互隔交链孢霉在人食管癌病因学中的意义

霉菌在食管癌病因学中的意义,70年代开始受到人们的关注,现已有多篇综述。甄应中等报道河南省五个食管癌高发县粮食互隔交链孢霉(Alternatia alternata)的污染率高于三个低发县粮食中的污染率。之后,一些研究者相继研究了该菌培养物的粗提物的     

互隔交链孢霉~#261株产生致突性代谢物(摘要)

为了探讨食管癌的霉菌病因,我们用乙醇提取法从食管癌高发区粮食中分离到的互隔交链孢霉~#261株的培养基内提取得到了粉末状代谢物。大肠杆菌回复突变试验和姊妹染色单体     

应用DSI试验观察互隔交链孢霉提取物的诱变性

应用DSI试验对食管癌高发区河南林县粮食中分离的互隔交链孢霉的提取物进行诱变性研究。在五个数量级浓度中,互隔交链孢霉提取物均能明显地抑制DNA的合成。其抑制率为51.2%～62.8%,有明显的剂量相关性。与对照组相比有极显著差异(P<0.01)。追踪观察表明,经10~-3mg/ml浓度的提取物作用后,靶细胞DNA合成速度在与提取物脱离接触后的0.5h内呈进行性下降,以后才逐渐回升,在0.5h处形成一个DNA合成的谷值。故可认为,互隔交链孢霉提取物中含有损伤性DNA合成抑制剂,但损伤修复较快。结果表明,互隔交链孢霉提取物中含有诱变性物质。     

互隔交链孢霉毒素对DNA的损伤作用

共价闭环超螺旋ＤＮＡ变为缺口环状和／或线性ＤＮＡ时，ＤＮＡ链要发生肤裂。利用这一原理来检测互隔交链孢霉毒素：交链孢酚（ＡＯＨ）、交链孢酚单甲醚（ＡＭＥ）引起ＤＮＡ链的断裂。结果表明，这两种物质对ＤＮＡ都有直接损伤作用，但是它们的作用强度和方式是不相同的，ＡＯＨ对ＤＮＡ的损伤作用强，并可与ＤＮＡ结合。     

互隔交链孢霉毒素对DNA的损伤作用

共价闭环超螺旋ＤＮＡ变为缺口环状和／或线性ＤＮＡ时，ＤＮＡ链要发生断裂。利用这一原理来检测互隔交链孢霉毒素：交链孢酚、交链孢酚单甲醚引起ＤＮＡ链的断裂。结果表明，这两种物质对ＤＮＡ都有直接损伤作用，但是它们的作用强度和方式是不相同的，ＡＯＨ对ＤＮＡ的损伤作用强，并可与ＤＮＡ结合。     

互隔交链孢霉提取物诱发细菌回复突变和重组效应的研究

从林县粮食中分离的20株互隔交链孢霉取其培养物的乙醚和乙醇提取物分别对E.Coli-ND160菌株的回复突变和对枯草杆菌H_(17)和M_(45)菌株的重组效应进行检测。其结果20株提取物(包括乙醚和乙醇提取物)中有17株诱发了细菌回复突变,19株中有16株提取物出现     

互隔交链孢毒素的研究

为了探讨互隔交链孢(Alternaria alternata)的代谢产物对人体细胞DNA的损伤作用,对实验动物的急性中毒致死能力和污染粮食后在不同粮食及不同条件下的产毒情况,我们进行了以下几项试验。     

互隔交链孢霉甲基醚对软骨细胞作用的超微结构观察

采用软骨细胞体外单层增减的方法，观察真菌毒互隔交链孢霉甲基醚对幼兔关节软骨细胞胞作用的超微结构改变。结果表明该毒素能引起细胞质内滴增多，脂滴周围出现较高电子密度的颗粒，以及似胆固醇的结晶，而且随毒素浓度增高而变化区域增大。     

大量互隔交链孢霉代谢物的提取分离与纯化

用简单硅胶柱层析系统及实验室常用仪器和试剂,从大量互隔交链孢霉培养物中提取分离与纯化出七种化学物质(其中有些是已知化合物),避免了使用大型仪器设备和昂贵的药品。     

互隔交链孢霉提取物261—B_2—3对V_(79)细胞致突变作用的研究

交链孢属是一种广泛存在的植物病原,它侵污许多农作物。食管癌高发区粮食中互隔交链孢霉的污染率高于低发区,本文报告从林县粮食中分离的互隔交链孢霉乙醇、甲醇等溶剂的连续提取物261—B_2—3对V_(7(?))细胞6—巯基鸟嘌呤耐受(6—TG~r)种实变试验获阳性     

90株互隔交链孢霉培养物的致突变性研究

90株互隔交链孢霉分别从林县地区(食管癌高发病区)和范县、商邱地区(食管癌低发病区)的粮食中分离。这些菌株培养物的乙醚提取物用E.coliND—160菌株检测其致突变性。其中66株提取物(73.3%)显示不同程度的致突变效应。这个结果提示互隔交链孢霉的产毒菌株广泛存在。林县地区粮食污染互隔交链孢霉的百分率远远超过其它二地区(P<0.001)。我们认为互隔交链孢霉的毒性代谢物可能对林县地区食管癌的发病率起着重要作用。本文还叙述和讨论了互隔交链孢霉的毒性代谢物。     

互隔交链孢霉提取物261—B_2—3诱发人羊膜FL细胞UDS的研究

本文应用互隔交链孢霉261株提取物261—B_2—3诱发人羊膜FL细胞UDS,以研究其致突变性。按余应年等的方法,在~(14)C—TdR预标记的FL细胞中由提取物引起酸不溶性组分的HU抗性非程序性~3H—TdR掺入。用液闪计数器测量。以放射比~3H/~(14)C为UDS水平的反     

互隔交链孢霉毒素诱发人胎食管上皮组织c-Ha-ras点突变的研究

体外培养的人胎儿食管上皮组织经互隔交链孢霉毒素AME或AOH短时间(4h)处理后,提取该组织高分子量DNA;同时提取未经处理的人胎儿食管上皮组织DNA(空白对照)以及食管癌组织和癌旁组织DNA。提取的高分子量DNA作为模板进行PCR反应,扩增含c-Ha-ras癌基因第12位密码子的104bp片段。该片段中第12位密码子处存在限制性内切酶     

互隔交链孢霉毒素引起大鼠肝细胞DNA单链断裂的作用

应用碱性洗脱荧光分析法对互隔交链孢霉产生的两种主要毒素——交链孢酚单甲醚(Alternariol Monomethyl Ether.AME)和交链孢酚(Alternariol.AOH)引起大鼠肝细胞DNA单链断裂效应进行了研究。实验结果表明:二者都能引起大鼠肝细胞DNA单链断裂,并有明显的剂量效应关系.DNA在滤膜上的存留分数明显低于溶剂对照组.具有统计学意义(P<0.01)。结果提示AME和AOH有致突变作用,二者可能是林县食管癌的病因之一。     

互隔交链孢霉毒素AME和AOH合成物的诱变性

对互隔交链孢霉毒素——交链孢酚单甲醚(Alternariol monomethyl ether,AME)和交链孢酚(Alternariol.AOH)的合成物进行了细菌回复突变试验.检测其诱变性。结果表明:AME和AOH提取物和合成物(不加S_9)对鼠伤寒沙门氏菌TA102菌株和大肠菌ND-160菌株.均显示致突变效应.而后者对AME和AOH更为敏感。用相同剂量.AOH对大肠杆菌ND—160菌株诱变比值(MR)比AME高2～7倍,表明AOH的诱变性更强。合成物与提取物相比,合成物的诱变作用较强。     

河南省食管癌高低发区粮食中互隔交链孢霉毒素的化学检测

互隔交错孢霉毒素从随机采集于食管癌高低发区粮食样品中被提取后,用化学方法纯化,再经薄层层析(TLC)检测。结果显示:高低发区粮食中毒素的阳性率有显著差异,提示高发区互隔交链孢霉毒素在粮食中的广泛存在与食管癌的发生有密切关系。     

互隔交链孢霉诱发姐妹染色单体互换及染色体畸变的研究

本文介绍了10株互隔交链孢霉提取物诱发人淋巴细胞姐妹染色单体互换(SCE)及染色体畸变。结果发现,当用不同浓度提取物加入培养基时,有8株所诱发的SCE增高,与对照组比较差异极为显著(P<0.01)、在8株阳性株中,有6株在加入低量提取物时即诱发SCE频率增高显示统计学差异、同时,在阳性株中有两株提取物所诱发的染色体畸变频率增高,与对照组比较亦有极显著性差异(P<0.01)。由此可见,多数互隔交链孢霉菌株(8/10)所产生的代谢产物或毒素,都含有致突变物,不同菌株具有不同强度的致突作用。另外,对应用人淋巴细胞的SCE技术检测致突变物的优点进行了讨论。