益气补肾活血方对佐剂关节炎大鼠关节滑膜细胞MMPs的影响

目的观察益气补肾活血方对佐剂关节炎(AA)模型大鼠关节滑膜细胞MMPs表达水平的影响,探讨该中药复方对类风湿关节炎的治疗机制。方法以雷公藤多苷作为对照,采用AA大鼠模型,用益气补肾活血方对AA大鼠进行灌胃治疗。采用反转录聚合酶链反应检测AA模型大鼠关节滑膜细胞MMPs的m-RNA表达。结果益气补肾活血方治疗后,AA模型大鼠MMPs的表达水平明显下降。结论益气补肾活血方能显著降低MMPs的表达水平,可能是该方治疗类风湿关节炎的作用机制之一。     

益气补肾活血方对失用性骨质疏松模型大鼠BMD、BGP、BAP的影响

目的观察益气补肾活血方对失用性骨质疏松大鼠骨密度(BMD)、大鼠骨钙素(BGP)、大鼠骨特异性碱性磷酸酶(BAP)等指标的影响。方法将假手术大鼠作为空白对照组,大鼠右侧股骨骨折后石膏固定的方法建立废用性骨质疏松模型,分为益气补肾活血方组、钙尔奇组、模型对照组。灌胃给药60 d后,骨密度仪检测BMD、骨矿盐(BMC),ELISA法检测血清中BGP、BAP的含量。结果益气补肾活血方组与钙尔奇组全身及股骨BMD及BMC均显著高于模型对照组(P0.05),两组之间比较,差异无统计学意义(P0.05);模型对照组血清BGP最低,与其他组比较差异有统计学意义(P0.05);益气补肾活血方组与钙尔奇组均能降低血清中BAP含量,与模型对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论益气补肾活血方能够有效防止失用性骨质疏松模型大鼠的骨量丢失,并能有效抑制骨吸收的发生,促进骨形成。     

补肾活血方对血管性认知障碍模型大鼠EAA和IAA的影响

目的观察补肾活血方对血管性认知障碍模型大鼠兴奋性氨基酸(EAA)与抑制性氨基酸(IAA)的影响。方法 3月龄Wistar大鼠用双侧颈总动脉永久结扎法制作认知障碍模型,用补肾活血方水煎剂和银杏叶片水溶剂灌胃14 d,观察造模前后大鼠行为的改变,用HPLC法检测大鼠海马组织乙酰胆碱(Ach)、5-羟色胺(5-HT)、谷氨酸、γ-氨基丁酸含量,WB、RT-PCR法检测其受体表达。结果补肾活血方组与模型组比较,逃避潜伏期缩短,翻越旷场实验箱格数增加,海马组织Ach、5-HT、GABA含量及其受体的表达增高,Glu的含量及其受体的表达降低。结论补肾活血方有保护大脑学习记忆能力,降低脑内Ach、5-Ht含量的功效,其作用机制与调节脑内EAA和IAA含量的平衡有关。     

益气补肾活血方对轻度认知功能损伤患者的影响

目的观察益气补肾活血方对轻度认知功能损伤（MCI）患者的临床疗效。方法60例MCI患者随机分为治疗组和对照组,每组30例。两组治疗期间停服一切中西医和其他促智药物,以及停服对大脑功能代谢有影响的药物直至疗程结束。对照组只给予治疗既往存在疾病的药物,治疗组给予治疗既往存在疾病的药物,并给予益气补肾活血方,12W为1个疗程,1个疗程后观察临床疗效。结果治疗组治疗后临床疗效与对照组比较有显著性差异（P〈0.01）;治疗组治疗前后简短精神状态量表（MMSE）评分及无意义图形再认积分比较有显著性差异（P〈0.01）。结论益气补肾活血方对MCI患者的临床疗效较理想,有较好的临床推广价值。     

补肾活血方对大鼠卵巢局部VEGFmRNA表达的影响

目的探讨补肾活血方对大鼠多束卵巢形成中血管内皮生长因子的基因表达(VEGFmRNA)的影响。方法选用未成年24 d龄SD雌性大鼠60只,随机分为模型对照组、西药对照组、补肾活血方高剂量组、补肾活血方低剂量组、正常对照组5组。用Bogovich法建立大鼠多囊卵巢病理模型。以克罗米酚为对照,用原位杂交法观察补肾活血方对多囊卵巢大鼠局部VEGFmRNA的影响。结果模型组卵巢局部VEGFmRNA存在颗粒细胞、卵泡膜细胞、间质细胞及血管内皮细胞表达的显著增高。用补肾活血方高、低剂量和西药对照治疗后,卵巢局部VEGFmRNA的表达明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01),说明补肾活血方高、低剂量组与西药组对VEGFmRNA的表达具有抑制作用。补肾活血方高、低剂量组与西药组比较,高剂量组抑制作用优于西药组,差异具有显著统计学意义(P<0.01);低剂量组与西药组比较差异无统计学意义(P>0.05),补肾活血方高、低剂量组比较,高剂量组抑制作用优于低剂量组,差异具有显著统计学意义(P<0.05)。结论VEGFmRNA可能参与多囊卵巢综合征的发病机制有关。以补肾活血立法的补肾活血方能降低多囊卵巢大鼠局部VEGFmRNA的显著增高表达,降低VEGFmRNA在卵巢局部的作用。提示补肾活血方可能通过VEGFmRNA途径切入卵泡发育、促卵泡优势化、卵泡成熟、基质降解、诱发局部类炎症反应,使排卵成功。     

补肾活血方对佐剂性关节炎大鼠细胞因子的影响

目的探讨补肾活血方对佐剂性关节炎(Adjuvant arthritis,AA)大鼠血清中细胞因子基质金属蛋白酶-3(Matrix Metalloproteinase 3,MMP-3)与白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)的影响。方法以雷公藤多苷片为阳性对照药物,给予AA大鼠不同剂量的补肾活血方制成药液灌胃,治疗28 d,观察治疗前后各组大鼠的一般情况、体重变化、关节炎指数,并测定各组大鼠血清中MMP-3、IL-4、IL-10水平。结果与空白对照组比较,模型对照组大鼠体重增长缓慢,血清中MMP-3显著升高,而IL-4及IL-10则明显下降,差异有统计学意义(P0.01);与模型对照组比较,给药后的中药不同剂量组及雷公藤多甙片组(对照组)大鼠体重增长较快,关节炎指数降低明显,且均可降低MMP-3,升高IL-4、IL-10水平,差异有统计学意义(P0.01);与对照组比较,中药高剂量组能显著增加AA大鼠体重(P0.05),升高IL-4、IL-10水平(P0.05),降低关节炎指数及血清中MMP-3的水平(P0.05)。结论补肾活血方通过增加IL-4、IL-10水平,降低血清中MMP-3含量,恢复类风湿性关节炎细胞因子间的平衡,从而达到防治该病的作用。     

温阳活血方对大鼠阿霉素肾病模型的影响

目的：探讨不同治法治疗原发性肾病综合征高脂血症的疗效差异。方法：用阿霉素（ADR）诱导一种类似人类微小病变肾病模型,然后用中药温阳方、活血方及温阳活血方对模型进行治疗,并设空白、病理及强的松组对照。结果：温阳活血方组尿蛋白、血脂、脂蛋白及肾脏病理损害明显改善;温阳方及活血方组血脂、脂蛋白部分指标及肾脏病理损害有所改善。结论：温阳活血方对ADR肾病的治疗作用较全面,其疗效优于温阳法和活血法。     

补肾活血方对肾阴虚小鼠抗应激作用的实验研究

目的:研究补肾活血方对肾阴虚小鼠抗应激作用的影响.方法:分别采用肾上腺皮质激素和甲状腺素加利血平诱发肾阴虚小鼠模型,观察补肾活血方对肾阴虚小鼠耐缺氧、抗疲劳、耐低温和耐高温的影响.结果:补肾活血方明显延长肾阴虚小鼠耐缺氧和游泳时间,可使肾阴虚小鼠在低温和高温环境下存活时间延长.结论:补肾活血方具有较好的抗应激作用.     

补肾活血方对大鼠子宫内膜细胞病理形态学及凋亡的影响

目的：探讨补肾活血方治疗子宫内膜异位症的细胞凋亡机制。方法：以雌性8～12周龄Wistar大鼠建立大鼠子宫内膜异位症模型,随机分为模型组、中药低剂量组、中药高剂量组及西药组,每组6只,共干预4周。采用光镜、电镜、TUNEL法检测药物干预前后模型大鼠异位及在位子宫内膜的病理形态学及凋亡细胞的阳性率。结果：①与模型组比较,各治疗组均有不同程度抑制异位内膜生长的作用,并可观察到异位内膜组织中典型的细胞凋亡形态学变化：细胞核固缩,染色质凝集,核破裂及凋亡小体形成等,其中以中药高剂量组及西药组的改变最明显,其次为中药低剂量组。②对在位子宫内膜进行镜下观察发现：中药组与正常的子宫内膜结构基本相同,表现为腺体及间质生长良好,腺上皮及黏膜上皮呈高柱状,间质密集,而西药组呈萎缩性改变,腺上皮萎缩,黏膜上皮呈扁平状,间质减少。③与模型组和中药低剂量组比较,中药高剂量组、西药组大鼠异位子宫内膜细胞平均凋亡指数升高,差异有统计学意义（P〈0.01）。与西药组比较,中药高剂量组异位子宫内膜细胞平均凋亡指数升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。西药组大鼠在位子宫内膜细胞平均凋亡指数较模型组、中药低剂量及中药高剂量组明显升高,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：子宫内膜异位症的发生与细胞凋亡能力的下降有关;补肾活血方能促进异位内膜细胞发生凋亡,使异位病灶萎缩、消退,而对在位子宫内膜无不良影响。     

补肾活血方对精索静脉曲张大鼠生精细胞凋亡的影响

目的探讨补肾活血方对精索静脉曲张模型大鼠生精细胞凋亡及各级生精细胞数的影响。方法将50只3月龄雄性SD大鼠先随机抽出10只为假手术组，其余40只大鼠采用肾静脉缩窄法建立精索静脉曲张病理模型，造模完成后再随机均分为模型组，补肾活血方低剂量组、中剂量组、高剂量组。造模后48d开始给药，连续给药60d，用流式细胞仪检测各纽大鼠睾丸生精细胞凋亡数、凋亡率及各级生精细胞数。结果假手术组未出现明显的凋亡峰，模型组与各治疗组均出现明显的凋亡峰，且模型组大鼠睾丸生精细胞凋亡率显著高于各治疗组（P〈0．01）。各级生精细胞数比较，1C细胞（精子细胞与精予）数模型组与各治疗组比较有显著性差异（P〈0．05）；2C细胞（次级精母细胞）数各组间比较无显著性差异；4C细胞数（初级精母细胞）模型组与治疗组比较有非常显著性差异（P〈0．01）。结论生精细胞大量凋亡是精索静脉曲张导致不育的重要病理机制，补肾活血方能降低生精细胞凋亡率，提高模型动物各级生精细胞数量。     

补肾活血方对实验性精索静脉曲张大鼠睾丸组织结构的影响

目的观察模型大鼠睾丸组织结构及超微结构的改变,以及补肾活血方对其病理改变的影响.方法本实验设5组:将35只3月龄雄性SD大鼠先随机抽出7只为假手术组,其余28只大鼠采用肾静脉缩窄法建立实验性精索静脉曲张病理模型,造模完成后再随机均分为模型组、补肾活血方低剂量组、补肾活血方中剂量组、补肾活血方高剂量组.造模完成后48天开始给药,连续给药60天,光镜观察睾丸组织结构改变,透射电镜观察睾丸超微结构改变.结果模型大鼠睾丸组织可见明显的病理性改变补肾活血方各组大鼠睾丸组织的病理性改变较模型组显著减轻.结论精索静脉曲张可引起睾丸组织的病理性损伤,补肾活血方可不同程度地修复这种病理性损伤.     

补肾活血方对骨质疏松症模型大鼠骨密度及BMP-2蛋白表达影响实验研究

目的:通过观察摘除卵巢复制骨质疏松症模型大鼠股骨中BMP-2蛋白表达变化,探究补肾活血方能有效治疗质疏松症的机理。方法:实验采用摘除大鼠双侧卵巢的方法复制骨质疏松症模型,并将大鼠分为正常组、假手术组、模型组、补肾活血方组、阳性药物福善美组和骨疏康组,术后2 d开始给药干预,6次/周,持续12周后检测各组大鼠股骨中BMP-2蛋白表达水平及骨密度。结果:补肾活血组和骨疏康组、福善美组与模型组相比较,股骨密度都得到了一定提高(P0.01);BMP-2蛋白表达水平也都有显著升高(P0.01)。结论:补肾活血方对骨质疏松症模型大鼠有明显的治疗作用,其作用机制可能是在一定程度上提高了股骨组织中BMP-2的水平,进而抑制骨组织的吸收,促进骨组织的形成。     

补肾活血方对膝骨性关节炎模型家兔硫酸软骨素的影响

目的:探讨补肾活血方对膝骨性关节炎模型家兔关节软骨中硫酸软骨素含量的影响.方法:54只10月龄日本大耳白兔,随机分为正常组、模型组、中药组各18只.采用兔右膝关节腔内注入木瓜蛋白酶建立骨性关节炎模型.造模成功后,模型组给予9.0 g/L氯化钠注射液,中药组给予补肾活血中药灌服,正常组正常饲养.分别于灌胃的4、8、12周后分批取材并测定各组关节软骨中硫酸软骨素含量.结果:模型组硫酸软骨素含量低于正常组,两者差异显著(P<0.05).中药组硫酸软骨素含量高于模型组,有显著性差异(P<0.05);且随着时间延长,中药组硫酸软骨素的含量升高趋势明显,8周与4周的测定值相比、12周与8周的测定值相比有极显著差异(P<0.05).结论:补肾活血方可提高膝骨性关节炎模型家兔关节软骨中硫酸软骨素的含量,且随着疗程的延长作用明显,从而起到防治骨性关节炎的作用.     

补肾活血方对膝骨性关节炎模型家兔一氧化氮水平的影响

目的:探讨补肾活血方对骨性关节炎模型家兔血清、关节软骨及滑膜中一氧化氮(NO)含量的影响。方法:54只10月龄新西兰大白兔,随机分为正常组、模型组、中药组各18只。采用Hulth模型复制法建立骨性关节炎模型,模型复制后4周正常组和模型组给予9.0g/L氯化钠注射液,中药组给予补肾中药灌服。分别于模型复制后4,8,12周测定各组血清、关节软骨及滑膜NO含量。结果:模型组血清、关节软骨及滑膜NO水平均高于正常组,以滑膜最为显著,而灌服中药后各项指标有明显下降,与模型组相比差异有显著性(P<0.01)。结论:补肾活血中药能够降低骨性关节炎血清、关节软骨和滑膜中NO水平,抑制骨性关节炎的发生和发展。     

痛泻二草方对溃疡性结肠炎模型大鼠肠黏膜乳酸含量和髓过氧化物酶活性的影响

目的 通过痛泻二草方对溃疡性结肠炎（UC）模型大鼠肠粘膜乳酸（LA）含量和髓过氧化物酶（MPO）活性的影响,探讨痛泻二草方防治UC的作用机理。方法 采用抗原免疫法和局部刺激法建立UC动物模型。将50只大鼠随机分愈合的为空白组、模型组、痛泻二草方组、痛泻要方组和补脾益肠丸组,分别对各组大鼠肠粘膜LA含量、MPO活性进行检测。结果 与空白组比较,模型组大鼠肠粘膜LA含量,MPO活性显著升高（P〈0．01,P〈0．05）;经药物治疗后与模型组比较,痛泻二草方可显著降低UC模型大鼠肠粘膜LA含量和MPO活性（P〈0.05）。结论 痛泻二草方具有抑制MPO活性,减少中性粒细胞浸润和清除LA而减轻炎性反应、促进溃疡愈合的作用。     

益气化瘀补肾方对大鼠肾虚型颈椎病的作用机制

目的：研究益气化瘀补肾方对大鼠肾虚型颈椎病的作用机制。方法：选择3月龄雌性SPF级SD大鼠30只，随机分为正常对照组、肾虚型颈椎病模型组（简称模型组）和益气化瘀补肾方组，每组10只。除正常对照组不施加任何手术外，采用由动静力失衡大鼠颈椎间盘退变模型和去卵巢肾虚模型复合法建立肾虚型颈椎病模型。手术3个月后，益气化瘀补肾方组大鼠予益气化瘀补肾方灌胃治疗1个月。放射免疫法检测血清雌二醇（estradiol，E2和血浆环磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate，cAMP）、环磷酸鸟苷（cyclic guanosine monophosphate，cGMP）含量；锥板法检测血液流变学；流式细胞仪检测血小板表面α-颗粒膜糖蛋白（alpha—granular membrane protein，CD62p）表达；HE染色观察颈椎间盘组织病理学改变，免疫组织化学检测颈椎间盘Ⅱ型胶原蛋白表达情况，并通过实时荧光定量聚合酶链式反应法检测聚集蛋白聚糖（aggrecan-1，Agcl）、Ⅱ型前胶原基因（type Ⅱ procollagen gene，Col2al）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（tissue inhibitor of metalloproteinase-1，TIMP-1）、基质金属蛋白酶-13（matrix metalloproteinase-13，MMP-13）mRNA表达。结果：与模型组比较，益气化瘀补肾方组大鼠血清E2含量升高（P〈0．05）；血浆cAMP、cGMP含量有所升高，但差异无统计学意义；全血低切黏度、低切还原黏度和CD62p表达百分率下降（Pd0．05或P〈0．01）；颈椎间盘退变有所改善，Miyamoto评分下降（P〈0．05），11型胶原表达增加；Agcl、Col2al和TIMP-1 mRNA表达增加（P〈0．05，P〈0．01），MMP-13 mRNA表达下降（Pd0．01）。结论：益气化瘀补肾方可通过调节免疫系统、代谢系统、凝血系统和内分泌系统等指标，改善肾虚型颈椎病证候指标，并延缓椎间盘退变。     

补肾活血方对大鼠子宫内膜异位症血管生长因子等影响的研究

目的探讨血管内皮生长因子 (VEGF)、转化生长因子 (TGF—β)在子宫内膜异位症 (EM)发病机制中的作用及相互关系 ,观察补肾活血方对两因子的影响及对EM的治疗作用。方法采用种植内膜方法建立EM动物模型 ,拟补肾活血方治疗 ,用丹哪唑对照 ,以免疫组化SP法检测VEGF、TGF—β在异位内膜组织中的表达。结果补肾活血方能降低VEGF、TGF—β在异位内膜组织中表达 ,与模型组比较有统计学差异 (P <0 .0 5 ) ;VEGF、TGF—β在EM中表达呈正相关。 结论VEGF、TGF—β在EM发生发展中起重要作用 ,补肾活血方可通过调节两因子的表达来抑制异位内膜的生长。     

补肾活血方对激素性股骨头坏死大鼠BMSCs分化影响的研究

目的 探讨补肾活血方含药血清对激素性股骨头坏死大鼠股骨近端骨髓间充质细胞体外分化的影响.方法 建立激素性股骨头坏死大鼠模型后,提取股骨近端骨髓单个核细胞,随机分为4组培养,空白血清对照组(A组)、补肾活血方含药血清低(B组)、中(C组)、高(D组)浓度组,分别加入重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)诱导下的骨髓间充质细胞的培养体系,观察各组的细胞形态学、细胞内ALP含量及TGF-β基因表达.结果 补肾活血方含药血清能增强rhBMP-2的活性,促进股骨近端骨髓体外成骨细胞的分化增殖(P＜0.01),促进分化中的骨髓间充质细胞表达TGF-β1 mRNA(P＜0.01).结论 补肾活血方通过增强rhBMP-2活性及TGF-β1 mRNA的表达在骨坏死的修复中起关键作用.     

补肾活血方对大鼠心脏成纤维细胞增殖及胶原表达的影响

摘要：目的探讨补肾活血方对大鼠成纤维细胞增殖及胶原表达的影响,为其抗心肌纤维化提供实验依据。方法通过血清药理
学方法制备补肾活血方含药血清,与DMEM配成细胞培养液。提取大鼠心脏成纤维细胞（CFs）并传代培养,将3~4代CFs分为
4组：A组为10%含药血清培养液培养,B组为20%含药血清培养液培养,C组为不含药血清培养液培养,D组为对照组,为常规胎
牛血清培养液培养。培养72 h后CCK-8检测CFs增殖,RT-PCR检测胶原基因表达,Western blotting检测胶原蛋白表达。结果
与C组、D组相比,A组、B组CFs增殖明显降低,B组较A组进一步降低（P<0.05）;Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA在A、B两组表达较C、
D两组明显下调（P<0.05）,Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达在A、B两组明显低于C、D两组（P<0.05）。结论补肾活血方可以抑制大鼠
成纤维细胞增殖及胶原表达。