水飞蓟喷雾剂对深Ⅱ度烫伤大鼠组织病理学和血清IL-1、TNF-α的影响

目的:考察水飞蓟喷雾剂对大鼠深Ⅱ度烫伤组织病理学及血清白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)的影响。方法:建立深Ⅱ度烫伤模型大鼠,随机分成为模型组、美宝湿润烧伤膏组(24 g·kg~(-1))、水飞蓟小剂量组(24 g·kg~(-1))、水飞蓟中剂量组(48 g·kg~(-1))、水飞蓟大剂量组(96 g·kg~(-1))和空白组,连续给药21 d,分别在造模后3 d、7 d、14 d、21 d检测血清IL-1、TNF-α含量;HE染色检测烫伤创面病理学变化。结果:与模型组相比,烫伤后3 d、7 d、14 d、21 d,美宝湿润烧伤膏组和水飞蓟小、中、大剂量组血清TNF-α和IL-1均显著降低,其中水飞蓟大剂量组血清降低程度更大(P0.05)。大鼠烫伤创面HE染色,水飞蓟喷雾剂可明显减轻表皮层、真皮层水肿,促进新生细胞增殖和皮肤组织修复。结论:水飞蓟喷雾剂对大鼠深Ⅱ度烫伤创面有修复作用,可促进烫伤创面的愈合,可能与降低血清IL-1和TNF-α抗炎作用有关。     

太乙膏对大鼠深Ⅱ度烫伤创面肉芽组织中表皮生长因子水平的影响*

目的 观察太乙膏对于大鼠深Ⅱ度烫伤创面肉芽组织中表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、血管内皮生长因(vascular endothelial growth factor,VEGF)含量的影响,以期探讨太乙膏在促进创面愈合过程中的作用机制。方法 SPF级Wistar大鼠60只,空白对照组6只,剩余54只建立大鼠深Ⅱ度烫伤模型。烫伤模型大鼠按照随机数字表法分为太乙膏组、解毒生肌膏组、模型对照组,每组18只。3组大鼠分别在烫伤部位涂抹太乙膏、解毒生肌膏及0.9%氯化钠注射液。连续治疗3周后,切取大鼠背部创面肉芽组织,采用免疫组化法检测肉芽组织中EGF、VEGF水平。结果 解毒生肌膏组、太乙膏组大鼠烫伤创面肉芽组织中EGF、VEGF水平显著高于模型对照组(P<0.05),且太乙膏组EGF、VEGF水平明显高于解毒生肌膏组(P<0.05)。结论 太乙膏通过某种调控促使创面肉芽组织中EGF、VEGF含量增多,可能是其促进创面愈合的作用机理。     

TGF-β1对糖尿病大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合的影响

目的观察转化生长因子-β1(TGF-β1)在糖尿病大鼠深Ⅱ度烫伤创面组织中的表达,探讨外源性TGF-β1应用对创面愈合的影响。方法 18只SD大鼠随机分为单纯烫伤组(对照组)、糖尿病烫伤组(糖尿病组)和糖尿病烫伤TGF-β1干预组(用药组),每组各6只。糖尿病组和用药组大鼠经链脲佐菌素诱导建立糖尿病模型,再制备深Ⅱ度烫伤模型,用药组大鼠建模成功后给予创面下局部皮内注射TGF-β1。烫伤后1、3、5、7、14、21 d记录创面未愈合面积并计算创面愈合率,组织学检查观察创面愈合情况,免疫组化检测创面组织TGF-β1表达。结果从烫伤后5 d起,对照组和用药组创面愈合率较糖尿病组升高,差异有统计学意义(P<0.05),对照组与用药组比较差异无统计学意义(P>0.05)。对照组创面局部TGF-β1含量较糖尿病组多,差异有统计学意义(P<0.05)。结论糖尿病大鼠烫伤创面较正常大鼠烫伤创面愈合速度慢,与创面局部TGF-β1含量减少有关。创面局部应用TGF-β1有利于糖尿病大鼠烫伤创面愈合。     

孵育鸡蛋膜对深Ⅱ度烧伤创面bFGF、EGF表达的影响及意义

目的:研究孵育鸡蛋膜对大鼠深Ⅱ度烧伤创面碱性成纤维细胞生长因子(Basic fibroblast growth factor,bFGF)、上皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)表达的影响及意义.方法:以鸡蛋膜、暴露处理为孵育鸡蛋膜对照,测定伤后7、14、21 d创面愈合率、创面羟脯氨酸含量、EGF和bFGF表达量.结果:孵育鸡蛋膜在各时间点愈合率高于暴露组,伤后7 d EGF,bFGF表达高于对照组.结论:孵育鸡蛋膜对深Ⅱ度烧伤创面愈合有促进作用,其促愈机理与覆盖孵育鸡蛋膜后创面EGF,bFGF表达增高相关.     

双黄烧伤膏影响大鼠烫伤创面愈合及其瘢痕形成相关实验研究

目的探讨双黄烧伤膏促进烫伤创面愈合及抑制瘢痕形成作用机制。方法取SD大鼠制作深Ⅱ度烫伤创面模型,随机分为双黄烧伤膏组及空白对照组,在伤后采用免疫组化法检测创面中TGF-β1、EGF,I、III胶原的表达情况,以CD34一抗免疫组织化学标记血管内皮细胞,计数微血管密度。结果双黄烧伤软膏能影响TGF-β1,EGF表达,增加微血管生成,影响I、III胶原比例。结论双黄烧伤膏能促进烫伤创面愈合并抑制瘢痕形成。     

拮抗内皮素促进深Ⅱ度烫伤创面愈合的实验研究

观察内皮素受体桔抗剂PD142893对深Ⅱ度烫伤创面愈合的作用。SD大鼠随机分成PD142893组、生理盐水两组,测定烫伤前后创面含水量、丙二醛(MDA)产量和超氧歧化酶(SOD)活性。伤后PD142893组含水量明显低于生理盐水组:PD142893组MDA量上升后快速下降,生理盐水组却呈直线上升;PD142893组SOD活性下降程度低,回升快。PD142893组较生理盐水组创面愈合时间短、质量高。提示烫伤早期给予PD142893拮抗ET,可减轻创面渗出及脂质过氧化损害.使大鼠深Ⅱ度烫伤愈合良好。     

荷负电气溶胶对大鼠烫伤创面表皮细胞生长因子和β1整合素表达的影响

目的研究荷负电气溶胶(aerosol bioelectricity, ABE)对大鼠烫伤创面愈合过程中表皮细胞生长因子(epidermal growth factor, EGF)和β1整合素表达的影响,探讨荷负电气溶胶促进创面愈合的作用机制.方法制作SD大鼠深Ⅱ度烫伤模型,将40只鼠随机分为治疗组(n1=20)和对照组(n2=20).治疗组应用荷负电气溶胶治疗,每次1.5 h,每天2次,直至创面愈合;对照组不作荷负电气溶胶治疗.采用免疫组织化学和图像分析方法,检测创面愈合过程中EGF和β1整合素表达水平.结果创面平均愈合时间治疗组为(7±1.15) d,对照组为(9±1.34) d,治疗组创面愈合时间明显提前(P<0.01).免疫组化显示,治疗组伤后第2天可见EGF、β1整合素开始表达于基底细胞和毛囊细胞,第5天表达显著,第6～9天持续高水平表达;对照组于第3天开始表达,第7天表达显著,第8～10天持续高水平表达.治疗组表达水平明显高于对照组(P<0.01).创面愈合后两组表达逐渐恢复至正常水平,差异无显著性意义(P>0.05).结论通过上调EGF和β1整合素的表达而促进细胞增殖可能是荷负电气溶胶促进烧伤创面愈合的机制之一.     

EGF对大鼠深Ⅱ度烫伤创面成纤维细胞的影响

目的探讨鼠表皮生长因子(epidermal growth factor, EGF)对大鼠深Ⅱ度烫伤创面成纤维细胞的影响. 方法采用流式细胞仪测定成纤维细胞的细胞周期,透射电镜观察成纤维细胞的形态, HE染色观察肉芽组织范围以了解成纤维细胞的功能变化. 结果应用EGF组和对照组大鼠分别于用药后第3、6d有成纤维细胞增殖活性的增加,后又迅速恢复近正常水平,电镜下可见用药组大鼠成纤维细胞明显增生迹象;两组大鼠在肉芽组织范围及肉眼观察创面愈合天数上无明显不同. 结论按临床常规用药方法,EGF可在一定时相内增加成纤维细胞增殖活性,但对创面愈合并未产生明显影响.     

烫伤药水喷雾剂促进深Ⅱ度烫伤创面愈合、减少瘢痕形成的实验研究

目的:观察烫伤药水喷雾剂对大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合、减少瘢痕生成的影响。方法:将60只深Ⅱ度烫伤SD大鼠模型随机分为3组,即实验组(烫伤药水喷雾剂),阳性对照组(磺胺嘧啶银软膏组),阴性对照组(基质软膏组),每组各20只。随机从每组中选取10只大鼠,于第2天、第7天、第14天用佳能70D数字相机拍摄,图片实用Image J软件计算烫伤创面面积,并予以保存,然后以公式计算创面愈合率:创面愈合率=(原始创面面积-未愈合创面面积)/原始创面面积×100%。随机选取每组大鼠的10只,于实验的第3天、第7天、第14天麻醉下分别取皮,送至病理科。分别测试:1组织内Ⅰ型、Ⅲ型胶原检测,2凋亡细胞计数组织内转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的表达。结果:烫伤药水在创面愈合率的检测中,第3天、第7天、第14天实验组与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P0.01),第1天、第2天、第3天阳性对照组与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P0.01);但实验组与阳性对照组相比较,差异无统计学意义(P0.05)。由此可见烫伤药水喷雾剂可显著促进创面愈合。在预防瘢痕的实验检测中,治疗组的Ⅰ型胶原纤维排列较为稀疏,低密度,Ⅲ型胶原表达较弱。而阳性对照组及阴性对照组的Ⅰ型胶原纤维粗,排列的密度较为高,显示为深黄色,过度增生的Ⅰ型胶原纤维呈漩涡状。Ⅲ型胶原纤维较细小,为网格状。显示烫伤药水处理后组织基质中Ⅰ型、Ⅲ型胶原比例部分恢复,其中Ⅰ型胶原实验组相对于阴性对照组,在第3天有统计学差异(P0.05),而在第7天、第14天,实验组与阴性对照组比较,差异具有显著统计学意义(P0.01)。Ⅲ型胶原实验组相对于阴性对照组,在第7天有统计学差异(P0.05),而在第3天、第14天,实验组与阴性对照组比较,差异具有显著统计学意义(P0.01)。在TGF-β1的检测中,烫伤药水对TGF-β1表达,实验组表达随时间逐渐减少,阳性对照组及阴性对照组随时间渐渐增加,第14天无明显下降。其中实验组相对于阴性对照组,在第7天有统计学差异(P0.05),而在第14天,实验组与阴性对照组比较差异具有明显统计学意义(P0.01),说明烫伤药水喷雾剂能促进创面的愈合,预防瘢痕生成。结论:烫伤药水喷雾剂具有抗炎、抗感染,促进创面愈合,减轻瘢痕形成的作用。     

烫伤液喷雾剂对Ⅱ度烫伤模型大鼠治疗的实验研究

目的:观察烫伤液喷雾剂对Ⅱ度烫伤大鼠模型的治疗作用.方法:实验采用85℃和75℃热水浸烫脱毛区15秒,成功建立大鼠深Ⅱ度烫伤和浅Ⅱ度烫伤模型.应用烫伤液喷雾剂涂抹烫伤创面,给药量为1ml/只鼠,每天涂药2次,连续给药14天,涂药后创面不加覆盖,逐日观察创面感染愈合情况及动物全身情况(体征表现和创面结痂、愈合情况)连续观察20天.结果:烫伤液喷雾剂对浅Ⅱ度烫伤模型大鼠可缩短结痂时间和脱痂时间,缩短愈合天数,(P<0.01);烫伤液喷雾刺对深Ⅱ度烫伤模型大鼠可缩短结痂时间,(P<0.05).结论:烫伤液喷雾剂对浅Ⅱ度烫伤具有较好的治疗效果,对深Ⅱ度烫伤具有促进创面愈合的作用.     

温肾健脾方对大鼠慢性创面愈合的影响

目的:探讨温肾健脾中药对慢性创面愈合的影响及可能作用机制.方法:采用大鼠背部开放性创面模型,用肌注氢化可的松的方法造成慢性难愈性创面,以辛葡康为阳性对照药,应用免疫组化、流式细胞术等方法,观察创面愈合时间、新生上皮宽度、肉芽组织形态学变化、肉芽组织细胞周期、表皮生长因子(epidermal growth factor, EGF)、转化生长因子β1 (transforming growth factor-β1, TGF-β1)及纤维连接蛋白(fibronectin, FN)等指标.结果:温肾健脾方治疗组与辛葡康对照组平均创面愈合时间分别为(17.0±1.9)和(18.8±1.9) d,较模型组及空白组明显缩短(P<0.05);治疗14 d后,治疗组及对照组新生上皮宽度分别为(3.73±0.19)和(3.21±0.15)mm,较模型组及空白组明显增宽(P<0.05);治疗组新生毛细血管丰富,成纤维细胞数量多,而对照组、模型组及空白组新生毛细血管及成纤维细胞数量均较治疗组明显减少(P <0.05);治疗组S期细胞比例较对照组、模型组及空白组明显提高(P<0.05);治疗组及对照组与模型组及空白组比较,EGF、TGF-β1、FN蛋白表达均增强(P<0.05).结论:温肾健脾方有促进大鼠慢性难愈创面修复的作用,其机制与调节细胞周期,上调EGF、TGF-β1细胞因子蛋白表达水平,促进间质FN的表达有关.     

骨髓间充质干细胞促进大鼠皮肤创面愈合的作用及机制研究

目的 探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)对大鼠皮肤创面的促愈作用及机制,为临床皮肤损伤修复提供新的治疗方法.方法 建立大鼠背部皮肤全层切割伤模型,将大鼠分为2组:空白对照组,MSCs处理组,分别于伤后3、6、9、12 d采用大体观察,常规组织学检查观察2组大鼠背部皮肤伤口愈合状况及RT-PCR观察转化生长因子(TGF-β1)、表皮生长因子(EGF)mRNA在愈合中的变化特点.结果 MSCs处理组大鼠皮肤愈合快,愈合指数高,创伤后第3天MSCs处理组大鼠皮肤TGF-β1上调明显,第6天EGF上调明显.结论 MSCs能促进大鼠皮肤创面愈合,其机制可能与其引起各种生长因子的合成和分泌有关.     

整合素连接激酶在创面中的表达及其调控研究

目的 探讨大鼠烫伤创面愈合过程中整合素连接激酶（ILK）的表达和转化生长因子β1(TGF-β1)对人皮肤成纤维细胞中ILK表达的调控作用。方法 健康SD大鼠18只,随即选取15只建立深Ⅱ°烫伤模型,分别于烫伤后第1、5、10、15、20天分别随机选取3只大鼠,运用免疫组织化学的方法,动态观察烫伤创面中ILK的表达。另外3只取正常皮肤作为对照。7例人正常皮肤标本采用组织块法分离培养人皮肤成纤维细胞,选取第4-6代状态良好的细胞,TGF-β1组给与TGF-β1(5ng/ml)刺激,同一成纤维细胞作为对照,运用倒置相差显微镜观察细胞的形态变化,荧光标记的免疫细胞化学方法检测第24、48、72小时各组细胞中ILK的表达。结果 烫伤后第5、10、15天大鼠烫伤创面中ILK的平均光密度值显著高于正常皮肤和愈合后（第20天）(P＜0.05)。随着刺激时间的延长,TGF-β1组细胞中ILK的表达逐渐增加,第48、72小时TGF-β1组ILK阳性表达的平均光密度值显著高于对照组(P＜0.05)。结论 ILK在大鼠创面愈合过程中表达明显增加,它们可能对创面的愈合起着重要作用。TGF-β1能时间依赖的诱导ILK的表达增加,TGF-β1对皮肤呈纤维细胞中ILK的表达具有一定的调控作用。     

胸腺素β4联合外源性bFGF对深II度烫伤大鼠创面愈合的影响及机制研究

【摘要】 目的 研究胸腺素β4(Tβ4)联合外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对深II度烫伤大鼠创面愈合的 影响及其机制。方法 将40只深II度烫伤大鼠随机分为正常对照组(外涂生理盐水)、Tβ4组(外涂6 μg Tβ4)、bFGF 组(外涂4μg bFGF)及Tβ4 + bFGF组(外涂6 μg Tβ4 + 4μg bFGF),每组各10只。给药第3、7、10、14 d对创面进行拍 照并取创面皮肤标本,计算各组大鼠创面愈合率,利用RT-PCR检测TGF-βl mRNA及VEGF mRNA表达,Western blot检测VEGF、Caspase-3及NF-kB蛋白表达。给药后第1、3、6、12、24及48 h,取各组大鼠创面皮肤标本,采用免疫组 织化学法检测IL-10及TNF-a阳性表达。结果 给药后各时间点,Tβ4 + bFGF组创面愈合率均高于其他各组(P＜ 0. 05) ,TGF-β1 mRNA表达量低于其他各组(PV0. 05),而VEGF mRNA表达量及VEGF、Caspase-3及NF-kB蛋白表 达量高于其他各组(P＜0. 05)。Tβ4 + bFGF组IL-10及TNF-a阳性细胞数先增加后降低,12 h到达峰值,12 h前高于 Tβ4组及bFGF组,12 h后低于Tβ4组及bFGF组(P＜0.05)。结论 Tβ4联合外源bFGF治疗深II度烫伤能通过改善 炎症反应,加速坏死组织细胞凋亡,促进新生血管生成加速创面愈合,具有很好的疗效。     

上皮生长因子对深Ⅱ°创面愈合影响的实验研究

模型大白鼠深Ⅱ°烫伤创面，以基质为对照组及含重组上皮生长因子（含10μg／grhEGF）为用药组，创面换药。探讨EGF对烧伤创面的愈合影响．结果用药组创面愈合时间早于对照组，创面愈合后上皮角质细胞及上皮乳头增多，两组新生皮与皮下结缔组织结合程度亦存在明显差异．提示EGF具有明显促上皮生长、加速创面愈合作用．     

烧烫安乳膏对大鼠皮肤深二度烫伤创面愈合的影响

目的探讨烧烫安乳膏对大鼠深二度烫伤的影响。方法采用大鼠深二度烫伤模型,创面分别外用高、中、低剂量的烧烫安乳膏,通过伤后不同时间点创面取材,检测烫伤创面羟脯氨酸水平、创面愈合面积百分比、愈合时间及观察组织病理学变化,以基质乳膏作阴性对照,湿润烧伤膏作阳性对照,观察烧烫安乳膏对大鼠深二度烫伤创面愈合的影响。结果创面外用中、高剂量的烧烫安乳膏可以增加创面羟脯氨酸水平,促进肉芽组织生长,促进创面局部成纤维细胞生长因子-1β(FGF-1β)的表达,缩短愈合时间;作用与湿润烧伤膏相当。结论烧烫安乳膏可增强胶原合成,促进上皮细胞增殖,加速烫伤创面愈合。     

重组人结缔组织生长因子(rhCTGF)促进大鼠烫伤创面愈合的实验研究

目的通过结缔组织生长因子(CTGF)的局部应用,观察其对烫伤创面愈合的促进作用。方法大鼠随机分为用药组和对照组,复制深Ⅱ度烫伤模型,每组为自体对照,用药物和基质,烫伤次日起,开始给药并对创面拍照,观察创面结痂时、创面完全愈合时分别取愈合组织做光镜、电镜、细胞周期检测。结果①给药第15天中剂量(30ng)、高剂量(100ng)组受试侧创面相对愈合面积与同组对照侧差异显著(P<0. 05);②创面完全脱痂时取组织,光学显微镜观察并评分, 10ng组受试侧与对照侧相比差异显著(P<0. 05);③电子显微镜观察,各剂量组受试侧纤维排列明显较对照侧更近似于正常皮肤;④流式细胞仪检测结果显示,中剂量组、高剂量组受试侧细胞G1期较对照侧短,并有差异显著性(P<0. 05 )。结论局部应用合适剂量CTGF可促进深Ⅱ度烫伤创面愈合,缩短创面愈合时间。     

EGF对大鼠深Ⅱ度烫伤创面成纤维细胞的影响

目的：探讨鼠表皮生长因子（epidermal growth factor,EGF)对大鼠深Ⅱ度汤伤创面成纤维细胞的影响。方法：采用流式细胞仪测定成纤维细胞的细胞周期，透射电镜观察成纤维细胞的形态，HE染色观察肉芽组织范围以了解成纤维细胞的功能变化。结果：应用EGF组和对照组大鼠分别于用药后第3，6d有成纤维细胞增殖活性的增加，后又迅速恢复近正常水平，电镜下可见用药组大成纤维细胞明显增生迹象，两组大鼠在肉芽组织范围及肉眼观察创面愈合天数上无明显不同。结论：按临床常规用药方法，EGF可在一定时相内增加成纤维细胞增殖活性，但对创面愈合并未产生明显影响。     

胰岛素对表皮角质形成细胞的作用

目的观察胰岛素对大鼠烫伤创面以及体外培养的表皮角质形成细胞(KCs)的作用,探讨其促进创面愈合的可能机制.方法水浴法致SD大鼠背部深Ⅱ度烫伤,局部创面下浸润注射生理盐水(对照组)或0.1 U长效混悬锌胰岛素(胰岛素组),记录创面再上皮化时间;RT-PCR测定KCs 表皮生长因子(EGF) mRNA表达;Western blotting检测KCs层粘蛋白(LN)表达.计算体外培养的人KCs经胰岛素作用后的细胞黏附率.结果胰岛素组创面再上皮化时间较对照组明显缩短.胰岛素组大鼠KCs烫伤后第4、6 d 的EGF mRNA表达以及第14 d和创面再上皮化当日的LN表达,均较对照组明显增强(P<0.05).体外培养的人KCs经胰岛素作用后,在不同细胞外基质上的黏附率均明显增加.结论胰岛素提高体外培养KCs的黏附能力并增强创面局部KCs分泌EGF和LN的功能,是其促进创面愈合的可能机制.     

芍药苷对难愈性溃疡大鼠创面愈合及HIF-1α/VEGF/VEGFR2信号通路的影响

目的:探讨芍药苷(PF)调控缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)/血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)对难愈性溃疡大鼠创面愈合的影响和作用机制。方法:将60只SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、模型(Model)组、PF组(30mg/kg, 2次/d)、PX-478组(100mg/kg HIF-1α/VEGF/VEGFR2通路抑制剂PX-478,1次/d)、PF+PX-478组，每组12只，持续2周。通过一般创面注射肌注氢化可的松制成大鼠难愈性创面模型，用相机结合Image J软件计算各组大鼠创面的愈合率；用ELISA法检测大鼠血清中氧化应激指标；HE染色检测大鼠创面病理变化；TUNEL染色检测创面组织细胞凋亡；RT-qPCR检测大鼠创面组织转化生长因子β1(TGF-β1)、血小板衍生因子(PDGF)表达情况；Western blotting法检测大鼠创面组织HIF-1α/VEGF/VEGFR2通路相关蛋白表达。结果:与Sham组相比，Model组大鼠创面成纤维细胞和毛细血管稀疏，愈合率、SOD、GSH-PX水平、TGF-β1、PDGF mRNA水平及H...