基于中药有效成分族的方剂物质基础研究

本文以血管紧张素转化酶(Angiotensin Converting Enzyme,ACE)抑制剂、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(3-Hydroxy-3-Methylglutaryl Coenzyme A Reductase,HMG-CoAR)抑制剂和血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)、血小板活化因子(Platelet Activating Factor,PAF)受体拮抗剂三维药效团为辨识模型,以三维数据库柔性搜索技术为辨识算法,发现了18首活血化瘀方剂及其所含20味中药可能具有的ACE、AngⅡ、PAF和HMG-COAR受体活性的物质基础。结果表明,中药有效成分族的研究将为从分子层次上揭示方剂物质基础提供方法学支撑。     

基于RAS双轴探讨中药对新型冠状病毒肺炎的干预机制

探讨新型冠状病毒肺炎(Corona Virus Disease 2019, COVID-19)肺损伤及多脏器损害与肾素-血管紧张素系统(RAS)双轴ACE/AngⅡ/AT1R、ACE2/Ang (1-7)/Mas的关联,提示血管紧张素转化酶2(ACE2)在介导SARS-CoV-2感染的易感性和免疫性中可能起双重作用。鉴于ACE2靶向治疗进退两难的境地,提出血管紧张素2型受体(AT2R)及Ang(1-7)/Mas受体或可作为中药干预的靶点。基于RAS双轴下游的信号通路,探讨中药治疗COVID-19可能的干预机制。人体内肺、胃肠、肾和血管上皮细胞高表达ACE2,印证了中医对病位主要在肺,可累及脾胃、肾和血脉的认识。根据病位,清肺、健脾、泄浊、化瘀或为主要治则。     

天麻芎苓止眩片对自发性高血压大鼠ACE2/Ang（1-7）/Mas轴的影响

目的?探讨天麻芎苓止眩片（TXZT）对自发性高血压大鼠（SHR）血管紧张素转换酶（ACE）2/血管紧张素（Ang，1-7）/Mas轴的调控作用，探讨其防治高血压病的作用机制。方法?50只SHR大鼠随机分为模型组、厄贝沙坦组、TXZT高、中、低剂量组，另取10只WKY大鼠作为正常组，厄贝沙坦组给予厄贝沙坦27 mg/kg灌胃；TXZT高、中、低剂量组分别给予TXZT 2.0 、1.0、0.5 g/kg 灌胃；模型组和正常组分别给予等量蒸馏水灌胃。各组均连续给药4周。测量干预前后大鼠收缩压；ELISA法检测血清中肾素（REN）、醛固酮（ALD）、AngⅡ、ACE2、Ang （1-7）的含量变化；免疫组化法检测主动脉AngⅡ、ACE2蛋白表达；Western Blot法检测主动脉ACE2、Mas蛋白表达；RT-PCR法检测主动脉ACE2、Mas mRNA表达。结果?与正常组比较，模型组各时间收缩压升高，血清REN、ALD、AngⅡ水平、主动脉AngⅡ表达升高，血清ACE2、Ang（1-7）水平、主动脉ACE2、Mas蛋白及mRNA表达降低（P<0.05，P<0.01）。与模型组比较，干预后各组各时间收缩压降低，主动脉ACE2 mRNA表达增加（P<0.05）；厄贝沙坦组大鼠血清REN、ALD、AngⅡ水平、主动脉AngⅡ表达降低，血清ACE2、Ang（1-7）水平升高（P<0.05，P<0.01）；TXZT高剂量组大鼠血清REN、ALD、AngⅡ水平、主动脉AngⅡ表达降低，血清ACE2、Ang（1-7）水平、主动脉ACE2蛋白、Mas mRNA表达升高（P<0.05，P<0.01）；TXZT中剂量组血清ALD、AngⅡ水平、主动脉AngⅡ表达降低，血清ACE2、Ang（1-7）水平、主动脉ACE2、Mas蛋白、Mas mRNA表达升高（P<0.05，P<0.01）；TXZT低剂量组大鼠血清AngⅡ水平降低（P<0.05）。与厄贝沙坦组比较，TXZT高剂量组给药后第2、4周、TXZT中剂量组给药后各时间、TXZT低剂量组给药后第2、3、4周收缩压升高（P<0.05，P<0.01）。结论?TXZT有明显、持续、稳定的降压作用，调节ACE2/Ang（1-7）/Mas受体轴抑制肾素-血管紧张素-醛固酮系统（RAAS）系统活性可能是其降压效应的重要机制之一。     

中药抑制血管紧张素Ⅱ的研究概述

血管紧张素Ⅱ(Angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)是肾素-血管紧张素-醛固酮系统(renin-angiotensin-aldosterone system,RAAS)中重要组成物质,具有收缩血管、调节醛固酮分泌等作用。然而在病理状态下,Ang Ⅱ可使RAAS过度激活,造成血压升高、水钠潴留、心肾重要脏器损伤等情况,且抑制Ang Ⅱ分泌的化学药物因高血钾、低血压、咳嗽等不良反应限制了临床应用。而某些中药不但可以抑制Ang Ⅱ分泌还可以在一定程度上减少不良反应的发生,因此本文将重点对具有抑制Ang Ⅱ含量的中药进行综述,旨在为临床用药提供参考。     

基于ACE/AngⅡ/AT1R通路探讨补肾降压方对盐敏感性高血压大鼠肾纤维化的作用机制

目的：探讨补肾降压方对盐敏感性高血压DS大鼠肾纤维化及肾素血管紧张素转换酶-血管紧张素Ⅱ-血管紧张素Ⅱ1型受体（ACE-AngⅡ-AT1R）信号通路的调节作用,探讨其防治高血压肾损害的作用机制。方法：选用盐敏感性高血压大鼠（Dahl salt-sensitve,DS)48只,随机数字表法分为低盐组、高盐组、缬沙坦组和补肾降压组,喂食以不同浓度钠盐饲料造模后,予药物干预8周。于干预前后测量血压。干预后酶联免疫吸附测定(ELISA)血清中血肌酐(Cr)、尿素氮（BUN）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）及转化生长因子-β1（TGF-β1)的含量。苏木精-伊红（HE）染色观察肾组织病理学改变情况,Masson染色观察肾纤维化程度。反转录PCR（RT-PCR）及蛋白质印迹法分别检测肾脏血管紧张素转化酶（ACE）及血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)mRNA及蛋白表达水平。结果：喂食3周不同浓度盐后,喂食高盐各组收缩压均较低盐组升高（P<0.01）。干预后,与低盐组比较,高盐组收缩压升高,Cr、BUN升高,血清AngⅡ及TGF-β1水平升高,HE及Masson染色显示肾脏纤维化程度加重,肾脏ACE及AT1R蛋白及mRNA表达升高（P<0.01）。与高盐组比较,缬沙坦组及补肾降压组收缩压降低,Cr、BUN降低,血清Ang Ⅱ及TGF-β1水平降低,肾脏纤维化程度减轻,肾脏ACE及AT1R蛋白及mRNA表达降低（P<0.05,P<0.01）。结论：补肾降压方有平稳降压,改善肾功能的作用,其作用机制可能与调节ACE/AngⅡ/AT1R轴进而抑制TGF-β1达到延缓肾纤维化相关。     

丹参酮ⅡA对高血压大鼠左心室肌肾素-血管紧张素系统不同成分表达量的影响

目的：探讨丹参酮Ⅱ_A（Tan）对肾性高血压大鼠肥厚左心室肌中肾素-血管紧张素系统（RAS）不同成分表达的影响。方法：建立大鼠两肾一夹型肾血管性高血压模型。实验中,所有大鼠在手术前即被随机分为4组（n=15）：假手术（Sham）组、高血压模型（Model）组、丹参酮Ⅱ_A低、高剂量组。给药组于肾动脉缩窄术后第5周开始分别给予丹参酮Ⅱ_A 35,70 mg·kg^-1·d^-1。术后每周采用标准尾套法检测大鼠血压。给药8周后处死大鼠,分离左心室,用于检测左心室重/体重、心肌胶原含量、心肌RAS不同成分表达量,包括血管紧张素转换酶（ACE）、血管紧张素转换酶2（ACE2）、血管紧张素1型受体（AT₁R）和Mas受体的mRNA表达量,以及心肌血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、血管紧张素（1-7）[Ang（1-7）]含量。结果：与假手术组相比,高血压模型组大鼠肥厚左心室中AngⅡ,Ang（1-7）含量（P<0.01）以及ACE,ACE2,AT₁R和Mas mRNA表达量均明显增多（P<0.01）。而应用丹参酮Ⅱ_A治疗则剂量依赖性抑制了肾性高血压大鼠左心室肥厚,减少了心肌AngⅡ含量,ACE,AT₁R mRNA表达量（P<0.01）,并且也进一步提高了心肌Ang（1-7）含量,ACE2和Mas mRNA表达量（P<0.01）。但是,丹参酮Ⅱ_A治疗并不影响高血压大鼠的血压。结论：丹参酮Ⅱ_A治疗可抑制肾性高血压大鼠左室肥厚的发生,其机制可能至少部分与调节心肌组织中肾素-血管紧张素系统（RAS）不同成分的表达相关。     

搜风祛痰法中药对AngⅡ诱导人脐静脉内皮细胞NF-κB mRNA及ET-1 mRNA表达的影响

目的观察搜风祛痰法对血管紧张素Ⅱ致体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs）核转录因子（NF-κB）mRNA及内皮素-1（ET-1）mRNA表达的影响。方法制备兔活心汤含药血清。采用酶消化法培养HUVECs2-3代用于实验,采用RT-PCR法测定内皮细胞NF-κB mRNA及ET-1 mRNA,随机分为5组：正常对照组,血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）组,低浓度中药血清＋AngⅡ组,中浓度中药血清＋AngⅡ组,高浓度中药血清＋AngⅡ组。结果活心汤可抑制AngⅡ导致的内皮细胞损伤,减少NF-κB mRNA及ET-1 mRNA的表达。结论活心汤可抑制AngⅡ所致的HUVECs损伤,保护血管内皮细胞功能。     

当归注射液对血管紧张素Ⅱ致乳鼠心肌细胞肥大的影响

目的：通过建立心肌细胞肥大模型，观察当归注射液对心肌细胞肥大的影响。方法：分离培养乳鼠心肌细胞，用血管紧张素Ⅱ（Angiotensin Ⅱ）诱导心肌细胞肥大，测定心肌细胞直径、蛋白含量，评价当归注射液对心肌细胞肥大的影响。结果：AngⅡ能够显著增加心肌细胞的直径和蛋白含量（P〈0．01），当归注射液对这一效应有逆转作用（P〈0．05）。结论：血管紧张素（终浓度为10^-4mmol／L）有明显促心肌肥大的作用，当归注射液（终浓度为10^-3g／mL）对血管紧张素诱导的心肌细胞肥大有一定的抑制作用。     

搜风祛痰法对血管紧张素Ⅱ诱导血管内皮细胞LOX-1mRNA及ET-1 mRNA表达的影响

目的观察搜风祛痰法对血管紧张素Ⅱ致体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs）氧化低密度脂蛋白1（LOX－1）mRNA及内皮素－1 ET－1）mRNA表达的影响。方法制备兔活心汤舍药血清。采用酶消化法培养HUVECs2～3代用于实验,采用RT-PCR法测定内皮细胞LOX－1 mRNA及ET－1 mRNA。随机分为正常对照组、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）组、低浓度中药血清＋AngⅡ组、中浓度中药血清＋AngⅡ组、高浓度中药血清＋AngⅡCR。结果活心汤可抑制AngⅡ导致的内皮细胞损伤,减少LOX—1 mRNA及ET-1 mRNA的表达。结论活心汤可抑制AngⅡ所致的HUVECs损伤,保护血管内皮细胞功能。     

当归注射液在血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞肥大时的作用及意义

目的：复制心肌细胞肥大模型，研究当归注射液在血管紧张素Ⅱ（AngiotensinⅡ，AngⅡ）刺激心肌细胞造成肥大时的作用及其意义。方法：免疫组化法检测细胞纯度，利用血管紧张素Ⅱ刺激心肌细胞，将10^-3g／L-10^-6g／L浓度的当归注射液加入到肥大心肌细胞中，考马斯亮蓝法测定心肌细胞蛋白含量。结果：细胞免疫组织化学显示培养的心肌细胞纯度达95%以上，经AngⅡ刺激后心肌细胞形态变大，加入当归注射液的细胞的蛋白含量减少。讨论：AngⅡ具有诱导心肌细胞肥大的作用；当归注射液可有效抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大。     

中风方剂数据初步分析

目的探讨中风方剂的配伍规律及其朝代分布规律,为,临床应用提供决策支持。方法筛选《中国方剂数据库》中风方剂905首。对所选中风方剂的中药名称进行信息标准化处理;用频数统计方法对方剂中单味药进行统计;用Aptiori算法对方剂分析得到核心药组,并根据成方时间将其按照朝代分类;提出方剂经典值的概念,用来表征方剂经典程度。结果中风方剂共涉及不同药味1479种、245种中医典籍;药味使用频次前3位为防风（40．22％）、当归（36．69％）和川芎（32．71％）;获得29个三元核心药团,核心药组按功效划分前三类为解表、补益、熄风;其最小支持度〉80（以频数表示）,功效以解表为主;计算得到方剂的经典值,并按照朝代分布展示;计算得到药味重现率前10的中医药典籍及它们各自的高频药,以及方剂数占全部方剂比例前10的中医药典籍。结论获得了各中医典籍中风用药的基本规律;从经典值的朝代分布得出中医学对中风研究越发系统,用药针对性越来越强;合集类中医药典籍中风方剂选取药味组方上有明显的重复性。     

咽舒复方不同配伍对3种有效成分含量影响

目的:研究咽舒复方不同配伍水提液对3种主要有效成分黄芩苷、苦参碱、氧化苦参碱含量变化的影响。方法:采用HPLC方法,测定咽舒复方不同配伍水提液中3种主要有效成分含量,比较各有效成分的含量变化。结果:山豆根、黄芩相互配伍有效成分含量远大于相应单味药。组方越大,黄芩苷溶出越少,苦参碱和氧化苦参碱受组方影响不大。结论:复方配伍对有效成分含量影响很大。     

基于人工神经网络的《伤寒论》方证知识库的构

目的：运用人工神经网络算法探讨“方”与“证”之间的非线性映射关系。方法：整理《伤寒论》中有症有方的条文,利用人工神经网络对245条数据进行训练,建立方证知识库,先选择100条作为测试样本,然后分别以桂枝汤证、麻黄汤证、小柴胡汤证、白虎汤证的症状表现输入模型,进行“症状”到“药物”的预测分析。结果：模型预测正确率79％,对桂枝汤证及麻黄汤证各药物的预测误差均在0．1以内;对小柴胡汤、白虎汤证中主药的预测误差在0．1以内,对其它药物的预测误差在0.3以内。结论：利用人工神经网络能较好的模拟方证之间的非线性映射,该思路可进一步应用于方证辨证论治体系中,为方证规范化及中医信息化服务。     

煎药机煎煮时浸泡时间对旋覆代赭汤5种有效成分溶出量的影响

目的以旋覆代赭汤中人参和甘草为主要研究对象,运用高压中药煎煮机,初步探索复方中人参和甘草在高压煎煮时浸泡时间对主要成分溶出的影响。方法浸泡时间：0、10、20、30、40、50、60、120分钟。煎煮时间：30分钟。加水量：6倍。煎煮次数：1次。用简单对比实验法确定煎煮工艺。每种工艺取旋覆代赭汤（人参6g、旋覆花9g、代赭石9g、炙甘草6g、清半夏9g、大枣4枚、干姜10g）10剂,使用高压煎药机进行煎煮,重复3次。用高效液相色谱法（HPLC法）测定其煎煮液中所含5种有效成分人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb．、甘草酸铵、绿原酸含量,计算、比较不同煎煮工艺下煎出液中各有效成分的溶出量并绘制溶出曲线。结果在煎煮时间30分钟,加水量6倍药重条件下,不同浸泡时间对旋覆代赭汤中人参、甘草等主要成分的含量没有明显影响。结论在煎煮时间30分钟,加水量6倍药重的高压煎煮条件下,煎煮前的浸泡时间对药材中部分成分的溶出无明显影响。     

搜风祛痰法对血管紧张素Ⅱ诱导血管内皮细胞iNOS mRNA及ET-1 mRNA表达的影响

目的观察搜风祛痰法对血管紧张素Ⅱ致体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs）iNOS及ET-1 mRNA表达的影响。方法制备兔活心汤含药血清。采用酶消化法培养HUVECs2-3代用于实验,采用RT-PCR法测定内皮细胞iNOSmRNA及ET-1 mRNA。结果活心汤可抑制AngⅡ导致的内皮细胞损伤,减少iNOSmRNA及ET-1 mRNA的表达。结论活心汤可抑制AngⅡ所致的HUVECs损伤,保护血管内皮细胞功能。     

中医学对运动性疲劳的认识及用药规律研究

总结中医学对运动性疲劳病因病机的认识及临床研究现状,认为脾胃气弱、肾气不足为主要病因病机。并对《中医方剂大辞典》收录治疗疲劳方剂进行数据挖掘,分析处方用药及配伍规律。共筛选方剂95首,涉及中药166味,方中益气温阳类中药出现频数最高;治疗方剂常用组合为益气温阳药配伍,演化得到核心组合6个,新处方3首。     

基于VEGFR,FGFR探讨中药方剂对COVID-19后遗症肺纤维化的干预作用

自2020年2月以来,随着疫情防控力度的加强,大批新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者治愈出院。肺纤维化是冠状病毒肺炎的后遗症之一,其不仅引起呼吸困难和肺功能指标的恶化,还具有死亡率高、预后不良的特点,严重影响患者的生活质量。血管内皮生长因子受体(vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR)、成纤维生长因子受体(fibroblast growth factor receptor,FGFR)通过介导参与肺纤维化进程的信号转导通路,抑制成纤维细胞增殖、活化与迁移,影响肺纤维的发生发展。基于中医整体观念指导下的中药方剂对肺纤维化具有良好的治疗效果,因此基于VEGFR和FGFR探讨中药对COVID-19后遗症肺纤维化的干预作用具有重要意义。该研究运用分子对接技术,通过构建VEGFR和FGFR靶点的对接模型,以原配体-CDCOKER ENERGY打分值的80%为阈值筛选方剂中的活性成分,并寻找其来源中药。通过检索成分命中率高于30%中药的性味归经及功效信息,构建中药-归经网络及中药-功效网络,结合《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第七版)》中2首、《中医疫病名方精选》中9首针对疫病恢复期的方剂,探讨了中药方剂治疗肺纤维化的规律。研究结果显示,基于VEGFR和FGFR靶点筛选获得潜在抗肺纤维化的活性成分分别为959,1 047个。VEGFR和FGFR靶点成分命中率达到30%以上的中药为黄芩、南沙参、半夏、薏苡仁、陈皮、白扁豆、白芍、桑叶、党参、玉竹、芦根、柴胡、黄芪、人参、西洋参、玄参、当归、丹参。分析上述中药性味归经及功效信息可知,治疗肺纤维化的中药主归肺(degree=14)、脾(degree=8)经,功效以补虚(degree=9)为主。结合恢复期推荐处方进行分析,上述中药在恢复期方剂中均有出现,其中以气阴两虚处方与补中益气汤命中中药数目最多。本次新型冠状病毒肺炎的主要证候为湿热蕴肺,内蕴邪热久羁,易于耗气伤津,临床观察显示,恢复期患者多处于余邪未尽、正气尚未恢复的阶段,主要表现为肺脾气虚,结合该研究分析,新型冠状病毒肺炎患者在此阶段,应当注重扶正祛邪,健脾益肺,进而缓解病毒导致的肺纤维化症状。研究结果旨在为中医药治疗COVID-19恢复期后遗症肺纤维化提供数据参考,并为临床用药提供指导。     

基于数据挖掘探索中药复方治疗围绝经期综合征的用药规律

目的探索治疗围绝经期综合征中药复方的用药规律。方法检索公开发表的文献中治疗围绝经期综合征的中药复方,建立相应数据库,采用频数分析、聚类分析、关联规则等方法对复方进行数据挖掘,对主要药物、药对（组）规律进行探讨。结果在治疗围绝经期综合征的49首中药复方中共用药100种、553频次;以使用频次〉3的共57种、504频次,作为主要药物进行聚类分析,共分为滋补药、清热药、温补药、补气药、安神药、平肝药、疏肝药、益智药8类药物;经关联规则分析,共得药对规则39条,药组规则17条。结论应用数据挖掘方法探索治疗围绝经期综合征中药复方用药规律是可行的。     

苗药组方雾化剂对染矽尘大鼠血清SOD、MDA和肺组织细胞凋亡Fas、Caspase-3基因表达的影响

目的：通过制备苗药组方雾化剂,观察苗药组方雾化剂对染矽尘大鼠血清 SOD 和 MDA 及肺组织细胞凋亡Fas和Caspase-3基因表达的影响。方法：健康 SD大鼠分成5组,其中4组进行染矽尘造模,待模型成功后随机选其中3组分别给予糖皮质激素雾化、苗药组方雾化剂雾化、苗药组方雾化加中药灌胃治疗,治疗40天后,采用 WST-1法检测超氧化物歧化酶（SOD）,TBA 法检测丙二醛（MDA）,提取实验大鼠肺脏组织 RNA ,采用反转录合成 cDNA ,通过 RT-PCR 技术检测 Fas、Caspase-3基因表达。结果：与染矽尘组比较,苗药组方雾化组大鼠血清中 SOD 活力明显升高（P〈0.05）,苗药组方雾化组大鼠血清中 MDA 含量明显降低（P〈0.05）,苗药组方雾化组大鼠肺组织 Fas 和 Caspase-3基因表达明显降低（P〈0.05）。结论：苗药组方雾化组能增强染矽尘大鼠血清SOD活力,减少染矽尘大鼠血清MDA含量,显著降低大鼠肺组织Fas和Caspase-3基因表达。     

基于数据分析清代名医孔毓礼中医药治疗痢疾的用药规律

目的：基于数据挖掘清代名医孔毓礼中医药治疗痢疾用药规律。方法：将清代名医孔毓礼所撰《痢疾论》治疗痢疾病的中医方剂录入计算机,使用Microsoft Office Excel 2003软件,建立数据库,运用统计学方法,统计分析其用药规律。结果：整理治疗痢疾病中药复方106首,涉及中药126种,总用药次数为706次。结论：临床以补虚药、温里药、清热药、解表药、利水渗湿药、理气药等为主要药类;核心单味药依次为甘草、人参、白术、茯苓、黄连、当归、干姜、白芍等。