逆转录病毒介导的IL6/IL2融合基因转导对小鼠B16细胞粘附及转移特性的影响

为探讨细胞因子之间对肿瘤细胞修饰的协同效果及融合基因用于肿瘤细胞转染的可行性,我们采用PCR及柔性接头连接的方法,构建了含人IL6/IL2融合基因的逆转录病毒载体,将其转染小鼠B16黑色素瘤细胞,对基因转导后细胞的粘附及实验性肺转移能力进行了测定.实验结果表明,融合基因转导的细胞所分泌产生的融合蛋白具有IL-2和IL-6两种细胞因子活性.对肿瘤细胞体外粘附及转移能力的测定结果表明,经融合基因修饰的B16细胞对细胞外基质的主要成分Laminin及重组基底膜Matrigel的粘附得到抑制,同时伴有实验性转移能力降低.这一结果提示,融合基因转导可明显降低肿瘤细胞的转移能力,其机制可能与基因修饰细胞相关生物学特性的改变及其对机体的免疫刺激活性有关.     

IL—4基因转染人胃癌细胞的实验研究

目的：评价ＩＬ－４基因转染人胃癌细胞株分泌ＩＬ－４的可行性。方法：用脂质体转染法将ＩＬ－４基因转入ＳＧＣ－７９０１人胃癌细胞株，并检测细胞分泌的ＩＬ－４和对ＬＡＫ细胞杀伤肿瘤细胞作用的影响。结果：ＩＬ－４基因可以转染入人胃癌细胞，并表达有活性ＩＬ－４，基因转染可以明显增强ＩＬ－２激活的ＬＡＫ细胞的肿瘤杀伤作用，用大剂量的γ射线照射后，转染细胞仍可以持续分泌ＩＬ－４３～４周期。结论：ＩＬ－４基因转染不改变胃癌细胞的体外生长特性，但可以明显增强抗肿瘤免疫反应     

外源性IL—6对人脑髓母细胞瘤生长的促进作用

作者采用分子生物学和细胞免疫学手段，在国内外首次研究了ＩＬ－６基因在髓母细胞瘤内的表达和产生，及其对肿瘤细胞生长的作用。结果发现，１３例被检样本中１２例有ＩＬ－６信息传导基因－ＩＬ－６Ｒ和ｇｐ１３０的表达，但无一例表达ＩＬ－６。重组ＩＬ－６可明显促进细胞生长和ＤＮＡ合成。结果提示，ＩＬ－６可通过旁分泌途径促进髓母细胞瘤生长。由于髓母细胞瘤周围和内部存在ＩＬ－６分泌细胞，本研究对揭示肿瘤与其间质细胞     

逆转录病毒介导IL—2基因导入肝癌细胞的研究

利用逆转录病毒载体系统ＰＡ３１７／ＬＮＣ－ＩＬ－２所产生的含有ＩＬ－２基因及新霉素抗性基因的重组病毒，经共培养转染ＳＭＭＣ－７７２１肝癌细胞株。ＩＬ－２基因受巨细胞病毒早期启动子调控，转染后的细胞置于含新霉素类毒性药物Ｇ４１８（４００ｕｇ／ｍｌ）培养基内培养、筛选３０天，结果果转染率约为１￣２％。对存活下来的转染有ＩＬ－２基因和新霉素抗性基因的细胞形态和生长情况进行观察，同时从水平及蛋白质水平对外     

外源性IL－6对人脑髓母细胞瘤生长的促进作用

作者采用分子生物学和细胞免疫学手段，在国内外首次研究了ＩＬ－６基因在髓母细胞瘤内的表达和产生，及其对肿瘤细胞生长的作用。结果发现，１３例被检样本中１２例有ＩＬ－６信息传导基因─ＩＬ－６Ｒ和ｇｐ１３０的表达，但无一例表达ＩＬ－６。重组ＩＬ－６可明显促进细胞生长和ＤＮＡ合成。结果提示，ＩＬ－６可通过旁分泌途径促进髓母细胞瘤生长。由于髓母细胞瘤周围和内部存在ＩＬ－６分泌细胞，本研究对揭示肿瘤与其间质细胞间的相互作用有一定的理论和临床意义。     

IL—2膀胱内注射及BCG＋IL—2联合膀胱灌注预防膀胱癌复发

目的　为预防膀胱癌术后复发。方法　对４０例膀胱癌患者于术中或ＴＵＲＢＴ术后癌肿切缘周围组织粘膜下注射５０万ｕ ＩＬ－ ２，以后每３ 月定期用自制输尿管导管针注射。并联合应用ＢＣＧ１２０ ｍ ｇ＋ ＩＬ－ ２１０ｕ 膀胱内灌注。同时随机对３０例同期膀胱癌术后患者用丝裂霉素Ｃ４０ｍｇ 膀胱内灌注为对照组。结果　随访４－ ７２个月，平均２８．６ 个月。无肿癌复发率ＩＬ－ ２膀胱内注射及ＩＬ－２＋ ＢＣＧ灌注组９５％ ，丝裂霉素Ｃ灌注组（对照组）８６．７％ 。比较两组有显著性差异（Ｐ＜ ０．０５）。结论　ＩＬ－ ２ 膀胱内注射及ＢＣＧ＋ ＩＬ－ ２ 联合膀胱内灌注防止膀胱癌术后复发更为有效。内注射ＩＬ－ ２，并于术后２ 周开始用ＢＣＧ＋ ＩＬ－ ２ 联合膀胱内灌注，这样可使血和尿ＩＬ－ ２ 水平长时间增高，且可有效观察肿瘤是否复发，可以充分发挥ＩＬ－ ２淋巴因子对肿瘤细胞的杀伤作用，ＢＣＧ还可使膀胱粘膜移行细胞变薄，刺激Ｔ细胞增殖转化成特异性细胞毒性Ｔ细胞，使局部呈炎性反应。我们行膀胱镜检时发现ＩＬ２ 膀胱内注射及ＢＣＧ＋ ＩＬ２ 膀胱灌注３ 月左右，病人的膀胱粘膜失去正常结构，膀胱粘膜变白，表面有炎性渗出物，呈“板块状”，弹性差，组织脆弱，这     

肝癌特异性转移因子对IL—2活性及IL—2R表达的影响

用免疫山羊的淋巴组织经匀浆透析法制备抗肝癌特异性转移因子，并在体外观察其对ＩＬ－２活性及ＩＬ－２４表达的影响。结果显示：肝癌特异性转移因子可明显地增加肝癌患者的ＩＬ－２活性及ＩＬ－２Ｒ表达，而对正常人的ＩＬ－２活性及ＩＬ－２Ｒ表达无影响，正常转移因子对正常人及肝癌患者的ＩＬ－２活性及Ｉ－２Ｒ表达均无影响；特异性转移因子可特异性地促进分泌ＩＬ－２和表达ＩＬ－２Ｒ异常的细胞恢复正常。提示这可能是特异性     

IL—12抗肿瘤活性的研究进展

ＩＬ－１２通过调节免疫细胞活性，诱导ＩＦＮγ的生成，与ＩＬ－２协同作用增强ＮＫ细胞、ＬＡＫ细胞、ＣＴＬ细胞活性而杀伤肿瘤细胞。引外，ＩＬ０１２不有间接抗血管生成作用，与其它抗血管生成药物联合可增强抑制血管生成效果。这表明ＩＬ－１２在肿瘤生成脑力名具有重要意义。研究ＩＬ－１２抗血管生成机理，寻找应用ＩＬ－１２的有效联合治疗方案是一个具有床应用的前景的研究领域。     

逆转录病毒介导IL－2基因导入肝癌细胞的研究

利用逆转录病毒载体系统ＰＡ３１７／ＬＮＣ－ＩＬ－２所产生的含有ＩＬ－２基因及新霉素抗性基因（ｎｅｏｒ）的重组病毒，经共培养转染ＳＭＭＣ－７７２１肝癌细胞株。ＩＬ－２基因受巨细胞病毒早期启动子调控，转染后的细胞置于含新霉素类毒性药物Ｇ４１８（４００ｕｇ／ｍｌ）培养基内培养、筛选３０天，结果果转染率约为１～２％。对存活下来的转染有ＩＬ－２基因和新霉素抗性基因的细胞形态和生长情况进行观察，同时从水平及蛋白质水平对外源性基因的转录和翻译进行检测。结果表明：ＳＭＭＣ－７７２１肝癌细胞在ＩＬ－２基因转染前后形态及生长情况无明显变化；培养上清活性检测发现转染后为转染前的２０～３０倍；逆转录ＰＣＲ分析显示转染后的ＩＬ－２ｍＲＮＡ量明显高于转染前。研究表明我们已成功地将ＩＬ－２基因导入肝癌细胞并获得持续、稳定、高效表达。     

白血病中IL－2受体基因的表达及其意义

利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测１１６例各种白血病细胞ＩＬ－２受体基因的表达情况。该基因在Ｔ－ＡＬＬ、ＣＬＬ、Ｃ－ＡＬＬ和ＡＮＬＬ都有相当高的表达率，分别为１００％、１００％、７１．４３％和６５％。该方法较ＡＰＰＡＰ和免疫荧光法发现更高的阳性率，提示其敏感性及准确性更高。本文结果显示了大部分的白血病细胞都表达了ＩＬ－２受体基因，推测ＩＬ－２受体可能是白血病细胞所具有的一种普遍特性，而ＩＬ－２则可能在白血病细胞的增殖中起一定的作用。故提出临床上应重新评价ＬＡＫ细胞和ＩＬ－２在白血病中的治疗价值。     

肿瘤T细胞免疫信号传递的恢复及治疗前景

本文在介绍Ｔ细胞活化的信号传递基础上，从分子和基因水平上总结了肿较Ｔ细胞信号传递百志致的对肿瘤不能正常发挥免疫应答的机制；同时结合近看来的研究进展，分析了利用基础基因工作技术转导细胞因子基因到肿瘤细胞方法的可行性，阐述了细胞因子纠正肿交个体Ｔ细胞信号异常的分子机制，特别了ＩＬ－２基因转导肿瘤细胞恢复信号传递的作用方式及其治疗上的应用前景。     

IL—6R与脑胶质瘤的恶性增殖

白细胞介素－６（ＩＬ－６）与ＩＬ－６受体（ＩＬ－６Ｒ）的自分泌或旁分泌环路在肿瘤发生发展中的作用越来越受到重视。随着对ＩＬ－６Ｒ结构和功能及其与脑胶质瘤关系的研究不断深入，初步推测脑胶质瘤细胞及组织中也存在ＩＬ－６－ＩＬ－６Ｒ自分泌或旁分泌环路，这为脑胶质瘤的免疫治疗提供了新的思路。     

IL—6在脑胶质瘤发生发展中的作用

脑胶质瘤是神经系统肿瘤中发病率和复发率最高的肿瘤，但其病因尚不十分清楚。国内外学者先后从培养的人脑胶质瘤细胞株和胚胎脑胶质细胞中观察到ＩＬ－６基因的持续表达和ＩＬ－６的持续分泌，并可在其它细胞因子的刺激下提高ＩＬ－６基因表达量，初步推测脑胶质瘤的发生发展可能与这些细胞因子基因异常表达及分泌有关。     

转基因细胞SPC-A-1/IL-2的致突变性研究 *

目的：观察转基因细胞ＳＰＣ－Ａ－１／ＩＬ－２的致突变作用,为转基因肿瘤细胞作为瘤苗进行临床应用的安全性检测提供依据。方法：在人ＩＬ－２的ｃＤＮＡ与逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ重组并完成ＰＡ３１７／ｐＬＩＬ－２ＳＮ包装体系的基础上,将ＩＬ－２基因导入人肺腺癌胸膜转移细胞系ＳＰＣ－Ａ－１中并得到ＩＬ－２基因的稳定表达,然后通过遗传毒理学实验技术对转基因细胞ＳＰＣ－Ａ－１／ＩＬ－２的ＤＮＡ及培养上清液进行体内和体外的致突变性实验研究。结果：转基因细胞ＳＰＣ－Ａ－１／ＩＬ－２的ＤＮＡ及培养上清液均未显出致突变作用。结论：转基因细胞ＳＰＣ－Ａ－１／ＩＬ－２作为瘤苗应用可初步视为是安全可靠的。     

肺癌患者IL－2RmRNA表达的临床意义

制备了人ＩＬ－２ＲａｃＤＮＡ探针，采用斑点印迹杂交法对４６例肺癌患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）ＩＬ－２ＲｍＲＮＡ的表达水平进行研究。结果发现ＩＬ－２ＲｍＲＮＡ的表达程度与肿瘤转移关系密切。肺癌无转移组：ＩＬ－２ＲｍＲＮＡ表达显著高于对照组与转移组（Ｐ＜０．００１），且与患者的组织学类型及病期有明显关系。转移组：ＩＬ－２Ｒ表达显著低于对照组（Ｐ＜０．００１），提示此组病人存在免疫抑制．其抑制可能存在细胞活化阶段或ＩＬ－２Ｒ的转录水平。同期所测血清肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）在两组患者无明显差异。本组结果提示：ＩＬ－２ＲｍＲＮＡ表达水平与患者预后密切相关。     

IL—6基因转导对人乳腺癌细胞系MCF—7细胞体内外生长特性的影响

为探讨ＩＬ－６基因转导对人乳腺癌细胞体内外生长特性的影响，我们构建了含人ＩＬ－６ｃＤＮＡ的逆转录病毒载体ｐＬＩＬ６ＳＮ。采用脂质体介导的方法将ｐＬＩＬ６ＳＮ导入ＭＣＦ－７细胞中，对基因转导细胞的体外生长、粘附特性及裸鼠体内的实验性转移能力进行了测定。实验结果表明，经ＩＬ－６基因修饰的ＭＣＦ－７细胞虽显示了明显的体外生长抑制，裸鼠体内实验性转移能力却获得增强。文中对其可能的影响机制进行了探讨     

肺癌患者血清IL—2,IL—6和IL—8水平的初步研究

目的 肺癌日益威胁着人们的健康。目前认为肺癌的发生是由于各种有害因素作用下机体免疫功能失调所致。而细胞因子是调节机体免疫功能的重要因素，可能在肺癌的发病机制中起着某种作用。本研究目的是为了探讨ＩＬ－２，ＩＬ－６，ＩＬ－８在肺癌发病中的作用。方法 用酶联免疫吸附法测定了２１例非小细胞肺癌，１７例小细胞肺癌及１０例健康人血清ＩＬ－２，ＩＬ－６，ＩＬ－８水平，统计学处理用两样本均数的ｔ检验。     

白血病细胞产生的免疫抑制因子对IL2作用的影响

人白血病细胞产生的免疫抑制因子（ＴＤＳＦ）作用于人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）６小时，即可抑制白细胞介素２（ＩＬ２）产生，与对照组相比Ｐ＜０．０１。当ＴＤＳＦ存在时，经驯化的ＰＢＭＣ效应细胞对外源性ＩＬ２反应显著减弱，表明ＴＤＳＦ能抑制ＩＬ２的利用。ＰＨＡ－Ｐ刺激ＰＢＭＣ增殖，但ＴＤＳＦ使其增殖抑制。表明：ＴＤＳＦ能抑制ＩＬ２产生及其作用；抗癌药对ＴＤＳＦ的分泌有部分阻抑作用。     

白细胞介素6及其毒素融合蛋白抗肿瘤作用的研究进展

白细胞介素６（ＩＬ－６）是一种具有多种功能的细胞因子，除参与免疫调节和造血调控外，还参与了机体的抗肿瘤免疫。ＩＬ－６主要通过调动机体免疫机制发挥抗肿瘤效应，亦能直接抑制肿瘤细胞增殖，但在一定条件下能促进某些恶性肿瘤细胞增殖；ＩＬ－６毒素融合蛋白则能高选择地杀伤高表达ＩＬ－６受体（ＩＬ－６Ｒ）的肿瘤细胞。本文拟就ＩＬ－６及其毒素融合蛋白的抗肿瘤研究进展作一综述。     

肺癌患者IL—2R mRNA表达的临床意义

制备了ＩＬ－２ＲａｃＤＮＡ探针，采用斑点印迹杂交法对４６例肺癌者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）ＩＬ－２Ｒ ｍＲＮＡ的表达水平进行研究。