人感染猪链球菌病的病原分离与PCR方法的快速检测

目的研究人感染猪链球菌的生物学特征，并建立一种快速、特异且敏感的检测方法。方法将疑似猪链球菌感染患者的血液进行增菌培养，对所分离的病原菌进行染色形态观察、API 32 Strep生化鉴定；同时从该疑似患者血液（抗凝血）中提取DNA为模板，并合成引物检测猪链球菌特异性16SrRNA基因片段、2型猪链球菌特异性荚膜多糖编码基因片段cps2J、溶菌酶释放相关蛋白编码基因片段mrp、细胞外蛋白因子编码基因片段ef。结果PCR扩增结果证实是猪链球菌2型，而从血液中分离的病原菌，经API 32 Strep生化鉴定，也证实为猪链球菌2型。结论人感染猪链球菌的病原学及PCR检测符合猪链球菌2型，同时该PCR反应体系是一种检测和鉴定猪链球菌2型的快速、特异且敏感的方法。     

宁波市首例人感染猪链球菌2型的实验室鉴定

目的:对首例人感染猪链球菌2型菌株进行鉴定,了解病原学及毒力。方法:将疑似猪链球菌感染患者血液、脑脊液进行增菌培养,对所分离的病原菌进行染色形态观察、APIStrep20生化鉴定;合成引物检测菌株的16SrRNA、cps2J、mrp、ef、sly、gapdh基因片段;制作cps2J、mrp、ef、sly长片段产物,进行基因序列测定。结果:从患者血液和脑脊液中分离的病原菌,经API20Strep生化鉴定编码为4641453,确认为猪链球菌2型,16SrRNA扩增结果进一步证实该菌为猪链球菌2型,基因测序结果与Genebank中注册05ZYH33的猪链球菌2型序列同源性在99%以上。结论:根据流行病学调查、临床表现和实验室鉴定结果,本起人感染猪链球菌的病原为猪链球菌2型,带有多种毒力基因其分子生物学特征典型。     

PCR快速检测猪链球菌2型方法的建立

目的建立一种快速、特异且敏感的猪链球菌菌型的检测方法。方法从疑似猪链球菌感染患者血液（抗凝血）中提取DNA为模板，并合成引物检测猪链球菌特异性16 Sr RNA基因片段、2型猪链球菌特异性荚膜多糖编码基因片段cps2J、溶菌酶释放相关蛋白编码基因片段mrp、细胞外蛋白因子编码基因片段ef。结果PCR扩增结果证实是猪链球菌2型。结论PCR反应体系是一种检测和鉴定猪链球菌2型的快速、特异且敏感的方法。     

重庆市人感染猪链球菌病的病原分离与鉴定

目的：分离和鉴定猪链球菌，为疫情的确定、预防及控制提供理论依据。方法：用血琼脂、生化反应及PCR对疑似猪链球菌感染病例、接触者和病死猪的血液、脑脊液及脏器等共30份标本进行分离培养和鉴定，阳性菌株进行药敏试验。结果：从病人脑脊液和血液中检出猪链球菌2型菌株2份。经PCR方法检测菌株，含有猪链球菌种特异性基因16SrtLNA（SPE基因），猪链球菌荚膜多糖编码基因（CPS2A基因），猪链球菌溶菌酶释放相关蛋白编码基因（MRP基因）。药敏试验表明，猪链球菌2型对四环素耐药，对左旋氟沙星、氨苄西林、青霉素、阿齐霉素、头孢吡肟、头孢肟、万古霉素等敏感。结论：猪链球菌2型是引起此次人类感染疫情的病原微生物。     

四川省人感染猪链球菌病的病原分离与鉴定

目的分离和鉴定猪链球菌,为诊断和治疗提供科学依据。方法用无选择性的血琼脂平板对患者血液、脑脊液、尸检组织和病死猪内脏进行分离培养,并对分离到的细菌进行染色形态观察;用PCR技术检测猪链球菌种基因、荚膜多糖编码基因、溶菌酶释放相关蛋白基因和溶血素基因;用VITEK2compact微生物生化鉴定仪定型。结果从4例患者血液、2例患者脑脊液、2例患者尸检组织和7例病死猪中分离到27株链球菌,经鉴定27株菌均为猪链球菌2型,猪链球菌种基因和猪链球菌三种毒力基因阳性。结论此次疫情为猪链球菌2型引起。     

东阳市一起人感染猪链球菌病疫情的流行病学和病原学分析

[目的]通过对一起人感染猪链球菌病的调查,了解人感染猪链球菌病的流行病学及病原学特点,熟悉必要的预防控制方法。[方法]通过现场调查、观察和实验室检测等方法,对患者脑脊液进行细菌培养,增菌、分离、染色、镜检。对分离株进行了生化反应、药敏试验、PCR检测等并做比较。[结果]根据所得生化结果可以判定患者分离株为猪链球菌Ⅱ型。PCR检测从患者的分离株中检出猪链球菌属特异基因tuf和种特异性16SrRNA基因,以及猪链球菌Ⅱ型特异性荚膜多糖编码基因Cps2J、猪链球菌溶菌酶释放相关蛋白编码基因mrp、溶血素基因sly、甘油醛-3-磷酸脱氢酶编码基因gapdh和细胞外蛋白因子编码基因ef共5种毒力基因。[结论]从一起人感染猪链球菌病中了解此类病的特点,提示疾控部门应采取相关措施做好此类疾病的预防,易感人群应及时做好个人防护。     

2014—2022年湖南省病人来源猪链球菌2型鉴定及毒力基因分析

目的 了解2014—2022年湖南省人感染猪链球菌病病人分离株型别分布与毒力基因携带情况,为人感染猪链球菌病的防控提供依据。方法 收集2014—2022年湖南省人感染猪链球菌病临床分离株,通过传统生化反应和聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)检测猪链球菌种特异性基因16S rRNA,同时用PCR对2型血清型鉴定基因(兼荚膜多糖毒力基因)cps2J和7种毒力基因进行扩增,用毛细管电泳检测扩增产物,分析病人来源猪链球菌的型别与毒力基因携带情况。结果 2014—2022年湖南省38株人感染猪链球菌病临床分离株中,1株为羊链球菌,32株为猪链球菌2型,5株生化鉴定为2型的菌株经分子分型鉴定为猪链球菌其他型别。32株猪链球菌2型菌株中,46.88%的菌株携带全部8种毒力基因,40.63%的菌株携带除mrp外的7种毒力基因。携带cps2J、fbps、ef、gdh、orf2、gapdh 6种毒力基因与携带cps2J、sly、gdh、orf2、gapdh 5种毒力基因的菌株均占3.13%,6.25%的菌株携带cps2J、gdh、orf2、gapdh 4种毒力基因...     

人感染猪链球菌Ⅱ型菌株的毒力基因及分子分型特征分析

目的掌握浙江瑞安地区人感染猪链球菌Ⅱ型菌株毒力因子及分子分型情况,为诊断、治疗和制定防控措施提供科学依据。方法对2012年瑞安地区分离的病原菌进行形态学观察、生化鉴定及多位点序列分型(MLST)分析,并选取胞外因子(ef)、荚膜多糖(cps2J)、溶菌酶释放蛋白(mrp)、溶血素(sly)、谷氨酸脱氢酶(gdh)等5个猪链球菌Ⅱ型主要毒力基因进行PCR检测。结果在血、脑脊液样本中分别分离出3株猪链球菌,均属于Ⅱ型,MLST分型结果显示:1株属于ST1型、2株属于ST7型。3株病原菌分为2种毒力基因型,其中ef+/cps2J-/mrp-/sly+/gdh+1株,ef+/cps2J-/mrp+/sly+/gdh+2株。结论在瑞安地区首次分离到人感染猪链球菌Ⅱ型,其中ST1克隆株属于全球常见高致病株,ST7克隆株与四川流行株相一致,可能来源于四川。毒力基因型分析表明,这3株病原菌均为高致病型。     

贵州省死亡病例1型猪链球菌的分离及分子生物学特征分析

目的 对来自贵州省1例疑似人感染猪链球菌患者的血液标本进行细菌分离鉴定,了解该菌株的分子生物学特征,为病例的快速确诊提供病原学依据。方法 采用血培养法对疑似感染猪链球菌患者的血液进行细菌分离培养,对分离菌株采用细菌16S rRNA 基因通用引物进行PCR扩增和DNA序列测定,将测序结果通过GenBank数据库的BLAST程序进行在线比对,再用猪链球菌种特异的16S rRNA 基因进行猪链球菌种的鉴定,进一步分别采用PCR检测常见强致病性血清型1、2、7和9型特异的cps 1j、cps 2j、cps 7h和cps9h基因以鉴定其血清型,并对菌株毒力基因gapdh、mrp、sly和ef进行检测。结果 血培养分离出1株链球菌可疑菌株,序列比对结果显示该分离菌株16S rRNA基因与猪链球菌的同源性最高,进一步的猪链球菌特异性PCR检测显示分离菌株16S rRNA基因为阳性,血清型特异PCR检测结果显示cps 1j基因为阳性,而cps 2j、cps 7h和cps 9h基因为阴性,毒力基因检测结果显示分离菌株gapdh,sly和ef毒力基因为阳性,而mrp为阴性。结论 本次从疑似感染猪链球菌死亡病例分离的菌株为猪链球菌1型,其毒力特征为gapdh、sly和ef基因阳性,mrp基因阴性,该病例为1型猪链球菌感染所致,且菌株毒力较强。     

2005—2018年福建省人感染猪链球菌分离株特征分析

目的 探讨2005—2018年福建省分离到的猪链球菌的分子流行病学特征。方法 通过对2005—2018年疫情分离的猪链球菌菌株进行相关常规分离培养、生化鉴定及药物敏感实验、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（matrix-assistedlaserdesorption/ionizationtime-of-flightmassspectrometry, MALDI-TOF MS）及聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）检测猪链球菌相关的16S rRNA基因和部分毒力基因荚膜多糖（capsularpolysaccharide2J,cps2J）、溶菌酶释放蛋白（muramidase-releasedprotein,mrp）、溶血素（suilysin,sly）、胞外因子（extracellular protein factor,ef），同时检测猪链球菌7个管家基因（aro A、cpn60、dpr、gki、mut S、rec A、thr A）分析菌株相关的多位点序列分型（multilocus sequence typing, MLST）型别。结果 10株菌株经...