静宁颗粒对注意力缺陷多动障碍模型大鼠认知功能及纹状体单胺类的影响

目的采用Morris水迷宫检测注意力缺陷多动障碍(Attention Deficit Hyperactivity Disorder,ADHD)模型动物-幼年自发性高血压大鼠(Spontaneous HypertensiveRats,SHR)学习记忆能力,评价静宁颗粒对SHR大鼠认知功能的影响,并观察静宁颗粒对SHR大鼠纹状体单胺类神经递质和多巴胺转运体(DAT)mRNA表达的影响,并探讨该药治疗ADHD的作用机制。方法60只幼年雄性SHR大鼠随机分为静宁颗粒高、中、低剂量组、盐酸哌甲酯组、盐酸托莫西汀组、模型对照组,每组10只;正常组为10只同龄Wistar大鼠。连续灌胃给药6周后,采用高效液相-电化学(HPLC-ECD)法检测各组大鼠纹状体单胺类神经递质含量;Real-time PCR法检测各组大鼠纹状体DAT mRNA表达水平。实验过程中,静宁颗粒低剂量组大鼠因灌胃处理不当死亡1只,因此样本量为9只,余组均为10只。结果静宁颗粒中、低剂量组,与盐酸托莫西汀组均能改善SHR大鼠学习记忆能力,从而改善认知功能(P<0.05),但盐酸托莫西汀组大鼠目标象限停留时间较静宁颗粒中、低剂量组增加,静宁颗粒对SHR大鼠认知功能的改善不及盐酸托莫西汀。纹状体DAT基因表达量依次为静宁颗粒高剂量组>盐酸托莫西汀组>静宁颗粒低剂量组>盐酸哌甲酯组>静宁颗粒中剂量组。与模型对照组比较,静宁颗粒中、低剂量组和盐酸哌甲酯组大鼠纹状体中DAT基因相对表达量降低,其中静宁颗粒中剂量组降低更明显。纹状体单胺类神经递质检测:正常组及静宁低剂量组大鼠脑组织纹状体中去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)含量增高(P<0.05),盐酸托莫西汀组3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、5-HT含量增高(P<0.05),与盐酸托莫西汀组比较,静宁颗粒中剂量组5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)降低(P<0.05)。结论模型对照组大鼠的认知功能明显降低,中药静宁颗粒可以显著改善ADHD动物模型的认知功能。静宁颗粒治疗ADHD的可能机制之一与其下调纹状体DAT mRNA表达水平,上调纹状体DA、NE、5-HT的含量,以及协调平衡单胺类神经递质的作用有关。     

六味地黄丸对多发性抽动症模型大鼠行为及脑多巴胺、高香草酸水平的影响

目的:探讨六味地黄丸对多发性抽动症(tourette's syndrome,TS)的治疗作用及作用机制。方法:将50只Wistar大鼠随机分成空白对照组、模型组、氟哌啶醇组、高剂量六味地黄丸组、低剂量六味地黄丸组,采用腹腔注射亚胺基二丙腈(iminodipropionitrile,IDPN)进行造模,采用高效液相色谱法测定大鼠全脑组织中多巴胺(dopamine,DA)、高香草酸(homovanillic aci,HVA)的含量,并观察各组大鼠的一般情况及行为情况。结果:高剂量六味地黄丸可明显改善TS模型大鼠一般情况;高剂量六味地黄丸能明显改善IDPN诱发的大鼠行为异常,尤以改善刻板行为疗效显著;各组大鼠脑组织中HVA未检测到;与空白组比较,模型组大鼠脑组织中DA的含量明显降低[(364.30±79.75)ng·g-1vs(180.33±27.88)ng·g-1,P0.01];与模型组比较,高剂量六味地黄丸组大鼠脑组织DA含量明显增高[(180.33±27.88)ng·g-1vs(300.39±67.58)ng·g-1,P0.01];高剂量六味地黄丸组与氟哌啶醇组大鼠脑组织DA含量无明显差异[(300.39±67.58)ng·g-1vs(279.93±69.90)ng·g-1,P0.05];高剂量六味地黄丸组与低剂量六味地黄丸组脑组织DA含量有差异[(300.39±67.58)ng·g-1vs(226.15±59.01)ng·g-1,P0.05],说明药效与剂量呈正相关。结论:六味地黄丸能改善IDPN诱导的TS模型大鼠一般情况及行为异常,其机制可能与调节脑内DA能系统平衡有关,且治疗效果与用药剂量呈正相关。     

六味地黄丸对多发性抽动症模型大鼠行为及脑多巴胺水平的影响

目的:探讨六味地黄丸对多发性抽动症(tourette's syndrome,TS)的治疗作用及作用机制.方法:将50只Wistar大鼠随机分成空白对照组、模型组、氟哌啶醇组、高剂量六味地黄丸组、低剂量六味地黄丸组,采用腹腔注射亚胺基二丙腈(iminodipropionitrile,IDPN)进行造模,采用高效液相色谱法测定大鼠全脑组织中多巴胺(dopamine,DA)含量,并观察各组大鼠的一般情况及行为情况.结果:高剂量六味地黄丸可明显改善TS模型大鼠一般情况;高剂量六味地黄丸能明显改善IDPN诱发的大鼠行为异常,尤以改善刻板行为疗效显著;各组大鼠脑组织中HVA未检测到;与空白组比较,模型组大鼠脑组织中DA的含量明显降低[(364.30±79.75) ng·g1vs(180.33±27.88) ng·g-1,P＜0.01];与模型组比较,高剂量六味地黄丸组大鼠脑组织DA含量明显增高[(180.33±27.88) ng·g-1vs(300.39±67.58) ng·g-1,P＜0.01];高剂量六味地黄丸组与氟哌啶醇组大鼠脑组织DA含量无明显差异[(300.39±67.58) ng·g-1 vs(279.93±69.90) ng· g-1,P＞0.05];高剂量六味地黄丸组与低剂量六味地黄丸组脑组织DA含量有差异[(300.39±67.58) ng·g-1vs(226.15±59.01) ng·g-1,P＜0.05],说明药效与剂量呈正相关.结论:六味地黄丸能改善IDPN诱导的TS模型大鼠一般情况及行为异常,其机制可能与调节脑内DA能系统平衡有关,且治疗效果与用药剂量呈正相关.     

养血祛风方对抽动障碍大鼠纹状体GAP-43表达影响的研究

目的:观察养血祛风方对抽动障碍(Tic Disorders,TD)大鼠行为学特征与纹状体GAP-43和多巴胺受体D1/D2 (DRD1/D2) mRNA表达的影响,探讨其对TD大鼠纹状体突触可塑性影响。方法:采用亚氨基二丙腈(IDPN)复制TD大鼠模型,按随机数字表法将TD模型大鼠分为模型组、西药组及低、中、高剂量中药组,每组各8只,另取8只健康SD大鼠做空白组;给药组TD大鼠予以相应药物灌胃,空白组及模型组则予以等量生理盐水。从刻板运动方面对各组大鼠行为学特征进行评估和比较;持续灌胃8周后,取大鼠纹状体,采用免疫组化SP法检测GAP-43表达水平。结果:刻板运动测试显示大鼠模型能良好模拟TD的特征性行为变化,中药组及西药组刻板运动评分均不同程度低于模型组(P 0. 05)。各组GAP-43表达水平比较,差异具有显著统计学意义(P 0. 001)。其中,模型组GAP-43表达水平明显低于空白组及各给药组(P 0. 05);而各剂量中药组GAP-43表达水平均高于西药组(均P 0. 05);不同剂量中药组之间比较,高剂量组和中剂量组GAP-43表达水平均较低剂量组明显增高(P 0. 05)。结论:养血祛风方可通过上调GAP-43表达水平,在TD大鼠纹状体突触重塑方面发挥正向调节作用。     

多发性抽动症大鼠皮质及纹状体强啡肽表达特点及健脾止动汤干预作用

目的研究多发性抽动症(TS)模型大鼠皮质及纹状体区内源性阿片肽——强啡肽(Dyn)及其前体物质强啡肽原(PDyn)的表达情况,以及中药组方健脾止动汤对二者的干预作用。方法 60只健康雄性SD大鼠,随机分为造模组(45只)和空白对照组(15只),造模组采用亚氨基二丙腈(IDPN)腹腔注射法建立TS动物模型。造模成功后的动物纳入实验,随机分为模型组、泰必利组、健脾止动汤组,每组15只。模型组和空白对照组给予生理盐水灌胃,其余2组分别给予等体积的泰必利混悬液(21 mg/kg)和健脾止动汤颗粒溶液(16 g/kg),连续给药6周,每周末次给药后记录TS大鼠刻板行为积分情况。6周给药结束后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)和实时定量荧光PCR(RT-PCR)分别检测大鼠皮质区、纹状体区Dyn和PDyn表达。结果 (1)泰必利组和健脾止动汤组TS大鼠刻板行为积分均值呈下降趋势,末次观察结果显示,2组积分均低于模型组(P0.05),其中健脾止动汤组积分低于泰必利组(P0.05);(2)组间比较,皮质区Dyn含量和PDyn mRNA相对表达量无显著差异性(P0.05);与空白对照组比较,模型组纹状体区Dyn含量和PDyn mRNA相对表达量显著升高(P0.05);给药后,泰必利组和健脾止动汤组Dyn含量和PDyn mRNA相对表达量低于模型组(P0.05),2组与空白对照组之间无显著差异性(P0.05)。结论纹状体区Dyn和PDyn表达增加可能参与TS大鼠刻板行为发生,健脾止动汤抗抽动机制可能与抑制纹状体区Dyn过表达、降低直接通路的易化作用有关。     

祛风止动方对抽动障碍大鼠纹状体中DRD1/DRD2 mRNA表达的影响

目的：探讨祛风止动方对抽动障碍（TD）大鼠纹状体神经递质基因表达的影响。方法：按照SPSS程序将SD大鼠随机分为正常组、模型组、中药大剂量组、中药常规剂量组及西药对照组,采用阿扑吗啡（APO）腹腔注射给药建立TD大鼠模型。中药组灌胃祛风止动方、西药组灌胃氟哌啶醇,正常组、模型组均予同等剂量生理盐水。药物干预4周后,断头处死实验大鼠,解剖脑组织并分离纹状体,采用RT-PCR检测各组大鼠纹状体中多巴胺受体D1/D2（DRD1/DRD2）mRNA表达水平。结果：腹腔注射APO后,经刻板行为验证显示模型大鼠能再现TD的特征性行为变化,且3周后模型组大鼠纹状体DRD2 mRNA明显上调、DRD1 mRNA明显下调,与正常组比较差异均有显著意义（P〈0.05）;经4周药物干预,西药组、中药大剂量组可显著上调DRD1 mRNA表达,明显优于中药常规剂量组（P〈0.05）;中药大剂量组可显著下调DRD2mRNA表达,明显优于西药组与中药常规剂量组（P〈0.05）。结论：祛风止动方可调节纹状体的DRD1/DRD2 mRNA表达水平。     

电针对脑卒中痉挛状态大鼠黑质内多巴胺受体及其亚型含量与表达的影响

目的通过动物实验分析电针治疗对脑卒中痉挛状态下SD大鼠大脑黑质中多巴胺受体及其亚型的含量与表达的影响,探讨电针缓解脑卒中痉挛状态(SCA)的疗效及其作用机制。方法将32只SD大鼠随机分为电针组(模型+电针阳陵泉、曲池)、假手术组、模型组、空白组,每组8只。运用在大脑中动脉线栓法制作SCA模型,行为学评分确认模型成功后开始电针治疗,连续3 d。酶联免疫吸附实验法(ELISA)检测黑质中多巴胺(DA)含量,以及DA的D1与D2受体的信使核糖核酸的含量,并通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测黑质中D1、D2两个亚型(DRD1 mRNA、DRD2 mRNA)的表达。结果 (1)神经功能损伤评分在电针治疗前,模型组、电针组与空白组、假手术组比较评分升高(P 0. 01);电针组治疗前后差异明显(P 0. 01)。(2)模型组与空白组、假手术组比较,DA、DRD1、DRD2含量明显降低(P 0. 01),电针组与模型组比较,DA、DRD1、DRD2含量明显升高(P 0. 01)。(3)模型组与空白组、假手术组比较,DRD1 mRNA、DRD2 mRNA表达明显降低(P 0. 01);电针组与模型组比较,表达均有增加(P 0. 01)。结论电针治疗可调节大脑黑质内DA及其受体的含量与表达,从而改善中枢神经系统的功能。     

针刺对于脑卒中痉挛状态大鼠皮质内多巴胺受体及其亚型含量与表达影响的研究

目的分析针刺治疗对于脑卒中疾病的痉挛状态中SD大鼠大脑皮质中多巴胺受体及其亚型的含量与表达的影响,探讨针灸缓解脑卒中痉挛状态(SCA)的作用机制。方法将32只SD大鼠随机分为针刺组(模型+常规手法针刺阳陵泉、曲池)、假手术组、模型组、空白组,每组8只。运用大脑中动脉线栓法制作SCA模型,行为学评分确认模型成功后开始针刺治疗,连续3 d。酶联免疫吸附实验法(ELISA)检测皮质多巴胺、多巴胺D1受体信使核糖核酸、多巴胺D2受体信使核糖核酸的含量,通过RT-PCR检测皮质中D1、D2两个亚型的表达。结果模型组、针刺组治疗前与空白组、假手术组比较肌张力明显增高(P 0. 01);针刺组治疗后与模型组比较,肌张力明显降低(P 0. 01);针刺组治疗前后肌张力比较差异有统计学意义(P 0. 01)。模型组与空白组、假手术组比较,大鼠大脑皮质DRD1、DRD2含量均明显降低(P 0. 01);针刺组与模型组比较,大鼠大脑皮质DRD1、DRD2含量明显升高(P 0. 05)。模型组与空白组、假手术组比较,大鼠大脑皮质DRD1mRNA、DRD2mRNA表达明显降低(P 0. 01);针刺组与模型组大鼠大脑皮质DRD1mRNA、DRD2mRNA表达比较明显增加(P 0. 05)。结论通过针刺可调节大脑皮质内DA及其受体的含量和表达,从而证明了针灸对脑卒中痉挛状态具有良好的治疗效果。     

益智宁神颗粒对SHR大鼠前额叶-纹状体多巴胺含量、GDNF mRNA及其蛋白表达的影响

[目的]研究益智宁神颗粒对幼龄自发性高血压(SHR)大鼠前额叶-纹状体多巴胺含量、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)mRNA及其蛋白表达的影响。[方法]以32只幼年SHR大鼠为研究对象,采用随机区组法分为模型对照组、益智宁神组、盐酸哌甲酯组、托莫西汀组,另设8只京都(WKY)大鼠为正常对照组。按各组设计剂量连续给药4周后,取前额叶、纹状体,采用高效液相法检测多巴胺(DA)含量、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测GDNF mRNA表达、蛋白免疫印迹(Western blot)法检测GDNF蛋白表达。[结果]1)SHR各组大鼠前额叶、纹状体DA的含量均有低于WKY组的趋势,其中,益智宁神组大鼠前额叶DA含量明显高于模型对照组(P0.05);益智宁神组大鼠纹状体DA含量低于正常对照组、盐酸托莫西汀组(P0.05)。2)SHR各组前额叶、纹状体GDNF mRNA表达依次为盐酸托莫西汀组盐酸哌甲酯组益智宁神组模型对照组(P0.05)。3)SHR大鼠各组间前额叶、纹状体GDNF蛋白表达均高于WKY组;其中,益智宁神组前额叶GDNF蛋白表达与其余SHR大鼠各组无统计学差异(P0.05),其纹状体GDNF蛋白表达低于盐酸哌甲酯组(P0.05)。[结论]益智宁神颗粒能够提高SHR特定脑区DA含量、GDNF mRNA及其蛋白表达,对促进幼龄SHR大鼠特定脑区DA能神经网络成熟度具有一定的作用。     

无忧汤对抑郁模型大鼠海马5-HT_(1A)R和5-HT_(2A)R表达影响的实验研究

目的通过对大鼠预见性应激大鼠抑郁模型(CUMS)的复制,观察无忧汤对抑郁模型大鼠海马CA1区5-羟色胺受体(5-HTR)的两个亚型5-HT_(1A)R和5-HT_(2A)R表达的影响。方法随机将60只CL级SD雄性大鼠分为空白对照组,模型组,黛力新组,无忧汤低剂量组、中剂量组、高剂量组6组,每组10只。造模开始前予以适应性饲养1周,造模35 d后,给予相应药物治疗35 d,实验结束后采用HE染色法观察大鼠海马CA1区阳性细胞形态结构和细胞数量的变化;采用免疫组化法,观察无忧汤对大鼠海马CA1区5-HT_(1A)R和5-HT_(2A)R表达的影响。结果经过35 d造模后,药物干预组和模型组大鼠体质量增加量明显低于空白对照组(P 0. 05);药物干预组和模型组大鼠的食物消耗量显著低于空白对照组(P 0. 05);模型组及药物干预组糖水消耗量明显低于空白对照组(P 0. 05);模型组及各给药组大鼠水平得分明显低于空白对照组(P 0. 05);模型组及药物干预组大鼠垂直得分明显低于空白对照组(P 0. 05)。经过35 d给药治疗后,无忧汤高剂量组与无忧汤低剂量组大鼠相比,体质量增加较明显(P 0. 05);无忧汤高剂量组与无忧汤低剂量组大鼠相比,食物消耗量增加显著(P 0. 05);无忧汤中、高剂量组与无忧汤低剂量组大鼠相比,糖水消耗显著增加(P 0. 05);无忧汤高剂量组大鼠与无忧汤低剂量组大鼠相比较,水平得分增加明显(P 0. 05);无忧汤中、高剂量组大鼠与无忧汤低剂量组大鼠相比较,垂直得分显著增加(P 0. 05)。与空白对照组相比,模型组大鼠海马5-HT_(1A)R阳性表达率降低(P 0. 05),5-HT_(2A)R阳性表达率升高(P 0. 05);与模型组相比较,黛力新组和无忧汤中、高剂量组大鼠海马5-HT_(1A)R阳性表达升高(P 0. 05),5-HT_(2A)R阳性表达降低(P 0. 05)。结论无忧汤抗抑郁机制可能与提高抑郁模型大鼠海马CA1区5-HT_(1A)R并下调5-HT_(2A)R的表达有关。     

菖蒲郁金汤对抽动秽语综合征模型大鼠突触体SNARE蛋白复合体的影响研究

目的  研究菖蒲郁金汤对抽动秽语综合征(Tourette syndrome, TS)模型大鼠突触体中SNARE蛋白复合体的调控作用, 揭示菖蒲郁金汤治疗TS的药效机制。方法  选择3周龄SD大鼠240只, 依据随机数字表将SD大鼠分为空白组(60只)和造模组(180只), 采用3, 3'-亚氨基二丙腈(IDPN)腹腔注射法制备TS动物模型。造模成功后, 再次随机将造模组大鼠分为模型组、硫必利组及菖蒲郁金汤组,每组60只。从造模完成后次日(即d0)开始灌胃给药, 空白组与模型组给予生理盐水, 其余各组给予相应药物, 每日1次, 连续给药4周。各组大鼠分别于第0、7、14、21、28天(即d0,d7,d14,d21,d28), 随机抽取12只大鼠, 麻醉后取纹状体, 采用Percoll密度梯度离心法制备纹状体中的突触体, 并在透射电镜下进行形态学鉴定。ELISA法检测纹状体多巴胺(Dopamine, DA)含量,qPCR和Western blot法检测突触体中SNAP-25、Syntaxin-1a和VAMP-2 mRNA及蛋白的表达, 免疫组织化学法检测纹状体上述指标的表达。结果  与空白组相比, 模型组各观察点纹状体中DA含量降低(P < 0.01), 突触体/纹状体中SNAP-25、Syntaxin-1a、VAMP-2 mRNA及蛋白的表达量显著降低(P < 0.05, P < 0.01);与模型组相比较, 硫必利组及菖蒲郁金汤组在干预期间的各观察点(d7,d14,d21,d28)纹状体中DA含量以及突触体/纹状体内SNAP-25、Syntaxin-1a、VAMP-2 mRNA及蛋白的表达量呈逐渐升高趋势。在治疗结束后(d28), 菖蒲郁金汤组突触体中SNAP-25、Syntaxin-1a、VAMP-2 mRNA, Syntaxin-1a蛋白及纹状体中SNAP-25、VAMP-2蛋白的表达高于硫必利组(P < 0.05, P < 0.01)。结论  菖蒲郁金汤通过调控SNAP-25、Syntaxin-1a、VAMP-2的表达促进DA的释放, 进而发挥其抗抽动的作用。      

化学因素诱发的多发性抽动症动物模型的比较研究

目的 通过对化学因素诱发的4种多发性抽动症(TS)模型效度的比较,为TS动物模型的选择应用提供理论和实验依据.方法 采用不同化学造模剂建立4种TS模型-AMP模型、APO模型、IDPN模型、DOI模型,通过自主活动次数、爬杆时间、脑纹状体单胺类递质检测,分别从模型的表面效度、预测效度、结构效度方面比较评价4种TS动物模型.结果 AMP模型组与空白组比较,自主活动次数增加(t=4.746,P=0.000),脑纹状体DOPAC含量升高[(0.99±0.18)ng/mg,P=0.029],NE含量下降[(0.11±0.033)ng/mg,P=0.012];APO模型组与空白组比较,爬杆时间延长(t=3.353,P=0.004),脑纹状体DA、5-HT含量升高[分别为(10.19±1.23)ng/mg,(0.54±0.08)ng/mg,P=0.019,P=0.002],DOPAC、HVA含量降低[分别为(0.63±0.11)ng/mg,(0.45±0.04)ng/mg,均P＜0.01];DOI模型组与空白组比较,脑纹状体DA、DOPAC、HVA含量下降[分别为(13.66±1.55)ng/mg,(0.80±0.11)ng/mg,(1.04±0.14)ng/mg,P=0.029,P=0.001,P=0.004];IDPN300组与空白组比较,脑纹状体5-HT含量升高[(0.77±0.09)ng/mg,P=0.031].结论 AMP模型表面效度短暂,IDPN模型表面效度稳定、持久,AMP模型、APO模型、DOI模型具有预测效度,AMP模型、APO模型、DOI模型、IDPN模型具有成为结构效度模型的潜能.     

母爱剥夺对成年大鼠情绪及多巴胺转运蛋白基因表达的影响

目的：研究母爱剥夺对雄性大鼠成年后情绪及脑纹状体多巴胺转运蛋白（dopamine transporter,DAT）基因表达的影响,探讨DNA甲基化是否参与调控DAT基因的表达。方法：新生幼鼠随机分为实验组和对照组,实验组出生后第1至14天,每天母子分离6 h。12周龄时,采用高架十字迷宫、旷场实验评定2组大鼠的情绪水平,采用RT-PCR法检测纹状体DAT mRNA表达水平,亚硫酸测序法检测DAT基因启动子区DNA甲基化水平。结果：实验组大鼠在新异环境中的探索能力下降、焦虑水平较低,大脑纹状体DAT mRNA表达显著低于对照组(P＜0.05),DAT基因启动子区的DNA甲基化水平差异没有统计学意义（P＞0.05）。结论：母爱剥夺对雄性大鼠成年后的情绪有持久的影响,且抑制纹状体DAT mRNA的表达;DNA甲基化可能不是DAT表达下降的机制。     

百合地黄汤对抑郁症大鼠血清IL-10和海马DA的影响

目的探讨百合地黄汤对慢性应激性抑郁模型大鼠血清抗炎因子白介素-10(interleukin-10,IL-10)和海马神经递质多巴胺(dopamine,DA)表达水平的影响,为其治疗抑郁症提供依据。方法将50只雌性成年SD大鼠随机分为空白对照组,模型组,百合地黄汤低、高剂量组,氟西汀组等5组,每组10只,采用慢性应激刺激和独立隔离喂养相结合的方法建立抑郁大鼠模型,模型组与空白对照组正常饲养,其余组在造模的基础上给予相应干预。造模28 d以旷场实验、强迫游泳实验进行行为学检测,ELISA法检测各组大鼠血清抗炎因子IL-10的水平,免疫组化法检测大鼠海马神经递质DA的表达。结果与空白对照组对比,模型组旷场实验总分降低,强迫游泳不动时间延长,血清抗炎因子IL-10和海马神经递质DA含量明显下降(P0.01);与模型组对比,百合地黄汤低剂量组、高剂量组旷场实验总分升高,强迫游泳不动时间缩短,血清抗炎因子IL-10和海马神经递质DA含量显著增加(P0.01)。结论百合地黄汤抗抑郁症模型大鼠的抑郁状态,可能与其能够有效干预血清中抗炎因子IL-10和海马神经递质DA有关。     

基于DA受体cAMP-PKA信号通路探讨加味当归芍药散治疗HPRL大鼠的机制

目的研究加味当归芍药散治疗高泌乳素血症(HPRL)大鼠的机制。方法 96只雌性SD大鼠采用随机数字表分为空白组,模型组,阳性组,高、中、低浓度组,每组16只,经背部皮下注射甲氧氯普胺液,制造HPRL模型,5天后造模成功,定时定量给药30天后立即处死取材,采用免疫组化法检测下丘脑多巴胺D1受体(DRD1)、D2受体(DRD2)、蛋白激酶A(PKA)的表达,酶联反应法(Elisa)检测各组大鼠血泌乳素(PRL)、多巴胺(DA)、环磷酸腺苷(cAMP),实时荧光定量PCR检测各组HPRL模型大鼠下丘脑多巴胺D1受体mRNA (DRD1 mRNA)、多巴胺D2受体mRNA(DRD2 mRNA)。结果与模型组相比,中高浓度组PRL水平降低[(260.12±4.814)、(241.98±8.351)比(332.18±9.472)](P0.05),cAMP水平显著性降低[(1.05±0.427)、(0.89±0.745)比(1.37±0.002)](P0.01),DA表达数量升高[(41.53±6.19)、(50.69±3.28)比(14.87±5.12)](P0.05),三组不同浓度中药组与模型组比较,PKA活性明显降低,且低浓度组略高于高浓度组[(0.30±0.024)、(0.23±0.061)、(0.20±0.034)比(0.51±0.037),(0.30±0.024)比(0.20±0.034)](P0.05);DRD1 mRNA表达各浓度组无差异、DRD2 mRNA表达增高且高浓度组表达量明显高于低浓度组[(0.20±0.322)比(0.11±0.700),P0.05];与模型组比,DRD1有增高趋势,DRD2除了低浓度组数量略增高[(0.34±0.040)比(0.41±0.019),P0.05],其余均明显增高(P0.01)。结论加味当归芍药散可能作用于DRD2通过cAMPP-PKA信号通路发挥治疗高泌乳素血症模型大鼠的作用。     

静宁颗粒对注意力缺陷多动障碍模型大鼠血清单胺类神经递质的影响

目的探讨静宁颗粒治疗注意力缺陷多动障碍(ADHD)可能的作用靶点。方法选用雄性自发性高血压(SHR)大鼠50只,随机分为空白模型组,盐酸托莫西汀组,静宁颗粒低、中、高剂量组,每组10只。同时,将10只同龄Wistar大鼠设为正常对照组。静宁低、中、高剂量组分别给予5. 785 g/kg、11. 57 g/kg、23. 14 g/kg静宁颗粒灌胃,盐酸托莫西汀组给予盐酸托莫西汀5. 36 mg/kg灌胃,空白模型组及正常对照组给予1 ml/100 g生理盐水灌胃。各组于治疗6周后处死大鼠,采用腹主动脉取血的方法取各组大鼠血清,并采用高效液相-电化学法测定其多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)及5-羟色胺(5-HT)的含量。结果空白模型组血清中DA、5-HT均低于正常对照组(P 0. 01);静宁颗粒高、中剂量组血清中DA、5-HT含量高于空白模型组(P 0. 05,P 0. 01);静宁中剂量组中血清DA、5-HT含量高于盐酸托莫西汀组及静宁颗粒低剂量组(P 0. 05)。结论静宁颗粒可以提高血清中DA、5-HT的含量,可能是治疗ADHD的作用靶点之一,以中剂量为宜。     

托吡酯对戊四氮点燃大鼠海马生长相关蛋白-43 mRNA和蛋白表达的影响

目的：观察托吡酯（TPM）对戊四氮点燃大鼠海马生长相关蛋白．43（GAP-43）蛋白和mRNA表达的影响。方法：健康成年雄性SD大鼠40只，随机分为4组，每组10只。模型对照组大鼠灌胃给予生理盐水（10mL／kg），低、高剂量TPM组分别按40mg／kg和100mg／kg给予10g／LTPM生理盐水溶液，空白对照组给予等量生理盐水，1h后，前3组大鼠腹腔注射10g／L戊四氮（35mg／kg）建立戊四氮点燃大鼠癫痫模型，空白对照组给予等量生理盐水。当模型对照组大鼠行为达到点燃时，应用RT．PCR方法半定量检测GAP-43mRNA的表达，应用免疫组织化学方法检测齿状回、海马CA3区和CA1区内GAP-43蛋白的表达强度。结果：与空白对照组相比，模型对照组，低剂量TPM组和高剂量TPM组大鼠齿状回与CA3区的GAP-43mRNA和蛋白表达强度升高（P〈0．05）；与模型对照组相比，低剂量TPM组和高剂量TPM组大鼠齿状回和CA3区的GAP-43mRNA和蛋白表达强度降低（P〈0．05）。结论：戊四氮点燃大鼠海马GAP-43表达增强，表明突触重建参与了癫痫发生的病理过程。TPM可抑制GAP-43的过表达，2种剂量的抑制作用无差异。     

脑络欣通方对大鼠脑缺血后纹状体中5-HT、DA、NE、5-HIAA的影响

目的研究脑络欣通方对大鼠脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法雄性SD大鼠100只,随机分为假手术组、模型组、预处理组、治疗3 d组、治疗7 d组,每组20只。复制MCAO(脑中动脉栓塞)/R大鼠模型。治疗3 d组造模后连续给予脑络欣通方3 d、治疗7 d组造模后连续给予脑络欣通方7 d,预处理组造模前给予脑络欣通方药7 d,3组每天灌胃给药2次,8.54 m L/kg。假手术组及模型组予以等量生理盐水灌胃7 d。解剖大鼠并取出脑组织,分离纹状体。采用激光多普勒血流仪(LDF)测定梗死侧纹状体局部脑血流量(r CBF);采用TTC染色法检测大鼠脑梗死体积;采用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)测定5-HT(5-羟色胺)mRNA、DA(多巴胺)mRNA、NE(去甲肾上腺素)mRNA、5-HIAA(5-羟吲哚乙酸)mRNA的表达含量。结果与假手术组比较,模型组发生明显缺血现象,脑血流量显著降低,脑梗死体积显著升高(P0.01),其纹状体中的5-HT mRNA、DA mRNA、NE mRNA、5-HIAA mRNA表达水平显著降低(P0.01);与模型组比较,脑络欣通方预处理组、治疗3 d、治疗7 d组脑血流量明显恢复,脑梗死体积显著下降(P0.01),纹状体中的5-HT mRNA、DA mRNA、NE mRNA、5-HIAA mRNA表达水平显著升高(P0.01)。结论脑络欣通方具有明显预防和治疗MCAO大鼠脑损伤的作用,通过增加MCAO/R大鼠的脑血流量,降低MCAO/R大鼠脑梗死体积,提高MCAO/R大鼠的纹状体组织中5-HT mRNA、DA mRNA、NE mRNA、5-HIAA mRNA单胺类递质的表达,从而起到抑制缺血后再灌注对大脑纹状体的损伤作用。     

杜仲醇提取物通过RhoA/ROCK信号通路调控大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化作用研究

目的:分析杜仲醇提取物通过RhoA/ROCK信号通路调控骨质疏松症大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化中的影响。方法:选取实验用纯系大鼠50只,随机数字表法分成5组:正常组(10只)、模型组(10只)、杜仲低剂量组(10只)、杜仲中剂量组(10只)与杜仲高剂量组(10只),模型组与杜仲低、中、高剂量组制备OP大鼠模型,杜仲低、中、高剂量组大鼠分别使用50、100、200 mg/kg杜仲醇提取物灌胃,正常组、模型组大鼠5 mL/kg生理盐水灌胃,末次给药后断颈处死大鼠,经过BMSCs培养并察看大鼠细胞成长及矿化状况,RT-PCR检测大鼠软骨细胞内ROCK1、RhoA表达状况及BMSCs成骨诱导后骨桥蛋白(OPN)、Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙素(OCN)mRNA表达。结果:模型组、杜仲低剂量组大鼠细胞矿化率较正常组显著降低,杜仲中、高剂量组大鼠细胞矿化率较模型组、杜仲低剂量组显著升高,差异均有统计学意义(P0.05);模型组、杜仲低剂量组大鼠ROCK1、RhoA mRNA表达量较正常组显著降低,杜仲中剂量组、杜仲高剂量组大鼠ROCK1、RhoA mRNA表达量较模型组显著升高,差异均有统计学意义(P0.05);模型组、杜仲低剂量组OPN、Runx2及OCN mRNA表达量较正常组显著降低,杜仲中、高剂量组OPN、Run×2及OCN mRNA表达量较模型组、杜仲低剂量组显著升高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:杜仲醇提取物可提升BMSCs内RhoA/ROCK信号路径ROCK1、RhoA mRNA表达量,促进成骨分化和BMSCs增殖,但其具体机制仍需行更深入研究。     

甲基苯丙胺依赖大鼠纹状体RGS4和D2受体信号传导通路mRNA的表达

［摘要］目的　通过建立甲基苯丙胺（methamphetamine,MA）依赖大鼠模型,检测其纹状体G蛋白信号调节因子4（regulator of G-protein signaling 4,RGS4）、多巴胺D2受体（dopamine receptor D2,DRD2）、抑制性G蛋白α亚基（inhibitory G protein α-subunit,Gαi）和丝裂原激活蛋白激酶 （mitogen-activated protein kinase, MAPK）的mRNA表达变化,探讨MA依赖对RGS4、D2信号通路的影响．方法　通过腹腔注射MA,建立MA条件性位置偏爱（conditioned place preference,CPP）1周组、2周组模型,应用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR）测定各组大鼠纹状体RGS4 mRNA、DRD2 mRNA、Gαi mRNA和MAPK mRNA的表达变化．结果　与生理盐水对照组比较大鼠在伴药箱的平均停留时间MA依赖CPP-周组、2周组均延长,差异具有统计学意义（P＜0.05）,提示MA依赖大鼠CPP模型成功建立．与生理盐水对照组比较,RGS4mRNA在MA依赖CPP 1周组、2周组中表达均降低,且2周组下降趋势更明显,但差异无统计学意义（P＞0.05）;而与生理盐水对照组比较MA依赖CPP 2周组中DRD2 mRNA、Gαi mRNA和MAPK mRNA的表达均明显上调,差异有统计学意义（P＜0.05）．结论　在MA依赖中,RGS4和D2受体信号通路发生变化,RGS4可能为D2信号通路的调节靶点．