类风湿因子定量测定的临床意义

类风湿因子（RF）检测方法有多种，但大多数医院采用胶乳凝集试验，操作简便，但只能做定性分析。近年开展的免疫比浊法对RF进行定量检测。本文对51例类风湿性关节类和部分肿瘤患者血清RF含量进行了定量检测并同时与乳胶法进行比较分析。     

胶乳增强免疫比浊法两种定量试剂检测D-二聚体的评价

目的应用胶乳增强免疫比浊法对两种定量试剂(西门子,九强)检测D-二聚体(D-D)的准确度、精密度及检测结果的一致性进行评价。方法收集新鲜凝血标本50份,应用两种不同试剂在sysmex CA-7000全自动凝血分析仪进行D-二聚体检测,比较其检测结果的一致性,通过对质控品的测定来比较两种试剂的精密度和准确度。结果准确度通过检测自身质控品和对方质控品进行评价,西门子试剂检测D-二聚体的相对偏差分别为-2.0%和-8.7%,九强试剂检测D-二聚体的相对偏差分别为-2.2%和26%;精密度通过20次室内质控结果进行评价,西门子试剂的检测均值为4.9±0.19 mg/L,CV为3.88%,差异无统计学意义(t=0.117,P>0.05),九强试剂检测的均值为4.5±0.17 mg/L,CV为3.69%,差异无统计学意义(t=0.132,P>0.05);检测结果一致性的对比显示:在D-D<0.5　mg/L时,两种定量试剂差异无统计学意义(P>0.05);在0.5　mg/L0.05);但在D-D>5　mg/L时,九强试剂显著高于西门子试剂,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论两种试剂的精密度良好,准确度在检测对方质控品时结果不令人满意,九强试剂在D-D>5 mg/L时的准确度尚需进一步论证。     

两种检测类风湿因子方法的比较

目的：对免疫比浊法（ITA）和乳胶凝集法（LAT）检测类风湿因子（RF）结果做比较分析。方法：70例类风湿关节炎（RA）和非类风湿关节炎（non-RA)的风湿病患者同时采用ITA和LAT法检测血清RF水平。结果：45例RA中LAT阳性率为68．9％,而ITA阳性率为86．7％,明显高于乳胶法,两者比较有显著性差异（P＜0．05）。LAT检测阳性的RF滴度与同组ITA法RF定量结果呈平行性关系,二者相关系数r=0.72,有显著相关性（P＜0．001）。结论：ITA和LAT检测RF具有一致性,但ITA优于LAT。     

增强免疫比浊法用于类风湿因子的定量检测

类风湿因子（ＲＦ）检测方法有多种,目前我国普遍采用乳胶凝集法。该法操作简单,但影响因素较多,且只能作定性分析。我们采用增强免疫比浊定量法检测１００例类风湿疾病患者及３０名正常人血清ＲＦ含量,并同时与乳胶法进行对照分析．１ 资料与方法１．１ 检测对象 筛选１００例我院门诊及风湿科病房类风湿疾病患者,其中男６０例,年龄２５～６０岁;女４０例,年龄３０～５５岁。３０例正常人为健康查体者（无类风湿类疾病者）．１．２ 仪器和试剂 日产欧林巴斯ＡＵ６４０全自动生化分析仪。英国产ＲＦ免疫比浊试剂。国产ＲＦ乳胶试剂…     

胶乳增强透射免疫比浊法测定类风湿因子失败原因分析

胶乳增强透射免疫比浊法测定类风湿因子（RF）是用某种独特技术将RF抗原（人变性IgG）锚定在胶乳表面。血清中的类风湿因子与试剂中的抗原在液相中结合成抗原抗体复合物,产生浊度变化,浊度变化的高低与样本中RF含量成正比。以此得出样本中RF的含量。胶乳可以特意地增大该浊度变化,增大试剂的灵敏度,提高检测阳性率,但是对于RF含量较高或者血清中某种蛋白含量较高、某种药物干扰等的血清标本检测结果有待进一步探讨。     

依据CLSI EP07-A3文件评价血清指数对免疫散射比浊法检测前白蛋白的干扰

目的 探讨溶血、黄疸、脂浊对免疫散射比浊法检测前白蛋白(PA)的干扰效果.方法 以新鲜血清样本作为基础样本,添加干扰物[血红蛋白(Hb)、胆红素及脂质]后,采用免疫散射比浊法检测PA水平.参考美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP07-A3文件进行配对差异实验、剂量效应实验.结果 10 g/L Hb(溶血指数为100...     

Cobas c 501和BNⅡ两种系统检测类风湿因子的性能分析

目的 探讨罗氏全自动生化分析仪Cobas c 501(以下简称Cobas c 501)和西门子全自动特定蛋白分析仪BNⅡ(以下简称BNⅡ)检测类风湿因子(RF)的性能.方法 分别采用Cobas c 501和BNⅡ检测20份室间质评质控品及43份待测RF的标本,分析其精密度、准确度,并探讨二者之间的相关性.结果 采用Co...     

胶乳增强免疫比浊法在甲胎蛋白测定的方法学评价

目的对胶乳增强免疫比浊法(LEIA法)测定甲胎蛋白(AFP)水平,并进行方法学评价。方法用LEIA法测定178例血清的AFP水平,同时采用化学发光免疫分析仪法(CLIA法)对AFP水平进行测定。结果 LEIA法测定AFP的灵敏度为0.65 ng/mL,低、中、高水平的批内CV分别为0.98%、0.92%、0.89%;批间CV分别为1.63%、1.53%、1.45%。回收率96.3%~102.9%。结论 LEIA法是测定AFP较好的方法,适合普及推广。     

类风湿因子对免疫比浊法测定D-二聚体结果的干扰分析

目的了解类风湿因子对两种D-二聚体检测试剂测定D-二聚体结果的干扰情况。方法采用DDimer PLUS试剂和INNOVANCE DDimer试剂分别测定加入不同浓度类风湿因子干扰物的实验血浆D-二聚体含量。结果类风湿因子阳性的标本对两种试剂测定结果影响均较大,在类风湿因子浓度为30.9IU/mL时,DDimer PLUS试剂检测结果影响度为11.4%,INNOVANCE DDimer试剂检测结果影响度为11.68%,两种试剂检测结果影响度均随类风湿因子浓度增加而增大。结论 D-二聚体两种试剂均受类风湿因子干扰,类风湿因子浓度越高,干扰越严重。     

胶乳增强免疫比浊法测定糖化血红蛋白的方法学评价

目的应用美国,旌床实验室标准化委员会的标准化评价方案对胶乳增强免疫比浊法测定HbAlc进行方法学评价。方法依据标准化文件要求,分析胶乳增强免疫比浊法测定HbAlc的精密度、线性范围、回收率和干扰因素,并考察其与高效液相色谱法的相关性。结果该法总变异系数为3．19％（低值）,3．53％（中值）和4．11％（高值）。平均回收率100．2％,在4．4％～13．5％范围内线性良好。胆红素在884μmol／L,三酰甘油在13．5mmol／L时对测定存在干扰。试剂和样本在低温保存时可稳定10天。该法与HPLC法结果明显相关,r=0．994,但整体略高于HPLC法的结果。结论胶乳增强免疫比浊法测定HbAlc方法符合NCCLS标准要求,适应临床需要。临床实验室在建立或引进新的检验项目时需要进行系统的方法学评价以验证检测的有效性和完整性。     

抗环瓜氨酸肽抗体联合类风湿因子诊断类风湿关节炎的临床意义

目的探讨类风湿关节炎(RA)血清标志物抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体的临床价值,并分析其与类风湿因子(RF)的关联性。方法采用化学发光法检测CCP抗体,使用免疫散射比浊法检测RF,并对结果进行统计学分析。结果 113例RA患者抗CCP抗体对RA诊断的敏感性73.5%,阳性83例;84例非RA患者抗CCP抗体特异性97.6%,阳性2例。82例抗CCP抗体与RF检测结果相同(72.6%)。两者无相关性(P0.05)。抗CCP抗体与RF联合检测的敏感性84.1%,特异性98.8%。结论抗CCP抗体与RF抗体联合检测可提高RA的特异性。     

探讨抗环瓜氨酸肽抗体和类风湿因子对类风湿关节炎的诊断价值

目的探讨抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体）、类风湿因子（RF）联合检测对类风湿关节炎（RA）的诊断价值。方法收集2011年5～9月RA和非RA患者202例,分别采用电化学发光法定量检测抗CCP抗体,免疫比浊法检测RF并进行统计学处理。结果抗CCP抗体诊断试验的灵敏度、特异性和阳性、阴性预测值分别为：78.0%、80.6%、82.5%、75.8%;RF为：89.9%、52.7%、69.0%、81.7%;抗CCP抗体与RF联合检测后作并联及串联统计,上述指标并联分别是：93.6%、51.6%、69.4%、87.3%;串联：74.3%、81.7%、82.7%、73.1%。RA组内灵敏度两两比较结果是：RF及联合抗CCP＋RF并联统计与单项抗CCP比较差异均有统计学意义（P〈0.05）,抗CCP＋RF串联统计则与RF比较差异有统计学意义（P〈0.05）。抗CCP抗体和RF的阳性结果均值中,RA组和非RA组的差值较大。结论联合检测抗CCP抗体和RF比单项检测更能为临床对RA的诊断提供丰富的信息,一定程度上避免了抗CCP抗体灵敏度低而造成的漏诊,以及RF特异性低而造成的误诊,为临床早期正确诊断提供依据。     

葡萄糖-6磷酸异构酶抗原与类风湿因子联合检测在类风湿关节炎诊断中的应用及探讨

目的：探讨葡萄糖-6-磷酸异构酶（GPI）与类风湿因子（RF）等指标在类风湿关节炎（RA）诊断中的应用。方法采用酶联免疫吸附试验检测92例类风湿性关节炎患者（活动组60例,非活动组32例）、78例非类风湿关节炎的自身免疫性疾病和56例健康对照者中GPI浓度,免疫比浊法检测RF浓度,同时检测上述人群C反应蛋白（CRP）与红细胞沉降率（ESR）,并进行统计学分析。结果（1）RA组中血清GPI的浓度明显高于疾病对照组及健康对照组,差别具有统计学意义（P＜0．05）。（2）GPI敏感性和特异性为79．3％和90．3％,RF敏感性和特异性为82．6％和69．4％;（3）CRP敏感性（65．2％）、特异性（63．4％）与ESR敏感性（55．4％）特异性（52．2％）两者均低于上述两种检测方法。（4）GPI与RF联合检测能显著提高对类风湿关节炎诊断的特异性（97．0％）。结论 GPI与RF联合检测可显著提高RA诊断的特异性,为临床提供有力的参考。     

抗CCP抗体、RF、CRP、ESR在类风湿关节炎诊断中的应用价值

目的 探讨抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、类风湿因子(RF)、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)在类风湿关节炎(RA)诊断中的意义.方法 选择RA患者42例(RA组),非RA疾病患者34例(非RA组),健康对照组21例,分别采用微粒子酶免疫分析法(MEIA)检测抗CCP抗体,用速率散射比浊法检测RF、CRP,采用Westergren法检测ESR.比较各组之间RF、抗CCP抗体有无显著性差异,同时对RA组抗CCP抗体、RF、ESR、CRP的相关性进行分析.结果 抗CCP抗体对RA的敏感度为76.2%(32/42),特异度为98.2%(54/55);RF对RA的敏感度为81.0%(34/42),特异度为90.9%(50/55);抗CCP抗体与CRP、ESR均无相关性(P>0.05),RF与CRP、ESR均无相关性(P>0.05).结论 抗CCP抗体的敏感度较RF低,但特异度比RF高;与CRP、ESR无相关性.     

胶原诱导性关节炎大鼠滑膜血管内皮生长因子与微血管密度

背景：目前发现的促进血管增生活性最强的是血管内皮生长因子,其在类风湿关节炎滑膜细胞呈现强表达。 目的：观察对胶原诱导性关节炎大鼠不同时间点滑膜血管内皮生长因子表达和微血管计数的变化,探讨血管内皮生长因子和微血管在类风湿关节炎发病机制中的作用及其相关性。 方法：采用Ⅱ型胶原与完全福氏佐剂诱导 SD 大鼠实验性关节炎模型,采用免疫组织化学方法观察实验性关节炎大鼠不同时间点滑膜组织血管内皮生长因子的表达水平和新生血管计数,并同时观察发病时间与关节炎指数积分、血管内皮生长因子及滑膜新生血管数之间的关系。用直线相关分析法分析血管内皮生长因子表达与滑膜新生血管数之间的关系,用等级相关分析法分析关节炎指数积分与血管内皮生长因子表达及滑膜新生血管数之间的关系。 结果与结论：随着实验性关节炎发病时间的延长,滑膜新生血管逐渐增多,滑膜增厚,关节炎指数积分逐渐增加,血管内皮生长因子表达水平和微血管数也随之升高;其关节炎指数积分与血管内皮生长因子表达水平呈正相关关系（r=0.535、P 〈0.05）,血管内皮生长因子表达水平与微血管计数呈显著正相关关系（r=0.860, P〈0.01）。血管内皮生长因子参与了实验性关节炎大鼠滑膜血管翳的形成过程,血管内皮生长因子与微血管密度在类风湿关节炎的发病中具有重要意义。     

类风湿性关节炎关节液中巨噬细胞移动抑制因子与血管内皮生长因子及磷脂酶A2关系研究

目的探讨类风湿性关节炎患者（rheumatoid arthritis,RA）关节液中巨噬细胞移动抑制因子（macrophage migration inhibitory factor,MIF）与血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、磷脂酶A2（phospholipase A2,PLA2）的关系。方法 RA患者30例为RA组,体检健康者30例为对照组,2组采用ELISA法检测患者关节液中MIF、VEGF及PLA2水平,采用RT-PCR检测关节液中MIF、VEGF及PLA2基因表达情况。结果 RA组MIF、VEGF和PLA2水平明显高于对照组（P〈0.05）;RA组MIF、VEGF、PLA2表达水平在晨僵时间、关节肿胀个数及有无手X线异常改变上差异有统计学意义（P〈0.05）,在有无皮下结节、类风湿因子及血沉水平比较差异无统计学意义（P〉0.05）;RA组MIF高表达者关节液VEGF、PLA2基因表达较MIF低表达者明显增高（P〈0.05）。结论 RA患者关节液中MIF水平明显增高,并与VEGF、PLA2表达密切相关。     

Combining mutations of charged residues at the A2 domain interface enhances factor VIII stability over single point mutations

Summary.  Background:  Factor (F) VIII consists of a heavy chain (A1A2B domains) and light chain (A3C1C2 domains), while the contiguous A1A2 domains are separate subunits in the cofactor, FVIIIa. Recently we reported that procofactor stability at elevated temperature and cofactor stability over an extended time course were increased following replacement of individual charged residues (Asp(D)519, Glu(E)665 or Glu(E)1984) with either Ala (A) or Val (V) (Wakabayashi et al. , Blood, 112, 2761, 2008). Objectives:  In the current study we generated combination mutants at these three sites to examine any additive and/or synergistic effects of these mutations on stability. Methods:  Studies assessing FVIII stability involved monitoring decay rates of FVIII at 55 °C or in guanidinium, decay of FVIIIa following A2 subunit dissociation, and thrombin generation at low (0.3 nmol L⁻¹) FVIII concentration. Results and conclusions:  Similar tendencies were observed within each group of variants. Variants with mutations at D519 and either E665 or E1984 (Group A) generally showed significantly better stability as compared with single mutants. Most variants with mutations at E665 and at E1984 (Group B) did not show significant improvement. Triple mutants with mutations at D519, E665 and E1984 (Group C) showed improvement to a similar degree as the Group A double mutants. Overall, these results indicate that selected combinations of mutations to reduce charge and/or increase hydrophobicity at the A2/A1 and A2/A3 domain interfaces yield FVIII reagents with improved stability parameters.     

类风湿关节炎患者易感性与HLA—DR基因相关性研究

目的探讨类风湿关节炎（RA）患者易感性与HLA—DR基因的相关性。方法研究对象为75例RA患者及40例健康体检者．采用PCR—SSP法检测HIA—DR4和HLA—DR53基因分型、BNII全自动特定蛋白分析系统速率散射比浊法和乳胶凝集法同时定量和定性检测类风湿因子,并对结果进行回顾性分析。结果①RA患者HLA—DR4和HLA—DR53等位基因发生的频率数分别为44％和56％。与对照组比较均P〈0．01．结果有非常显著性意义。组间比较,P〉0．05结果无显著性意义,其DR基因与RA的相对危险率分别为3．70和2．64．HLA—DR4高于HIA—DR53。②75例RA患者其速率比浊法和乳胶凝集法分别有59例阳性和44例阳性,两法经,检验,结果均P〈0．01,有非常显著性意义;组间比较经Х^2检验,P〈0．05有显著性意义说明速率比浊法好于乳胶凝集法。③75例类风湿性关节炎患者速率比浊法检测结果为198．59±379．21IU／ml,同对照组比较经t检验,P〈0．01结果有非常显著性意义。结论RA患者其HLA—DR基因与RA的发生易感性明显有关。为临床诊断和鉴别诊断提供依据。