妊娠早期人滋养层细胞表达γ干扰素及γ干扰素受体

已知细胞因子参与胚胎-胎盘分化。已证实γ干扰素(IFN-γ)在人及猪的滋养层中存在,而且γ干扰素受体(IFN-γR)已从绒毛外层中得到分离、纯化。但IFN-γ在生殖免疫中的作用、妊娠不同时期细胞表达IFN-γ的部位及功能尚不了解。本文着重研究妊娠早期及末期胎盘组织的IFN-γ及IFN-γR     

肿瘤坏死因子α与γ干扰素诱导人绒毛膜滋养层细胞？…

目的 探讨肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）与γ干扰素（ＩＮＦ－γ）诱导妊娠早期人绒毛膜滋养层细胞凋亡的作用及其机理。方法 建立人妊娠早期滋养层细胞体外培养体系；ＴＮＦ－α与ＩＦＮ－γ联合作３６小时后，利用台盼蓝染色记数活细胞法检测其细胞毒性。在光镜和透射电镜下观察滋养层细胞凋亡的形态学变化；用琼脂糖凝胶电泳对ＤＮＡ断裂片断进行分析；采用流式细胞仪测定滋养层细胞的凋亡指数；粘附式细胞仪检测ＴＮＦ－α作用     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子在绒毛和胎盘组织中的表达

目的 探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)在绒毛及胎盘组织中的表达以及表达部位。方法 分别取36例妊娠6～9周妇女的早孕绒毛组织、7例因病理指征行中期引产妇女的胎盘组织和11例足月妊娠妇女的胎盘组织,免疫组化方法检测绒毛组织和胎盘组织中EMMPRIN的表达部位变化特点。结果 (1)表达部位：EMMPRIN在早孕绒毛组织、中期和足月妊娠的胎盘组织中均有高度表达。在早孕绒毛组织中的表达部位主要集中在绒毛内细胞滋养细胞、合体滋养细胞及细胞滋养层柱细胞;在中期和足月妊娠的胎盘组织中,主要表达于底蜕膜的绒毛外细胞滋养细胞。(2)表达特点：在早孕绒毛组织中细胞滋养细胞、合体滋养细胞和细胞滋养层柱细胞的。EMMPRIN阳性率随妊娠进展逐渐下降。在妊娠中期的胎盘组织中,细胞滋养细胞、合体滋养细胞和细胞滋养层柱细胞的EMMPRIN阳性率分别为5／7、3／7、5／7;在足月妊娠的胎盘组织中,细胞滋养细胞、合体滋养细胞和细胞滋养层柱细胞的EMMPRIN阳性率分别为73％、18％和82％。在中期和足月妊娠的底蜕膜中的EMMPRIN阳性率较弱,且趋于稳定。而早期妊娠阶段,侵入到底蜕膜的绒毛外细胞滋养细胞中。EMMPRIN阳性表达则随孕周进展逐渐增强。结论 EMMPRIN在妊娠早期与胚胎植入有关,在妊娠的中晚期则可能参与妊娠维持。     

复发性流产患者宫腔微环境对早期妊娠的影响

目的：初步探讨复发性流产（recurrent spontaneous abortion,RSA）患者宫腔微环境对早期妊娠的影响。方法：采集2021年10月—2022年1月就诊于我院拟行清宫术的RSA患者和同期拟行人工流产术的正常早孕女性的宫腔灌洗液,检测其脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、γ干扰素（interferon-γ,IFN-γ）浓度,并用宫腔灌洗液分别干预子宫内膜细胞和绒毛外滋养细胞,检测子宫内膜细胞TNF-α、IL-2、IFN-γ mRNA的表达,以及绒毛外滋养细胞的侵袭迁移能力。结果：RSA患者宫腔灌洗液中LPS、TNF-α、IL-2、IFN-γ的浓度均高于正常早孕女性,差异有统计学意义（均P<0.05）。RSA患者的宫腔灌洗液干预子宫内膜细胞后,TNF-α、IL-2、IFN-γ mRNA的表达均较正常早孕女性宫腔灌洗液干预组升高,差异有统计学意义（均P<0.05）。RSA患者宫腔灌洗液干预后的绒毛外滋养细...     

肿瘤坏死因子α与γ干扰素诱导人绒毛膜滋养层细胞凋亡的研究

目的　探讨肿瘤坏死因子α（ Ｔ Ｎ Ｆα） 与γ干扰素（ Ｉ Ｆ Ｎγ） 诱导妊娠早期人绒毛膜滋养层细胞凋亡的作用及其机理。方法　建立人妊娠早期滋养层细胞体外培养体系; Ｔ Ｎ Ｆα与 Ｉ Ｆ Ｎγ联合作用３６ 小时后,利用台盼蓝染色记数活细胞法检测其细胞毒性。在光镜和透射电镜下观察滋养层细胞凋亡的形态学变化;用琼脂糖凝胶电泳对 Ｄ Ｎ Ａ 断裂片段进行分析;采用流式细胞仪测定滋养层细胞的凋亡指数;粘附式细胞仪检测 Ｔ Ｎ Ｆα作用下滋养层细胞内氧自由基的变化。结果　 Ｔ Ｎ Ｆα在１ ０００ 、３ ０００ 和５ ０００ Ｕ／ｍｌ 浓度时,活细胞数显著减少（ Ｐ＜ ０ ．０５） ;而在与 Ｉ Ｆ Ｎγ共同作用下, Ｔ Ｎ Ｆα在５００ 、１ ０００ 、３ ０００ 和５ ０００ Ｕ／ｍｌ 时,活细胞数均显著减少（ Ｐ＜ ０ ．０５） ;电镜下观察到染色体边集、核固缩、凋亡小体; Ｄ Ｎ Ａ 琼脂糖凝胶电泳有“梯形条带”。细胞凋亡指数具有 Ｔ Ｎ Ｆα浓度的依赖性;在 Ｔ Ｎ Ｆα的作用下,绒毛膜滋养层细胞内氧自由基升高。结论　 Ｔ Ｎ Ｆα与 Ｉ Ｆ Ｎγ能够诱导妊娠早期人绒毛膜滋养层细胞凋亡;氧自由基可能参与了 Ｔ Ｎ Ｆα诱导滋养层细胞凋亡的过程。     

人类白细胞抗原E和F在妊娠中的研究进展

非经典人类白细胞抗原（HLA）-Ⅰ类分子HLA-G，-E和-F在表达形式和多态性方面与经典HLA-Ⅰ类分子不同。目前，这类分子在妊娠中的研究多聚焦在HLA-G；事实上，HLA-E和-F在妊娠中也起着重要的作用，可以与自然杀伤（NK）细胞的受体及T细胞受体相互作用，且均在侵入母体蜕膜的绒毛外滋养层细胞表达，是新的具有生物活性的分子。就HLA-E和-F在妊娠中的研究进展作一综述。     

CD4+CD25+调节性T细胞与妊娠关系的研究进展

妊娠是一种自然同种半异体移植现象,其成功有赖于母体妊娠免疫耐受,而母胎耐受的建立和维持涉及到多种机制的参与.比较经典的有母胎界面的机械作用:首先,绒毛中的血管壁、绒毛间隙、基底膜和绒毛上皮细胞共同构成母胎机械性屏障.另外,胎盘滋养细胞表面的唾液黏蛋白能遮盖滋养层细胞表面的组织相容性抗原,且这层黏多糖和免疫活性的淋巴细胞都带负电荷,互相排斥.还有就是多因素作用的免疫屏障,比如妊娠早期胎儿滋养层细胞Ⅰ类主要组织相容性复合体分子与母体子宫的自然杀伤细胞的相互作用,胎源性凋亡因子Fas通过与滋养层细胞表达的相关配体结合导致母体特异性T细胞大量表达Fas,从而启动凋亡途径,补体调节蛋白的表达等.而作为一个具有独立免疫调节功能的T细胞亚群,调节性T细胞(regulatory Tcells,Treg细胞)由Sakaguchi等[1]在对啮齿类动物的研究中首次发现,其免疫学特性主要表现在抑制自身反应性T细胞的活化,参与机体免疫耐受,在正常妊娠过程中扮演了一个相当重要的角色.     

HLA-G在卵巢癌异位表达的临床和生物学意义

人类白细胞抗原-G(human leukocyte antigen-G,HLA-G)由非经典HLA-I类基因编码,最初于母胎界面的绒毛膜外滋养层细胞上发现,并证实在胎儿免疫耐受中起重要作用。现研究发现,HLA-G在生理、病理情况下有组织特异性表达,在肿瘤免疫逃逸中HLA-G可能具有重要作用。HLA-G在卵巢肿瘤的表达对卵巢癌高危险患者的早期诊断、鉴别诊断、预后分析、治疗都具有潜在价值。     

GIBCO Opti-MEM培养液中形成的同种特异性细胞毒性T淋巴细胞可杀死鼠滋养层细胞

早已皆知胎盘可以视为免疫屏障,在保护胎儿免受母亲免疫系统攻击中起重要作用。但作者曾报导培养的鼠妊娠中期滋养层细胞虽带有Ⅰ类主要组织相容性抗原复合体(MHC)抗原,极易被特异性抗体和补体溶解,但不能被标准条件下培养的同种特异性细胞毒性 T 细胞(CTL)杀伤,另外还发现滋养层细胞也不被干扰素(IFN)激活的天然杀伤细胞或抗体依赖细胞介导细胞毒作用溶解,上述事实证实滋养层细胞抵抗细胞介导溶解能力是这     

IL-6、TNFα对人早孕绒毛滋养层细胞胎盘生长因子表达调控的作用

目的:探讨IL-6、TNFα对原代培养人早孕绒毛滋养层细胞胎盘生长因子(PIGF)表达的调控作用。方法:对胰蛋白酶与胶原酶Ⅰ联合消化、Percoll细胞分离液纯化而得到的滋养层细胞进行原代培养,测定100 ng/mL IL-6、50 ng/mL TNFα对滋养层细胞PIGF表达的影响。结果:酶联合消化及梯度离心能较好地分离早孕绒毛中的滋养层细胞,100 ng/mL IL-6作用于滋养层细胞后PIGF分泌增加,与对照组有显著性差异(P<0.01),TNFα作用于滋养层细胞后PIGF分泌也增加,但与对照组差异不显著(P>0.05)。结论:IL-6对PIGF分泌具有促进作用,TNFα对滋养层细胞PIGF分泌的促进作用不显著,提示VEGF与PIGF可能由母胎界面不同的细胞因子所调控。     

干扰素-r和干扰素-α对人蜕膜LAK细胞杀伤滋养层细胞能力的影响

人类正常妊娠过程中,胎儿绒毛外滋养层细胞必须侵入到子宫蜕膜中。滋养层细胞表达非典型I类HLA分子,如HLA-G等。这些滋养层细胞如何不被母亲效应细胞攻击,目前还未了解。蜕膜中存在一大群CD_3~-的大颗粒淋巴细胞(LGL),其与     

TNF-α和IL-6对绒毛膜11β-羟基类固醇脱氢酶Ⅰ型和前列腺素合成酶Ⅱ型的调节

目的：研究肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(Ⅱ-6)对胎膜糖皮质激素代谢酶11β-羟基类固醇脱氢酶Ⅰ型(11β-HSD1)和前列腺素合成酶Ⅱ型(PGHS-2)的影响，以探讨细胞因子导致分娩启动的机制。方法：利用薄层层析法(TLC)和Western blot杂交法分别从酶活性、蛋白表达水平，研究Ⅱ-6、TNF-α对原代培养的人类绒毛膜细胞11β-HSD1及PGHS-2水平的影响。结果:TNF-α和IL-6对绒毛膜滋养层细胞11β-HSD1还原酶活性有促进作用，对绒毛膜细胞11β-HSD1和PGHS-2的蛋白表达均有上调作用。结论：IL-6、TNF-α对胎膜11β-HSD1及PGHS-2的诱导作用可能是其导致分娩启动的机制之一。     

早期自然流产患者TNF-α及TGF-β1的异常表达

目的:探讨自然流产患者外周血单个核细胞和胎盘组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及转化生长因子-β(TGF-β1)的异常表达。方法:采用RT-PCR技术,检测30例早期自然流产患者(自1然流产组)、25例正常妊娠妇女(正常妊娠组)、25例正常未妊娠妇女(未孕对照组)外周血单个核细胞内TNF-αmRNA和TGF-β1mRNA表达水平;采用免疫组织化学技术检测绒毛和蜕膜组织内TNF-α及TGF-β1表达强度。结果:三组研究对象外周血单个核细胞表达TNF-αmRNA相对含量分别为21.1±9.4%、68.6±14.1%、97.0±11.6%,组间比较有显著性差异(P<0.05);TGF-β1mRNA相对含量分别为21.5±9.4%、95.7±12.9%、87.0±13.8%,组间比较也均有显著性差异(P<0.05)。自然流产组细胞滋养层细胞及合体滋养层细胞表达TNF-a均显著强于人工流产组(P<0.01);自然流产组合体滋养层细胞表达TGF-β1显著低于人工流产组(P<0.01)。结论:①早期自然流产患者外周血单个核细胞TNF-αmRNA表达水平显著下降,而细胞滋养层细胞及合体滋养层细胞表达TNF-α均显著强于人工流产组,提示TNF-α可能在母胎界面局部发挥作用并导致流产。②正常早期妊娠妇女外周血单个核细胞TGF-β1mRNA表达水平较正常未妊娠妇女显著升高,提示TGF-β1对妊娠维护起重要作用。早期自然流产患者外周血单个?     

早孕期绒毛和蜕膜的组织化学观察

111例正常早孕人工流产的胎盘组织作绒毛蜕膜组织化学观察。蜕膜细胞,富于糖元,碱性磷酸酶多呈阳性或弱阳性,酸性磷酸酶多数阴性或弱阳性,少数阳性。3β-HSD弱阳性,蜕膜腺体弯曲呈锯齿状,腺体壁呈扇形,有时细胞向内突出如鞋钉状,腔内充满分泌物,糖元强阳性,对维持早期妊娠是一个重要营养条件。早期妊娠绒毛具有完整两层滋养层,即合体滋养层及细胞滋养层,60天后则细胞滋养层逐步消失,绒毛大小不等,胎儿血管扩大并移向绒毛表面,从而使胎儿-母体胎盘屏障变薄,有利于胎儿-母体的物质交换,是适应胚胎发育的一个重要条件。早孕期绒毛组织化学检查显示绒毛两层细胞糖元和碱性磷酸酶活性都很强,反映代谢机能活跃,细胞滋养层胞浆酸性磷酸酶活性60—90天逐渐加强,这应与此时期细胞滋养层退化有关。3β-HSD 在甾体生物合成过程中起重要作用,绒毛滋养层细胞3β-HSD皆为阳性,表明具有甾体生物合成机能。着床、早孕过程中,绒毛、蜕膜是母体-胚胎直接接触和相互联系的两种组织,从计划生育角度,在发展抗着床、抗早孕药物研究工作中,对于蜕膜、绒毛形态和机能的研究应当受到重视。     

上皮性钙黏蛋白在人输卵管妊娠种植与非种植部位组织中表达的比较

目的:比较上皮性钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)在人输卵管妊娠种植与非种植部位组织中的表达水平。方法:14例未破裂型输卵管壶腹部妊娠组织标本,均包括种植和非种植部位的组织,分为种植部位组(n=14)和非种植部位组(n=14);并以12例因其它疾患行全子宫加附件切除术的人分泌期正常输卵管壶腹部组织新鲜标本为对照组。采用免疫组织化学法观察E-cad蛋白在输卵管妊娠组织和输卵管黏膜上皮的表达情况,应用荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和免疫印迹法(Western blotting)检测其E-cadmRNA和蛋白表达水平。结果:E-cad蛋白表达于人输卵管黏膜上皮纤毛细胞和分泌细胞的胞膜,在细胞之间的连接面表达较强,管腔面表达较弱,纤毛未见表达。在输卵管妊娠组织,E-cad表达于蜕膜细胞、绒毛细胞滋养层细胞和绒毛外滋养细胞的胞膜,绒毛外滋养细胞的阳性显色弱于绒毛细胞滋养层细胞。E-cadmRNA和蛋白在种植部位组的表达显著低于非种植部位组和对照组(P<0.05),非种植部位组与对照组之间表达无显著性差异(P>0.05)。结论:E-cad在输卵管妊娠种植部位表达水平降低,可能与输卵管妊娠发生有密切的联系。     

人类白细胞抗原E和F在妊娠中的研究进展

非经典人类白细胞抗原(HLA)-I类分子HLA-G,-E和-F在表达形式和多态性方面与经典HLA-I类分子不同.目前,这类分子在妊娠中的研究多聚焦在HLA-G;事实上,HLA-E和-F在妊娠中也起着重要的作用,可以与自然杀伤(NK)细胞的受体及T细胞受体相互作用,且均在侵入母体蜕膜的绒毛外滋养层细胞表达,是新的具有生物活性的分子.就HLA-E和-F在妊娠中的研究进展作一综述.     

TRAIL在小鼠胚胎着床过程中子宫内膜的表达

目的:检测TRAIL在小鼠胚胎着床过程中子宫内膜的表达,探讨它在蜕膜细胞凋亡中的作 用。方法:采用RT-PCR及免疫组化技术检测妊娠d 1-8小鼠子宫组织TRAILmRNA及蛋白的表 达情况。结果:妊娠d 1-8的小鼠子宫组织均有TRAIL mRNA的表达,且着床期间的表达较着床前 明显增加(P<0．05)。妊娠d 1-3,小鼠子宫内膜无TRAIL蛋白表达;妊娠d 4,TRAIL表达在小鼠胚 胎定位、黏附点的子宫内膜腔上皮细胞;妊娠d 5-6,TRAIL定位于胚胎着床点附近的蜕膜细胞中; 妊娠d 7-8,TRAIL表达在与子宫蜕膜邻近的胚胎滋养层细胞中。结论:在小鼠胚胎着床过程中, TRAIL诱导子宫内膜腔上皮细胞凋亡可能是胚胎跨越上皮屏障的重要机制之一,且TRAIL诱导的 蜕膜细胞和胚胎滋养层细胞的凋亡在滋养层细胞对子宫内膜的适度侵入过程中起重要作用。     

人绒毛膜促性腺激素用于诊断妊娠期相关疾病的进展

人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)是胎盘绒毛膜的合体滋养层细胞合成的一种糖蛋白激素,主要由胎盘绒毛滋养层细胞直接分泌。绒毛滋养层分两层:细胞滋养层与合体细胞滋养层。两者分泌的HCG不同:合体细胞滋养层主要分泌规则HCG,具有生物活性;细胞滋养层主要分泌β-HCG,是妊娠早期HCG的主要分子形式,是妊娠的特异标志物。测定HCG相关分子以往主要用于诊断早期妊娠、滋养层疾病,并监测其治疗和预后情况。近年许多研究表明,HCG改变可诊断及预测多种妊娠不良结局,如孕早期异位妊娠,先兆流产,辅助生殖技术治疗后的妊娠结局,唐氏综合征,胎儿宫内生长受限,胎膜早破,发现子痫前期-子痫等。现就相关文献做一综述。     

低分子肝素对不同氧浓度下早孕绒毛滋养层细胞侵袭力的影响作用

目的:研究低分子肝素(LMWH)对不同氧浓度下早孕绒毛滋养层细胞侵袭力的影响。方法:取妊娠8~10周正常绒毛组织,酶消化法分离人早孕绒毛滋养层细胞,分别置2%和20%O_2分压的细胞培养箱培养。用不同浓度LMWH(0、0.1、5、10IU/ml)处理滋养细胞,观察滋养层细胞侵袭力的改变,检测细胞中HIF-1α、MMP-2、MMP-9、TIMP-2、TIMP-3表达。结果:低氧浓度下,早孕绒毛滋养层细胞的侵袭能力随着LMWH浓度(0,0.1,5IU/ml)升高而增强,但高浓度的LMWH(10IU/ml)对其有抑制作用;随着LMWH浓度增加,HIF-1α和MMP-2表达呈先上升后下降的趋势;TIMP-2、TIMP-3表达改变的趋势与MMP-2相同。正常氧浓度下的滋养层细胞,其侵袭能力未见显著增强,各细胞因子的表达无上调。结论:低氧环境下,一定浓度的LMWH可提高早孕绒毛滋养层细胞的侵袭能力,其发生机制可能是通过诱导、增强滋养层细胞HIF-1α和MMP-2基因表达。     

母体在妊娠期间对胎儿的细胞介导免疫

胎儿这一同种异体移值物,能在母体内自由地生存,其原因一直被归结为母体免疫功能的降低。由于研究是在不均一的条件下进行的,所以常出现矛盾的结果。整体非特异性免疫抑制不应视为胎儿能在母体内生存的唯一机制。胎儿是生长在免疫系统未遭损伤的母体内,这提示母亲对其胎儿表现出特异性细胞介导的免疫反应。此反应的机制是怎样的?暴露于母体的抗原已观察到在一些无绒毛滋养层组织中,整个妊娠过程都存在着胎儿的Ⅰ类 MHC(主要组织相容性复合体)抗原。表明母体能接触到移植抗原,因此,有可能发生排斥反应。即使在与母体组织血液不接触的绒毛基质和