基于TLR4/NF-κB 信号通路研究木犀草素对幼鼠急性肺损伤的作用机制

目的研究木犀草素对幼鼠急性肺损伤（ALI）的保护作用,并探究其作用机制。方法将50 只SPF 级 SD 幼鼠随机分为5 组：正常组,模型组,地塞米松组,木犀草素高、低剂量组,每组10 只。除正常组外,其 余各组幼鼠雾化吸入脂多糖（LPS）建立急性肺损伤模型,正常组大鼠雾化吸入等量生理盐水。模型复制前3 d 起及模型复制后1 h,木犀草素高、低剂量组大鼠分别灌胃40、20 mg · kg-1 的木犀草素,地塞米松组于模型复 制前2 h 注射5 mg·kg-1 地塞米松,正常组和模型组大鼠灌胃等量0.5%羧甲基纤维素钠（CMC-Na）。模型复制 后12 h,采用ELISA 法检测血清及肺泡灌洗液（BALF）中白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）、肿瘤 坏死因子α（TNF-α）和肺组织超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）含量;检测大鼠肺组织湿干质量 比（W/D）;HE 染色检测肺组织病理变化;Western Blot 法和qRT-PCR 法检测肺组织Toll 样受体4（TLR4）、核 因子κB（NF-κB）p65 蛋白和mRNA 的表达水平。结果与正常组比较,模型组血清及BALF 中IL-1β、IL-6、 TNF-α 的表达水平明显升高,W/D 值升高,肺组织SOD 活力降低,MDA 含量升高,肺损伤明显,TLR4、 NF-κB p65 蛋白和mRNA 的表达水平增加（P＜0.05）。与模型组比较,木犀草素降低了血清及BALF 中 IL-1β、IL-6、TNF-α 水平和W/D 值,提高了肺组织SOD 活力,降低了MDA 含量,肺损伤得到改善,同时也 降低了肺组织中TLR4、NF-κB p65 蛋白和mRNA 的表达水平（P＜0.05）。结论木犀草素对幼鼠急性肺损伤 具有保护作用,其作用机制与抑制TLR4/NF-κB 信号通路的活化有关。     

大蒜素抑制慢性肾衰竭大鼠炎症反应

【目的】 探讨大蒜素对慢性肾衰竭大鼠的治疗作用及机制。【方法】 将50只SPF级SD大鼠随机分为假手术组、模型组及大蒜素低、中、高剂量组,每组各10只。除假手术组,其余各组大鼠采用5/6肾切除法建立慢性肾衰竭模型。造模成功后,大蒜素低、中、高剂量组分别给予10、20、40 mg·kg-1·d-1大蒜素灌胃,假手术组与模型组给予等体积生理盐水灌胃,每日1次,连续4周。应用全自动生化分析仪检测血清肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）水平,酶联免疫吸附分析（ELISA）检测大鼠血清白细胞介素（IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子（TNF）-α水平,采用苏木素-伊红（HE）染色和马松（Masson）染色观察肾组织病理学变化,采用蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测肾组织Toll样受体（TLR）4、髓样细胞分化因子（MyD）88、核转录因子（NF）-κB蛋白表达水平,实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）法检测肾组织TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达水平。【结果】 与假手术组比较,模型组大鼠血清SCr、BUN、IL-1β、IL-6、TNF-α水平均显著升高（均P＜0. 05）,HE染色、Massion染色结果显示大鼠肾组织发生明显病理改变,肾组织中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白及mRNA表达水平显著升高（均P＜0.05）;与模型组比较,大蒜素低、中、高剂量组大鼠血清SCr、BUN、IL-1β、IL-6、TNF-α水平下降（均P＜0.05）,HE染色、Massion染色结果显示肾组织病理改变减轻,肾组织TLR4、MyD88、NF-κB蛋白及mRNA表达水平下降（均P＜0.05）,且呈剂量依赖性。【结论】 大蒜素可能通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB 信号通路,抑制肾组织炎症反应,进而延缓慢性肾衰竭进程。     

冬瓜皮炭对慢性肾衰竭大鼠肾功能的保护作用

目的探讨冬瓜皮炭对慢性肾衰竭大鼠肾功能的保护作用。方法 72只大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组(爱西特,450 mg/kg)及冬瓜皮炭低、中、高剂量组(300、450、600 mg/kg)。腺嘌呤灌胃给药30 d后,ELISA法检测血清BUN、SCr、TGF-β1、PAI-1水平,HE染色、Masson染色观察肾组织病理形态变化,RT-PCR检测NF-κB p65、I-κB mRNA表达,Western blot检测NF-κB p65蛋白表达。结果与模型组比较,冬瓜皮炭高剂量组BUN、SCr、TGF-β1、PAI-1水平,NF-κB p65、I-κB mRNA表达,NF-κB p65蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01),肾小管轻度扩张、肾小管上皮细胞轻度空泡样变性、肾间质纤维化、炎细胞浸润明显缓解。结论冬瓜皮炭(600 mg/kg)能降低慢性肾功能衰竭大鼠肾脏有害指标,改善肾功能,其机制可能与干预NF-κB信号通路有关。     

木犀草素对H2O2诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用

目的观察木犀草素(Luteolin)对H2O2诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用.方法在培养的新生大鼠心肌细胞上建立H2O2损伤模型,观察不同浓度木犀草素(1×10-6、3×10-6、1×10-5mol/L)对乳酸脱氢酶(LDH)活力、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量的影响.结果与正常组比较,模型组细胞LDH活性及MDA含量升高,SOD活性下降(P＜0.01);与模型组比较,不同浓度的木犀草素可以降低细胞LDH活性及MDA含量,增加SOD活性.结论木犀草素对H2O2诱导的乳鼠心肌细胞损伤有保护作用.     

木犀草素对大鼠肺成纤维细胞增殖的作用

目的：研究木犀草素对乳鼠肺成纤维细胞增殖作用的影响。方法：取3d内出生的乳大鼠肺组织制备肺成纤维细胞,经纯化,接种于96孔培养板上,细胞分为正常对照组、醋酸泼尼松龙组、4×10^-4、4×10^-5、4×10^-6、4×10^-7mol·L^-14个不同浓度的木犀草素实验组,培养一段时间后,观察肺成纤维细胞的形态变化,测定肺成纤维细胞的生长曲线、增殖情况及细胞内超氧化物歧化酶（SOD）活力。结果：木犀草素浓度在4×10^-5、4×10^-6mol·L^-1时,可明显抑制肺成纤维细胞的生长和增殖,且细胞密度减小,细胞间隔变大,这种作用与药物浓度呈正相关性,且使肺成纤维细胞内蛋白质的含量减少,所有木犀草素给药组均可使肺成纤维细胞内SOD活力随剂量的增加而增加,且与正常对照组比较差异均有统计学意义。结论：木犀草素对大鼠肺成纤维细胞的增殖有抑制作用。     

木犀草素对大鼠主动脉的舒张作用及相关机制研究

 目的观察木犀草素的舒血管作用并探讨其作用机制。方法大鼠胸主动脉环张力测定法。结果在内皮完整及去内皮血管上,木犀草素均浓度(4.5～36 μmol·L^-1)依赖性地降低苯肾上腺素(PE)预收缩血管的张力,拮抗高钾引起的血管收缩;木犀草素使PE收缩曲线非平行右移,且使最大张力减小;L-NAME,propranolol对木犀草素的舒血管作用无显著影响;钾通道阻断剂TEA,4-AP,BaCl₂,5-HD均能显著减弱木犀草素的血管舒张作用;木犀草素可以显著地对抗无钙、无钾、无钙环境下渐复钙后由PE引起的血管收缩。结论木犀草素对血管的舒张作用表现为非内皮依赖性,其舒张作用与其直接抑制电压依从性钙通道、受体操纵性钙通道、细胞内钙释放,以及激活钾通道有关,而与α,β受体无关。     

木犀草素对缺血再灌损伤神经元的保护作用及机制研究

目的:探讨黄酮类化合物木犀草素对缺血/再灌损伤神经元的作用以及可能的作用机制。方法:原代培养的海马神经元经2 h的氧糖剥夺和24 h的再灌处理,分别检测细胞活性,乳酸脱氢酶漏出率和细胞凋亡率,采用Pu lsinelli四动脉阻断法对SD大鼠施行10 m in全脑缺血和24 h再灌,检测钠泵活性。结果:经氧糖剥夺/再灌后,海马神经元的活性比未经氧糖剥夺/再灌组显著地降低,乳酸脱氢酶漏出率和细胞凋亡率均显著地增高。在氧糖剥夺期间给予的木犀草素,在10~100μmol.L-1能呈剂量依赖地逆转这些改变。进一步实验发现木犀草素能够显著地增强大鼠全脑缺血/再灌后的钠泵活性。在神经元氧糖剥夺/再灌模型上,利用钠泵抑制剂哇巴因能阻断木犀草素的神经元保护作用。结论:木犀草素能减轻缺血/再灌所致的神经元损伤,其保护机制可能与增强了神经元细胞膜上的钠泵活性有关。     

木犀草素抑制NF-κB增敏TRAIL诱导肝癌HepG2细胞凋亡作用的研究

目的 研究木犀草素抑制NF-κB增敏肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导肝癌细胞HepG2凋亡的作用。方法 体外培养人肝癌HepG2细胞,实验分为空白对照组、木犀草素组、TRAIL组、木犀草素+TRAIL组;采用CCK8法分析细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡情况和细胞周期;Western Blotting法检测IκBα、p-IκBα和NF-κB p65蛋白表达情况。结果 木犀草素(50μmol/L)、TRAIL(20 ng/mL)以及木犀草素+TRAIL作用于HepG2细胞24 h,细胞的凋亡率分别为(11.67±0.20)%、(6.61±0.15)%和(32.93±0.63)%;流式细胞凋亡和周期检测结果显示木犀草素显著增加细胞凋亡,其中,G₀/G₁期细胞减少,S期细胞增加;TRAIL组细胞变化无统计学意义;木犀草素+TRAIL组细胞凋亡更甚,其中,G₀/G₁和G₂/M期细胞减少,S期增加,细胞停滞于S期;Western Blotting检测结果显示IκBα、p-...     

木犀草素对银屑病抑制作用的研究

目的：探讨木犀草素对银屑病的抑制作用。方法：选取Balb/c小鼠30只,经咪喹莫特乳膏诱导制成银屑病样小鼠模型,苏木素-伊红（HE）染色分析皮损情况,酶联免疫吸附法、免疫组织化学法以及实时荧光定量聚合酶链式反应检测,分析木犀草素对银屑病的抑制机制。结果：木犀草素可改善银屑病红肿、鳞屑症状,降低皮肤失水率;经木犀草素干预同样可降低表皮厚度,但2 mg/mL、10 mg/mL浓度时其干预效果并不明显,50 mg/mL时皮肤表皮厚度低于模型组（P<0.05）;木犀草素10 mg/mL、50 mg/mL剂量组CD8+T细胞数量与模型组相比降低（P<0.05）。木犀草素干预后COX-2表达均与模型组相比明显降低（P<0.05）;木犀草素干预后IL-1β表达与模型组相比明显降低（P<0.05）,木犀草素10 mg/mL、50 mg/mL组IL-6表达与模型组相比明显降低（P<0.05）,木犀草素干预后IFN-γ表达与模型组相比明显降低（P<0.05）;木犀草素50 mg/mL时IFN-α/β mRNA合成量明显低于模型组（P<0.05）,木犀草素2 mg/...     

木犀草素对Aβ25-35损伤大鼠大脑微血管内皮细胞的保护作用

目的：研究木犀草素对Aβ25-35损伤大鼠大脑微血管内皮细胞的保护作用。方法：取3周龄Wistar大鼠制备大脑微血管内皮细胞,经过纯化,将细胞随机分为对照组、Aβ25-35损伤组、0.1、1.0及10μmol·L^-1不同浓度木犀草素实验组。采用MTS法、DCFH-DA染色法、SOD抑制率实验分别检测细胞存活率、细胞内活性氧含量及SOD活力。通过测定跨内皮细胞电阻抗、γ-谷氨酰转肽酶、碱性磷酸酶、TXA2及PGI2稳定代谢产物含量,观察微血管内皮细胞的功能及屏障特性。结果：木犀草素在0.1、1.0及10μmol·L^-1浓度时,可显著提高Aβ25-35作用后微血管内皮细胞存活率,并抑制细胞内活性氧产生,提高细胞内SOD活性。木犀草素亦可改善Aβ25-35作用后微血管内皮细胞的功能和屏障特性,表现为提高跨内皮细胞电阻抗,增加特征性酶含量,缓解TXA2及PGI2分泌失衡。结论：木犀草素对Aβ25-35损伤大鼠大脑微血管内皮细胞具有保护作用。     

真武汤对慢性肾衰竭大鼠肾功能影响的实验研究

目的:观察真武汤对实验性慢性肾衰竭大鼠肾功能的影响。方法:采用“单肾切除加腺嘌呤灌胃法”建立大鼠慢性肾衰竭模型。予真武汤灌胃治疗。每周测体重2、4h尿量和24h尿蛋白,给药4周后处死取血测SCr、BUN、血钙、血磷、红细胞计数、血红蛋白含量。结果:真武汤在24h尿蛋白量、SCr、BUN、血磷、血钙、血红蛋白方面的作用与模型组对比有改善。结论:真武汤对单侧肾切除后腺嘌呤性慢性衰竭大鼠的肾功能具有一定的改善作用。     

灯盏花胶囊对慢性肾功能衰竭大鼠肾组织炎症因子的影响

目的：观察灯盏花胶囊对慢性肾功能衰竭（CRF）大鼠肾组织微炎症反应的影响,探讨其治疗CRF的可能机制。方法将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、贝那普利组和灯盏花组,每组15只,应用Platt 5/6肾切除方法制备CRF模型。贝那普利组予盐酸贝那普利（0.29 mg/100 g）灌胃,灯盏花组予灯盏花胶囊（0.3 g/100 g）灌胃,正常组及模型组予等量生理盐水灌胃,疗程12周。RT-PCR检测肾组织转化生长因子β1（TGF-β1）、纤溶酶原激活物抑制因子1（PAI-1）的表达。ELISA检测大鼠肾组织白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。结果与模型组比较,灯盏花组、贝那普利组大鼠肾组织TGF-β1、PAI-1水平下降,IL-6、TNF-α含量降低（P＜0.05）,且灯盏花组较贝那普利组降低更加明显（P＜0.05）。结论灯盏花胶囊能减轻CRF大鼠肾组织的炎症反应,抑制肾组织纤维化。     

益肾导浊口服液对慢性肾衰大鼠肾脏酶组织化学的影响

观察益肾导浊口服液对腺嘌呤诱发大鼠慢性肾衰肾功能及肾脏酶组织化学的影响。结果显示本方能明显降低大鼠血清尿素氮（ＢＵＮ）和肌酐（Ｃｒ）的含量，提高碱性磷酸酶（ＡＬＰ）、琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）和三磷酸腺苷酶（ＡＴＰａｓｅ）的活性。疗效优于异搏定。     

益肾降脂胶囊对慢性肾功能衰竭大鼠整体肾功能及血脂的影响

目的 观察益肾降脂胶囊对慢性肾功能衰竭(慢性肾衰)大鼠的保护作用，并探讨其治疗机制。方法 复制慢性肾衰大鼠模型，分别给大鼠灌胃益肾降脂胶囊(治疗组)和阳性对照药(阳性对照组)，90d后测大鼠肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)及血脂、24h尿蛋白，取肾组织作病理检查；并与空白对照组比较。结果 与阳性对照组比较，治疗组BUN、SCr、24h尿蛋白及血脂降低，肾组织病理损害减轻。结论 益肾降脂胶囊具有降低血脂、改善肾功能、减轻肾间质炎症、促进受损组织恢复的作用。     

健脾排毒丸治疗腺嘌呤诱导大鼠慢性肾功能衰竭的实验研究

目的：观察健脾排毒丸对腺嘌呤诱导大鼠慢性肾衰大鼠的保护作用。方法：腺嘌呤诱导大鼠慢性肾衰模型，用健脾排毒丸干预30d，以肾功能及肾脏病理为观察指标。结果：健脾排毒丸可降低慢性肾功能衰竭模型大鼠的尿量、尿蛋白，并明显降低血中肌酐、尿素氮及胆固醇含量，病理学显示可减轻模型鼠肾组织的损害。结论：健脾排毒丸对腺嘌呤诱导大鼠慢性肾功能衰竭有较好的治疗作用。     

基于“整体功能代偿疗法”探讨增强肝的代偿功能对慢性肾衰模型大鼠肾功能的影响

目的:基于"整体功能代偿疗法"探讨增强肝的代偿功能对慢性肾衰模型大鼠肾功能指标的影响。方法:将40只健康雄性Wistar大鼠随机分为4组,即模型组、空白组、四逆散组及西药福辛普利组,对给药后的中药组与模型组进行对照,观察其血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)指标的变化。结果:实验第8周末四逆散组与模型组比较,血清Scr、BUN水平降低(P0.05),说明四逆散组在降低大鼠血清Scr、BUN,保护肾功能方面有一定作用。结论:基于"整体功能代偿疗法"增强肝的代偿功能可降低腺嘌呤致慢性肾衰模型大鼠血清Scr、BUN水平,并减轻腺嘌呤对肾脏组织损害的作用,延长慢性肾衰模型大鼠的治疗周期,缓解肾功能衰竭的进展。     

黑地黄丸对慢性肾衰竭研究的新进展

慢性肾衰竭（CRF）是影响人民健康的重大疾病之一,肾功能呈慢性进行性不可逆损害,最终导致肾功能完全丧失,严重影响患者的生存质量甚至危及生命。对于CRF的治疗,早、中期以延缓或逆转病情的进展,防止终末期肾脏病（ESRD）的发生为目标,而ESRD一旦发生就要以肾脏替代治疗为主,目前随着透析与肾移植技术的不断发展,使ESRD患者的生命得以延长,生活质理得以提高,但仍然存在并发症多、死亡率高、费用昂贵,移植条件受限等诸多问题。中医药非透析期治疗在干预CRF进展中占有极其重要的地位,且治疗本病的疗效在不断提高,日益受到国内外肾脏病学者的广泛关注和重视。因此,发挥中医特色,寻求治疗早、中期CRF的有效方药具有十分重要的意义。黑地黄丸是目前临床运用治疗CRF的有效方剂,有一定的临床研究基础,在改善CRF患者肾性贫血、骨病、营养不良、内分泌与脂质代谢紊乱、微炎症及残余肾功能保护等方面具有重要价值。黑地黄丸治疗CRF也有广泛的实验研究,通过对5/6肾切除慢性肾衰大鼠的实验研究发现黑地黄丸通过抗炎、抗纤维化、抗氧化、修复免疫炎症损伤、调节激素代谢紊乱、影响血流动力学与血液流变学等调控机制,延缓肾衰大鼠肾纤维化进程,有效保护大鼠肾功能。该文综述黑地黄丸对CRF临床和实验研究的新进展。     

固本泄浊饮通过调节肠道菌群治疗大鼠慢性肾衰竭的作用研究

目的：分析固本泄浊饮对慢性肾衰竭(CRF)大鼠肾功能生化指标、肾脏病理学变化及肠道菌群结构组成与功能上的影响,研究其治疗CRF的作用机制。方法：取SD大鼠随机分为6组：假手术(SHAM)组、模型(MOD)组、氯沙坦钾(LP,30 mg·kg^–1·d^–1)组、固本泄浊饮低、中、高剂量(GBXZYL、GBXZYM、GBXZYH,0.538、1.076、2.152 g·mL^–1)组,造模成功后按分组给药8周。给药结束后,采集血液、肾组织和粪便进行生化检测、病理组织染色、16S rRNA测序分析。结果：在药效方面,各剂量固本泄浊饮均能有效调节相关生化指标,缓解肾组织炎症反应,尤其是GBXZYM组。在肠道菌群方面,GBXZYL、GBXZYM组可提升肾衰竭大鼠肠道菌群的多样性,各剂量组均能有效调节肠道菌群的组成和相对丰度,Parabacteroides和Blautia可能是固本泄浊饮调节肠道微生物的关键标志物种。在差异代谢通路方面,物质能量代谢和激素生物合成可能是固本泄浊饮对肠道菌群调节作用的潜在机制。结论：固本泄浊饮可通过调节肠道...     

肾衰宁胶囊联合百令胶囊治疗慢性肾衰竭伴血液透析疗效及对肾功能指标的影响

目的探究肾衰宁胶囊联合百令胶囊治疗慢性肾衰竭伴血液透析患者的疗效、肾功能的影响。方法106例慢性肾衰竭患者,按随机数字表法将其分成两组,对照组53例患者采用血液透析治疗,观察组53例患者在对照组基础上采用肾衰宁胶囊联合百令胶囊。对比两组治疗前后中医证候积分、血生化指标及肾功能指标变化情况。结果治疗后,观察组倦怠乏力、口淡不渴、食少纳呆、肢体麻木、面色晦黯、腰膝酸软症候积分较对照组降低,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组Cys-C(0.85±0.44)mg/L、24 h UPQ(1.23±0.97)g较对照组Cys-C(1.25±0.47)mg/L、24 h UPQ(1.87±1.01)g降低,而Hb(107.37±7.38)g/L、Alb(33.89±7.67)g/L则较对照组Hb(98.26±6.35)g/L、Alb(29.15±5.15)g/L升高,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组SCr(265.25±35.23)μmol/L、BUN(10.03±3.07)mmol/L与对照组SCr(301.31±39.52)μmol/L、BUN(13.32±3.44)mmol/L相比显著降低,而观察组Ccr(39.88±8.14)mL/min与对照组Ccr(35.42±8.05)mL/min相比显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论肾衰宁胶囊联合百令胶囊治疗慢性肾衰竭伴血液透析患者的临床效果明显,不仅可改善患者的临床症状及血生化指标,还可提高患者肾功能。     

扶正泄浊保肾汤对慢性肾功能衰竭患者HA,LN的影响

目的:观察扶正泄浊保肾汤治疗慢性肾功能衰竭的疗效及机制。方法:70例患者以就诊次序随机分为治疗组和对照组,每组各35例;对照组给予西医综合治疗,治疗组在西医综合治疗基础上加用扶正泄浊保肾汤,疗程3个月,观察治疗前后两组患者血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、内生肌酐清除率(Ccr)及血透明质酸(HA)、层粘连蛋自(LN)变化情况。结果:治疗组总有效率77.14%,对照组总有效率51.43%,两者相比有显著差异(P<0.05);治疗组治疗后Scr,Ccr较治疗前显著改善(P<0.05),BUN较治疗前下降(P<0.01),Scr,Ccr,BUN改善优于对照组治疗后(P<0.05);治疗组HA,LN较治疗前显著下降(P<0.05),且低于对照组治疗后(P<0.01)。结论:扶正泄浊保肾汤能改善CRF患者肾功能,且具有抑制肾纤维化作用。