2种类型膜荚黄芪主要药效成分含量及关键酶基因表达量差异研究

目的以2年生2种类型膜荚黄芪Astragalus membranceus(绿茎有毛膜荚黄芪、紫茎有毛膜荚黄芪)根、茎、叶为实验材料,探究其主要药效成分含量及其生物合成途径中关键酶基因表达量的差异,为药材膜荚黄芪资源合理利用及其优良品种选育选育提供科学的理论参考。方法使用HPLC检测膜荚黄芪根、茎、叶中黄芪甲苷与毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量,使用紫外分光光度计检测膜荚黄芪根、茎、叶中总皂苷含量,采用实时荧光定量PCR检测其根中皂苷生物合成过程中关键酶乙酰辅酶A乙酰基转移酶(AATC)、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶(HMGS)、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)、异戊二烯焦磷酸异构酶(IDI)、法尼基焦磷酸合酶(FPS)、鲨烯合酶(SS)、鲨烯环氧酶(SE)、环阿尔庭烷合酶(CAS)基因的表达量。结果紫茎膜荚黄芪根中黄芪甲苷含量始终高于绿茎膜荚黄芪;在生殖生长期时,绿茎膜荚黄芪根中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量高于紫茎膜荚黄芪,而枯萎期二者变化浮动较大;绿茎膜荚黄芪根中总皂苷含量普遍高于紫茎膜荚黄芪。AACT、FPS、HMGS基因表达量与绿茎膜荚黄芪总皂苷含量呈显著相关(P0.05),IDI基因表达量与总皂苷含量呈极显著相关(P0.01),说明这4个基因在绿茎膜荚黄芪总皂苷合成中具有重要影响;HMGR基因与紫茎膜荚黄芪总皂苷呈显著相关(P0.05),其他基因与紫茎膜荚黄芪皂苷含量均有相关性,但未达到显著水平。结论探究了2种类型黄芪3种主要药效成分的动态变化和皂苷类化合物关键酶基因的表达,为黄芪皂苷类化合物合成生理生态机制的明晰、膜荚黄芪资源合理利用及优良品种选育提供了科学的理论依据。     

HPLC-ELSD法测定黄芪药材中黄芪甲苷

黄芪为常用补气药，是我国重要的传统药材。《中国药典》规定，药用黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus，membranaceus （Fisch．）Bunge var．nongholicus （Bunge）Hsiao及膜荚黄芪A．membranaceus（Fiseh．）Bunge的干燥根。黄芪中含有多种化学成分，如皂苷类、黄酮类、木脂素类、氨基酸类、多糖类及多种微量元素等。研究表明黄芪甲苷具有降血压、镇静、镇痛及抗氧化等作用，是黄芪的主要活性成分，因此黄芪甲苷常作为指标性成分应用于黄芪药材的质量监控。我国黄芪药用资源丰富，在华北大部分省区均有大面积种植。     

蒙古黄芪茎叶多类型资源性化学成分分析与价值评价

通过分析和评价蒙古黄芪茎叶多类型资源性化学成分,为其资源化利用提供数据支撑。分别采用凯氏定氮法、过滤法、紫外-可见分光光度法对蒙古黄芪茎叶中粗蛋白、粗纤维、可溶性糖类成分进行分析;采用超高效液相色谱-三重四极杆质谱串联(UPLC-TQ-MS)法对蒙古黄芪茎叶核苷类、氨基酸类、黄酮类及皂苷类成分进行分析。结合主成分分析对蒙古黄芪茎叶资源性成分质量差异进行综合评价。结果表明蒙古黄芪茎叶中粗蛋白、粗纤维、总多糖、还原糖平均质量分数分别为5.11%、30.33%、11.03 mg·g^-1、31.90 mg·g^-1;检测出6种核苷类成分、15种氨基酸类成分、22种黄酮类成分和1种皂苷类成分,平均总量分别为1.49 mg·g^-1、6.00 mg·g^-1、1.86 mg·g^-1、35.67μg·g^-1;不同采收期、不同生长年限蒙古黄芪茎叶各类型资源性化学成分含量差异显著;主成分分析结果表明宁夏产蒙古黄芪茎叶质量较优。研究结果可为蒙古黄芪茎叶资源化利用提供参考和依据。     

正交设计优选黄芪总黄酮和总皂苷的提取工艺

黄芪为豆科植物膜荚黄芪Astragalus membranceus Bunge的干燥根,为常用中药,具有补气固表、利尿、排毒、敛疮生肌等作用.黄芪所含成分复杂,但主要可分为三大类即黄酮类、皂苷类和多糖类[1].具有增强免疫系统、抗氧化、延缓衰老、改善心功能状态、抗病毒、抗癌等功效[2].对其有效成分提取工艺研究,多以多糖为主[3,4].     

蒙古黄芪和膜荚黄芪水溶性蛋白表达

目的:蒙古黄芪和膜荚黄芪都为药用黄芪,二者亲缘关系近,成分相似,药用价值尚未区分。该研究旨在建立蒙古黄芪和膜荚黄芪的水溶性蛋白表达谱,了解两种黄芪之间存在的差别。方法:样品采用水超声提取和丙酮沉淀的方法得到黄芪水溶性蛋白成分,质谱级胰酶酶解后的肽段经nano ESI-LC-MS/MS分析,采用Proteome Discoverer 1. 4软件比对豆科蛋白数据库鉴定蛋白,再使用非标记定量软件SIEVE分析蒙古黄芪与膜荚黄芪水溶性蛋白质表达的差异。最后运用生物信息学方法分析2种黄芪共有蛋白的分类、分子功能、参与的生物过程和信号通路。结果:蒙古黄芪鉴定特异性蛋白有920个,膜荚黄芪鉴定的特异性蛋白有717个,2种黄芪中共同表达的蛋白有472个,其中二者的差异表达蛋白有21个,如PR-10蛋白,NDK-1蛋白,谷蛋白A2,磷脂酶D等蛋白在两种黄芪中差异表达。蒙古黄芪高表达蛋白14个,膜荚黄芪高表达蛋白7个。结论:蒙古黄芪和膜荚黄芪的水溶性蛋白表达谱存在显著差异,特异性蛋白、差异表达蛋白和共同表达的蛋白可为今后两种黄芪的鉴别、药理作用机制的研究和寻找作用靶点提供参考。     

黄芪质量的化学模式识别研究

目的 建立黄芪质量评价的化学模式识别方法。方法 用甲醇回流提取黄芪中皂苷类成分，以氯仿—甲醇—水(65：30：10)为展开剂，采用双波长薄层扫描法，在λR＝390nm，λR＝590nm下，对18个产地的黄芪样品进行了定量分析，以黄芪甲苷为指标成分，用系统聚类分析对其进行了化学模式识别研究。结果 蒙古黄芪和膜荚黄芪中的黄芪甲苷含量较高，这与《中华人民共和国药典》2000年版将蒙古黄芪和膜荚黄芪列为正品相一致。结论 此方法可用于黄芪质量评价。     

不同产地黄芪中的黄芪总皂苷含量对比分析

目的:统计不同产地黄芪中的黄芪总皂苷含量并进行对比分析。方法:以我国八个不同产地的蒙古黄芪与膜荚黄芪作为研究样本,对比两个品种黄芪的黄芪总皂苷含量;对比不同种植方式黄芪的黄芪总皂苷含量;对比不同产地黄芪的黄芪总皂苷含量;对比不同产地蒙古黄芪、膜荚黄芪的黄芪总皂苷含量。结果:内蒙古产黄芪的黄芪总皂苷含量最高,为(22.95±1.17)mg/g,吉林产黄芪的黄芪总皂苷含量最低,为(18.12±0.59)mg/g,不同产地黄芪的黄芪总皂苷含量可见明显差异(P0.05)。蒙古黄芪的黄芪总皂苷含量为(21.24±1.06)mg/g,膜荚黄芪的黄芪总皂苷含量为(19.01±0.87)mg/g(P0.05)。野生黄芪的黄芪总皂苷含量高于人工种植黄芪(P0.05);不同产地内蒙黄芪的黄芪总皂苷含量可见统计学差异(P0.05);不同产地膜荚黄芪的黄芪总皂苷含量可见统计学差异(P0.05)。结论:不同产地黄芪的黄芪总皂苷含量具有明确差异性,临床应用中应给予足够重视,根据产地、品种、种植方式等修正方剂中黄芪用量。     

瓜子金中3种皂苷类成分含量测定及其差异分析

目的:测定瓜子金不同部位中3种皂苷类成分含量,并比较其差异。方法:采用HPLC法测定瓜子金全草、根、茎、叶中瓜子金皂苷Ⅴ、瓜子金皂苷己、远志皂苷F的含量,并进行主成分分析。结果:12批瓜子金样品按药典标准可分2类,合格品(第1类)出峰时间集中在5～35 min,3种皂苷类成分含量较高;不合格品(第2类)出峰时间集中在40～68 min,3种皂苷类成分含量较少。从总体上来看,合格品中瓜子金皂苷Ⅴ、瓜子金皂苷己的含量为叶茎根,远志皂苷F的含量为根茎叶,不同药用部位成分含量存在一定的差异。结论:市场流通的瓜子金药材存在较多不合格品,叶中瓜子金皂苷己含量较高,现行质量标准存在局限性,该文所建立的方法能较全面控制药材质量。     

黄芪注射液治疗心力衰竭的研究进展

黄芪为豆科多年生草本植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的根,主要功效为补气升阳、益卫固表、利水消肿、托疮生肌,临床应用广泛。黄芪注射液是临床上最常用的黄芪成药制剂,药理学研究证实,黄芪具有强心、扩血管作用,黄芪对心肌的正性肌力作用以及扩血管的作用主要来自于其中的皂苷类成分黄芪甲苷（XGA）。     

施肥条件对膜荚黄芪的生长、产量及葡糖甙类含量的影响

为了生产以膜荚黄芪(Astragalus membranaceus)为基原的1年生优质黄芪,改变肥料三要素(氮、磷、钾)的用量进行栽培,探讨了对膜荚黄芪茎叶重量、产量、根的粗细、长短、葡糖甙(异类黄酮Ⅰ～Ⅳ;黄芪皂甙Ⅰ～Ⅳ)及异类黄酮Ⅴ的含量。     

山西浑源仿野生栽培蒙古黄芪的质量研究

目的通过对山西浑源县仿野生栽培和野生蒙古黄芪中皂苷类和黄酮类成分的比较,评价仿野生栽培蒙古黄芪的质量。方法采集12批野生和19批仿野生栽培蒙古黄芪样品,采用HPLC-DAD法测定毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素4种黄酮成分,UPLC-ELSD法测定黄芪皂苷I、II、III、IV 4种皂苷成分。结果 5～6年生的仿野生栽培的蒙古黄芪中的高质量分数成分毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、黄芪皂苷I、II、III的量高于野生黄芪,相应的黄酮总量、皂苷总量高于野生黄芪,而2种低质量分数成分芒柄花素、黄芪皂苷IV的量低于野生黄芪;通过比较仿野生栽培1～6年生黄芪中8种成分的量发现,黄酮类成分随生长年限的增长不断升高,而皂苷类成分则逐渐降低。结论仿野生栽培的方法可有效地解决优质野生浑源蒙古黄芪资源不足的问题。     

黄芪多糖、皂苷、黄酮含量之间的相关性分析

目的:研究分析植物黄芪各部位有效成分间的相关性。方法:对膜荚黄芪植株根茎叶的折干率及主要药效活性成分多糖、黄酮、皂苷的含量进行了相关性和回归分析。结果:黄芪的黄酮、皂苷、多糖含量和黄芪植物的折干率有低度相关性;黄芪多糖含量在根茎叶之间,黄芪皂苷含量在茎和叶之间,黄芪黄酮含量在茎和根之间,黄芪的皂苷和黄酮含量在茎中,黄芪黄酮、皂苷和多糖含量在根中都具有统计学意义上的显著相关性和极显著的线性回归关系;在叶中,黄芪的黄酮、皂苷、多糖含量没有显著相关性。结论:黄芪初生代谢产物黄芪多糖和次生代谢产物黄芪黄酮、皂苷的累积具有相关性,各物质的含量在根茎叶间的分布也有一定的相关性,这符合植物代谢物质累积的规律。     

氮、磷、钾对膜荚黄芪生长发育及有效成分的影响

目的：研究氮、磷、钾及其配比对膜荚黄芪生长发育及有效成分的影响。方法：通过田间试验，采用氮、磷、钾3因素2次D-饱和最优设计，研究氮、磷、钾及其配比对膜荚黄芪生长及有效成分的影响。结果：施肥促进了膜荚黄芪幼苗的生长，从而为生育后期膜荚黄芪根生长、产量形成及有效成分的累积提供充足的营养基础。氮、磷、钾各元素及其配比明显促进了茎叶及根干物质积累，氮、磷、钾对膜荚黄芪干物质累积总量的影响程度依次为氮>钾>磷；对膜荚黄芪茎叶干物质累积量的影响程度依次为氮>磷>钾；对根干物质累积量的影响程度依次为氮>钾>磷。施肥明显提高了膜荚黄芪根产量，氮、磷、钾对根产量影响程度依次为氮>钾>磷。氮、磷、钾各元素及其配比使黄芪多糖、黄芪甲苷含量明显增加，对总黄酮含量影响不明显。氮、磷、钾对黄芪多糖含量影响程度依次为钾>磷>氮；对黄芪甲苷含量的影响程度依次为氮>钾>磷。结论：氮、钾对膜荚黄芪生长发育，产量形成及多糖，黄芪甲苷含量有重要的影响。根类中药材黄芪的栽培过程中应该注重氮、钾肥的施用，并注意氮、磷、钾的配合施用。     

黄芪皂苷类有效成分提取分离技术

黄芪甲苷和总皂苷是中药黄芪中的特征性成分,目前黄芪药材及含黄芪的单方与复方中药制剂多以黄芪甲苷和总皂苷含量为质量评价指标。关于黄芪中皂苷类成分的前处理方法的文献报道比较丰富。本文对近年来黄芪皂苷类成分提取分离方法的研究进展进行了归纳,列举并对比了水提法、醇提法、微波辅助提取法、柱前衍生化法、超临界CO2萃取法等方法的优缺点及适用范围,为黄芪及其制剂中皂苷类成分的分离提纯提供参考。     

甘肃产1～2年生红芪和黄芪皂苷、多糖、黄酮类成分含量差异研究

目的对甘肃产1～2年生红芪（多序岩黄芪Hedysarum polybotrys）和黄芪（蒙古黄芪Astragalus membranaceus var. mongholicus或膜荚黄芪A. membranaceus）总皂苷、总多糖、黄酮类成分含量进行统计分析,综合多指标探讨红芪和黄芪的差异。方法运用R3.3.2软件,选取总皂苷、总黄酮、总多糖、毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮、芒柄花苷、芒柄花素、4种异黄酮含量总和8个含量指标,产地、品种、采收时间、纬度、经度、海拔高度6个影响质量的因素做变量,采用相关分析、聚类分析、主成分分析方法,对甘肃产1～2年生红芪和黄芪质量差异进行综合评价。结果聚类结果表明红芪、黄芪聚成2大类,2种药材品质相差较大;主成分分析结果表明,黄芪质量优于红芪,总体上2年生红芪、黄芪药材质量优于1年生药材,宕昌产黄芪质量较优,武都产红芪质量较优。结论甘肃产红芪和黄芪药材质量有明显差异,从质量角度分析,二者不适合替代使用。     

黄芪的临床应用

黄芪,为豆科植物蒙古黄芪及膜荚黄芪的干燥根,始载于《神农本草经》,为上品。清代吴其浚《植物名实图考》说：黄芪“有数种,山西、蒙古产者佳”。也即是说,除山西沁州绵上外,内蒙古产的黄芪也为道地药材。据现代药理研究证明,黄芪含皂苷类、多糖类等多种有效成份。其中皂苷类以黄芪甲苷为主,并含乙苷和丙苷等。还有黄酮类及黄芪多糖、多种氨基酸等。由于黄芪主产于北方,故现代中医处方,多写为“北芪”。     

黄芪根、茎、叶中总皂苷含量比较

生药黄芪为豆科植物膜荚黄芪Astragalusmembranaceus（Fisch．）Bge．和蒙古黄芪A.mongholicusBge．的干燥根。皂苷为黄芪的主要化学成分之一。黄芪的入药部位为根。我们通过实验分析比较黄芪根、茎、叶中总皂苷含量，为开发黄芪地上部分，扩大药物资源提供科学依据。1仪器和材科仪器：721型分光光度计。药品：黄芪甲苷（ASI）标准品（781－90001，中国药品生物制品检定所）；黄芪根、茎、叶来自大兴安岭野生黄芪（膜荚黄芪）。2方法和结果2.1总皂苷的提取与纯化：取黄芪根、茎、叶粗粉干燥至恒重，分别精确称取根、茎、叶样品约5g（精…     

不同来源黄芪中黄芪总皂苷含量比较研究△

目的：比较全国不同来源黄芪中总皂苷含量。方法：采用紫外分光光度法测定黄芪总皂苷含量,以黄芪甲苷为对照品,测定波长为541 nm。结果：全国黄芪总皂苷平均含量为20.18 mg·g-1,蒙古黄芪总皂苷平均含量为21.06 mg·g-1,膜荚黄芪总皂苷平均含量为19.37 mg·g-1;野生黄芪药材总皂苷平均含量为21.33 mg·g-1,人工种植黄芪药材总皂苷平均含量为19.06 mg·g-1,半野生栽培黄芪药材总皂苷平均含量为18.97 mg·g-1。结论：不同来源黄芪药材总皂苷含量具有明显差异。     

膜荚黄芪叶中三萜皂苷类成分的分离与鉴定

目的：研究膜荚黄芪叶中的三萜皂苷类成分。方法：采用硅胶、十八烷基硅烷键合硅胶(ODS)等色谱方法对膜荚黄芪叶的化学成分进行分离,通过一维核磁共振氢谱(¹D-NMR)和²D-NMR法分析鉴定化合物。结果：从膜荚黄芪叶提取物中共分离出15个化合物,分别鉴定为黄芪叶苷B(1)、黄芪叶苷L(2)、cyclounifolioside D(3)、3-O-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃木糖基]-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基-24-O-α-L-吡喃阿拉伯糖基-16-乙酰基-3β,6α,16β,24(S),25-五羟基环菠萝蜜烷(4)、黄芪叶苷K(5)、黄芪叶苷A(6)、astraverrucinⅠ(7)、cycloaraloside A(8)、黄芪叶苷D (9)、astralanosaponin D (10)、大豆皂醇E (11)、3β,21α,24-三羟基-齐墩果-12-烯(12)、3β,22β,24,29-四羟基齐墩果-12-烯(13)、豌豆皂苷Ⅰ(14)、大豆皂醇B-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基-...     

黄芪有效成份提高机体免疫功能的研究进展

<正>黄芪,本品为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根,味甘,微温;归肺、辟经,主产于内蒙古、山西、黑龙江等地,春、秋二季采挖[1]。根据中国中药化学成分数据库,除了一些微量元素,黄芪主要包括黄芪多糖、黄芪皂苷、黄芪黄酮类化合物等68种有效化学成分[2]。现代医学发现其药理作用广泛,黄芪的药理作用是由其所含的有效成分所决定,而这些活性成分均具有增强机体免疫功能的作用,现具体综述如下。