脑肿瘤中P53基因突变与突变型P53蛋白表达的研究

采用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）法对４１例脑肿瘤进行Ｐ５３基因突变的检测，并与抗突变型Ｐ５３蛋白单抗的免疫组化染色结果相对照，结果显示脑肿瘤中Ｐ５３基因突变率为３４．１％（１４／４１），胶质瘤为２８％（１０／３６）。Ｐ５３基因突变与突变型Ｐ５３蛋白表达具有高度一致性，且二者均与脑肿瘤的分化程度有关。Ｐ５３基因突变及蛋白的表达不仅出现在高恶度胶质瘤及转移癌，而且可出现在低恶度胶质瘤中，表明Ｐ５３基因的突变在脑瘤的发生、发展过程中起重要作用。     

人脑胶质瘤组织中P53基因的突变研究

人脑胶质瘤组织中Ｐ５３基因的突变研究高振强高志萍为了研究Ｐ５３基因在脑肿瘤发生过程中的作用，我们采用目前检测基因突变最先进ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术，对脑胶质瘤组织中Ｐ５３基因进行了研究。一、材料与方法脑胶质瘤来自医院手术标本，共３０例，其中多形性成胶质细...     

脑肿瘤中P53蛋白的表达及Ki－67LI的相关性研究

利用突变型Ｐ５３蛋白的单抗及Ｋｉ－６７单抗对５０例冰冻标本进行检测，结果发现，脑肿瘤中突变型Ｐ５３蛋白的表达阳性率为４６％。低恶度胶质瘤、高恶度胶质瘤及转移癌中Ｐ５３蛋白表达的阳性率不同，分别为１８．２％、５３．８％及１００％。Ｐ５３蛋白表达阳性的肿瘤中高Ｋｉ－６７ＬＩ比例为７０％，其中位数及均数为１４．３％、２０．７６±１８．３（％），而无Ｐ５３蛋白表达的脑瘤中，ｋｉ－６７ＬＩ中位数及均数分别为１．３９及５．１９±９．０（％）。结果表明，突变型Ｐ５３蛋白的表达与脑肿瘤的组织类型，分化程度及细胞的增殖有关，而它的高表达又可能是肿瘤恶性表型或转移的标志之一。     

胸腺瘤中P53蛋白表达研究

目的:研究P53蛋白在胸腺瘤中的表现及临床意义。方法:用免疫组化染色法观察54例胸腺瘤中P53蛋白表达阳性细胞密度和分布。结果:发现P53表达与胸腺瘤浸润与否密切相关,26例恶性胸腺瘤(Ⅰ和Ⅱ型)中18例P53蛋白高度表达,而28例非浸润性胸腺瘤仅2例高度表达(P＜0.01),P53高度表达患者生存期较非高度表达者明显短。显示P53蛋白表达异常可作为胸腺瘤病变性质和判断病人预后的指标。54例胸腺瘤中49例P53蛋白表达阳性(90.7%)。结论:P53表达异常发生于胸腺瘤的早期。     

44例人脑胶质瘤P53基因突变的研究

用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ及ＤＮＡ直接测序研究了４４例人脑胶质瘤。发现１３例有Ｐ５３基因突变。３３例星形细胞瘤１２例有Ｐ５３基因突变。１１例非星形细胞瘤１例有Ｐ５３基因突变。ＤＮＡ直接测序证实所有突变均在Ｐ５３基因第５～８外显子，发现了一些新的突变位点，并发现在３例胶质母细胞瘤中存在Ｐ５３基因的多个位点的突变。该结果提示在大多数非星形细胞胶质瘤并不涉及Ｐ５３基因突变，Ｐ５３基因突变对星形细胞瘤的诊断有重要价值。特别是多位点的Ｐ５３基因突变可做为星形细胞瘤进展到胶质母细胞瘤的基因标志。     

脑胶质瘤P53基因及其表达蛋白研究进展

P53肿瘤抑制基因的缺失、点突变是迄今发现的胶质瘤最常见的分子生物学改变。近来的研究表明,星形细胞瘤P53基因突变率较其它类型的胶质瘤高,胶质瘤P53基因突变多分布于第4—8外显子上,以错义突变为主,常常合并另一等位基因杂合性丢失。P53基因的缺失、突变和胶质瘤的病理级别、增殖能力有关。免疫组化研究显示,恶性胶质瘤常常存在P53蛋白过度表达。本文就此方面的进展及面临的问题作一概述。     

人脑胶质瘤P53基因突变的研究现状

P53基因是目前肿瘤学研究的热点。本文就近年来关于P53突变在人脑胶质瘤发生,发展中的作用及人脑胶质瘤中P53基因突变的特点作一综述。     

脑胶质瘤P^53蛋白表达的初步研究

作者随机选取２２例星形细胞瘤的新鲜标本作冰冻切片，然后采用抗Ｐ＾５３单克隆抗体ｐＡｂ２４０，按ＡＢＣ法作免疫组化检测。结果发现星形细胞瘤Ｉ级Ｐ＾５３蛋白表达阳性率为０，Ⅱ级阳性率为２５％，Ⅲ－Ⅳ级阳性率为５０％，三组间的阳性率有极显著差异。本文还讨论了Ｐ＾５３基因的生物学特性及其与临床的关系。     

P53蛋白在脑胶质细胞瘤中的表达

用SP免疫组化方法检测79例脑胶质细胞瘤中P53蛋白的表达,总阳性率为21.52%.其中星形细胞瘤及室管膜瘤阳性率分别为26%及25%,且Ⅲ、Ⅳ级肿瘤阳性率及表达量均显著高于Ⅰ、Ⅱ级肿瘤.表明P53蛋白的表达与这两型肿瘤的恶性程度密切相关.但临床上恶性程度很高的髓母细胞瘤反而未见表达.     

Accumulation of wild-type p53 in meningiomas

The p53 tumour suppressor gene contributes to the regulation of DNA repair and the initiation of apoptosis. Mutations of this gene and nuclear accumulation of its protein product are features of a large variety of turnours. A histological spectrum of meningiomas, including anaplastic examples and a meningosarcoma. was analysed for accumulation of the p53 protein and mutations in exons 4–9 of the p53 gene. No mutations were found, but 9134 (26%) tumours showed accumulation of the p53 protein. The p53-positive meningiomas came from across the histological spectrum and were not restricted to the anaplastic group. The accumulation of wild-type p53 in a proportion of meningiomas may reflect this gene's role in DNA repair, or its enhanced stability when bound to cellular proteins such as the mdm-2 gene product.     

星形细胞瘤中肿瘤抑制基因p53的表达及PCNA、GFAP、Vimentin、S-100的研究

目的检测30例不同病理级别星形细胞瘤标本中p53基因的表达状垠及肿瘤其它生物学特性。方法采用常规HE染色及免疫组化技术检测30例标本中p53、增殖细胞核抗原（PCNA）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、波形蛋白（VIM）、S－100蛋白的表达。结果p53免疫组化染色阳性率随病理级别增高而增高，Ⅳ级染色阳性率83．3％，Ⅰ～Ⅱ级15．4％，且不同级别染色有差异，PCNA均呈阳性，Ⅳ级病理染色阳性强度大于Ⅰ级。GFAP、S-100随病理级别升高而阳性率降低，VIM却随病理级别升高而升高。结论检测p53突变产物，可判定星形细胞瘤恶性程度与预后，p53基因在星形细胞瘤发展、演化中有重要作用。PCNA可反映星形细胞瘤增殖活性及恶性程度。GFAP、VIM、S－100的测定也可了解其分化程度，三者结合可增加判断的准确性。     

p53 and PTEN gene mutations in gemistocytic astrocytomas

The gemistocytic astrocytoma is a histological variant of diffuse astrocytomas and is characterised by the presence of large, GFAP-expressing neoplastic astrocytes (gemistocytes) and a tendency towards rapid progression to glioblastoma. In this study, we analyzed 28 gemistocytic astrocytomas (mean fraction of gemistocytes, 35.0 ± 9.9%) for mutations in the p53 and PTEN (MMAC1) tumour suppressor genes. Single strand conformation polymorphism (SSCP), followed by direct DNA sequencing of p53 exons 5–8, revealed a mutation in 23 of 28 (82%) cases. Regional analysis of four tumours revealed identical p53 mutations in gemistocytic and fibrillary tumour areas. In contrast, none of 15 gemistocytic astrocytomas (WHO Grade II) and only two of 11 (18%) anaplastic gemistocytic astrocytomas (WHO Grade III) contained a PTEN mutation. Of these, one was a 1 bp deletion in codon 345 and the other a 1 bp insertion in intron 4. Differential PCR did not reveal homozygous PTEN deletion in any of the tumours analysed. These results indicate that p53 mutations are a genetic hallmark of gemistocytic astrocytomas, whilst PTEN mutations are absent in low-grade and rare in anaplastic gemistocytic astrocytomas. Received: 16 February 1998 / Accepted: 2 March 1998     

p53、CerbB-2和PCNA在脑胶质瘤中表达的意义及其相关性研究

目的研究76例脑胶质瘤的p53、CerbB－2和PCNA表达意义及其相关性。方法应用SP微波免疫组化技术和统计学分析。结果（1）在76例脑胶质瘤组织中，p53、CerbB－2和PCNA的阳性表达率分别是44．74％（34／76）、34．21％（26／76）和80．26％（61／76）。（2）p53的表达强度与胶质瘤的组织学类型和恶性程度呈显著正相关（P＜0．01）。（3）p53、CerbB－2和PCNA三者之间有阳性表达相关性（P＜0．05）。结论（1）P53的异常表达影响瘤细胞的分化，可能是胶质瘤的恶性表型和诊断指标之一。（2）CerbB－2的异常表达与p53异常有关，在胶质瘤生长中起重要作用。（3）多项癌基因的检测有助于脑胶质瘤的病理分析和生物学行为观察。     

Mdm2和p53基因在颅内非生殖细胞瘤性生殖细胞肿瘤中的表达意义

目的 研究鼠双微基因2(mdm2)基因和p53基因在颅内非生殖细胞瘤性生殖细胞肿瘤患者(NGGCTs)中的表达及意义. 方法 利用半定量RT-PCR技术检测了15例NGGCTs肿瘤(成熟畸胎瘤6例,未成熟畸胎瘤5例,卵黄囊瘤2例,绒毛膜上皮癌2例)中mdm2和p53 mRNA的表达,并与正常人群进行比较,另外检测p53基因5～8外显子的突变情况.结果 p53和mdm2mRNA在各类NGGCTs中均有较高水平表达,与正常对照组比较差异有统计学意义(P=0.000);p53mRNA在各类肿瘤中表达强度差异无统计学意义(P=0.056);mdm2基因在非生殖细胞瘤性恶性生殖细胞肿瘤(NGMGCTs)中表达强度较成熟畸胎瘤高,差异有统计学意义(P=0.000);mdm2和p53mRNA的表达强度无显著相关性(r=0.418,P=0.121);15例NGGCTs肿瘤均未检测到p53基因的突变.结论 mdm2基因异常表达与NGMGCTs肿瘤关系密切,p53基因突变并非NGGCTs形成的主要原因,mdm2和p53之间相互作用共同影响NGGCTs肿瘤的发生发展过程.     

p53基因联合顺铂对实验性胶质瘤的治疗作用

目的观察p53基因和顺铂对实验性胶质瘤的治疗作用。方法先以人胶质瘤细胞株U251建立裸鼠胶质瘤模型,然后瘤体内注射p53基因和/或腹腔内注射顺铂,定期测量肿瘤的大小。结果观察30d,p53基因联合顺铂治疗组的肿瘤大小为(0.44±0.05)cm3,顺铂治疗组为(0.92±0.03)cm3,p53基因治疗组为(1.16±0.10)cm3,对照组为(1.72±0.17)cm3,各组间差异有显著性意义(P<0.05)。结论对实验性胶质瘤,p53基因联合顺铂治疗组的疗效好于单用p53基因或顺铂治疗组。     

Accumulation of wild-type p53 in astrocytomas is associated with increased p21 expression

Approximately one quarter of human astrocytomas show immunohistochemical positivity for p53 protein but lack p53 gene mutations, which could reflect either an accumulation of wild-type p53 protein or an inadequate sensitivity of mutation detection. Since wild-type p53 up-regulates p21 expression, increased p21 expression in those astrocytomas with p53 accumulation in the absence of mutations would argue that the protein was wild type in these tumors. We therefore compared p21 expression with p53 gene and protein status in 48 primary human astrocytomas. Single-strand conformation polymorphism analysis and direct sequencing of the p53 gene showed mutations in 11 tumors (22.9%), while immunohistochemistry revealed positive staining in 19 cases (39.6%). Those tumors with p53 immunopositivity in the absence of p53 mutation had significantly increased p21 expression when compared to either mutant p53 or p53-immunonegative cases. Neither p53 nor p21 status correlated with proliferation indices, as assessed by Ki-67 immunohistochemistry. These results support the hypotheses that functionally wild-type p53 accumulates in some astrocytomas, and that alternative cell cycle checkpoints (such as the p16 pathway) may be more important than p21 in regulating proliferation in astrocytomas. Received: 11 October 1996 / Revised, accepted: 17 January 1997     

野生型p53基因导入诱导神经细胞凋亡

目的　观察野生型 p5 3基因诱导神经细胞凋亡的现象 ,探讨外源性 p5 3基因对神经细胞 p2 1、c-fos和 c-jun基因表达的影响。方法　构建了野生型 p5 3基因的重组线病毒载体 ,体外转染胚胎大鼠神经细胞 ,应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的切口末端标记技术原位检测细胞凋亡 ,以免疫组化法测定 P2 1 、c-Fos和 c-Jun蛋白表达水平。结果　外源性基因导入神经细胞后 ,P2 1、c-Fos和 c-Jun蛋白水平显著增高 ,d UTP切口末端标记阳性细胞百分率约为 4 0 %。结论　野生型 p5 3基因可诱导神经细胞凋亡和促进 p2 1、c-fos和 c-jun基因表达