达高于鳞癌;MRP1的表达与年龄有关,60岁以上的患者显示了更高的MRP1表达率。BCRP的表达与化疗效果相关,但P-gp和MRP1的表达与疗效无显著性相关。[结论]BCRP可以作为判断晚期NSCLC患者化疗效果的预测因子。     

Expression of multidrug resistance protein gene in patients with glioma chemotherapy

Two different ATP-binding membrane glycoproteins, the 170kDa P- glycoprotein (P-gp) and the 190kDa multidrug resistance protein (MRP), are involved in the acquisition of multidrug resistance phenotypes in cancer cells. Overexpression of P-gp is often observed in various human tumors when treated with anticancer agents. In this study, we asked whether MRP was overexpressed in human gliomas after cancer chemotherapy. We investigated expression of MRP and P-gp before and after chemotherapy in tumor samples from patients with glioma. MRP expression was observed in 16 (70%) of 23 untreated patients, and the proportion of MRP-positive cells in the whole cell population ranged from 3 to 32% in the 16 MRP-positive patients. P- gp-positive tumors were observed in 4 (18%) of 23 patients, and the proportional rates of P-gp-positive cells in the whole cell population ranged from 4 to 23%. The proportional rate of MRP- positive or P-gp-positive glioma cells increased after chemotherapy when compared with that before chemotherapy in all patients examined. We could observe no statistically significant correlation between expression of MRP or P-gp and tumor grade. These results suggest that MRP as well as P-gp may be involved in acquired or intrinsic drug resistance in human glioma.     

肺癌患者外周血淋巴细胞与癌细胞耐药基因表达的相关性研究

目的：探讨肺癌患者外周血淋巴细胞和癌细胞耐药基因表达的相关性。方法：采用RT—PCR法检测40例肺癌患者外周血淋巴细胞耐药基因MDR-1的表达，免疫组化法检测肺癌组织原代培养癌细胞耐药基因蛋白P—gp和MRP的表达。结果：肺癌患者外周血淋巴细胞耐药基因MDR-1的表达率37．5％（15／40），与肺癌细胞耐药基因蛋白P—gp和MRP的表达具有相关性（P〈0．05），与肺癌患者的年龄、分期、病理类型及性别无关（P〉0．05）。结论：外周血淋巴细胞耐药基因MDR-1的表达率较高，与癌细胞耐药基因蛋白P—gp和MRP的表达具有相关性，对肺癌临床化疗药物的选择具有重要的参考价值。     

ABC 转运蛋白在肝细胞癌中的表达及意义*

目的:探讨P-gp、MRP1、BCRP 等ABC 转运蛋白在肝细胞癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:应用RT-PCR 和免疫组织化学方法检测P-gp/MDR1、MRP1、BCRP等mRNA 及蛋白在34例的肝细胞癌、19例癌旁肝组织中的表达。结果:MDR1、MRP1、BCRP等mRNA 在肝癌组的相对表达水平分别为1.15± 0.24、0.64± 0.33、1.07± 0.32,在癌旁肝组织组的相对表达水平分别为0.36± 0.14、0.19± 0.06、0.31± 0.09。MDR1、MRP1、BCRP 在肝细胞癌中低分化组（Ⅲ、Ⅳ级）为1.38± 0.26、0.73± 0.35、1.34± 0.21,在高分化组（Ⅰ、Ⅱ级）分别为0.74± 0.32、0.30± 0.11、0.45± 0.13。P-gp、MRP1、BCRP等的阳性反应产物主要分布于细胞膜和胞浆内;在肝癌组和癌旁肝组织组的阳性表达率分别为82.35% 、58.82% 、79.41% 和42.11% 、26.32% 、36.84% 。P-gp、MRP1、BCRP在肝细胞癌中低分化组（Ⅲ、Ⅳ级）的阳性表达率分别为100% 、81.25% 、100% ,在高分化组（Ⅰ、Ⅱ级）的阳性表达率分别为66.67% 、38.89% 、61.11% 。RT-PCR 及免疫组织化学均显示,P-gp、MDR1、MRP1、BCRP mRNA和蛋白在肝癌组的表达均高于癌旁肝组织组,且在低分化（Ⅲ、Ⅳ级）肝癌组织的表达高于高分化者（Ⅰ、Ⅱ级）,差异有统计学意义（P<0.05）。 MDR1、MRP1、BCRP之间的表达无线性相关。结论:在肝细胞癌中存在原发性多药耐药现象,且多种耐药机制并存。P-gp、MDR1、MRP1、BCRP等与肝细胞癌的耐药有关,在肝癌组的表达高于癌旁肝组织组,且在肝细胞癌中的表达随着肿瘤分化程度的增高而降低,可作为肝细胞癌多药耐药性作用的靶点。      

Clinical relevance of the lung resistance protein in diffuse large B-cell lymphomas.

Drug resistance of non-Hodgkin's lymphomas may involve mechanisms of the multidrug resistance phenotype including the lung resistance protein (LRP) and the multidrug resistance protein (MRP1). To determine the clinical relevance of these multidrug resistance factors in previously untreated diffuse large B-cell lymphomas (n = 48), we studied LRP and MRP1 expression in lymphoma cells and their impact on clinical outcome. LRP and MRP1 expression were immunohistochemically assessed by means of the monoclonal antibodies LRP-56 and MRPr1, respectively. LRP was positive in 23% and MRP1 in 44% of the samples. LRP expression was associated with higher tumor stage (P = 0.03), elevated serum lactate dehydrogenase levels (P = 0.01), and the International Prognostic Index (P = 0.0001). LRP-positive patients had a lower complete response rate to polychemotherapy than LRP-negative patients (18 versus 65%; P = 0.006). Patients with LRP expression had a shorter overall survival than those without LRP expression (median of 0.9 years versus median not reached; P = 0.001). MRP1 expression was independent of clinical and laboratory parameters and had no impact on the outcome of chemotherapy or survival of the patients. These data suggest that LRP expression but not MRP1 expression is an important mechanism of drug resistance associated with worse clinical outcome in previously untreated diffuse large B-cell lymphomas. Thus, the reversal of LRP-mediated drug resistance may improve clinical outcome in diffuse large B-cell lymphoma in the future.     

非霍奇金淋巴瘤多药耐药蛋白在淋巴结与骨髓液中表达的实验研究

 目的　探讨初发非霍奇金淋巴瘤（NHL）骨髓液和淋巴结活组织两种标本中多药耐药蛋白的表达及临床价值评估。方法　采用流式细胞术（FCM）活细胞免疫荧光法检测41例初治NHL淋巴结活组织中和37例骨髓液中瘤细胞多药耐药蛋白及反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）半定量检测mdr1mRNA的表达,分析其与临床分期、恶性分级、乳酸脱氢酶（LDH）异常增高等的相关性。结果　两种标本中三种耐药基因单独及联合过度表达率无明显差异;淋巴结组织中,P-gp阳性表达在Ⅰ／Ⅱ期和Ⅲ／Ⅳ期之间有差别（P＝0.046）,与LDH异常增高相关（P＜0.05）,与恶性度分级无关（P＞0.1）;肺耐药蛋白（LRP）与三者都存在明显相关（P＜0.05）。而骨髓液中仅LRP与恶性分级和LDH异常增高明显相关（P＝0.01）,并未显示P-gp表达在不同分期的差异性;淋巴结中P-gp+的CR低于P-gp-（37.5 %,84.8 %;P＜0.01）;LRP+与LRP-的CR之间亦存在差别（53.3 %,88.5 %;P＜0.01）。结论　用淋巴结活组织进行耐药蛋白检测比骨髓能提供更准确的临床信息,且在肿瘤尚未发生骨髓转移时,取淋巴组织亦能进行耐药蛋白检测,及早指导临床治疗及预后。