肺癌患者P53基因突变的检测

应用多聚酶链反应单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）研究技术，从分子生物学角度探讨Ｐ５３肿瘤抑制基因在肺癌中的突变情况。结果：①３６例肺癌中有１７例出现Ｐ５３基因突变，占４７％；其中鳞癌突变发生率为２９％（４／１４），腺癌为５０％（５／１０），小细胞肺癌为７３％（８／１１）；１例肺泡癌未发现突变。②突变集中在Ｐ５３基因的５第５、６和７个外显子，分别有６、３和３例肺癌在相应的外显子部位发生突变。③突变     

非小细胞肺癌P53基因突变的研究

采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ对３５例非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）肿瘤切除组织的Ｐ５３基因５￣８号外显子进行突变检测，对８号外显子同时采用ＰＣＲ－ＤＧＧＥ进行突变检测。发现ＮＳＣＬＣ中Ｐ５３突变率为６５．７％。Ｐ５３率在肿瘤细胞不同分化程度间有显著差异，低分化ＮＳＣＬＣ的Ｐ５３突变率（８９．５％）明显大于高、中分化的ＮＳＣＬＣ（３７．４），虽然有纵膈淋巴结转移的Ｐ５３突变率（７１．４％）高于无给膈转移者（５７     

肺癌患者P53基因突变的检测

应用多聚酶链反应单链构象多态性（ＰＣＲＳＳＣＰ）研究技术，从分子生物学角度探讨Ｐ５３肿瘤抑制基因在肺癌中的突变情况。结果：①３６例肺癌中有１７例出现Ｐ５３基因突变，占４７％；其中鳞癌突变发生率为２９％（４／１４），腺癌为５０％（５／１０），小细胞肺癌为７３％（８／１１）；１例肺泡癌未发现突变。②突变集中在Ｐ５３基因的第５、６和７个外显子，分别有６、３和３例肺癌在相应的外显子部位发生突变。③突变类型均为插入型突变，分别插入３～６个碱基对。结论：细胞分化程度低的肺癌Ｐ５３基因突变发生率高，预后差     

P53与肺癌

Ｐ５３与肺癌韩育宁郭德和（审校）Ｐ５３基因为一经典抑癌基因，在肺癌中的异常表达比较常见。现就近几年来国内外主要文献中对Ｐ５３在肺癌发生、发展过程中的异常表达情况，Ｐ５３异常表达在肺癌的早期诊断、鉴别诊断和判定预后中的价值，以及Ｐ５３异常表达与肺癌细胞...     

层粘蛋白表达与肺癌转移及预后的关系

目的：探讨层粘蛋白（LN）的表达与肺癌转移及预后的关系。方法：采用免疫组化LSAB法检测96例肺癌（鳞癌49例，腺癌47例）组织中LN的表达。结果：LN的表达类型在肺癌不同组织学类型有显著性差异（P＜0．05）；在不同分化，分级的肺癌中有极显著性差异（P＜0．00001）；在有否淋巴结转移及术后不同生存期的肺癌组织有非常显著性差异（P＜0．001）。结论：LN的表达类型可作为判断肺癌细胞分化，淋巴结转移及病人预后的一个独立指标。     

P53,K—ras基因突变及HPV感染与肺癌关系

运和ＰＣＲ法及免疫组化技术，检测５７例肺癌组织中ＨＰＶ病毒感染及Ｐ５３Ｍ、Ｋ－ｒａ突变情况。结果：ＨＰＶ感染率为３３％，Ｋ－ｒａｓ突变率为２２．８％，Ｐ５３阳性表达为３８．６％，显示ＨＰＶ、Ｐ５３、Ｋ－ｒａｓ与肺癌发生，发展密切相关，Ｐ５３突变绝大多数在ＨＰＶ阴性病例中出现：肺组织癌变是一个多步化，多因子协同的过程。     

肺癌患者CD、P53、P16、nm23、EGFR和CEA表达及其与预后的关系

目的　探讨组织蛋白酶D(CD)、表皮生长因子受体 (EGFR)、转移抑制基因nm2 3、抑癌基因P1 6、P5 3、癌胚抗原 (CEA)在非小细胞肺癌 (NSCLC)的表达及临床意义。方法　采用链霉抗生物素蛋白 过氧化物酶 (S P)快速免疫组化法检测了 6 4例肺癌标本六种蛋白的表达。结果　肺癌组织P5 3、CD、EGFR、nm2 3、CEA和P1 6表达的阳性率分别为 76 6 %、6 5 6 %、6 7 2 %、6 0 9%、76 6 %和5 1 6 % ,P1 6蛋白阴性表达率达 48 4% ,CD、CEA和EGFR表达与肺癌患者临床分期 (P <0 0 5、P <0 0 5、P <0 0 1 )、淋巴结转移 (P <0 0 1、P <0 0 5、P <0 0 5 )密切相关 ,后者亦与细胞分化程度有关 (P <0 0 1 )。COX比例风险模型分析和Kaplan Meier存活曲线分析显示CD和EGFR是影响肺癌病人预后的重要因素 (P <0 0 5 )。结论　在NSCLC中nm2 3、P1 6、CD、P5 3、CEA和EGFR异常改变的频率很高 ,它们在NSCLC的发生、发展中可能起促进作用。CD和EGFR可作为评价NSCLC患者的预后指标之一     

P53基因和P185基因表达与胃癌预后关系的研究

用免疫组化方法检测胃癌组织中的Ｐ５３和Ｐ１８５蛋白表达，结果表明Ｐ５３和Ｐ１８５基因表达与胃癌患者性别，年龄，肿瘤部位，肿瘤分期，病理类型等均无明显关系，而Ｐ５３基因阳性表达胃癌患者的生存期低于Ｐ５３在因阴性表达者，Ｐ１８５基因表达与胃癌患者的生存期无关，提示Ｐ５３表达可能对判断胃癌预后有一定的作用，而多基因同时异常表达可能对临床估计预后更为有意义。     

ras、P53基因突变和蛋白表达与尿路上皮肿瘤预后的关系

目的　研究ras、P5 3基因突变和蛋白表达以及DNA倍体异常与尿路上皮肿瘤预后的关系。方法　用聚合酶链式反应加单链多态性分析 (PCR -SSCP)及流式细胞术和细胞免疫荧光技术检测 5 2例尿路上皮肿瘤K -ras和P5 3基因突变及蛋白表达和DNA含量变化。结果　K -ras、P5 3基因突变分别为 9.6 2 % ( 5 /5 2 )、42 .31% ( 2 2 /5 2 ) ;rasP2 1、P5 3蛋白阳性表达分别为 6 9.2 3 % ( 36 /5 2 )、6 3 .46 % ( 33/5 2 ) ;异倍体和二倍体肿瘤分别为 42 .31% ( 2 2 /5 2 )、5 7.6 9% ( 30 /5 2 ) ;DNA倍体异常、P5 3基因突变及rasP2 1和P5 3蛋白表达随肿瘤病理分级和分期的上升而增加 ,与肿瘤预后有直接关系(P <0 .0 1) ;异倍体肿瘤其P5 3基因突变、rasP2 1和P5 3蛋白表达阳性率明显高于二倍体肿瘤 (P <0 .0 1)。结论　DNA倍体异常、P5 3基因及rasP2 1和P5 3蛋白表达对尿路上皮肿瘤预后有预测意义。     

肺癌淋巴结转移与P53,nm23基因表达

观察Ｐ５３及ｎｍ２３基因产物在肺癌中的表达及其与肺癌预后的关系。方法：ＬＳＡＢ免疫组化法。结果；肺腺癌组Ｐ５３表达与淋巴结转移呈正相关，肺鳞癌ｎｍ２３基因表达与淋巴结转移呈负相关，ｎｍ２３表达腺癌组高于鳞癌组。观察PT3     

肺癌p53基因突变与蛋白表达关系的研究

目的 以测序结果为标准,探讨免疫组织化学和聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）两种方法用于检测肺癌ｐ５３基因突变的敏感性及优缺点。方法 用免疫组织化学,ＰＣＲ－ＳＳＣＰ和ＰＣＲ产物直接测序检查３０例肺癌标本的Ｐ５３蛋白和基因改变,结果 ３０例肺癌标本经测序共检出２２例突变,突变位于第５外显子８例（３６％）,位于第６外显子２例（９％）,位于第７外显子７例（３２％）,位于第８外显子５例（２     

p53基因在肺癌患者中的突变

目的　探讨肺癌组织中p5 3基因蛋白表达和肺癌患者血白细胞p5 3基因突变及其相互关系。方法　应用免疫组织化学S -P法检测肺癌组织中p5 3基因蛋白表达及聚合酶链反应 -单链构象多态性分析 (PCR -SSCP)检测其中肺癌患者血白细胞p5 3基因突变。结果　p5 3基因蛋白在 5 1例肺癌组织中的阳性表达率为 5 9% ,其中p5 3蛋白在鳞癌、腺鳞癌和腺癌的表达差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,但有淋巴结转移者 ( 77% )显著高于无淋巴结转移者 ( 4 5 % ,P <0 0 5 ) ,p5 3蛋白在肺癌癌旁正常肺组织及白细胞中均为阴性 ;5 1例肺癌患者中 2 8例血白细胞DNA均未见p5 3基因突变。结论　p5 3基因在肺癌患者血白细胞DNA未见突变 ,p5 3基因蛋白阳性的肺癌患者更易发生淋巴结转移     

非小细胞肺癌组织中Survivin、MVD基因的表达及对预后的影响

目的:研究非小细胞肺癌组织中Survivin、MVD基因的表达及其对预后的影响。方法:应用免疫组化S-P法检测肺癌、癌旁及肺良性瘤样病变组织中Survivin、MVD的表达,分析两项指标对患者预后的影响。结果:肺癌、癌旁及肺良性瘤样病变组织中Survivin表达率为69.7%穴63/96雪、16.1%穴5/31雪、0穴0/20雪穴P<0.05雪,MVD值为24.44±7.79、19.37±5.26和11.83±6.52(P<0.05);Survivin、MVD阳性组术后生存期明显短于阴性组穴P=0.042,P=0.039雪。结论:肺癌组织中Survivin、MVD的表达明显高于癌旁和肺良性瘤样病变组织,其表达与肺癌患者的预后有关,是判断预后的良好指标。     

老年人肺癌组织中鸟氨酸脱羧酶基因表达及其临床意义

目的：从mRNA和蛋白质水平探讨ODC基因表达和老年人肺癌的关系，为肺癌基因诊断和基因治疗的研究提供理论依据。方法：分别应用RT PCR和免疫组化方法检测42例老年人肺癌组织和癌旁正常肺组织中ODC mRNA和ODC蛋白的表达，应用Western Blot检测肺癌组织中ODC表达，同时用MTT法观察不同转染组肿瘤细胞的增殖状况，探讨上述指标与肺癌临床病理学特性的关系。结果：RT PCR显示，老年人肺癌组织中ODC mRNA表达明显高于癌旁正常肺组织（P＜0.05），不同类型和分化程度肺癌组织中ODC mRNA水平差异无统计学意义（P＞0.05），Ⅲ期肺癌组织中ODC mRNA表达明显高于Ⅰ期+Ⅱ期（P＜0.05）；免疫组化显示，肺癌组织中ODC蛋白表达明显高于癌旁正常肺组织(P＜0.05);不同病理类型和分化程度肺癌组织中ODC蛋白表达未见明显差异（P＞0.05），Ⅲ期肺癌组织中ODC蛋白表达较Ⅰ期+Ⅱ期明显升高（P＜0.05）；Western Blot显示，肺癌组织中ODC蛋白表达明显高于癌旁正常肺组织；MTT法观察生长曲线检测数据表明，ODC的反义RNA表达载体转染组细胞的增殖明显比对照组细胞和空载体转染组细胞缓慢。结论：ODC表达增强与老年人肺癌发生、发展、浸润及转移有关，可作为判断肺癌生物学行为的参考指标; ODC的反义RNA表达载体对A 549肺癌细胞株的生长具有一定的抑制作用。     

中国上海人群肺癌发病的时间趋势及预后因素

目的了解上海肺癌发病的时间趋势及影响生存的预后因素。方法由上海全死因登记报告系统所获得的2002至2004年恶性肿瘤患者死亡个案资料,按国际癌症登记协会（IACR）的肿瘤登记计算指南进行计算。分别按粗率和标率计算1972年至2004年的年度变化百分比（APC）,对上海市发病时间趋势进行估计。采用Cox比例风险模型对影响生存的多因素进行分析,参数包括性别、年龄、居住区域、病理类型、临床分期、首诊医院级别。结果自1972年以来的32年,上海市中心区男性肺癌发病粗率APC增加1．723％,而女性增加2．036％,均呈逐渐增高趋势（P均〈0．01）;但男性肺癌的标化发病率APC为-0．605％,呈下降趋势（P〈0．01）,而女性为-0．136％,呈平稳趋势（P〉0．05）。上海市肺癌发病患者中Ⅲ、Ⅳ期占大多数,分别占35．6％和42．2％。上海市女性肺癌的3年生存率为17．05％,中位生存期（MST）为0．83年,均高于男性的14．01％和0．77年（P均〈0．01）,对各期肺癌的不同性别亚组的生存期分析显示女性生存期均较男性为高（P〈0．05）。Cox多因素分析结果提示性别、年龄、居住区域、病理类型、期别、首诊医院级别对肺癌生存有影响（P均〈0．01）;其中女性、年轻、居住市中心区、鳞癌、早期、高级别医院可能对生存有益,而男性、老年、居住郊区、小细胞癌、晚期、低级别医院这些因素可能对肺癌患者不利。结论上海市肺癌的发病水平逐渐接近欧美国家。女性、年轻、市中心区居住、鳞癌、早期、高级别医院治疗对肺癌的生存有益。各期别女性肺癌的预后均优于男性,但原因尚不清楚。     

融合自杀基因AdCD-UPRT对人肺癌细胞A549的体外作用

目的:研究融合自杀基因CD-UPRT系统对A549细胞的体外作用.方法:包装、扩增携带重组腺病毒AdCD-UPRT,并测定其滴度.检测AdCD-UPRT感染A549细胞的效率、毒性及目的基因的表达.用MTT法观察AdCD-UPRT/5-FC系统对A549细胞的体外抑制作用及旁观者效应.运用AO-EB染色、电镜及FCM观察AdCD-UPRT/5-FC系统对A549细胞的诱导凋亡作用.结果:CD-UPRT融合自杀基因对A549细胞显示出明显的生长抑制作用并存在旁观者效应,使细胞周期阻滞于S期并诱导细胞凋亡.结论:CD-UPRT融合自杀基因系统对A549细胞有较强的细胞毒作用.     

人胆囊癌细胞系GBC-SD p53基因突变的研究

目的：从蛋白质和分子水平研究人胆囊癌细胞系GBC-SD p53基因状况。方法：对体外培养的GBC-SD细胞,应用免疫细胞化学SP法定性了解其P53蛋白的表达情况;用PCR技术扩增GBC-SD细胞p53基因4-9外显子,对所得产物进行直接测序分析。结果：GBC-SD细胞P53蛋白过表达;PCR产物第5外显子126位密码子有TAC—AAC的碱基颠换,因而使其编码的氨基酸从酪氨酸→天冬酰胺,产生错义突变。结论：人胆囊癌细胞系GBC-SD表达突变型P53蛋白,点突变是其p53基因功能失活的主要原因。     

野生型P53抑制肺癌细胞生长的研究

目的：观察外源性野生型P53对有P53基因突变的肺癌细胞系的生长抑制作用，研究P53调控细胞生长分化的作用。方法：以PCR、免疫组化、SSCP方法筛选P53突变型细胞系，在脂质体介导下转染野生型：P53质粒pC53-SN3，并以空质粒pCMV-neo做对照。用G418筛选稳定表达的细胞克隆，以生长曲线和集落形成实验观察所转染的野生型P53质粒对细胞生长分化的影响。结果：经筛选发现Calu-6细胞系为P53第六外显子突变株，204处密码由谷氨酸突变为天冬氨酸，经野生型P53质粒pC53-SN3转染后，发现细胞生长明显减慢，而转染空质粒的Calu-6细胞与未转染的细胞生长无差异，同时发现pC53-SN3转染后集落形成抑制率达90．6％。结论：表明野生型：P53基因可对肿瘤细胞细胞周期进行负调控，抑制细胞生长。     

p53基因突变与骨髓增殖性肿瘤临床特征及预后关系

探究p53 基因突变与骨髓增殖性肿瘤（MPN）临床特征及预后的关系。方法 选取2017年1月～2020年1月本院收治的MPN患者126例,二代测序法检测患者p53 基因突变情况。对患者进行随访,统计患者总生存（OS）时间和累计生存率;分析p53 基因突变对患者临床特征、预后的影响。结果 126例MPN患者中12例（9.52%）检出p53基因突变,突变主要位于4~8号外显子上,不同类型患者的p53 基因突变检出率比较差异无统计学意义（P＞0.05）。p53突变组患者年龄大于p53 非突变组,WBC水平低于p53 非突变组（P＜0.05）,两组患者的染色体核型、IPSS预后分层比较差异无统计学意义（P＞0.05）;p53 非突变组患者的OS时间、累计生存率均明显高于p53突变组患者（P＜0.05）。结论 MPN患者p53 基因突变发生率较高,与患者年龄、WBC水平、异常核型及IPSS预后分层相关,p53 基因突变会影响患者的预后,可作为临床筛查预后不良高风险人群的客观指标。     

胃癌患者血浆DNA p53基因突变的检测

目的:探讨胃癌患者血浆循环核酸p53基因突变检测的可行性,研究基因突变与胃癌的发生、发展、预后的关系。方法:采用聚合酶链反应(PCR)扩增p53基因外显子7,用变性高效液相色谱技术(DHPLC)对产物进行突变分析,再与各生物参数进行相关性研究。结果:在34例胃癌患者中11例(32.4%)发生p53基因突变,突变率与组织类型、组织分化程度有关(P<0.05),与临床分期、淋巴结转移及远处转移无关(P>0.05)。结论:检测胃癌患者血浆循环核酸p53基因突变,对胃癌的恶性程度、预后评估有一定的临床价值。而DHPLC可作为一种快速简便的基因检测手段。