胃癌术中腹腔游离癌细胞检测临界值的确定及其临床意义

目的 探讨胃癌术中腹腔游离癌细胞(FCC)检测的最佳阳性判定值,以及腹腔FCC的存在对预后的影响.方法 用实时荧光RT-PCR方法检测术中腹腔FCC,并进行5年的随访.用MedCalc软件分析FCC最佳阳性判定值;[大于此值表示FCC存在,标记为FCC(+)],并前瞻性地分析FCC(+)组及(-)组与预后的关系.最后用多因素Cox回归模型分析影响预后的独立因素.结果 (1)最佳阳性判定值为31.21拷贝/mL时约登指数最高;(2)FCC(+)与(-)组的平均存活期分别为17.2个月和48.7个月,中位存活期分别为8.1个月和60.0个月;5年累积存活率分别为9.1%和67.4%.Kaplan-Meier生存分析显示,FCC(-)组生存时间明显长于FCC(+)组(P=0.000).Cox模型分析发现FCC,浆膜及远处转移是影响生存预后的独立因素(P＜0.05).结论 (1)FCC最佳阳性判定值为31.21拷贝/mL;(2)腹腔FCC是影响预后的独立危险因素之一,FCC(+)反映手术时肿瘤存在扩散状态.预示患者预后较差.     

超声双重造影在胃癌术前TN分期中的价值

目的 在胃癌术前分期中,通过与超声内镜检查(EUS)对比分析超声双重造影(DCUS)检查的价值.方法 选择162例经病理活检证实为胃癌并进行手术切除的患者,手术前5 d内进行EUS及DCUS检查,并进行TNM分期,与术后病理检查结果对照得出正确率,并进行相互比较.结果 本组162例胃癌患者中TNM分期:42例为T1期,49例为T2期,56例为T3期,15例为T4期.DCUS和EUS术前T分期总的正确率分别为77.2%、74.7%(χ2=0.273,P=0.603),而在T3分期上DCUS优于EUS(χ2=5.009,P=0.025);在N分期上两者总的正确率分别为78.4%、57.4%(χ2=16.370,P=0.001),而两者的敏感性和特异性分别为78.4%比49.5%、78.5%比69.2%.在对阳性淋巴结诊断上DCUS的正确率较高(78.4%比49.5%,χ2=17.523,P<0.01),尤其是对低分化腺癌患者阳性淋巴结的诊断正确率较高(81.5%比42.6%,χ2=17.338,P<0.01).结论 DCUS检查在胃癌术前分期中有较好的应用价值,其在预测阳性淋巴结方面,尤其是判断低分化腺癌患者有无淋巴结转移上正确率高于EUS检查.     

胃癌进展中转录因子e2f-1的表达变化及其意义

目的 研究转录因子e2f-1在胃癌发展过程中不同阶段的表达情况及其临床意义,判断其在胃癌发展中的作用.方法 采用SABC免疫组化法检测121例胃癌原发灶中e2f-1的表达情况,分析其与临床病理特征和预后的关系.结果 121例患者e2f-1的表达阳性率为38.8%(47/121).随着胃癌的进展,TNMⅠ～Ⅳ期e2f-1表达阳性率呈逐渐下降的趋势(r=-0.320,P<0.05): Ⅰa期62.5%(10/16),Ⅰb期47.1%(8/17),Ⅱ期55.0%(11/20),Ⅲa期40.0%(8/20),Ⅲb期27.3%(6/22),Ⅳ期15.4%(4/26);同时e2f-1的表达与肿瘤最大直径、浸润深度、淋巴结转移率和累及淋巴站亦呈负相关(P<0.05).多参数检验分析显示组织学类型及生存期是e2f-1阳性表达的独立相关因素(P<0.05).Log-Rank检验提示与术后生存相关的因素包括累及淋巴站、肿瘤最大直径、肿瘤位置、淋巴结转移率、浸润深度及TNM分期(P<0.05).多因素Cox逐步回归分析提示累及淋巴站越远、e2f-1表达阳性率越高,则生存期越短(P<0.05).TNM各期中: Ⅰ、Ⅱ期患者e2f-1的阳性高表达率与更短的生存期相关(r=-0.304,P<0.05),而且e2f-1呈阳性表达者其预后显著差于阴性表达者(χ2=13.437,P<0.05);而Ⅲ、Ⅳ期患者e2f-1的表达与生存期之间无统计学关系(P>0.05).结论 转录因子e2f-1是体现早期胃癌恶性行为的标记之一,表达阳性的早期患者生存时间显著缩短,是有效的预后判断因子;而在晚期胃癌中e2f-1表达降低,提示可能与其进展有关.     

腹腔冲洗细胞学检查对判断胃癌预后的价值

目的探讨胃癌患者腹腔游离癌细胞形成的相关因素及其与胃癌根治术后预后的关系。方法对61例胃癌手术患者施行术中腹腔冲洗液细胞学检测,分析其临床病理特征与腹腔游离癌细胞形成的相关性,通过多元回归分析和累积生存曲线分析预后及相关因素。结果61例胃癌患者腹腔冲洗液细胞学阳性率为36%,Ⅲ、Ⅳ期胃癌、浆膜受累、淋巴结受侵及血管癌栓、术后腹膜转移者阳性率分别为50%、47%、45%、65%、88%,明显高于Ⅰ、Ⅱ期胃癌(19%)、浆膜未侵(22%)、无淋巴结受侵(12%)、无血管瘤栓(18%)及其他转移者(33%)。腹腔游离癌细胞是胃癌预后的独立危险因素(RR=3·614,P=0·02),腹腔冲洗液细胞学阳性组的生存时间明显缩短(P<0·01)。结论腹腔游离癌细胞形成微转移灶是胃癌根治术后腹腔复发转移及预后的危险因素,术中腹腔冲洗液细胞学检测有助于判断预后。     

血清同型半胱氨酸与胃癌分期的相关性研究

目的:通过比较不同病理分期胃癌患者的同型半胱氨酸(Hcy)水平,探讨血清Hcy与胃癌及病理分期的相关性。方法:选取2014年3月—2015年6月于山东大学齐鲁医院住院的胃癌患者138例,根据美国癌症联合会第七版胃癌分期指南分为4组:Ⅰ期(n=34)、Ⅱ期(n=33)、Ⅲ期(n=58)、Ⅳ期(n=13),并以同时期入院的良性胃疾病患者为对照(n=90),比较良性胃疾病与胃癌及各分期间Hcy及肿瘤标志物水平差异,分析Hcy与胃癌不同病理分期的相关性。采用单循环酶法测定血清Hcy水平。结果:良性胃疾病患者血清Hcy水平(12.31±3.22)μmol/L,胃癌患者(16.19±4.84)μmol/L,胃癌患者血清Hcy水平显著升高(P<0.05)。血清Hcy水平随胃癌临床分期增高逐渐升高,其中I期(13.94±4.07)μmol/L,Ⅱ期(15.49±4.09)μmol/L,Ⅲ期(17.10±4.79)μmol/L,Ⅳ期(19.81±5.77)μmol/L,各分期差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析证实,血清Hcy与病理分期呈正相关(r=0.503,P<0.001)。在校正了其他胃癌危险因素后,Logistic回归分析显示,血清Hcy仍是胃癌发生的独立危险因素(OR=1.208,P=0.003)。结论:血清Hcy水平与胃癌及临床病理分期密切相关,伴随临床分期进展Hcy水平明显升高,对判定胃癌病情发展有重要价值。     

血清低、高密度脂蛋白胆固醇比值与结直肠癌病理分期的关系

目的探讨结直肠癌患者术前血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平比值(简称L/H值)与结直肠癌病理分期的关系。方法回顾性分析2009年7月至2014年6月期间在解放军总医院接受手术治疗的187例结直肠癌患者的临床资料。结果不同TNM分期、N分期以及M分期患者的L/H值不同或不全相同(P<0.05),其中,TNMⅣ期高于Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ期,N2期高于N1和N0期,M1期高于M0期;但不同T分期患者的L/H值比较差异无统计学意义(P>0.05)。logistic回归分析结果显示,在控制其他混杂因素的情况下,L/H值对结直肠癌TNM分期(OR=4.34,95%CI:2.837~6.644,P<0.000 1)、T分期(OR=1.72,95%CI:1.175~2.512,P=0.005 3)、N分期(OR=2.15,95%CI:1.422~3.254,P=0.000 3)及M分期(OR=3.04,95%CI:1.733~5.332,P=0.000 1)的影响均有统计学意义,L/H值越高者其TNM分期、T分期、N分期及M分期越高。结论术前血清L/H值的升高是结直肠癌TNM分期、T分期、N分期及M分期进展的独立危险因素。     

磁激活细胞分离术检测胃癌循环血微转移的研究

目的用磁激活细胞分离术(MACS)检测胃癌患者外周血和门静脉血中癌细胞,探讨胃癌血液微转移情况。方法术前抽取23例胃癌患者和7例对照者的外周血,术中取其门静脉血,经MACS富集、分离,用流式细胞仪检测癌细胞含量。结果未经MACS的血标本中较少发现癌细胞,富集后的标本癌细胞阳性率在胃癌组与对照组(外周血16/23VS1/7,门静脉血19/23VS1/7,P<0.01)以及pTNMⅠ~Ⅱ期与Ⅲ~Ⅳ期患者(外周血0.19%VS0.48%,P<0.01,门静脉血0.42%VS1.89%,P<0.001)差别均有统计学意义。胃癌组门静脉血中游离癌细胞阳性率高于外周血(1.81%VS0.42%,P<0.01)。结论MACS能有效地富集血中癌细胞,提高癌细胞检出率循环血癌细胞数量与胃癌病理分期密切相关。MACS检测血中癌细胞对判断肿瘤转移及选择化疗合理途径、时机、监测疗效有指导意义。     

survivin在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨胃癌组织中凋亡抑制因子survivin的表达及其与各临床病理因素的关系,评价survivin在胃癌预后判断中的价值。方法应用免疫组织化学EnVision两步法检测140例胃癌组织中survivin的表达情况,回顾性分析survivin与各临床病理因素及预后之间的关系。结果胃癌组织中survivin表达阳性率为46.4%(65/140)。累及浆膜层的胃癌survivin表达阳性率(53.2%)明显高于未及浆膜层者(32.6%),TNM分期Ⅲ、Ⅳ期的胃癌survivin表达阳性率(55.2%)明显高于Ⅰ、Ⅱ期者(38.4%)(P均<0.05)。分化较差的胃癌survivin表达阳性率(52.2%)与分化较好者差异无显著性意义(35.4%,P=0.059)。survivin表达阳性患者5年生存率(34.4%)明显低于表达阴性者(58.6%,P<0.006)。Cox回归模型分析显示,survivin表达状态是胃癌根治术后独立的预后因素,阳性表达提示预后不良。结论凋亡抑制因子survivin在胃癌组织中具有较高的表达率,其表达与胃癌的浸润深度和TNM分期相关。survivin的表达状态是胃癌根治术后独立的预后因素,阳性表达提示预后不良。     

中下段直肠癌淋巴结微转移的临床研究

目的探讨淋巴结微转移与中下段直肠癌生物学行为的关系,以及淋巴结微转移对淋巴结分期的影响。方法应用CK-20免疫组化技术对56例中下段直肠癌共计661枚淋巴结微转移进行检测。结果20例(36%)67枚(10%)淋巴结检出微转移。肿瘤直径≥5 cm的中下段直肠癌淋巴结微转移检出率为61%(11/18),而肿瘤直径<5 cm的淋巴结微转移检出率仅为24%(9/38) (x~2=7.452,P=0.006)。高分化和中分化直肠癌淋巴结微转移检出率分别为1/5和24%(9/37),明显低于低分化直肠癌的71%(10/14)(x~2=10.406,P=0.005)。Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期中下段直肠癌淋巴结微转移检出率分别为0、23%(5/22)和52%(15/29)(x~2=7.361,P=0.022)。中下段直肠癌淋巴结微转移检出率与性别、年龄、肿瘤浸润肠壁周径、Ming分型以及浸润深度无关(x~2=1.701,P= 0.192;x~2=0.271,P=0.602;x~2=1.748,P=0.626;x~2=0.278,P=0.870;x~2=1.840,P=0.399)。20例检出淋巴结微转移者中10例TNM分期提高:Ⅰ→ⅢA 3例,Ⅰ→ⅢC 2例,ⅡA→ⅢB 3例,ⅢA→ⅢC 2例。结论CK免疫组化技术可以显著提高中下段直肠癌淋巴结转移的检出率,有助于更准确地进行临床病理分期。淋巴结微转移与肿瘤直径、肿瘤分化程度和分期密切相关。     

热休克蛋白90α在人胃癌组织中的表达及其意义

目的 观察热休克蛋白90α(HSP90α)在人胃癌组织和正常胃黏膜组织中的表达,探讨其表达与胃癌的发生、发展及生物学行为的关系.方法 收集46例胃癌组织和相应的正常胃黏膜组织标本,分别应用免疫组织化学技术中链霉菌抗生物素蛋白.过氧化物酶连接法(即SP法)和逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HSP90α的表达情况,分析检测结果 .结果 HSP90α在胃癌组织中表达的阳性率为82.6%(38/46),明显高于正常胃黏膜组织中的表达(10/46,21.7%);在不同分化类型的胃癌组织中,各组间HSP90α阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05);在淋巴结转移为N1期以后(不包括N1在内)的病例中HSP90α表达阳性率为96.2%(25/26),高于淋巴结转移为N和N1的病例;在TNM分期Ⅲ、Ⅳ期阳性表达率为92.9%(26/28),也要高于Ⅰ、Ⅱ期.结论 HSP90α在胃癌组织中呈现高表达,并且在淋巴结转移多和越晚期的胃癌组织中表达越高,提示HSP90α可作为胃癌预后判定监测指标.     

腹腔液胃癌细胞学与CEA mRNA检测比较的意义

目的：探讨胃癌病人术中腹腔冲洗液细胞学及腹腔冲洗液、腹膜组织中的癌胚抗原（CEA）mRNA，以探讨对腹腔中游离癌细胞和预测腹膜转移的诊断价值。方法：收集48例胃癌和5例胃良性病变病人的腹腔冲洗液或腹水，并同时切除少量大网膜、膈腹膜和盆腔腹膜作为对照。冲洗液行常规细胞学检查，并逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）法检测腹腔游离癌细胞和网膜组织中CEA mRNA的表达。结果：腹腔冲洗液和腹膜组织中的CEA mRNA的阳性率分别为39．58％（19／48）和43．75％（21／48），皆高于腹腔冲洗液细胞学27．08％（13／48）（P＜0．05）。CEA mRNA的表达与淋巴结转移、肿瘤浸润深度、浆膜侵犯程度及TNM分期呈正相关。结论：腹腔冲洗液CEA mRNA和细胞学检查是检测腹腔游离癌细胞和预测腹膜转移的有效方法；如同时行腹膜组织CEA mRNA的检测可能更有助于诊断。     

实时荧光定量聚合酶链反应检测食管癌患者循环肿瘤细胞及其意义

目的 探讨实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(fqRT-PCR)技术评价食管癌患者外周血中循环肿瘤细胞(CTCs)的临床价值.方法 以43例病理确诊的食管鳞癌及10例胸部良性疾病患者为研究对象,将癌胚抗原(CEA)作为检测标志物,应用fqRT-PCR方法定量检测其外周血CEA mRNA表达及拷贝数,评价食管鳞癌患者CTCs状况.结果 食管鳞癌患者外周血CEA mRNA阳性表达率为46.51%(20/43),胸部良性病变患者外周血未见阳性表达;其阳性率随肿瘤TNM分期增高;Ⅲ、Ⅳ期患者CEA mRNA阳性率显著高于Ⅰ、Ⅱ期(P＜0.05),但Ⅰ、Ⅱ期患者之间及Ⅲ、Ⅳ期患者之间差异无统计学意义(P＞0.05);外周血CEA mRNA拷贝数在Ⅳ期患者明显高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者(P＜0.01);但在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者间其拷贝数差异无统计学意义(P＞0.05).CEA mRNA表达与癌细胞分化程度无明显相关.随访结果:外周血CEA mRNA阳性表达者其转移预测特异性为81.25%(13/16).结论 fqRT-PCR检测食管癌患者外周血CEA mRNA有较高的敏感性和特异性,是监测食管癌CTCs较为可靠的一种方法.     

肿瘤大小对结肠癌患者预后的影响

目的探讨肿瘤大小对结肠癌患者预后的影响。方法回顾性分析2004年1月至2008年6月间北京大学肿瘤医院外科收治的345例结肠癌的临床病理资料．运用受试者工作特征（ROC）曲线确定肿瘤大小的临床最佳界值,分析肿瘤大小对预后的影响。结果345例结肠癌患者3年生存率为85．1％。根据ROC曲线分析,以肿瘤最大直径5cm作为肿瘤大小的最佳临界点。肿瘤直径大于或等于5cm者3年生存率为79．5％．小于5cm者为90．5％,差异有统计学意义（P=0．005）。多因素分析显示,术前CEA水平（P=0．004）、肿瘤大小（P=0．020）、区域淋巴结转移（P=0．000）和脉管癌栓（P=0．002）是结肠癌的独立预后因素。分层预后分析显示。肿瘤大小是Ⅲ期结肠癌患者的独立预后因素（P=-0．011）．但对Ⅱ期结肠癌患者的预后并无明显影响（P=0．827）。结论以肿瘤最大直径5cm．为临界值．肿瘤大小是Ⅲ期结肠癌患者的独立预后因素,但与Ⅱ期结肠癌患者的预后无关。肿瘤大小对结肠癌预后的影响需根据不同的TNM分期来判断。     

Prognostic significance of carcinoembryonic antigen levels in peritoneal washes in patients with gastric cancer.

BACKGROUND: Peritoneal metastasis is the most frequent cause of death in patients with gastric cancer. Detection of free cancer cells in the peritoneal cavity at the time of surgery, therefore, is considered to be of great value in predicting the peritoneal recurrence and accordingly in the prognosis in patients with gastric cancer. This study examined the clinical significance of intraoperative determination of carcinoembryonic antigen (CEA) levels in peritoneal washes (pCEA) in patients with gastric cancer. METHODS: CEA levels in peritoneal washes were correlated retrospectively with several clinicopathologic factors including clinical outcome in 56 patients with resectable gastric cancer. RESULTS: Among several clinicopathologic factors, the depth of tumor invasion significantly and independently correlated with pCEA levels as revealed by multivariate stepwise logistic regression analysis. A significant difference in overall survival rates was observed between pCEA-positive and pCEA-negative groups: 5-year survival rates were 95.7% in pCEA-negative and 20% in pCEA-positive patients (P <0.0001). Multivariate analysis indicated that pCEA level is a statistically significant independent prognostic factor for the survival of patients with gastric cancer, and is an important factor for predicting peritoneal recurrence. CONCLUSIONS: pCEA could be a potential predictor of a poor prognosis as well as peritoneal recurrence in patients with gastric cancer. We believe that this information could contribute to determining the optimal intraoperative and postoperative therapeutic plan including adjuvant chemotherapy of gastric cancer.     

乙酰肝素酶及E-钙黏蛋白对胃癌侵袭转移的影响

目的 探讨乙酰肝素酶及E-钙黏蛋白对胃癌侵袭转移的影响.方法 收集2005年2月至2007年5月辽宁省肿瘤医院手术切除的50例胃癌标本.采用RT-PCR法检测乙酰肝素酶mRNA及E-钙黏蛋白mRNA在胃癌组织中的表达,同时应用免疫组织化学法检测E-钙黏蛋白在胃癌组织中的表达.计量资料采用方差分析和t检验;计数资料采用χ~2检验.结果 乙酰肝素酶与E-钙黏蛋白的表达在胃癌的细胞分化程度、淋巴结转移、TNM分期方面比较,差异有统计学意义(t=1.999,4.258,1.735;1.286,6.794,3.091;χ~2=6.273,9.397,5.640,P<0.05).乙酰肝素酶阳性/E-钙黏蛋白阴性与未分化型、淋巴结转移及TNM Ⅲ、Ⅳ期有关(χ~2=11.306,10.208,8.420,P<0.05).结论 乙酰肝素酶在胄癌组织中的表达增高,E-钙黏蛋白在胃癌组织中表达降低,乙酰肝素酶与E-钙黏蛋白的异常表达具有协同作用,两者同时异常表达使胃癌细胞具有更强的侵袋转移能力.     

Phase II Clinical Trial of Postoperative S-1 Monotherapy for Gastric Cancer Patients with Free Intraperitoneal Cancer Cells Detected by Real-Time RT-PCR

Background  

We have previously reported the molecular detection of peritoneal micrometastases in patients with gastric cancer by quantifying carcinoembryonic antigen (CEA) mRNA in the peritoneal washes. Patients with CEA mRNA exceeding a cutoff value have a significant risk for developing peritoneal carcinomatosis, but optimal treatment for this population remains unknown.     

实时荧光定量PCR检测结直肠癌腹腔CEA水平及其临床意义的研究

目的:应用实时荧光定量PCR技术检测结直肠癌腹腔内CEA水平并探讨其临床意义.方法:2003年5月至2004年3月,收集在日本爱知癌症中心手术107例结直肠癌病例的腹腔冲洗液,每个样本的cDNA应用随机引物合成,并在罗氏的实时荧光定量PCR(LightCycler)上进行定量分析.每个样本同时进行常规细胞学检查.所有病例术后经过平均为1年的随访.结果:CEA mRNA的阳性率和水平均与肿瘤的侵润度(T),分期以及淋巴结转移相关.在一个合理界定值上,CEA和CK-20检测的敏感度与特异度均为100%和100%,而常规的细胞学检查则为33%和100%.结论:CEA定量分析是检测结直肠癌腹腔微转移的敏感和特异的方法,CEA mRNA水平的异常与术后的无瘤生存率显著相关.其临床意义有待于更长期的随访结果.