蛋白酪氨酸磷酸酶基因启动子过甲基化与喉癌的关系

目的：探讨蛋白酪氨酸磷酸酶（PTEN）基因启动子过甲基化与喉癌的关系。方法：采用过甲基化特异性PCR和RT-PCR法分析喉癌（喉癌组）及正常喉组织（对照组）PTEN基因启动子过甲基化及其mRNA表达情况。结果：喉癌组有16例（40．0％）PTEN基因启动子过甲基化;对照组未发现过甲基化。对照组PTEN基因mRNA的高、中、低表达率及阴性率分别为77．8％（7／9）、22．2％（2／9）、0和0,淋巴结转移组分别为26．7％（4／15）、33．3％（5／15）、26．7％（4／15）和13．3％（2／15）,两组比较,PTEN mRNA表达差异有统计学意义（P〈0．05）。病理高分化PTEN基因mRNA高、中、低表达率及阴性率分别为60．0％（6／10）、30．0％（3／10）、10．0％（1／10）和0,病理低分化mRNA分别为16．7％（2／12）、25．0％（3／12）、41．7％（5／12）和16．7％（2／12）,两者比较,其mRNA表达差异有统计学意义（P〈O．05）。PTEN基因在喉癌组织中,mRNA呈现低表达的10例中有7例（70．0％）出现启动子过甲基化,mRNA呈现高表达的17例中仅有4例（23．5％）出现启动子过甲基化;PTEN基因mRNA高表达与低表达在启动子过甲基化率的差异有统计学意义（P〈O．05）。结论：PTEN基因启动子过甲基化是该基因在喉癌中失活的原因之一,PTEN基因表达下降与喉癌淋巴结转移及病理低分化有关。     

uPA基因启动子甲基化与喉鳞状细胞癌的关系

目的：探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA）基因启动子甲基化状况与喉癌侵袭转移的关系。方法：采用RT-PCR法检测40例喉癌组织中uPAmRNA表达;同时用甲基化特异性PCR（MSP）法检测uPA基因启动子甲基化状况。结果：uPA基因表达率为65．0％（26／40）;有颈淋巴结转移的喉癌与无颈淋巴结转移的喉癌比较,uPA基因表达率显著增高（P〈0．01）。uPA基因启动子甲基化率为20．0％（8／40）;有颈淋巴结转移的喉癌与无颈淋巴结转移的喉癌比较,uPA基因启动子甲基化率显著降低（P〈0．01）。甲基化的喉癌组织中均无uPA基因表达。结论：uPA基因启动子甲基化是uPA基因表达缺失的机制之一,uPA基因启动子的去甲基化机制可能与喉癌颈淋巴结转移有关。     

抑癌基因PTEN在喉癌中的表达及临床意义

目的：研究抑癌基因PTEN在喉癌组织中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组织化学SP法,检测PTEN在68例喉鳞状细胞癌组织（喉癌组）及33例癌旁正常黏膜组织（对照组）中的表达。结果：①喉癌组PTEN蛋白阳性表达率为61．8％（42／68）,对照组为100．0％（33／33）,喉癌组PTEN蛋白阳性表达率显著低于对照组（P＜0．01）。②PTEN蛋白阳性表达与喉癌临床病理特征的关系：高、中分化组与低分化组之间PTEN蛋白阳性表达率比较（79．3％：48．7％）差异有统计学意义（P〈0．01）;淋巴结转移者PTEN蛋白阳性表达率（55．0％）显著低于无淋巴转移者（71．4％）（P＜0．05）;根据临床病理分期,Ⅰ加Ⅱ期与Ⅲ加Ⅳ期之间PTEN蛋白阳性表达率（76．0％：53．5％）差异有统计学意义（P＜0．05）;随临床分期增加、喉癌分化程度降低及淋巴结的转移,PTEN蛋白阳性表达率逐渐降低。另外,PTEN蛋白阳性表达与患者年龄、性别、肿瘤组织大小及部位无关（P〉0．05）。结论：抑癌基因PTEN在喉癌的发生及发展中起重要作用,对其蛋白的检测可作为判定喉癌发生及侵袭转移能力的一项客观指标。     

喉鳞状细胞癌及转移淋巴组织中Cyclin E的表达

目的：定量检测细胞周期素E（Cyclin E）在喉鳞状细胞癌及颈部淋巴组织中的表达,探讨其在喉癌转移中的可能作用。方法：采用激光共聚焦显微镜、多参数流式细胞技术对手术切除的21例喉鳞状细胞癌（7例伴颈淋巴结转移,14例不伴颈淋巴结转移）组织标本中Cyclin E的表达含量进行检测分析。结果：Cyclin E在喉鳞状细胞癌、阳性淋巴结、阴性淋巴结中均有不同程度的表达,喉鳞状细胞癌伴颈淋巴结转移平均荧光强度为78.12士6.54,略高于不伴颈淋巴结转移者（74.93士8．82）（P〉0．05）;阳性淋巴结平均荧光强度为93．65士7．48,明显高于阴性淋巴结（30．65士7．48）（P〈0．01）,且高于喉鳞状细胞癌伴颈淋巴结转移和不伴颈淋巴结转移者（P〈0．05）。结论：Cyclin E的异常表达是喉癌发生、发展过程中一个重要的分子事件;Cyclin E的检测可望成为临床评估喉癌淋巴结转移的指标之一。     

下咽鳞状细胞癌中FHIT基因异常表达的研究

目的：分析下咽鳞状细胞癌中脆性组氨酸三联体FHIT基因转录本的表达，探讨FHIT基因与下咽鳞状细胞癌生物学行为的相关性。方法：应用nested RT-PCR及DNA测序技术检测24例下咽鳞状细胞癌组织及对应的正常组织标本中FHIT基因的表达情况。结果：24例正常配对下咽组织中23例有FHIT基因完整表达，1例未见任何转录本，9例（37．5％）下咽癌标本中检测出FHIT基因mRNA转录本的异常表达。高分化鳞状细胞癌FHIT基因转录本异常率为28．6％（2／7），中分化鳞状细胞癌为50．0％（4／8），低分化鳞状细胞癌为33．3％（3／9），各个病理分级之间的差异无统计学意义（r=-0．0198，P〉0．05）；无淋巴结转移下咽癌FHIT基因转录本异常率为33．3％（4／12），伴淋巴结转移癌组41．7％（5／12），差异无统计学意义（P〈0．01）。2例原发性下咽癌经测序发现，分别缺失exon8，exon7～9，所有缺失的起始处均为外显子之间的连接部位。结论：位于3P14．2的FHIT基因在下咽鳞状细胞癌中存在较高的缺失率，提示FHIT基因为下咽鳞状细胞癌的候选抑制基因，在下咽癌的发生、演化和进展中起着重要作用。     

信号转导和转录激活因子3在喉癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨信号转导和转录激活因子3（STAT3）及磷酸化STAT3（P—STAT3）在喉癌组织中的表达情况及活化STAT3蛋白表达与喉癌临床病理特征的关系。方法：用免疫组织化学法检测50例手术切除的喉癌组织（喉癌组）和10例癌旁正常组织（对照组）中STAT3及P—STAT3蛋白的表达。结果：喉癌组中有36例（72．0％）STAT3蛋白表达阳性,29例（58．0％）P—STAT3蛋白表达阳性,对照组均为阴性表达（均P〈0．01）。STAT3主要表达在细胞质,P—STAT3主要表达在细胞核内;STAT3及P-STAT3在低分化、临床分期较晚和有淋巴结转移的喉癌患者中阳性表达率高（P〈0．05或P〈0．01）。结论：喉癌组织中存在STAT3和P—STAT3的高表达,并与临床病理分期和淋巴结转移有关;STAT3的表达可作为判定喉癌生物学行为的一个指标。     

喉鳞状细胞癌与端粒酶亚单位表达

目的 检测喉鳞状细胞癌（简称喉鳞癌）相关组织中端粒酶亚单位（端粒酶逆转录酶、端粒酶相关蛋白1和端粒酶RNA组分hTR）mRNA的表达,研究不同的端粒酶亚单位的表达与喉鳞癌发生的关系。方法 对34例喉鳞癌病例,采用逆转录聚合酶链（RT-PCR）技术检测上述三种端粒酶亚单位在喉癌组织、对应的癌旁组织和转移淋巴结中的mRNA表达。结果 喉癌组织、对应癌旁组织和转移淋巴结中端粒酶逆转录酶mRNA的阳性率分别为88．2％（30／34）、5．9％（2／34）和90．0％（9／10）,三种组织的阳性率间存在显著性差异（P〈0．05）,喉癌组织和转移淋巴结组织的阳性率显著高于癌旁组织（P〈0．05）。端粒酶相关蛋白1和端粒酶RNA组分mRNA在喉癌组织、对应癌旁组织和转移淋巴结中的阳性率均为100％。结论 本研究结果提示端粒酶依赖途径是喉鳞癌发生的方式之一。与端粒酶相关蛋白1和端粒酶RNA组分比较,端粒酶逆转录酶表达的上调在端粒酶依赖途径的喉鳞癌的发生中占有更重要的地位。     

趋化因子受体CXCR4和CCR7在喉癌组织中的表达

目的：观察喉癌组织中趋化因子受体CXCR4和CCR7的表达情况,初步了解CXCR4和CCR7与喉癌恶性表现的关系,从而为临床治疗提供理论基础。方法：应用免疫组织化学SP法对实验组30例喉癌组织标本和对照组18例正常喉部黏膜组织标本中的趋化因子受体CXCR4和CCR7的表达进行检测,并应用计算机辅助图像分析仪对表达结果进行图像分析,然后进行统计学分析。结果：①趋化因子受体CXCR4和CCR7蛋白在喉癌组织中呈强阳性表达,且CXCR4和CCR7蛋白表达水平显著高于对照组（P〈0．01）;②癌细胞分化程度高的癌组织趋化因子受体CXCR4和CCR7蛋白表达水平显著低于分化程度低的癌组织（P〈0．05）,CXCR4和CCR7蛋白表达水平在Ⅲ～Ⅳ期较Ⅰ～Ⅱ期明显升高（P〈0．01）,淋巴结转移组较无淋巴结转移组均明显升高（P〈0．01）。结论：趋化因子受体CXCR4和CCR7在喉癌组织中的高表达,其表达水平与喉癌的病理分化程度、临床分期及颈部淋巴结转移有关。     

喉鳞状细胞癌中BAG-1和 p53基因的表达及其临床意义

目的：研究BAG-1和p53基因在喉鳞状细胞癌组织中的表达,探讨BAG-1在喉鳞状细胞癌发生、发展中的作用及与p53的关系。方法：运用免疫组织化学SP技术,检测40例喉鳞状细胞癌组织,27例喉癌旁正常组织及20例声带息肉组织中BAG-1与p53的表达。结果：BAG-1在喉癌中表达阳性率为72．5％,较喉癌旁组织（18．5％）、声带息肉组织（20．0％）高（P〈0．05）,其表达与预后呈负相关（P〈0．05）;p53在喉癌中表达阳性率为65．0％,而在喉癌旁组织和声带息肉组织中均无表达,与在喉癌组织中的表达相比差异有统计学意义（P〈0．05）;其表达与病理分化程度、颈淋巴结转移及预后呈负相关（P〈0．05）;在喉癌组织中BAG-1与p53表达之间未见显著性相关（P〉0．05）。结论：BAG-1和p53基因的过度表达与喉鳞状细胞癌的发生、发展存在一定的关系。BAG-1可作为早期诊断喉癌的一种生物标记,尤其是细胞核BAG-1定位可作为一种不良预后的预测因子;p53表达与喉癌颈淋巴结转移有关,可单独作为喉癌的预后指标。     

uPA及nm23-H1蛋白表达与喉鳞癌侵袭转移的关系

目的探讨喉鳞癌中uPA及nm23-H1的表达与喉鳞癌侵袭转移的关系。方法采用免疫组织化学方法检测uPA及nm23-H1在55例喉癌中蛋白水平的的表达。结果喉癌中uPA及nm23-H1的阳性表达率分别为67．3％（37／55）和54．5％（30／55），且二者表达呈负相关（P〈0．05）。uPA的表达与临床分期、颈淋巴结转移呈正相关（P〈0．05）。nm23-H1的表达与临床分期、颈淋巴结转移呈负相关（P〈0．05）。uPA阳性同时nm23-H1阴性表达者，颈淋巴结转移率明显高于uPA阴性同时nm23-H1阳性表达者（P〈0．05）。结论uPA及nm23-H1的表达与喉癌的颈淋巴结转移及临床分期密切相关，联合检测具有一定的临床意义。     

KAI1基因在喉癌及转移淋巴结中的表达

目的 通过研究KAI1基因在人类喉鳞状细胞癌及转移淋巴结中的蛋白表达情况,试图阐明KAI1基因蛋白的表达与喉癌转移之间的关系。方法 取喉鳞状细胞癌组织标本蜡块40例及转移的淋巴结13例,以癌旁正常组织标本蜡块30例作为对照,采用免疫组织化学SP法,检测KAI1单克隆抗体在喉鳞状细胞癌、转移淋巴结及癌旁正常组织标本中蛋白的表达,并结合患者临床病理资料进行统计学分析。结果 KAI1基因在癌旁正常组织、喉鳞状细胞癌及转移淋巴结中的表达率分别为93.33%（28/30）、62.50%（25/40）、30.77%（4/13）,且各组之间差异均有统计学意义（P＜0.05）。KAI1基因的蛋白表达与喉鳞状细胞癌的临床分期差异有统计学意义（P＜0.05）,与性别、年龄、原发部位、病理学分级及有无淋巴结转移无关(P＞0.05)。 结论 KAI1基因在喉鳞状细胞癌转移淋巴结中的表达较在喉鳞状细胞癌中的表达呈显著性下降,该基因可能在喉癌转移过程中起一定作用。     

喉癌喉咽癌哨位淋巴结的临床初步研究

目的 探讨喉癌喉咽癌哨位淋巴结的检测及其对颈淋巴结转移的预测价值。方法 用手术中注射蓝染料的方法,对29例颈淋巴结NO的喉癌喉咽癌患者进行了哨位淋巴结的临床研究。手术中取蓝染的哨位淋巴结作快速冰冻病理检查,并与HE染色病理检查结果及颈清扫切除的淋巴结病理检查对照,观察哨位淋巴结转移对颈淋巴结转移癌的预测值。结果 29例中28例成功地显示了哨位淋巴结,成功率达96．6％。每例发现蓝染的哨位淋巴结1－4个,平均每例则检出2．5个。有3例患者的哨位淋巴结检测有肿瘤转移,HE染色病理检查及颈清扫切除的淋巴结病理检查均证实颈淋巴结转移。25例哨位淋巴结冰冻病理检查阴性患者,颈淋巴结清扫标本亦未查见淋巴结转移。哨位淋巴结对颈淋巴结转移的阳性正确率和阴性预测率为100％。结论 哨痊淋巴结检测对喉咽癌的淋巴结转移有重要的预测价值。     

Tiam1蛋白在喉癌中的表达及其临床意义

目的检测T淋巴细胞侵袭转移诱导因子1（Tiam1）蛋白在喉癌组织中的表达,并探讨其表达水平与喉癌临床病理特征和预后之间的关系。方法采用免疫组织化学染色技术检测Tiam1蛋白在98例喉癌石蜡组织切片中的表达,并统计分析Tiam1蛋白表达水平与喉癌临床病理特征和预后之间的关系。结果Tiam1蛋白的表达与喉癌的淋巴结转移（P<0.001）、临床分期（Ⅰ期、Ⅱ期/Ⅲ期、Ⅳ期）（P=0.027）、组织病理学分级（P=0.020）及复发（P=0.003）密切相关;Kaplan Meier生存曲线分析结果显示Tiam1高表达组的5年无复发生存率（P=0.001）和5年总生存率（P<0.001）均明显低于Tiam1低表达组;而且通过Kaplan Meier生存曲线分析Tiam1蛋白表达和淋巴结转移情况与头颈鳞癌患者预后之间的关系,发现Tiam1高表达并有淋巴结转移组的5年无复发生存率和5年总生存率明显低于其它（Tiam1低表达或无淋巴结转移）组（P均<0.001）;多因素Cox比例风险回归模型进一步显示,淋巴结转移（P=0.001）及Tiam1表达水平（P=0.020）为喉癌的独立预后因素。结论Tiam1在喉癌组织中表达显著升高,且其高表达与喉癌患者的淋巴结转移、复发及预后密切相关。Tiam1可能在喉癌的发生、发展中起重要作用,其表达水平对喉癌的复发及预后具有评估价值。     

Small cell carcinoma of the larynx: imaging findings

Small cell carcinoma of the larynx is an uncommon epithelial tumor, which is the most aggressive subtype of neuroendocrine carcinomas. Because of its nonspecific clinical and radiological manifestations, the diagnosis of small cell carcinoma of the larynx is essentially based on the light microscopic examination aided by electron microscopy or immunohistochemical staining. We report a case of supraglottic small cell carcinoma accompanied by large bilateral cervical lymph node metastasis ocurring in a 70-year-old man. On CT scans, no area of low attenuation indicating necrosis was demonstrated within such large metastatic lymph nodes. We suggest that small cell carcinoma of the larynx should be included in the diagnostic considerations when a laryngeal mass is accompanied by large cervical lymph nodes without necrosis shown by CT.     

Histopathological predictors of occult lymph node metastases in supraglottic squamous cell carcinomas

Lymph node metastasis appears to be the most important factor determining survival in patients with squamous cell carcinoma of the larynx. Supraglottic laryngeal carcinomas have a known tendency to metastasize to cervical lymph nodes because of the extensive lymphatic network present. This retrospective cohort study was conducted to define possible histopathological parameters affecting cervical lymph node metastasis and then using these parameters to create a scale to predict occult lymph node metastasis in supraglottic squamous cell carcinoma. The pathological slides of 61 operated patients were reevaluated for tumor grade, lymphatic-vascular invasion, invasion pattern of tumor margins, perineural invasion and lymphocytic infiltration. Grade (P < 0.001), lymphatic-vascular invasion (P < 0.001) and tumor margins (P = 0.007) were found to be closely associated with neck metastasis. To define the risk factors for occult metastasis, a grading scale was created by using grade (G), lymphatic-vascular invasion (L) and tumor margin (M) findings of patients. None of the patients with a GLM value of zero developed occult metastasis. On the other hand occult metastasis was found in 58.8% of N0 patients with a GLM value that was more than zero. These findings indicate that patients with high-grade tumors having infiltrating borders and lymphatic-vascular invasion have a high risk for occult metastasis so that elective treatment of the neck either by neck dissection or radiotherapy should be added to therapy. Serial sections of specimens are needed to avoid missing metastatic loci of disease. Received: 19 February 1999 / Accepted: 30 December 1999     

Tiam1基因表达与鼻咽癌浸润转移的关系

目的:探讨Tiam1基因表达与鼻咽癌浸润转移的关系。方法:应用RT-PCR技术,对41例鼻咽癌组织和20例正常鼻咽部组织进行Tiam1mRNA表达水平的检测。结果:41例鼻咽癌组织的Tiam1mRNA平均表达水平(1.83±0.73)明显高于正常鼻咽部组织(0.87±0.45)(P<0.01);鼻咽癌组织中Tiam1mRNA高表达率与临床分期、T分级呈正相关;有淋巴结转移者Tiam1mRNA高表达率为59.3%(16/27),无淋巴结转移者为21.4%(3/14),二者之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Tiam1基因在鼻咽癌组织中的表达明显高于正常鼻咽部组织,其过表达与鼻咽癌浸润转移呈正相关。     

肿瘤浸润抑制因子在喉癌复发及转移中的作用

目的 :研究肿瘤浸润抑制因子 (E cadherin)在喉癌复发、转移中的作用 ,以探讨喉癌复发转移的机制。方法 :利用PCR、PCR SSCP等分子生物学方法 ,检测E cadherin基因第 5、7对外显子在喉癌组织中的基因突变。结果 :正常喉组织有E cadherin基因表达 ,无基因突变 ;癌旁组织第 5对外显子突变率为 2 .5 %。第 5、7对外显子在喉复发癌组织中的基因突变率分别为 2 8.5 7%、0 % ;淋巴结转移阳性组分别为 4 7.0 6%、64.71% ,淋巴结转移阴性组分别为 0 %、6.2 5 % ;且基因突变率随肿瘤TNM临床分期而增高。结论 :通过对喉癌组织中E cadherin基因突变的检测 ,可以判断肿瘤复发、转移的倾向性 ;E cadherin基因突变可能是喉癌复发、转移的分子机制之一     

喉癌喉前淋巴结转移

回顾性调查1865例行全喉切除的喉癌病例．发现120例喉癌有喉前淋巴结，其中24例发生喉前淋巴结转移。非转移性喉前淋巴结最大直径从0．2cm大小到1cm左右不等，转移性喉前淋巴结从0．2cm到最大直径1．9cm。喉前淋巴结转移率为1．3％．其中声门上癌、声门癌、声门下癌和跨声门癌的喉前淋巴结转移率分别为0．39％、0．73％、5．02％和2．55％。喉前淋巴结转移与细胞分化无关，与喉癌原发部位及肿瘤分期有关，声门下癌或侵犯声门下区的喉癌较声门上癌和声门癌易发生喉前淋巴结转移，跨声门侵犯的喉癌较声门上癌易发生喉前淋巴结转移；T3、T4期喉癌，较T1、T2期喉癌易发生喉前淋巴结转移；有喉前淋巴结转移的喉癌．易发生颈侧淋巴结转移。