健脾养正消癥方对裸鼠胃癌皮下移植瘤细胞凋亡的影响及自噬机制的实验研究

目的观察健脾养正消瘢方对人胃癌MGC-803细胞BALB/c裸鼠皮下移植瘤抑瘤率的影响及可能的分子机制。方法取胃癌MGC-803细胞接种于裸鼠皮下,制备裸鼠移植性胃癌模型。32只BALB/c裸鼠按随机数字表法分为阴性对照组、阳性对照组和健脾养正消瘢方高、低剂量组,每组8只。阴性对照组给予生理盐水灌胃,阳性对照组给予5-氟尿嘧啶(5-Fu,2.5 mg/kg)灌胃,健脾养正消瘢方高、低剂量组分别以85、43 g/kg灌胃,每天1次,连续10天。观察健脾养正消瘢方对裸鼠皮下移植瘤抑瘤率的影响;采用RT-PCR法观察该复方对移植瘤中Bax、Bcl-2、Fas、Cyclin D1、Cyclin D2和Cyclin D3基因表达的影响;采用Western Blot法观察该复方对移植瘤中procaspase-3、procaspase-8和procaspase-9、cleavedPARP、Beclin-1和LC3B蛋白表达的影响。结果(1)与阴性对照组比较,阳性对照组和健脾养正消瘢方高、低剂量组瘤重明显减轻(P0.05),健脾养正消瘢方高、低剂量组瘤重均高于阳性对照组(P0.05)。(2)RT-PCR显示:与阴性对照组比较,阳性对照组和健脾养正消瘢方高、低剂量组Bax表达上调,Bcl-2、Cyclin D1、Cyclin D2和Cyclin D3表达下调(均P0.05),阳性对照组及健脾养正消瘢方高剂量组Fas表达上调(P0.05);与阳性对照组比较,健脾养正消瘢方高、低剂量组Fas、Bax表达均下调,Bcl-2、Cyclin D2和Cyclin D3表达上调(均P0.05),健脾养正消瘢方高剂量组Cyclin D1下调,低剂量组Cyclin D1上调(均P0.05)。(3)Western blot显示:与阴性对照组比较,健脾养正消瘢方高、低剂量组procaspase-3、procaspase-8、procaspase-9蛋白表达下调,cleaved-PARP、Beclin-1、LC3BⅡ蛋白表达上调(均P0.05);阳性对照组procaspase-3、procaspase-8、procaspase-9和LC3BⅡ蛋白表达下调,cleaved-PARP、Beclin-1和LC3BⅠ蛋白表达上调(均P0.05)。结论健脾养正消瘢方对胃癌MGC-803细胞裸鼠皮下移植瘤有显著的抑制作用,其作用可能与其激活凋亡、自噬相关因子有关。     

蜈蚣提取物对裸鼠肝癌原位移植瘤EphA7表达的影响

目的:观察蜈蚣提取物(Scolopendra Centipede Extract,SCE)作用于裸鼠肝癌原位移植瘤模型后对肝癌原位移植瘤生长的抑制作用及EphA7蛋白的影响,探讨SCE抗肝癌的作用机制。方法:以肝内植入裸鼠肝癌组织法构建肝癌原位移植瘤模型。将成瘤裸鼠随机分为SCE高剂量组(蜈蚣提取物高剂量,50 mg/kg/d,腹腔注射)、SCE低剂量组(蜈蚣提取物低剂量,10mg/kg/d,腹腔注射)、5-FU组(50mg/kg/次,腹腔注射),模型组(0.9%氯化钠注射液,10g/kg/d,腹腔注射),另设正常组(同模型组),用药14d。观察裸鼠的瘤体体积与瘤重,计算抑瘤率,测血清AFP含量,检测移植瘤EphA7蛋白的表达情况。结果:(1)与模型组比较,SCE高剂量组、SCE低剂量组、5-FU组瘤重均低于模型组(P0.01);与5-FU组及SCE低剂量组比较,SCE高剂量组平均瘤重最低,差异具有统计学意义(P0.01);SCE高剂量组、SCE低剂量组、5-FU组抑瘤率分别是62.5%、37.5%、30.8%。(2)SCE高剂量组、SCE低剂量组血清AFP平均含量明显降低,与模型组比较,差异具有统计学意义(P0.01);与5-FU组比较,SCE高剂量组血清中AFP含量明显降低(P0.01),SCE低剂量组血清中AFP含量无明显差异(P0.05)。(3)SCE高剂量组、SCE低剂组与模型组比较,肝癌原位移植瘤中Eph A7蛋白表达均表现为下调,差异具有统计学意义(P0.01);与5-FU组比较,SCE高剂量组肝癌原位移植瘤中Eph A7蛋白表达下调,差异具有统计学意义(P0.01),与SCE低剂量组比较,差异有统计学意义(P0.01)。结论:SCE对肝癌原位移植瘤裸鼠肿瘤的生长有明显抑制作用,并有剂量依赖性;SCE通过下调Eph A7蛋白的表达,调控酪氨酸磷酸化及肿瘤血管的形成,可能是SCE抗肝癌的机制之一。     

胃复方对人胃癌BGC-823细胞移植瘤裸鼠作用及其对c-Myc、人端粒酶逆转录酶基因表达的影响

目的:观察胃复方对人胃癌BGC-823裸鼠的抑瘤作用及c-Myc、人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达的影响,评估胃复方作用及其可能的作用机制。方法:建立人胃癌BGC-823裸鼠模型;将成功建立的裸鼠胃癌皮下移植瘤模型的40只荷瘤鼠随机分为5组(n=8):模型对照组、胃复方低剂量组、胃复方高剂量组、氟尿嘧啶组、氟尿嘧啶联合中药组,连续给药4周。每7天记录肿瘤长径、短径,计算瘤体体积并绘制肿瘤生长曲线图;给药4周后处死所有荷瘤鼠,剥离皮下移植瘤称瘤重、计算抑瘤率;免疫组织化学法检测瘤体组织c-Myc、hTERT蛋白表达。结果:1)胃复方对人胃癌BGC-823裸鼠移植瘤具有明显抑制作用,各剂量间有量效关系。其中胃复方低剂量组、胃复方高剂量组、氟尿嘧啶组、氟尿嘧啶联合中药组的抑瘤率分别为21.06%、45.89%、30.65%、59.42%。氟尿嘧啶联合中药组效果最好。2)瘤重显示与模型组比较,各药物组瘤重均有不同程度的减轻差异有统计学意义(P 0.05);其中氟尿嘧啶联合中药组降低明显。3)肿瘤生长曲线图显示与模型组比较,各药物组瘤体积均有一定程度缩小差异有统计学意义(P 0.05)。4)与模型组比较,药物组均能下调c-Myc、hTERT蛋白表达量差异有统计学意义(P 0.05)其中氟尿嘧啶联合中药组下降最明显。结论:胃复方能够抑制人胃癌BGC-823细胞BALB/c-nu裸鼠皮下移植瘤生长,可能与下调c-Myc、hTERT蛋白表达有关,并且与氟尿嘧啶联合用药有增效作用。     

狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮对人肝癌裸鼠移植瘤抑制作用及机制研究

目的:观察狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮对人肝癌裸鼠移植瘤的抑制作用,探讨其机制。方法:建立荷瘤裸鼠动物模型,给药后观察并测量裸鼠瘤体,计算体积大小,并绘制生长曲线。分离瘤体后,计算抑制率,病理组织学检查,TUNEL染色检测移植瘤细胞凋亡。透射电镜观察瘤组织细胞的自噬小体和细胞超微结构,Western blot法检测Beclin1、Atg5、CyclinD1、Caspase-3、Bax、Bcl-2、nm23-Hl和MMP-9蛋白表达。结果:与模型对照组比较,狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮50、100、200 mg/kg具有显著抑制移植瘤生长的作用(P<0.01)。与5-氟尿嘧啶20 mg/kg相比,狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮100 mg/kg+5-氟尿嘧啶20 mg/kg联合应用能显著地降低肿瘤/体重比(P<0.01)。病理组织检查发现,与模型对照组比较,狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮50、100、200 mg/kg能促使癌细胞核分裂相对减少,肿瘤细胞发生凋亡,可见比较明显的重度坏死。TUNEL染色实验发现,与模型对照组比较,5-氟尿嘧啶20 mg/kg、华蟾素624 mg/kg、联合组、狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮100、200 mg/kg能诱导细胞凋亡,移植瘤细胞凋亡率均有显著提高(P<0.01)。电镜观察移植瘤细胞超微结构发现,与模型对照组比较,联合用药组、狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮各剂量组可抑制细胞自噬体的形成。与模型对照组比较,狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮100、200 mg/kg能促使细胞核固缩,碎裂、溶解,出现凋亡小体。Western blot法分析表明,与模型对照组比较,狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮三个剂量组、联合组及两个阳性药组能显著上调Bax和Caspase-3蛋白和下调Bcl-2和Survivin蛋白的表达水平,诱导移植瘤HepG2细胞发生凋亡(P<0.01),能抑制Beclin1、Atg5、CyclinD1、MMP-9等蛋白的表达,能促进nm23-Hl蛋白的表达(P<0.01),抑制HepG2细胞转移,进而抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长。结论:狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮可以抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长。     

中药“扶正祛积汤”联合埃克替尼对肺癌移植瘤凋亡的影响

目的:从诱导细胞凋亡机制研究中药"扶正祛积汤"联合埃克替尼对肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤的抑瘤作用。方法:以A549细胞皮下注射裸鼠腋下形成移植瘤,随机分成模型组、埃克替尼组、中药"扶正祛积汤"组和中药"扶正祛积汤"联合埃克替尼组(联合组),每组5只,给药21 d,计算各组移植瘤的抑瘤率和联合组的增效率。采用TUNEL法检测各组移植瘤细胞凋亡率。采用免疫组化法和Western Blot法分别检测凋亡相关蛋白Fas、Bax和剪切caspase-3的表达情况。结果:埃克替尼组、中药"扶正祛积汤"组和联合组的抑瘤率分别为14.74%、12.76%和31.25%,联合组增效率为111.11%。联合组凋亡率(46.03±9.26)%均明显高于埃克替尼组(28.40±3.36)%(P0.01)。与埃克替尼组相比,联合组瘤组织Fas、Bax和剪切caspase-3表达均增加(均P0.05)。结论:中药"扶正祛积汤"可以明显提高埃克替尼对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的抑瘤作用,协同增效抑瘤机制可能和引起Fas、Bax和剪切caspase-3表达上升导致诱导细胞凋亡增加有关。     

苦参碱的体内抑瘤作用及机制研究

目的 观察苦参碱(Matrine)对裸鼠的体内抑瘤作用.方法 通过建立可视化大肠癌移植瘤模型,动态观察苦参碱对裸鼠体内SW480-EGFP实体瘤生长的影响.结果 苦参碱高剂量组的抑瘤率为59.52％,与对照组相比具有显著性差异(P＜0.001);透射电镜结果显示苦参碱用药组结肠癌细胞核周可见凋亡小体出现;线粒体和内织网肿胀,空泡样变.结论 苦参碱通过诱导凋亡抑制裸鼠体内结直肠癌细胞的生长.     

芦荟大黄素通过Bax/Caspase-3 信号通路调控肝癌细胞自噬作用研究

目的：探讨芦荟大黄素通过B 淋巴细胞癌-2 基因（Bcl-2） 相关X 蛋白（Bax） /半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3） 信号通路调控肝癌细胞自噬的作用。方法：选用肝癌SMMC-7721 细胞,设置SMMC-7721 组、5 氟尿嘧啶组、芦荟大黄素低、高剂量组（低、高剂量组）。5 氟尿嘧啶组加入5 氟尿嘧啶至终浓度为80 μg/mL,低、高剂量组加入芦荟大黄素至终浓度分别为100 μg/mL、200 μg/mL。以上各组每孔设6 个平行样,培养72 h。试验结束后,采用MTT 法测定细胞增殖水平,吖啶橙染色观察细胞自噬水平,流式细胞仪测定细胞凋亡水平,RT-PCR 法及Western-blot 法测定细胞Bax、Caspase-3 基因和蛋白水平。结果：与SMMC-7721 组比较,其余各组细胞存活率降低（P＜0.05）,自噬小体、凋亡率、Bax、Caspase-3 mRNA 及蛋白表达水平升高（P＜0.05）;与低剂量组比较,高剂量组存活率降低（P＜0.05）,自噬小体、凋亡率、Bax、Caspase-3 mRNA 及蛋白表达水平升高（P＜0.05）;与5 氟尿嘧啶组比较,低、高剂量组细胞存活率升高（P＜0.05）,自噬小体、凋亡率、Bax、Caspase-3 mRNA 和蛋白表达水平降低（P＜0.05）。结论：芦荟大黄素能明显抑制肝癌SMMC-7721 细胞增殖,诱导该细胞发生自噬和凋亡,且其机制与芦荟大黄素能促进Bax、Caspase-3 mRNA 及蛋白表达有关。     

叶下珠复方Ⅱ号对肝癌Hep3B细胞裸鼠移植瘤生长和miR-122及IGF-1R表达的影响

目的：观察叶下珠复方Ⅱ号对Hep3B2.1-7人肝癌细胞(简称Hep3B细胞)裸鼠移植瘤生长的抑制作用并探讨其机制。方法：建立肝癌Hep3B细胞裸鼠移植瘤模型,并随机分为模型组、叶下珠复方Ⅱ号高、低剂量组(57.5、28.75 g·kg^-1)和5-氟尿嘧啶(5-FU)组(0.025 g·kg^-1),每组8只。叶下珠复方Ⅱ号高、低剂量组均灌胃给药,每日1次;模型组予同体积生理盐水灌胃;5-FU组采用腹腔注射,隔日1次。给药28 d后处死取移植瘤,以免疫组化(IHC)法检测瘤体组织细胞核抗原(PCNA)表达,以脱氧核糖核酸断裂原位末端标记(TUNEL)法检测瘤体组织细胞凋亡,以实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测移植瘤组织miR-122和胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)的mRNA表达,以蛋白免疫印迹法(Western blot)检测瘤体组织CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、肝细胞核因子-4α(HNF-4α)和IGF-1R的蛋白表达。结果：叶下珠复方Ⅱ号高、低剂量组和5-FU组的抑瘤率分别为74.90%、6...     

健脾活血祛湿方通过干预AQP9表达调控线粒体细胞凋亡通路对荷H22肝癌移植瘤裸鼠的影响研究

目的观察健脾活血祛湿方通过干预水通道蛋白9(AQP9)蛋白靶点调控线粒体细胞凋亡途径对H22肝癌移植瘤裸鼠的影响。方法采用H22肝癌移植瘤裸鼠模型,随机分为空白对照组、阳性药物(CTX)对照组、健脾活血祛湿方低、中、高剂量组,分别给予相应干预后,观察裸鼠一般情况,测量移植瘤、脾脏重量、计算抑瘤率和脾指数;免疫组化检测各组肿瘤细胞AQP9表达;检测Cty-C、Caspase-3活性;TUNEL检测细胞凋亡水平。结果各组成瘤裸鼠生存状态基本良好,与空白组相比,药物高剂量组和阳性对照组抑瘤率明显增高(P0.05),脾指数降低(P0.05),中、高剂量组AQP9高表达且肝癌细胞呈现凋亡趋势,高剂量组的Cty-C、Caspase-3活性显著增强(P0.05),TUNEL显示高剂量组的凋亡细胞数增多(P0.05)。与阳性对照组相比,AQP9、Cty-C和Caspase-3的活性表达均呈剂量依赖性升高(P0.05),以上均提示阳性对照组和药物高剂量组有效促进肝癌细胞凋亡。结论健脾活血祛湿方可诱导AQP9高表达,调节线粒体细胞凋亡通路中相关凋亡因子的表达,促进肝癌细胞凋亡,从而抑制肿瘤细胞增殖。AQP9在线粒体细胞凋亡通路中可能起着重要作用。     

三棱莪术组方对人胃癌细胞SGC-7901移植瘤裸鼠血清COX-2、VEGF和bFGF含量的影响

目的:研究三棱莪术组方对人胃癌细胞SGC-7901移植瘤裸鼠的抗肿瘤效应及对血清COX-2、VEGF和b FGF含量的影响,探讨其抑制胃癌的作用机制。方法:采用人胃癌细胞SGC-7901单细胞悬液接种方法建立裸鼠胃癌模型,三棱莪术组方灌胃给药(60 g/kg、30 g/kg、15 g/kg),阳性对照药氟尿嘧啶组腹腔注射给药(10 mg/kg),模型组灌服等量生理盐水。氟尿嘧啶组隔天腹腔注射给药1次,其余各组每天灌胃给药1次。裸鼠取瘤体,测量其体积并称重,取血,检测血清中COX-2、VEGF和b FGF含量。结果:与模型组比较,三棱莪术组方高、中、低剂量组裸鼠的肿瘤重量比模型组明显减轻,肿瘤生长受到抑制,抑瘤率分别为63.60%、61.52%、42.51%,具有显著性差异(P0.05,P0.01),抑瘤率与药物的浓度呈正相关。三棱莪术组方高、中、低剂量均可降低人胃癌SGC-7901细胞移植瘤裸鼠血清COX-2含量(P0.05,P0.01),三棱莪术组方高、中剂量可降低胃癌SGC-7901细胞移植瘤裸鼠血清VEGF和b FGF水平(P0.05,P0.01),并具有明显的剂量依赖性。结论:三棱莪术组方具有抑制人胃癌细胞SGC-7901移植瘤生长的作用,三棱莪术组方可通过降低人胃癌细胞SGC-7901移植瘤裸鼠血清COX-2、VEGF和b FGF水平从而达到抑制肿瘤生长的作用。     

附子多糖对裸鼠胃癌移植瘤MMP-2，MMP-14表达的影响

目的:观察附子多糖对裸鼠胃癌移植瘤的生长抑制作用及对肿瘤组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2),基质金属蛋白酶-14(MMP-14)表达的影响。方法:建立胃癌裸鼠移植瘤模型,随机分为模型组,5-氟尿嘧啶组(5-FU,0.01 g·kg~(-1)),附子多糖高、低剂量组(0.2,0.1 g·kg~(-1)),灌胃15 d。观察附子多糖对裸鼠胃癌瘤重的影响;光镜下观察肿瘤细胞的形态变化;酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中转化生长因子-β_1(TGF-β_1)含量;通过免疫组化、蛋白质免疫印迹法(Western blot)及实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测肿瘤组织中MMP-2,MMP-14蛋白及mRNA表达水平。结果:附子多糖高、低剂量组抑瘤率分别为52.83%,40.57%,与模型组比较,附子多糖高、低剂量组的瘤重显著降低(P0.01),附子多糖对裸鼠胃癌移植瘤的生长具有抑制作用;ELISA表明,与模型组比较,附子多糖高、低剂量组显著降低裸鼠胃癌血清TGF-β_1含量(P0.01);免疫组化表明,与模型组比较,附子多糖高、低剂量组MMP-2蛋白明显下调(P0.05,P0.01),MMP-14蛋白表达下降(P0.01);Western blot表明,与模型组比较,附子多糖高、低剂量组MMP-2,MMP-14蛋白表达下调(P0.01);Real-time PCR结果显示,与模型组比较,附子多糖高剂量组的MMP-2,MMP-14 mRNA表达下降(P0.05,P0.01)。结论:附子多糖可抑制裸鼠胃癌移植瘤的生长,抑制TGF-β_1表达,其抑瘤机制可能与下调MMP-2,MMP-14蛋白及mRNA的表达有关。     

下瘀血汤诱导人肝癌裸鼠移植瘤细胞凋亡的实验研究

目的 观察下瘀血汤对肝癌裸鼠移植瘤及核仁纺锤体相关蛋白1(Nusap1) mRNA和蛋白表达的影响,并探讨作用机制。方法 将32只雌性BALB/c裸鼠建立人肝癌移植瘤动物模型,将造模成功的20只裸鼠采用随机数字表法分为对照组及下瘀血汤低、中、高剂量组,每组5只。下瘀血汤低、中、高剂量组分别予0. 15、0. 3、0. 6 g/20 g下瘀血汤灌胃,对照组予等容积0. 9%氯化钠注射液灌胃,灌胃均每日2次,连续15 d。灌胃期间每3 d测量肿瘤大小,灌胃结束后处死取出肿瘤,称取肿瘤质量,采用流式细胞术检测肿瘤细胞的凋亡,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测Nusap1 mRNA表达,采用免疫印迹法检测Nusap1蛋白的表达水平。结果 灌胃第12 d,下瘀血汤中、高剂量组裸鼠移植瘤体积低于对照组(P 0. 05);灌胃第15 d,下瘀血汤低、中、高剂量组裸鼠移植瘤体积低于对照组(P 0. 05)。下瘀血汤低、中、高剂量组裸鼠移植瘤平均质量均低于对照组(P 0. 05),下瘀血汤中、高剂量组裸鼠移植瘤平均质量均低于下瘀血汤低剂量组(P 0. 05),下瘀血汤高剂量组裸鼠移植瘤平均质量低于下瘀血汤中剂量组(P 0. 05)。下瘀血汤低、中、高剂量组移植瘤细胞凋亡率高于对照组(P 0. 05),下瘀血汤高剂量组移植瘤细胞凋亡率高于下瘀血汤低、中剂量组(P 0. 05)。下瘀血汤低、中、高剂量组Nusap1 mRNA相对表达量均低于对照组(P 0. 05),下瘀血汤高剂量组Nusap1 mRNA相对表达量低于下瘀血汤低剂量组(P 0. 05)。下瘀血汤低、中、高剂量组可以抑制Nusap1蛋白的表达,且随着用药浓度的增加,抑制作用增强。结论 下瘀血汤可抑制Nusap1的表达,可减缓裸鼠肝癌细胞移植瘤的生长,促进移植瘤细胞凋亡。     

阿克替苷通过调控JNK信号通路促进肝癌细胞自噬与凋亡的实验研究

探讨阿克替苷(acteoside)通过JNK信号通路抑制H22荷瘤小鼠瘤体的分子机制。50只BALB/c雄性小鼠经H22肝癌细胞皮下造模后，分为模型组、顺铂组以及阿克替苷低、中、高剂量组5组，每组均给药2周，每周连续给药5 d。观察各组小鼠精神、饮食、饮水、活动度、皮毛等一般状况。比较给药前后小鼠体质量变化及各组小鼠瘤体体积、瘤重和抑瘤率。HE染色观察肝癌组织形态学变化，免疫组化和Western blot检测各肿瘤组织中p-JNK、JNK、Bcl-2、Beclin-1和LC3的表达，qRT-PCR检测JNK、Bcl-2、Beclin-1和LC3 mRNA的表达。模型组和阿克替苷低剂量组小鼠一般状况较差，其余3组小鼠的一般状况均改善。阿克替苷中、高剂量组和顺铂组小鼠体质量小于模型组(P<0.01)。模型组瘤体体积与阿克替苷低剂量组比差异无统计学意义，顺铂组瘤体体积与阿克替苷高剂量组比差异无统计学意义。阿克替苷中、高剂量组和顺铂组瘤体体积和瘤重与模型组相比显著减小(P<0.001)。阿克替苷低、中、高剂量组和顺铂组的抑瘤率分别为10.72%、40.32%、53.79%、56.4...     

黄精多糖对肝癌H22移植瘤小鼠的抑瘤作用及机制研究

目的 研究黄精多糖对H22移植瘤小鼠的抑瘤作用,并探讨其作用机制。方法 建立H22移植瘤小鼠模型。将模型小鼠随机分为5组:模型组,环磷酰胺组(20 mg·kg-1),黄精多糖高、中、低剂量组(400, 200,100 mg·kg-1),连续灌胃给药10 d。测定瘤体质量,计算抑瘤率。新鲜瘤组织制备单细胞悬液,流式细胞术分析细胞周期分布,酶联免疫吸附法(ELISA)检测瘤组织中Caspase-3, 8,9活性。结果 黄精多糖各剂量组均能显著抑制肿瘤生长,高剂量组抑瘤率为54.5 %,其作用接近环磷酰胺组(57.7 %)。黄精多糖各剂量组能显著提高肿瘤组织中Caspase-3,8,9活性,与模型组比较差异有统计学意义(P < 0.01)。黄精多糖中、高剂量组可显著增加G0/G1期细胞(P < 0.05),减少G2/M期细胞(P < 0.01),高剂量组还可减少S期细胞(P < 0.05)。结论 黄精多糖对肝癌H22移植瘤小鼠具有显著的抑瘤作用,其作用机制可能是通过影响细胞周期分布,将肿瘤细胞阻滞于G0/G1期,抑制细胞增殖,并通过激活Caspase系统诱导肿瘤细胞凋亡。     

健脾解毒方对裸鼠胃癌皮下移植瘤氟尿嘧啶治疗的增效作用

目的:探讨健脾解毒方对氟尿嘧啶(5-Fu)治疗人胃癌细胞皮下移植瘤的增效作用。方法:采用皮下接种构建裸鼠人胃癌MKN45异位移植瘤模型,建立模型后,随机分为6组:A生理盐水组;B健脾解毒方低剂量组;C健脾解毒方中剂量组;D健脾解毒方高剂量组;E5-FU组;F健脾解毒方联合5-FU组。治疗4周后处死各组老鼠,观察健脾解毒方对移植瘤体积及裸鼠体质量的影响及对5-FU治疗效果的影响。结果:(1)对体质量的影响:经健脾解毒方及5-Fu干预后,除5-Fu组体质量增加不显著外,其余各组组间比较无统计学意义(P0.05)。(2)对抑瘤率的影响:治疗后,健脾解毒方低、中、高剂量组、5-FU组及联合组各组的瘤体抑瘤率分别为18.96%、40.97%、50.94%、51.03%、54.43%。(3)对瘤重的影响:健脾解毒方组及5-FU组瘤体质量虽然小于模型组,但是差异无统计学差异(P0.05);联合给药组同模型组及低剂量组比较有统计学差异(P=0.011、P=0.032)。结论:健脾解毒方煎剂具有一定抑制肿瘤生长的能力,在联合化疗药物作用下,其抑制效果明显,在有效治疗剂量中,健脾解毒方以剂量依赖性方式抑制裸鼠异位瘤的生长。     

山蛩提取物对小鼠H_(22)移植瘤抑制作用研究

目的:研究山蛩提取物在小鼠体内对肝癌H_(22)移植瘤生长的影响。方法:肝癌H_(22)荷瘤小鼠随机分为5组:模型组、山蛩提取物低、中、高(0.40、0.80、1.60g·kg~(-1))3个剂量组和阳性药五氟尿嘧啶(5-FU,5mg·kg~(-1))对照组。连续给药13天,于第14天检测抑瘤率、脾指数、胸腺指数、血清中AST和ALT的活性。结果:与模型组比较,山蛩提取物低、中、高剂量组的抑瘤率分别为27.14%(P0.05)、35.31%(P0.01)和40.25%(P0.01);同阳性组相比,山蛩提取物高、中、低剂量组的荷瘤小鼠脾脏指数及胸腺指数均显著升高(P0.05)。结论:山蛩提取物对肝癌H_(22)荷瘤小鼠肿瘤的生长具有明显的抑制作用,并能保护荷瘤小鼠的免疫功能,其机制可能与其促进胸腺和脾腺产生抑瘤因子有关。     

从自噬机制探讨加味黄芪赤风汤含药血清对阿霉素诱导的肾小球足细胞损伤的保护作用

目的研究加味黄芪赤风汤对肾小球足细胞自噬及足细胞损伤相关蛋白nephrin、podocin及desmin表达的影响。方法采用体外培养小鼠肾小球足细胞、以阿霉素(adriamycin,ADR)诱导的方法制作足细胞损伤模型。随机分为空白组、模型组、替米沙坦组及加味黄芪赤风汤高、中、低剂量组(简称中药高、中、低剂量组)。采用Western blot法检测各组足细胞相关蛋白nephrin、podocin、desmin和自噬相关蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ的表达水平,透射电镜下观察各组足细胞自噬超微结构变化。结果 (1)与空白组比较,模型组nephrin、podocin表达明显下降(P0.01),desmin表达明显升高(P0.01);与模型组比较,中药高、中剂量组及替米沙坦组nephrin、podocin表达明显升高(P均0.01),desmin表达明显下降(P均0.01),中药低剂量组无明显改善(P0.05)。(2)模型组较空白组自噬小体数量明显增多,体积增大,细胞器减少;中药高、中剂量组及替米沙坦组较模型组自噬超微结构均有不同程度改善,而中药低剂量组无明显改变。(3)与空白组比较,模型组Beclin-1、LC3-Ⅱ表达明显上升(P0.01);与模型组比较,中药高、中剂量及替米沙坦组Beclin-1、LC3-Ⅱ表达明显下降(P0.01),中药低剂量组无明显下降(P0.05)。结论加味黄芪赤风汤对ADR诱导的足细胞损伤具有保护作用,调节足细胞自噬活性可能是其足细胞保护作用的内在机制之一。     

新加良附方联合5-Fu对裸鼠胃癌移植瘤PTEN表达的影响

目的观察新加良附方联合5-Fu对人胃癌细胞SGC-7901裸鼠移植瘤生长抑制作用及其对肿瘤组织中PTEN表达的影响。方法建立移植性人胃癌细胞SGC-7901裸鼠移植瘤模型,随机分为模型对照组、5-FU组及新加良附方高、中、低剂量组、联合给药组(新加良附中剂量+5-FU组)6组。连续给药10d,计算肿瘤抑制率,检测PTEN抑癌基因的表达。结果联合给药组抑瘤率为54%,与模型对照组比较,有统计学意义(P0.05);与新加良附高剂量比较联合给药组抑瘤率升高明显,有统计学意义(P0.05);联合给药组上调肿瘤组织PTEN蛋白表达,与模型对照组比较,有统计学意义(P0.05);与新加良附高剂量组比较,联合给药组PTEN蛋白表达升高明显(P0.05)。结论联合给药组抑瘤率高于新加良附高剂量组及5-FU组,在调节PTEN表达方面优于新加良附高剂量组及5-Fu组,显示了两药协同作用的优势。     

补中益气汤对肺腺癌顺铂耐药细胞株裸鼠移植瘤作用及其机制的研究

目的探讨补中益气汤对肺腺癌顺铂耐药细胞株A549/DDP裸鼠移植瘤的作用机制。方法 60只裸鼠随机分为6组,空白对照组给予生理盐水0.5ml灌胃,其余5组以5×106/L的A549/DDP接种于裸鼠皮下,待成瘤后,分别给予生理盐水0.5ml灌胃,0.2ml顺铂腹腔注射同时生理盐水灌胃,0.2ml顺铂腹腔注射顺铂和高、中、低剂量的补中益气汤灌胃。观察A549/DDP细胞在各组裸鼠的致瘤率,计算抑瘤率;采用免疫组化方法、RT-PCR(real time PCR)检测移植瘤组织中PI3K、AKT的表达水平。结果补中益气汤高、中、低剂量组能不同程度的抑制移植瘤的生长,其中以高、中剂量组最显著,与顺铂组抑瘤率比较有明显的统计学差异(P0.05);移植瘤中PI3K、AKT蛋白表达和mRNA基因的表达在补中益气汤高、中、低剂量组中均有下降,高、中剂量组降低较多,与顺铂组和小剂量比较有统计学差异(P0.05)。结论补中益气汤联合顺铂对肺腺癌移植瘤的增殖有明显的抑制作用,补中益气汤能通过调控PI3K、AKT基因和蛋白的表达而干预顺铂的耐药机制,这种干预作用具有一定的量效关系。     

大黄素对三种人宫颈癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:观察大黄素(Emodin)对人宫颈癌siha、Hela和C33A细胞株裸鼠移植瘤的抑制作用。方法:将人宫颈癌siha、Hela和C33A细胞分别移植至裸鼠皮下,建立A(siha细胞)、B(Hela细胞)和C(C33A细胞)三种细胞移植瘤模型。第15天将移植成功的各模型裸鼠随机分为对照组、低剂量组和高剂量组,每组6只;分别经灌胃给予0.1%二甲基亚砜(DMSO)0.2m L/只、大黄素20mg/kg和大黄素40mg/kg,每日1次,共14天。给药结束后处死裸鼠,测量肿瘤瘤重和生长体积,并计算抑瘤率和肿瘤体积抑制率。结果:与对照组相比较,大黄素低剂量组对肿瘤生长体积抑制作用不明显,大黄素高剂量组肿瘤瘤重和生长体积均受到显著抑制;三种模型中,大黄素对siha、Hela两种细胞移植瘤抑制效果优于C33A细胞移植瘤。结论:大黄素具有抑制人宫颈癌裸鼠移植瘤生长的作用,对siha和Hela细胞移植瘤作用更为明显。