蛇胆的成分分析及临床应用

<正>蛇胆是眼睛蛇科动物眼镜蛇、金环蛇或者游蛇科动物灰鼠蛇的体内贮存胆汁的胆囊,以上三种蛇胆合称为三蛇胆。由于蛇胆的价格昂贵,资源较少,在物以稀为贵的情况下,就会有以其它动物的胆来冒充蛇胆的现象。蛇胆中主要含有胆汁酸、胆色素、胆固醇、无机盐、黏蛋白等成分。曾常青[1]等对14种胆汁酸成分进行高效薄层色谱分析得出:蛇胆胆汁酸以牛磺结合型胆汁酸属多,游离的胆汁酸较少。樊氏等~[2]从蛇胆中分得胆酸和牛磺胆酸,并通过实验验证了蛇胆主要     

蛇胆中胆汁酸类化学成分分析

蛇胆作为传统的名贵中药广泛应用于多种名优中成药的制备,胆汁酸为其主要活性成分。阐明蛇胆中的胆酸类成分,对于建立完整的蛇胆质量控制方法和阐明药效物质均具有重要意义。该文首先利用1H-NMR技术对蛇胆提取物非靶标性检测,再利用自动馏分接收器剔除蛇胆中的牛磺胆酸部分,收集目标成分,浓缩处理后利用LC-MS对其中的胆酸类成分深入分析。非靶标检测结果表明胆汁酸为蛇胆的主要成分,结合文献及对照品比对,从蛇胆1H-NMR图谱中初步归属了6个胆酸类成分,分别为鹅去氧胆酸、胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、牛磺胆酸、牛磺去氧胆酸和甘氨胆酸。由于其中牛磺胆酸含量过高从而影响微量成分的检出,通过自动接收器剔除蛇胆中的牛磺胆酸后,将处理过的蛇胆提取物经LC-MS平台检测,通过多级质谱数据分析,保留时间匹配,并结合对照品及数据库搜索,共发现并鉴定了57个胆酸类成分。该文基于1H-NMR和LC-MS平台并半制备蛇胆化学成分对蛇胆中胆酸类成分进行了全面、系统地表征,对蛇胆的质量控制和评价方法的建立具有一定的参考价值。     

HPLC法测定蛇胆中牛磺胆酸钠的含量

蛇胆为传统中药,性凉,味苦微甘,无毒。功能主治为祛风、清热、化痰。明目。广东、广西的蛇胆资源丰富,以蛇胆作原料的中药制剂较多,如蛇胆川贝散、蛇胆陈皮散、三蛇胆川贝液等,蛇胆中牛磺胆酸钠的含量因蛇的品种不同、季节不同而异,以致引起制剂中牛磺胆酸钠含量的波动。为了保证蛇胆投料的准确性和制剂质量,对蛇胆中牛磺胆酸钠含量进行测定。据文献报道:对含有蛇胆的中成药,目前通过测定胆酸或牛磺胆酸钠含量以控制其质量,有薄层扫描方法、比色法;对蛇胆的测定也     

蛇胆汁及其主要成分镇咳,祛痰,平喘作用的比较研究

通过对乌梢蛇胆汁及其主要成分牛磺胆酸、牛磺去氧胆酸药理作用（镇咳、祛痰、平喘）的比较研究，证明蛇胆汁的主要成分也是其主要有效成分。     

蛇胆川贝液中蛇胆的鉴别研究

目的 :控制蛇胆川贝液中使用其它动物胆汁。方法 :采用薄层色谱法对处方中的蛇胆进行鉴别 ,并与其它动物胆汁进行比较。结果 :仅在蛇胆与牛胆中检出牛磺胆酸钠 ,但两种胆汁其它斑点区别明显 ,且蛇胆中各种斑点经按标准工艺[1] 制备后仍可检出。结论 :用蛇胆汁及牛磺胆酸钠作对照 ,采用薄层色谱法鉴别蛇胆川贝液中蛇胆的真伪 ,效果较好     

蛇胆川贝液中蛇胆的鉴别研究

目的：控制蛇胆川贝液中使用其它动物胆汁。方法：采用薄层色谱法对处方中的蛇胆进行鉴别，并与其它动物胆汁进行比较。结果：仅在蛇胆与牛胆中检出牛磺胆酸钠，但两种胆汁其它斑点区别明显，且蛇胆中各种斑点经按标准工艺^[1]制备后仍可检出。结论：用蛇胆汁及牛磺胆酸钠作对照，采用薄层色谱法鉴别蛇胆川贝液中蛇胆的真伪，效果较好。     

HPLC检测蛇胆和人工蛇胆中结合胆汁酸的含量

目的：测定人工蛇胆中牛磺胆酸和牛碘去氧胆酸的含量。方法：采用HPLC法，色谱柱Spherisorb C18柱，甲醇－0.02mol/L磷酸缓冲液（60：40）为流动相，检测波长210nm。结果：牛磺胆酸和牛磺去氧胆酸分别为0.28672-2.8672mg/mL和0.26842-2.6842mg/m范围内有良好的线性关系。平均回收率分别为97．65％和95．815，RSD分别为0．79％和3．27％。结论：本方法简便，准确。     

蛇胆川贝散中牛磺胆酸的含量测定

蛇胆川贝散由蛇胆汁、川贝等药材组成,具有清肺、止咳、除痰的功效。主要用于治疗肺热咳嗽、痰多等症。中国药典对该制剂中的蛇胆汁、川贝进行薄层色谱鉴别。本文采用薄层扫描法,测定蛇胆汁中牛磺胆酸的含量。本法操作简便,定量较准确,值得推广。     

十四种蛇胆胆汁酸成分的高效薄层色谱分析

本文应用高效薄层色谱对十四种蛇胆胆汁酸进行了分析,并用薄层扫描法对其中的牛磺胆酸进行了含量测定。结果表明,不同蛇胆的胆汁酸有相似的化学成分,但其主要成分之一的牛磺胆酸含量不同。     

牛黄中结合胆汁酸的薄层色谱定量

用薄层扫描法测定了牛黄中牛磺胆酸、牛磺去氧胆酸和牛磺鹅去氧胆酸、甘氨胆酸、甘氨去氧胆酸和甘氨鹅去氧胆酸的含量.样品用甲醇提取,在国产高效硅胶板上用异辛烷-异丙醇-正丁醚-冰乙酸-水(10∶9∶5∶5∶1)为展开剂展开.     

青环海蛇胆中牛磺胆酸的TLC分析

用硅胶薄层鉴别青环海蛇胆中主要化学成分为牛磺胆酸,并用双波长薄层扫描法测定青环海蛇胆中主要成分牛磺胆酸的含量。本法灵敏度高,重现性好。     

复方熊胆糖浆剂的研制

<正>复方熊胆糖浆剂是从川贝、熊胆、黄芪等中药中提取的有效成分配制而成的复方制剂。 熊胆为熊科动物黑熊Selenarctos thibetanus G.Cuvier或棕熊Ursus arctos L.的干燥胆。有效成分主要为熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸、胆酸及去氧胆酸等。这些胆酸通常与牛磺酸、甘氨酸结合,并形成钠或钙盐而存在,如牛磺熊去氧胆权酸牛磺鹅去氧胆酸,前者系解痉有效成分。     

HPLC-ELSD法同时测定熊胆粉中4个胆汁酸成分含量

目的 建立高效液相色谱-蒸发光散射法(HPLC-ELSD)同时测定熊胆粉中牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸含量。方法 采用Waters XSelect^?HSS T3色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)，以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相，梯度洗脱，柱温40℃，流速1.0 mL/min,ELSD漂移管温度80℃，氮气流量2.0 L/min。结果 牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸的线性范围分别为1.012～5.060、0.808～4.040、0.068～0.340、0.176～0.880μg，相关系数r分别为0.999 5、0.999 7、0.999 6和0.999 8；平均加样回收率(n=6)分别为98.8%、99.7%、98.9%和98.7%。精密度、稳定性、重复性试验的RSD均<3.0%(n=6)。熊胆粉样品中牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸的平均含量分别为(34.82±0.18)%、(27.95±0.19)%、(1.23±0.02)%和(3.77±0.06)%。结论 本方法简便、灵...     

注射用熊胆粉质量标准研究

目的:建立注射用熊胆粉质量控制方法。方法:采用薄层色谱法对制剂中熊胆进行定性鉴别:用HPLC法测 定制剂中牛磺熊去氧胆酸含量。结果:薄层色谱中斑点清晰,易于识别:HPLC法精密度、重现性良好,牛磺熊去氧胆酸在 2．5～16μg内均较好的线性关系,加样回收率为99．75％,RSD为0．82％。结论:该法可有效控制注射用熊胆粉质量。     

蛇胆及其制剂中牛磺胆酸含量比较

在研究蛇胆主要成分——牛磺胆酸的基础上，对15种蛇肥及部分制剂进行牛成腿酸含量测定的比较，采用单波长薄层扫描法，其方法简便，快速，能反映蛇胆及制剂的质量。1仪器与试剂岛津CS－930薄层扫描仪，狭缝1．2×1．2，反射法锯齿形扫描，背景校正，λs为560nm。所用试剂均为分析统。牛磺胆酸为上海中药研究所提供。供试品蛇胆由新昌、宁波、义乌捕捉后活刻而得。蛇种均经鉴定，所测制剂从市场购得，编为浙江某厂（D），武汉某厂（C），空姐某厂（B），江西某厂（F），新昌越州制药厂（J），湖北某厂（H），广西某厂（G）。2抗准曲线的…     

基于UPLC-MS对牛黄解毒片中胆酸类成分定量测定及化学模式识别研究

目的 建立超高效液相色谱串联四级杆-静电轨道阱高分辨质谱技术(UPLC-Q Exactive-Orbitrap MS/MS)同时测定牛黄解毒片(Niuhuang Jiedu Tablets,NJT)中牛磺胆酸、7-酮-3α,12-α-羟基胆烷酸、甘氨猪去氧胆酸、12-脱氢胆酸、甘氨胆酸、3-酮-7α,12α-二羟基-5β-胆烷酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、7-酮基胆石酸、猪胆酸、牛磺脱氧胆酸钠、12-酮脱氧胆酸、猪去氧胆酸、胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、甘氨脱氧胆酸、牛磺石胆酸钠、甘氨石胆酸、鹅去氧胆酸、去氧胆酸、石胆酸21种胆酸类成分含量的方法,并对不同批次的NJT进行质量评价。方法 采用Thermo Bremen Hypersil Gold色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.9μm),以含0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱,体积流量0.2 mL/min,柱温为40℃;质谱采用加热型电喷雾离子源(HESI),在负离子平行反应监测模式下进行含量测定,采用SIGMA 14.0软件对定量结果进行化学计量学分析。结果 21种胆酸成分在线性范围内呈良好的线性关系(r2≥0.998 9)...     

基于1H-NMR结合LC-MS技术分析熊胆粉及常见胆类中药中的胆酸类成分

目的 建立基于核磁共振氢谱技术（¹H-NMR）结合液质联用技术（LC-MS）的分析方法,阐明熊胆粉中胆酸类成分组成,找出熊胆粉与其他常见胆类中药中的差异性成分。方法 利用¹H-NMR非靶标分析熊胆粉及其他常见胆类中药的化学成分组,通过信号归属表征熊胆粉中胆酸类成分组成,以¹H-NMR图谱分段积分后峰面积为变量进行多元统计分析。利用LC-MS对熊胆粉及其他常见胆类中药中10个胆酸类成分（胆酸、熊去氧胆酸、猪去氧胆酸、鹅去氧胆酸、牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、甘氨熊去氧胆酸、甘氨猪去氧胆酸、牛磺胆酸、甘氨胆酸）进行含量测定,并以含量为变量进行多元统计分析。结果 基于¹H-NMR图谱及多元统计分析发现胆酸类成分为胆类中药的主要成分,也是熊胆粉与其他常见胆类中药的主要差异性成分。结合文献及对照品比对,从熊胆粉中初步鉴定出7个胆酸类成分。进一步结合LC-MS含量测定结果和多元统计分析验证熊胆粉与其他常见胆类中药的主要差异性胆酸类成分为熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸、牛磺熊去氧胆酸和牛磺鹅去氧胆酸。结论 熊胆粉与其他常见胆类中药的胆酸类成分存在显著差异。与其他胆类中药相比,熊胆粉中熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸及其牛磺型结合胆酸含量较高。¹H-NMR技术具有对化学成分组全面、快速分析的优势,可与LC-MS检测相互补充,共同应用于中药复杂体系成分分析和代谢组学的深入研究。     

UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS法同时测定牛黄上清片中18种胆汁酸的含量

目的 建立超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS)法同时测定牛黄上清片中牛磺胆酸、7-酮-3α,12-α-羟基胆烷酸、甘氨猪去氧胆酸、12-脱氢胆酸、甘氨胆酸、3-酮-7α,12α-二羟基-5β-胆烷酸、牛磺鹅去氧胆酸、3α-羟基-7-氧代-5β-胆烷酸、猪胆酸、牛磺脱氧胆酸钠、猪去氧胆酸、胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、甘氨脱氧胆酸、牛磺石胆酸钠、鹅去氧胆酸、去氧胆酸、石胆酸的含量。方法 分析采用Thermo Fisher Scientfic Bremen HYPERSIL GOLD色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.9μm);流动相0.1%甲酸-甲醇,梯度洗脱;体积流量0.2 mL/min;柱温40℃;加热电喷雾离子源;负离子扫描;平行反应监测模式。再进行化学模式识别。结果 18种胆汁酸在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 5),平均加样回收率96.73%～104.07%,RSD 2.10%～4.07%。不同厂家样品中各胆汁酸在种类和含量上存在一定差异。结论 该方法灵敏可靠,专属性好,可用于牛黄上清片的质量控制。     

蟒蛇胆的薄层色谱鉴别

蟒蛇胆的薄层色谱鉴别游勇基,林金镐,季莲芳(福建省药品检验所福州350001)蛇胆是许多中成药制剂的重要原料药材之一。目前蛇胆的真伪鉴别主要通过薄层色谱法检测其中的牛磺胆酸TCA[1,2],但由于蛇胆品种众多,各品种之间的区别尚未见报道。本文介绍以蟒蛇胆的特征成分[3]牛磺蟒胆酸(TPCA)水解后生成蟒胆酸内酯,用薄层色谱法检测,以鉴别蟒蛇胆,并区别于其它的蛇胆。1实验部分1.1实验材料:蟒蛇胆取自蟒蛇Pythonmolu-rusbivittatus(S....     

HPLC法测定猪胆粉中的牛磺猪去氧胆酸和甘氨猪去氧胆酸

目的建立HPLC-UV法同时测定猪胆粉中牛磺猪去氧胆酸和甘氨猪去氧胆酸的含有量。方法猪胆粉甲醇提取液采用Kromasil C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分析;流动相乙腈-0.03 mol/L磷酸二氢钠,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;柱温25℃;检测波长200 nm。结果牛磺猪去氧胆酸和甘氨猪去氧胆酸分别在0.087 7~4.384 9μg(r=1.000 0)、0.257 8~8.594 6μg(r=1.000 0)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率在95.0%~105.0%之间,RSD均小于3.0%。结论该方法简单、可靠,适用于猪胆粉的质量控制。