快速乳胶试验检测梅毒螺旋体抗体

目的：评价快速乳胶试验检测梅毒螺旋体抗体的可行性。方法：采用快速乳胶试验和TPPA平行检测50例梅毒患者血清和30例对照组血清的梅毒螺旋体抗体(TP—Ab)。结果：50例梅毒患者血清中，快速乳胶试验阳性47例，阴性3例；30例对照组血清快速乳胶试验阳性1例，阴性29例；以TPPA结果为标准，快速乳胶试验的敏感性为94．0％(47／50)，特异性为96．7％(29／30)。结论：快速乳胶试验检测TP—Ab具有一定的敏感性和特异性，操作简单，快捷。     

重组梅毒螺旋体抗原的研究进展

在梅毒螺旋体人工培养尚未获得成功的情况下,基因克隆(即DNA重组)技术的出现为该病原体的研究开辟了一条新的途径。应用基因工程技术目前已制备出多种重组梅毒螺旋体抗原,这些抗原的制备对梅毒发病机理的探讨、疫苗的研制、以及血清学诊断试验的建立与应用具有重要意义,为梅毒的预防和控制提供了更加有效的手段。     

重组梅毒螺旋体抗原的研究进展

在梅毒螺旋体人工培养尚未获得成功的情况下,基因克隆技术的出现为该病原体的研究开辟了一条新的途径。应用基因工程技术目前已制备出多种重组梅毒螺旋体抗原,这些抗原的制备对梅毒发病机理的探讨,疫苗的研制,以及血清学诊断试验的建立与应用具有重要意义,为梅毒的预防和控制提供了更加有效的手段。     

梅毒螺旋体抗体IgG酶联免疫吸附试验的建立

梅毒螺旋体抗原试验,如荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)、梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)等的敏感性和特异性高,但试剂昂贵,操作较复杂,所需时间较长,现不用于筛查而用于确证。为探讨既可用于筛查又可用于确证的梅毒螺旋体抗体检测方法,我们用基因重组技术表达的梅毒螺旋体蛋白(Treponema pallidum protein,Tp)17和Tp44.5为抗原,以辣根过氧化物酶标记的鼠抗人IgG单克隆抗体为酶结合物,建立了梅毒螺旋体抗体IgG的间接ELISA法(ELISA-Tp-IgG),经临床观察和献血员筛查,效果较好,现报道如下。     

酶联免疫法与微粒子化学发光法检测梅毒螺旋体抗体的效果观察

目的探讨酶联免疫法与微粒子化学发光法检测梅毒螺旋体抗体的效果。方法记录我院进行梅毒筛查的800例患者接受酶联免疫法和微粒子化学发光法检测的结果,以梅毒螺旋体明胶凝集试验结果为金标准,比较两种检查方式对梅毒螺旋体抗体检出率、梅毒诊断正确率以及诊断梅毒的灵敏度、特异度、准确率、阳性预测值、阴性预测值。结果两种检测方法梅毒螺旋体抗体检出率并无统计学差异(P 0.05),但酶联免疫法梅毒诊断正确率高于微粒子化学发光法,差异显著(P 0.05);酶联免疫法诊断梅毒的灵敏度、特异度、准确率、阳性预测值、阴性预测值均高于微粒子化学发光法,差异显著(P 0.05)。结论酶联免疫法在梅毒筛查中效果优于微粒子化学发光法,值得临床推荐。     

快速梅毒螺旋体抗体检测试验的实验室初步评价

目的：对不同国家生产的7种快速梅毒螺旋体抗体检测试验效果进行实验室评价,筛选敏感、特异、快速、简便、价廉的快速特异性梅毒螺旋体抗体检测方法。方法：以世界卫生组织推荐的TPPA方法作为“金标准”,采用盲法,分别对92份TPPA阳性血清和阴性血清进行快速试验检测,检测结果由2位观察人员分别判读纪录,并在第一次判读结果后1小时读取第二次结果,以评价7种快速试验的敏感性、特异性、结果判读的一致性以及稳定性等。结果：7种快速试验的敏感性为70．8％～97．9％,其中三种快速试验的敏感性较高,与另外四种试验方法比较有统计学差异;7种方法的特异性为89％～95％,各方法之间均无统计学差异;所有结果判读的一致性及稳定性都很高。结论：实验室对7种快速特异性梅毒螺旋体抗体检测试验效果的实验室评价结果表明：Determine（Abbott,美国）及Bioline（Standard,韩国）有较高的敏感性和特异性,且操作简便、相对价廉,可望作为理想的梅毒螺旋体抗体快速检测试剂推广应用。     

基因工程技术制备梅毒螺旋体重组抗原的研究

目的 用基因工程技术制备梅毒螺旋体特异蛋白抗原,以梅毒螺旋体不能体外培养而难以获得足量的纯梅毒螺旋体特蛋白抗原的难题。方法 以PCR技术克隆出目的基因,重组后通过DNA序列测定验证重组质粒中连结有目的基因片段;以pMAL^TM-e2为质粒载体,TB1大肠杆菌为宿主菌进行目的基因的转化、诱导和表达,并对表达产物进行蛋白印迹试验检测其血清学活性。结果 PCR克隆出梅毒螺旋体15000、17000以及47000蛋白的基因克隆,其中梅毒螺旋体17000以及47000在TB1大肠杆菌中得到稳定的表达,且表达产物显示与梅毒患者血清有非常特异的血清学反应。结论 梅毒螺旋体之目的基因在大肠杆菌中得到了成功表达,并具特异的血清学活性,从而为建立为国产化梅毒血清学诊断的新方法奠定了基础。     

一种梅毒螺旋体重组抗原胶体金的制备

目的制备一种可以特异、准确的检测血清中梅毒螺旋体抗体的胶体金免疫层析试纸。方法利用原核表达系统构建一种包含梅毒螺旋体多个免疫表位的重组抗原B1,采用ELISA的方法对重组抗原进行活性检测。胶体金标记重组抗原B1,制备胶体金免疫层析试纸。结果重组抗原B1在BL21表达载体中有较高表达,ELISA结果显示B1与梅毒患者血清能特异、敏感的结合,与乙型肝炎病毒血清及阴性血清无交叉反应。应用B1蛋白制备的胶体金诊断试纸检测100份梅毒标准血清,结果均为阳性,与乙型肝炎患者血清及健康人群血清无交叉反应。结论梅毒螺旋体胶体金快速诊断试纸具有良好特异性和敏感性,可以快速、准确的诊断梅毒螺旋体的感染。     

梅毒性胃炎:用荧光螺旋体抗体吸收补体染色及免疫过氧化物酶染色证实苍白螺旋体

本文报告1例21岁女性梅毒性胃炎患者。主诉:呕吐、上腹部疼痛1个月。体检:上腹部肌卫,有触痛,双掌跖有鳞屑性红斑。梅毒血清试验结果:VDRL 1:64,FTA-ABS(+),TPHA 1:1280,19S-IgM-FTA-ABS 1:60。胃镜检查:见胃粘膜有多发性糜烂性出血性斑片。胃粘膜病检HE染色发现灶性溃疡处有淋巴组织细胞及较多浆细胞浸润。用荧光螺旋体抗体吸收补体染色     

全自动化学发光免疫分析仪在梅毒螺旋体抗体检测中的临床应用

目的探讨CHEMCLIN(600型全自动化学发光免疫分析仪(下称CLIA法)在梅毒螺旋体抗体检测中的临床应用价值。方法通过测定CLIA法在梅毒螺旋体抗体检测中的精密度、携带污染现象、灵敏度、干扰试验及对比试验。并进行统计分析1484份临床血清标本用CLIA法、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)三种方法的平行检测的结果。结果 CHEMCLIN(600型系统对高、中、低度3个浓度梅毒螺旋体抗体阳性标本检测的重复性结果显示,其批内、批间的变异系数均低于10%。通过比较强阳性混合血清混合前后及阴性混合血清,系统吸样针无携带污染,差异无显著性(P0.05)。用CLIA法和TPPA法同时检测弱阳性标本,CLIA法1∶16稀释检测结果为阴性,TPPA法1∶4稀释检测为阴性。三酰甘油浓度高达20.0mmol/L、血红蛋白浓度高达30.0g/L、胆红素高达95mol/L时对测定结果的发光值影响度3.5%,且前后判断结果不变。比较CLIA法与进口仪器I2000两种方法 ,差异无统计学意义P0.05。TPPA法与CLIA法两种方法检测结果比较,差异也无显著性(P0.05)。CLIA的敏感度为98.4%,特异度为99.8%。结论 CHEMCLIN(600型全自动化学发光免疫分析仪系统作为国内新开发的梅毒血清学特异性抗体检测方法 ,其检测精密度较好,无携带污染现象,检测灵敏度高于TPPA法,抗干扰能力强。其敏感性和特异性都很高,自动化程度高,值得在临床推广应用。     

4种以重组梅毒螺旋体抗原为基础的梅毒快速诊断试验的临床评价

目的：评估4种以重组梅毒螺旋体抗原为基础的梅毒快速诊断试剂盒的敏感性和特异性,及其在临床应用中的可操作性。方法：选择860例性传播疾病（STD）门诊患者,签署知情同意书并采集其静脉血。分别取全血和血清进行梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）及4种试剂盒的检测。检测方法分别按照说明书进行。结果：以TPHA为标准,结果分别为：①Abbott Determine Syphilis TP test：血清敏感性为100％,特异性为98、9％;全血敏感性为81．9％,特异性为99．4％。②SDBIOLINE Syphilis 3．0 test：血清敏感性为95．5％,特异性为97．9％;全血敏感性为87．6％,特异性为99．4％。③VISITECT-SYPHILIS test：血清敏感性为94．0％,特异性为98．1％;全血敏感性为73．5％,特异性为99．7％。④Syphicheck-WB test：血清敏感性为67．4％,特异性为98．8％：全血敏感性为64．0％,特异性为99．7％。结论：4种试剂盒均具有优良的临床操作性能,适用于STD门诊的梅毒快速检测。而且这4种快速诊断试剂盒在血清中的检测比全血具有更高的敏感性。     

化学发光微粒子免疫分析法对梅毒螺旋体特异性抗体的检测价值探究

目的：研究化学发光微粒子免疫分析法（CMIA）对梅毒螺旋体特异性抗体的检测,评价其检测效果,探讨其临床适用性。方法：选择2011年5月～2012年5月在我院就诊的门诊和住院260例患者,分别使用梅毒螺旋体胶凝试验（TPPA）法与CMIA法病人血清,观察两种方法测定的阳性率,并以TPPA法为标准,评价CMIA法的敏感性、特异性、阴性预测值及阳性预测值。结果：CMIA法检出率为16．2％,而TPPA法检出率为14．6％,两种方法的阳性检出率比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;CMIA法敏感性100％,特异性98．2％,阳性预测值90．5％,阴性预测值100％,CMIA法与TPPA法检测梅毒螺旋体抗体的符合率为98．7％。结论：CMIA具有自动化、检测周期短等特点,可以为梅毒抗体进行实验室批量检测。其与梅毒螺旋体胶凝试验的检出率相当,特异性也较高,可以结合TPPA及临床资料用于梅毒的确诊,在临床长期推广应用。     

用梅毒螺旋体或Reiter株螺旋体的轴丝作抗原的酶联免疫吸附试验：作为梅毒筛选试验的评价

迄今,梅毒血清诊断一般都采用TPHA、FTA-ABS、VDRL和RPR等项试验方法.由于这些方法操作复杂又受主观视觉的影响,作者根据Veldkamp和Hardy的报告,用超声波裂解的梅毒螺旋体和Reiter株螺旋体的轴丝为抗原,作微量酶标试验(TP-ELISA和AF-ELISA)来检测螺旋体抗体     

梅毒免疫和梅毒螺旋体的研究进展

梅毒螺旋体有着独特的基因和蛋白结构,对其基因分型有利于梅毒分子流行病学的研究.梅毒螺旋体缺乏脂多糖与外膜蛋白,但可表达多种脂蛋白,这些脂蛋白同梅毒螺旋体的组织黏附及播散有关,同时可诱导机体发生免疫应答.机体对于梅毒螺旋体的免疫应答过程十分复杂,固有免疫、体液免疫及细胞免疫均在梅毒螺旋体的感染过程中参与了应答过程.Th1型细胞免疫在梅毒的发生发展过程中起重要作用,梅毒患者在局部及系统免疫方面都存在细胞免疫的异常.     

一期梅毒患者酶毒螺旋体和血清学检测

目的：比较评价几种用于一期梅毒（PS）的实验诊断方法。方法：采用暗视野显微镜法（D－F）、镀银染色法（Ag）、间接免疫荧光法（ⅡF），聚合酶链反应（PCR）等4种梅毒螺旋体（TP）检测方法和甲苯胺红不加红血清学试验（TRUST）和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）对91例PS患者进行检测。结果：Ag法、ⅡF法、PCR法检测TP阳性率较高，D－F法阳性率较低，对于病程小于2周患者TRUST阳性率明显低于TPPA。结论：Ag法是TP检测的有效方法之一，对于病程小于2周的PS患者TPPA比TRUST更具有诊断价值。     

酶联免疫法检测梅毒19S IgM抗体的评价

以TP-19S-IgM酶联免疫法对梅毒血清检测,表明其对一期梅毒的敏感性为79．3％,高于RPR法(55．3％)及n)PA法(72．4％),对于二期梅毒,其敏感性同于TPPA(均为100％),却高于RPR法(91．8％)。     

用蛋白印迹技术初步评价重组梅毒螺旋体抗原的反应性

目的：初步分析重组梅毒螺旋体抗原对梅毒螺旋体抗体的反应性。方法：用蛋白印迹技术检测与麦芽糖结合蛋白（MBP）融合的2种重组梅毒螺旋体蛋白（rTP47和rTP17)与二期梅毒患者血清的反应性。结果：30份二期梅毒患者血清均与MBP－rTP47和MBP－rTP17反应,反应强度与RPR试验测定的血清滴度无绝对一致性,但MBP－rTP17与二期梅毒患者血清的反应强于MBP－rTP47,30份正常人血清均不与MBP－rTP47和MBP－rTP17反应。结论：MBP－rTP47和MBP－rTP17对二期梅毒患者血清的反应性较强。     

三种梅毒螺旋体特异性抗体检测方法性能评价

目的:比较电化学发光免疫分析(ECLIA)、化学发光免疫分析(CLIA)、酶联免疫吸附实验(ELISA)三种方法检测梅毒螺旋体特异性抗体的性能差异.方法:通过梅毒螺旋体抗体颗粒凝集试验(TPPA)实验筛选阳性样本和阴性样本各60例,对所有样本的梅毒螺旋体特异性抗体采用三种方法检测,通过受试者工作曲线(ROC)确定不同方...     

梅毒螺旋体特异性抗体快速检测胶乳试剂的研制

梅毒螺旋体特异性抗体快速检测胶乳试剂的研制范亚民，缑宇虹卫生部兰州生物制品研究所（邮政编码７３００４６）目前，国内用于检测梅毒螺旋体特异性抗体的试验主要为梅毒螺旋体荧光抗体吸收试验（ＦＴＡ－ＡＢＳ）及梅毒螺旋体血凝试验（ＴＰＨＡ）”，’‘，ＦＴＡ－Ａ...     

胶体金法检测梅毒螺旋体特异性抗体的初步观察

检测梅毒螺旋体抗体有两种,一种是检测非特异性抗体,另一种是检测其特异性抗体。目前胶体金标记金黄色葡萄球菌Ａ蛋白(ＳＰＡ)法检测梅毒螺旋体非特异性抗体已见报道[1]。我们采用基因重组梅毒螺旋体抗原点样于醋酸纤维薄膜上、胶体金标记ＳＰＡ快速检测血清中梅毒螺旋体特异性抗体,现将结果报道如下。一、材料和方法1.梅毒螺旋体特异性抗原的制备:选用公认的42000膜蛋白(ＴｍｐＡ)作为梅毒螺旋体特异性抗原[2,3],聚合酶链反应(ＰＣＲ)人工合成或者将其基因片段植入大肠埃希菌内大量合成其ＴｍｐＡ蛋白,本抗原及醋酸纤维薄膜由Ｔｒｉｃｏｎ…