(1,3)-β-D葡聚糖检测联合CD4~+ T淋巴细胞计数对AIDS合并侵袭性真菌病的诊断价值

目的探讨(1,3)-β-D葡聚糖(BDG)检测(简称G试验)联合CD4+T淋巴细胞计数对获得性免疫缺陷综合征(AIDS)合并侵袭性真菌病(IFD)诊断的价值。方法选择2013年1月至2014年5月在广西医科大学第十附属医院感染科住院怀疑合并IFD的AIDS患者297例,治疗前同时行G试验和CD4+T淋巴细胞计数。根据IFD的诊断标准将患者分为IFD组(拟诊、临床诊断和确诊)和非IFD组。分析G试验作为IFD诊断方法的敏感性、特异性和G试验联合CD4+T淋巴细胞计数的敏感性、特异性。结果 G试验诊断AIDS合并IFD的敏感性为75.3%,特异性为87.4%。根据G试验结果绘制受试者工作特征(ROC)曲线,曲线下面积为0.861(95%可信区间0.720~0.865)。G试验和CD4+T淋巴细胞联合检测的敏感性为92.9%,特异性为88.8%。结论G试验对AIDS合并IFD有较好的诊断价值,G试验联合CD4+T淋巴细胞计数可明显提高AIDS合并IFD的临床诊断价值。     

(1,3)-β-D葡聚糖检测联合其他微生物学检测在侵袭性真菌病诊断中的相关性分析

目的研究(1,3)-β-D葡聚糖检测(G 试验)联合真菌涂片、真菌培养及隐球菌荚膜抗原检测等微生物学检测在侵袭性真菌病(IFD)诊断中的临床意义。方法收集2018年2-12月在复旦大学附属华山医院同时进行G试验、真菌涂片、真菌培养的942例患者资料,其中184例另行隐球菌荚膜抗原检测。回顾性分析G试验、真菌检测和隐球菌荚膜抗原检测结果,分别计算不同检测方法及联合检测的灵敏度、特异度、阳性和阴性预测值。结果 942例患者中,确诊IFD 115例,拟诊33例,疑似154例,非感染640例。对除隐球菌病外的IFD诊断的灵敏度、特异度:G试验单独检测时为92.9%、59.0%;真菌涂片为57.5%、96.6%;真菌培养为77.9%、93.0%;三者联合检测时为97.3%、93.2%。对于隐球菌病,G试验灵敏度、特异度分别为77.1%、81.2%。结论 G试验灵敏度良好,特异度一般。将G试验与传统真菌学检测方法联合使用,能弥补单项检测不足,可作为辅助指标为临床及时正确诊断提供帮助。     

1-3-β-D葡聚糖和半乳甘露聚糖检测与血培养真菌结果的相关性分析

目的探讨血清1,3-β-D葡聚糖检测(G试验)和半乳甘露聚糖抗原检测(GM试验)对侵袭性真菌病(IFD)诊断的灵敏度、特异度等临床诊断性能。方法对该院2017年3月至2018年6月间同时做了G试验、GM试验和真菌血培养的住院患者结果进行回顾性相关分析,收集临床疑似IFD病例共455例。以血培养真菌阳性作为IFD确诊指标,将病例分为IFD组和非IFD组,其中IFD组49例;非IFD组406例;分析G试验和GM试验诊断侵袭性真菌感染的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、约登指数、符合率等效能指标。结果 IFD组G试验和GM试验检测值为(243.7±268.3)pg/mL和0.47±0.70;非IFD组G试验和GM试验检测值为(23.1±52.3)pg/mL和0.25±0.24,两组间比较差异有统计学意义(P0.001)。G试验和GM试验对IFD诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、约登指数、符合率分别为65.3%、95.3%、62.7%、95.7%、0.606、92.1%和24.5%、93.6%、31.6%、91.1%、0.181、86.2%;G试验与GM试验联合诊断IFD的特异性达99.0%。结论 G试验与GM试验是IFD早期诊断的实验室重要指标,联合检测可提高诊断灵敏度和准确度;特别是阴性结果对排除IFD的意义更大,对其合理应用可有效提高IFD的诊治水平。     

艾滋病合并隐球菌性脑膜炎70例临床分析

目的探讨艾滋病(AIDS)合并隐球菌性脑膜炎(CM)患者脑脊液检测指标的变化特点。方法回顾性分析2014年1月至2016年10月北京地坛医院收治的AIDS合并CM患者70例,分别采用真菌培养法、墨汁染色法、隐球菌抗原乳胶凝集法检测隐球菌。结果患者脑脊液外观均为无色透明,不浑浊,常规检测结果无明显变化,其中白细胞计数为(27.6±31.9)个/微升,血糖水平为(2.74±0.67)mmol/L,蛋白水平为(69.8±53.9)mg/L。外周血中CD4+T细胞计数为(29.9±25.3)个/微升,其中54例50个/微升,15例为50~100个/微升,1例为105个/微升。隐球菌抗原乳胶凝集法的阳性检出率为100.0%(70/70),真菌培养法的阳性检出率为57.1%(40/70),墨汁染色法的阳性检出率为80.0%(56/70)。对真菌培养阳性的40株隐球菌进行药敏试验,氟胞嘧啶、二性霉素B、伊曲康唑、伏立康唑敏感37株,中介3株。临床采用单一或联合的抗真菌药对70例AIDS合并CM患者进行治疗,好转48例,未愈15例,死亡7例,病死率为10%。结论采用墨汁染色法、真菌培养法及隐球菌抗原乳胶凝集法进行联合检测,有助于AIDS合并CM患者的早诊断,可大大提高CM治愈好转率。     

G试验联合GM试验在上饶地区侵袭性真菌感染中诊断价值的研究

目的 探究在上饶地区侵袭性真菌感染(IFD)诊断中G试验联合GM试验的应用价值。方法 回顾性分析2021年9月至2022年9月江西医学高等专科学校第一附属医院疑似IFD的156例患者,其中58例确诊者设为IFD组、98例未感染者设为对照组,进行G试验、GM试验以真菌培养,分析检测结果,并计算诊断效能。结果 IFD组真菌培养、G试验以及GM试验结果明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。G试验联合GM试验诊断IFD的准确率为93.59%,明显高于真菌培养的75.00%、G试验的85.26%、GM试验的80.77%,差异有统计学意义(P<0.05)。G试验联合GM试验诊断IFD的灵敏度为98.89%、特异度为90.82%、阳性预测值为86.36%、阴性预测值为98.89%,分别高于真菌培养、G试验、GM试验,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IFD诊断中G试验和GM试验均具有较高应用价值,且联合检测的诊断效能更高,适用于早期筛查,以便指导临床尽早给予经验性抗真菌治疗,然后根据培养结果和药敏分析调整抗真菌药物。     

新生隐球菌常用哪些检测方法?

答 :新生隐球菌的检测方法有墨汁负染法 ,如脑脊液标本检查。乳胶凝集试验用于检测新生隐球菌的荚膜多糖抗原 ,可以检测脑脊液、血液及其他体液标本。该试验具有很高的特异性和敏感性 ,是少数可以靠免疫学方法诊断的真菌性疾病。该试验还可以检测滴度 ,对疗效监测和估计预后有一定的指导意义。咖啡酸试验 :新型隐球菌可产生深棕色色素。尿酶试验 :新生隐球菌能够产生尿素酶 ,常用Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎｕｒｅａａｇａｒ培养 ,新生隐球菌产生的尿素酶分解尿素 ,使培养基变为红色。新生隐球菌常用哪些检测方法?@陈剑 @李若瑜…     

HIV/AIDS合并侵袭性真菌感染GM和BG抗原检测的价值

目的 探讨半乳甘露聚糖(GM)和(1,3)-β-D-葡聚糖(BG)检测对人类免疫缺陷病毒(HIV)/获得性免疫缺陷综合征(AIDS)合并侵袭性真菌感染(IFI)的诊断价值.方法 收集在南宁市第四人民医院住院的1333例HIV/AIDS患者的病历资料,将患者分为IFI组380例和非IFI组953例,检测患者血清GM、血浆BG水平,留取血液、痰液、灌洗液等标本行真菌培养.分析GM、BG单独及联合检测对HIV/AIDS合并IFI的诊断效能,比较IFI组和非IFI组GM、BG水平,分析患者真菌分布情况.结果 GM、BG联合(并联和串联)检测的灵敏度、特异度达到86.05％、99.48％,优于GM单独检测的56.84％、88.35％及BG单独检测的66.05％、92.24％,差异均有统计学意义(P<0.05).IFI组GM、BG水平高于非IFI组,差异均有统计学意义(P<0.05).IFI组真菌培养以念珠菌(56.32％)及马尔尼菲篮状菌(51.84％)为主,非IFI组以念珠菌(98.25％)为主.结论 HIV/AIDS合并IFI时GM、BG水平升高,二者联合检测可提高IFI的诊断效能,并可为HIV/AIDS合并IFI的早期诊治提供依据.     

炎症因子检测、GM试验和G试验对儿科重症监护室患儿侵袭性真菌病的早期诊断价值

目的探讨炎症因子检测、半乳甘露聚糖抗原检测(GM试验)和(1,3)-β-D葡聚糖试验(G试验)对儿科重症监护室(PICU)患儿侵袭性真菌病(IFD)的早期诊断价值。方法选取具有IFD高危因素的患儿250例分为确诊IFD组、拟诊IFD组和非IFD组,检测患儿血清和肺泡灌洗液中炎症因子白细胞介素(IL)-10、IL-6、IL-8和IL-17表达水平,并分别进行G试验和GM试验。比较3组患儿炎症因子表达水平差异,以及G试验和GM试验诊断IFD的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。结果确诊IFD组和拟诊IFD组患儿血清中IL-10、IL-6、IL-8和IL-17表达水平明显高于非IFD组,肺泡灌洗液中IL-6、IL-8表达水平明显高于非IFD组,差异均有统计学意义(P<0.05)。G试验和GM试验联合诊断IFD的灵敏度为95.97%,特异度为93.65%,阳性预测值为93.70%,阴性预测值为95.83%,均明显高于单项检测,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论GM试验和G试验联合检测能明显提高对PICU患儿IFD早期诊断的灵敏度,为临床早期治疗提供依据;动态监测PICU患儿炎症因子表达水平,有助于判断IFD的严重程度和治疗效果及预后。     

艾滋病并发隐球菌脑膜炎14例临床分析

目的分析艾滋病(AIDS)并发隐球菌脑膜炎临床特点,为临床诊治提供信息。方法对近3年北京佑安医院收治的14例AIDS并发隐球菌脑膜炎患者的临床资料进行回顾性分析。结果 14例患者均以头痛为主诉入院,10例(71.4%)有发热、呕吐等主要伴随症状,脑膜刺激征及视神经乳头水肿的发生率也较高,分别为7例(50.0%)和8例(57.1%),抽搐及意识障碍等脑实质受损的表现发生率较低,分别为3例和2例。85.7%(12/14)的患者CD4+T淋巴细胞<100/μL。85.7%(12/14)的患者颅内压增高,其中一半患者脑脊液压力大于35 cmH2O,13例(92.9%)患者的脑脊液细胞数和9例患者(64.3%)的脑脊液蛋白水平轻度增高,6例(42.9%)脑脊液葡萄糖水平减低,8例(57.1%)氯化物水平减低。11例(78.6%)脑脊液隐球菌涂片阳性,6例(42.9%)脑脊液隐球菌培养阳性,12例(85.7%)脑脊液隐球菌荚膜多糖抗原检测阳性。4例(28.6%)头颅CT或核磁共振检查表现异常,包括脑实质损伤2例,脑积水1例及占位性病变1例。经治疗2例(14.3%)死亡,1例自动出院,11例病情好转出院,平均住院天数为60 d。结论 AIDS并发隐球菌脑膜炎的患者多以头痛为主诉,伴发热及颅内压增高等表现多见,而脑实质损伤的表现较少。患者的CD4+细胞数多低于100/μL,脑脊液压力大多明显增高,隐球菌抗原检测灵敏度较高,而影像学检查很少有特异性发现。该病目前的诊断及治疗仍相对困难,临床医师应当予以更多的重视。     

探讨新型隐球菌脑膜炎不同检测方法的诊断价值

目的比较新型隐球菌脑膜炎不同检测方法的试验效果,评价各方法学在新型隐球菌脑膜炎诊断中的临床价值。方法采用隐球菌抗原胶体金免疫层析法、印度墨汁染色、隐球菌真菌肉汤培养在隐球菌感染时对脑脊液标本进行同期检测并对结果进行比较,评价各方法学优劣。结果隐球菌胶体金法灵敏度100%,特异性98.33%;墨汁染色灵敏度65.95%,特异性98.33%;隐球菌培养灵敏度63.63%,特异性100%。结论不同检测方法在隐球菌脑膜炎诊断中都具有一定的临床意义,隐球菌抗原胶体金免疫层析法对隐球菌脑膜脑炎患者的快速诊断具有重要的参考价值。     

LA检测隐球菌荚膜多糖抗原在隐球菌性脑膜炎诊断中的应用

目的 探讨乳胶凝集试验（LA）在隐球菌性脑膜炎中的早期诊断价值.方法 收集56例确诊的隐球菌性脑膜炎患 者和25例结核性脑膜炎、病毒性脑膜炎患者的脑脊液,采用乳胶凝集试验检测隐球菌荚膜多糖抗原,并与真菌培养和直接镜检方法相比较,评价其诊断的灵敏度和特异度.结果 乳胶凝集试验、真菌培养和直接镜检3种方法诊断的灵敏度分别为91.1％、69.6％和73.2％,乳胶凝集试验特异度分别为96.0％、100％、100％.结论 乳胶凝集试验检测隐球菌荚膜多糖抗原可作为隐球菌性脑膜炎的早期诊断方法.     

TaqMan荧光定量PCR检测新型隐球菌方法的建立

目的建立TaqMan荧光定量PCR方法定量检测新型隐球菌基因组DNA,为检测隐球菌性脑膜炎提供重要方法。方法在国家生物技术信息中心(NCBI)查找新型隐球菌各亚型的ITS-rDNA序列,序列比对后设计特异性引物和探针,扩增片段为114bp,构建质粒标准品,调整质粒浓度为1.42×10~8 copy/μL~1.42×10copy/μL共8个浓度梯度,分别取2μL作为模板,优化反应条件,建立标准曲线,进行敏感性、特异性、重复性评价,并检测临床确诊的15例隐球菌脑膜炎感染菌株。结果建立的荧光定量PCR可以检测2.84×10~2拷贝的质粒DNA,对临床分离的各10例其他真菌、细菌、乙型肝炎病毒DNA和人类基因组DNA均无扩增曲线,重复性良好,3个浓度的批间变异系数分别为2.86%、1.48%、1.36%,可准确检测15例新型隐球菌。结论成功建立检测新型隐球菌的荧光定量PCR方法,敏感性和特异性较高,结果稳定可靠,可早期、快速诊断隐球菌性脑膜炎。     

胶体金免疫层析法检测血清隐球菌抗原在肺隐球菌病诊断中的应用价值

目的探讨血清隐球菌抗原-胶体金免疫层析法(CrAg-LFA)在肺隐球菌病诊断中的应用价值。方法回顾性研究2016年1至11月中南大学湘雅二医院收治的肺隐球菌病及非肺隐球菌病患者共547例,采用CrAg-LFA筛查血清中隐球菌抗原,分析血清CrAg-LFA对肺隐球菌病诊断的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值。结果 10例肺隐球菌病组患者采用CrAg-LFA测定阳性8例,敏感性为80.0%(8/10);非肺隐球菌病组患者537例,CrAg-LFA测定阴性534例,特异性为99.4%(534/537),阳性预测值和阴性预测值分别为72.7%和99.6%。结论 CrAg-LFA是一种简单快速的肺隐球菌病筛查试验,可用于肺隐球菌病的辅助诊断。     

获得性免疫缺陷综合征合并新型隐球菌脑膜炎临床分析

目的总结分析新型隐球菌性脑膜炎的临床特点,提高对获得性免疫缺陷综合征(AIDS)合并隐球菌性脑膜炎的认识。方法分析总结住院的72例患者的临床特点,在给予高效抗反转录病毒治疗的同时,给予抗真菌治疗。结果 AIDS合并隐球菌性脑膜炎的临床表现以颅内压增高(81.9%),脑膜刺激征为主(84.7%),全部合并有概率性感染(100%),免疫功能低表现为CD4+<50 cell/μL(83.3%)。结论 AIDS合并隐球菌性脑膜炎病情重、预后差、病死率高(37.5%),反复实验室病原学检查结果是诊断新型隐球菌性脑膜炎的主要依据。两性霉素B联合氟胞嘧啶治疗新型隐球菌性脑膜炎仍是安全、有效的。     

自身免疫性脑炎并发培养阴性抗原阳性肺隐球菌病的临床研究

目的 分析1例隐球菌培养阴性,宏基因组测序检出新型隐球菌序列,隐球菌抗原检测阳性的自身免疫性脑炎并发肺隐球菌感染病例的诊治过程,旨在为临床诊断和治疗肺隐球菌病提供帮助。方法 分析1例血清隐球菌荚膜多糖抗原阳性、自身免疫性脑炎患者的临床资料,分别采用常规检测、生化检测、微生物培养和气管镜肺泡灌洗液宏基因组二代测序(mNGS)等方法进行复查,明确肺炎感染类型,并结合文献对肺隐球菌病进行复习讨论。结果 该例患者HIV检测阴性,痰液Xpert MTB/RIF结核分枝杆菌检测阴性;痰液、肺泡灌洗液细菌培养结果为正常菌群生长,隐球菌培养阴性;血培养阴性。脑脊液常规检测、生化检测、微生物培养结果均正常,隐球菌抗原阴性,墨汁染色未检出隐球菌;气管镜肺泡灌洗液mNGS结果提示新型隐球菌,序列数6,相对丰度46.15%,覆盖度0.001 0%。口服氟康唑治疗3个月后患者肺部CT检查结果显示右肺下叶类圆形结节影伴空洞较之前缩小。结论 临床工作中遇到免疫功能低下、且肺部影像学检查出空洞的患者,血清隐球菌荚膜多糖抗原和呼吸道标本mNGS联合检测可以有效辅助临床对肺隐球菌病的诊疗。     

真菌特异性抗原联合检测对侵袭性曲霉感染的早期诊断价值

目的 评价半乳甘露聚糖抗原(GM)和(1,3)-β-D-萄聚糖(BG)的检测及其联合检测对血液病和恶性肿瘤患者侵袭性曲霉感染(1A)的早期诊断价值.方法 回顾192例血液病和恙性肿瘤患者血浆BG和血清GM水平,分析BG检测和GM检测及其联合检测对侵袭性曲霉感染的敏感度、特异度,阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV).结果 BG和GM联合检测对IA诊断的敏感度为86.4%,特异度为98.5%,阳性预测值为97.4%,阴性预测值为91.6%.结论 GM和BG联合检测对于血液病和恶性肿瘤患者侵袭性曲霉感染提高了敏感度和特异度,同时联合检测对LA的早期诊断有较高的临床意义.     

建立实时荧光定量PCR检测新型隐球菌CAP10基因及其初步应用

目的建立FQ-PCR(real-time Fluorescent Quantitative PCR)系统定量检测新型隐球菌CAP10基因,为将其应用于新型隐球菌感染的诊断和疗效判断奠定基础。方法根据新型隐球菌5种血清型(A、B、C、D、AD)中同源序列设计引物和探针,PCR扩增CAP10基因片段,并将其克隆到pGEM-T Easy载体上,构建质粒标准品;建立FQ-PCR体系,优化反应条件,建立标准曲线,进行特异性、敏感性、重复性实验。结果FQ-PCR系统用于检测CAP10基因片段,敏感性为1拷贝数/μl,重复性好,批内变异系数(CV)为1.36%,批间变异系数(CV)为1.86%,特异性好,对临床其他常见脑膜炎病原体不出现特异性扩增曲线。结论成功建立了新型隐球菌CAP10基因FQ-PCR检测方法,结果稳定、准确,有望为判断新型隐球菌性脑膜炎疗效、预后提供新的依据。     

血浆(1,3)-β-D-葡聚糖抗原检测对器官移植术后患者侵袭性肺部真菌感染的诊断价值

目的探讨血浆(1,3)-β-D-葡聚糖(BG)检测(G试验)在早期诊断器官移植术后合并侵袭性肺部真菌感染(IPFI)的敏感性与特异性。方法2006年1月~2008年2月在本院器官移植中心接受器官(或组织)移植合并有肺部病变的患者60例,分别为接受造血干细胞移植(HSCT)、肾移植和肝移植。入选患者在住院期间每周采集2次全血,进行血浆G试验和血清曲霉菌半乳甘露聚糖抗原(GM)检测。10例健康志愿者均采血1次。结果32例确诊和临床诊断IPFI患者共采集35株致病型真菌,主要为曲霉菌(22株);有12例患者G试验结果为阴性。单份血浆标本G试验阳性的敏感性为60%~71.4%,特异性为74.7%~89.7%,连续双份血浆标本G试验阳性的敏感性(40%~57.1%)略有降低,但特异性(86.7%~98.3%)有所升高。G试验较痰液真菌培养平均提前8.2 d出现阳性结果,差异有显著统计学意义(P<0.01)。较典型影像学改变也平均提前3 d(P<0.05)。结论通过连续检测血浆BG浓度,G试验对器官移植术后合并IPFI的诊断敏感性接近60%,特异性则达到98%;且较微生物学培养及典型影像学改变更早出现阳性结果。     

G试验联合GM试验对恶性肿瘤患者并发侵袭性真菌感染的早期诊断价值

目的探讨联合检测血清(l,3)-β-D-葡聚糖及半乳甘露聚糖抗原在恶性肿瘤患者并发侵袭性真菌感染的早期诊断价值。方法检测血清(1,3)-β-D葡聚糖、半乳甘露聚糖抗原在患者体内水平,并对检测结果进行分析。结果 (1,3)-β-D葡聚糖(G试验)的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测为87%、91%、80%和94%,半乳甘露聚糖抗原(GM试验)为76%、95%、86%和91%,G试验联合GM试验联合试验为97%、81%、69%和99%;治疗前后的G试验均值分别为(251.20±49.90)和(46.20±7.90)pg/mL。GM均值分别为(1.15±0.61)和(0.63±0.25)μg/L。结论 G试验联合GM试验在诊断恶性肿瘤患者并发侵袭性真菌感染患者中具有较高的可靠性,动态监测G试验和GM试验检测结果对临床用药有指导意义。     

G及GM试验在急性白血病合并侵袭性真菌病中的诊断价值

目的:分析G及GM试验在急性白血病患者合并侵袭性真菌病中的诊断效能,及其与CT在侵袭性真菌病早期诊断中的应用。方法:本院血液科2016年下半年急性白血病患者怀疑侵袭性真菌病(IFD)行G及GM试验检测的病人共493例。根据IFD的诊断标准,将患者分为:IFD确定组(包括确诊及临床诊断IFD,62例),IFD未确定组(包括拟诊及非IFD,431例)。分析2组患者G及GM试验结果,并评价二者单独及联合诊断的诊断效能。此外,从病例中筛选入院时肺部CT结果阴性,在住院过程中CT显示肺部有改变及血清学检测结果显示阳性的患者26例,比较血清学检测阳性结果与CT显示肺部改变的时间差异。结果:G试验在IFD确定组和IFD未确定组中的阳性率分别是56.5%和10.4%;GM试验在2组中的阳性率分别是41.9%和9.0%。G试验的灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值分别是56%、90%、44%、92%;GM试验分别是42%、91%、40%、93%,并且二者联合诊断的灵敏度和特异度可分别提高到69%和98%。血清学检测(G/GM试验)阳性结果比肺部CT改变早出现大约5 d。结论:G及GM试验有较高的灵敏度和特异度,且两者联合使用能提高诊断效能,更准确地指导临床抗真菌治疗用药。在早期临床诊断IFD上,血清学检测阳性结果比CT显示肺部改变出现较早。