奥曲肽对胃癌细胞株SGC7901生长调控作用的研究

目的 研究奥曲肽(OCT)对人胃中分化腺癌细胞株SGC7901体外生长抑制作用的机制。方法MTT法测定OCT对SGC7901细胞生长的调控；流式细胞术分析OCT对SGC7901细胞周期的影响；免疫细胞化学染色法检测表皮生长因子受体(EGFR)的表达；放射免疫法测定细胞培养上清液中表皮生长因子(EGF)和胃泌素的含量。结果 OCT对SGC7901细胞生长有抑制作用；OCT可诱导SGC7901细胞G0／G1期阻滞，加药后24小时最显著，同时伴s期细胞比例减少；OCT作用后24、36小时．SGC7901细胞EGFR表达较对照组明显减少。加入OCT24小时，细胞培养上清液中EGF和胃泌素含量明显下降。结论 OCT可通过多种途径抑制体外培养的SGC 7901细胞的增殖。     

阿司匹林对胃癌细胞株的抑制作用

目的探索阿司匹林对人胃癌细胞的抑制作用。方法建立人胃癌裸鼠移植瘤模型后,12只裸鼠均分成两组:治疗组于接种次日开始腹腔灌注阿司匹林10mg/kg;对照组腹腔注射生理盐水;30d观察肿瘤大小。采用MTT法检测体外不同浓度(0.1、1.0、8.0mmol/L)阿司匹林对胃癌细胞株SGC7901增殖及细胞周期的影响。结果与对照组比较,不同浓度阿司匹林作用后,SGC7901胃癌细胞的吸光度显著降低(P<0.05);治疗组荷瘤体积小于对照组(P<0.05)。结论阿司匹林对胃癌细胞及裸鼠移植瘤具有一定的抑制作用。     

Celecoxib抑制胃癌发生发展的实验研究

目的:研究胃癌组织与癌旁组织中的环氧化酶-2(COX-2)的表达,COX-2抑制剂Celecoxib对胃癌发展的影响。方法:采用SP免疫组织化学染色检测胃癌组织与癌旁组织中的COX-2表达;细胞计数法检测Celecoxib对胃癌细胞SGC7901和BGC823生长曲线的影响;MTT比色法检测Celecoxib对SGC7901细胞和BGC-823存活率的影响;ELISA法测定Celecoxib对胃癌细胞SGC7901细胞和BGC823分泌释放VEGF蛋白的影响。结果:胃癌组织与癌旁组织中的COX-2表达存在显著差异。Celecoxib对胃癌细胞SGC7901、BGC823均有抑制作用,表现出剂量依赖性和时间依赖性。Celecoxib对胃癌细胞SGC7901、BGC823分泌VEGF均有抑制作用,随着药物浓度的增加和作用时间的延长,其VEGF分泌量也相应降低。结论:胃癌组织中的COX-2表达高于癌旁组织,Celecoxib可以抑制胃癌组织的发生发展。     

钠氢交换蛋白1在胃癌中的表达及其对胃癌细胞增殖的影响

目的：观察钠氢交换蛋白1（Na＋／H＋,exchanger 1,NHE1）在人胃癌组织和胃癌细胞中的表达变化,以及对SGC‐7901胃癌细胞增殖的影响。方法采用实时逆转录聚合酶链式反应（real time PCR ,RT‐PCR）和免疫印迹（Western Bloting）技术检测比较NHE1在正常胃黏膜组织、胃癌组织、正常胃黏膜细胞株GES‐1和胃癌细胞株SGC‐7901中的表达;用不同浓度的NHE1特异性阻断剂[5‐（N‐乙基‐N‐异丙基）]阿米洛利[5‐（N‐ethyl‐N‐isopropyl） amiloride （EIPA ）]处理胃癌 SGC‐7901细胞24 h ,MTT法检测其对SGC‐7901细胞增殖的影响。结果 NHE1在人正常胃黏膜组织、胃癌组织、正常胃黏膜细胞和胃癌细胞中均有表达,但在人胃癌组织和 SGC‐7901胃癌细胞中,其mRNA 和蛋白表达水平均明显增高（P＜0．05）;EIPA10μm／mL ,20μm／mL ,30μm／mL处理,均能抑制胃癌SGC‐7901细胞的过度增殖（P＜0．05）,且呈现良好的剂量‐效应关系。结论 NHE1 mRNA和蛋白表达水平在胃癌中表达显著升高;NHE1特异性阻断剂EIPA能抑制胃癌SGC‐7901细胞的增殖,N H E1的改变可能与胃癌细胞的增殖密切相关。     

API-2抑制胃癌细胞株SGC7901生长及其机制探讨

目的检测不同浓度API-2作用后磷酸化AKT（p-AKT）在胃癌细胞株SGC7901中的表达及细胞生长情况,并探讨Akt信号转导通路与消化道肿瘤发生发展的机制。方法胃癌细胞株SGC7901传代培养;MTT方法检测不同浓度API-2（0,2,4,6,8μmol/L）对胃癌细胞SGC7901的增殖抑制作用;免疫细胞化学染色和Western blot检测经API-2作用24h后胃癌细胞株SGC7901中p-AKT的表达。结果不同浓度API-2均可抑制SGC7901细胞的增殖,并呈浓度和时间依赖性;不同浓度API-2作用24h后,p-AKT蛋白表达均减少。结论API-2作用Akt信号转导通路的位点,减少p-AKT的表达。Akt信号转导通路与胃癌细胞株SGC7901的发生、发展有关。     

阿司匹林-烟酰胺-锌络合物对胃癌细胞SGC-7901的生长抑制作用

目的：探讨阿司匹林-烟酰胺-锌络合物（商品名：佛立沙,WUY）对人胃癌细胞SGC-7901增殖的抑制作用。方法：用MTT法考察WUY对人胃癌细胞SGC-7901增殖的抑制作用,用流式细胞技术检测WUY对胃癌细胞周期的影响。结果：WUY在2、4、8、16mmol/L剂量时对胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制率分别为9.95%、19.28%、37.36%、63.47%（P〈0.05）,平均IC50为11.06mmol/L。增殖抑制曲线表明,WUY对胃癌细胞有抑制作用且呈明显的量效和时效关系。流式细胞仪检测显示,WUY对胃癌细胞作用24h后,呈浓度依赖性改变细胞周期的分布,G0/G1期细胞比例下降,S期细胞比例和G2/M期细胞比例升高。结论：WUY能显著抑制人胃癌细胞SGC-7901的增殖,其作用可能与影响细胞周期有关。     

苦马豆素诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡作用机制的实验研究

目的:探讨SW体外诱导人胃癌细胞株SGC7901凋亡的机制。方法:应用MTT法确定SW对体外培养的SGC7901细胞的作用剂量,通过流式细胞术及凋亡相关调控基因p53、cmyc、Bcl2的检测对细胞凋亡及细胞周期的测定,观察SW对胃癌细胞SGC7901增殖周期的影响以及抑制肿瘤细胞增殖的方式,同时利用激光共聚焦显微镜对细胞内Ca2 浓度的监测,研究SW与细胞内Ca2 超载的关系。结果:SW体外抗SGC7901细胞的完全致死剂量为6.2μg·ml-l,高于0.05μg·ml-l时抑制作用明显(P<0.05),其LC50为0.84μg·ml-l;经SW0.5～1.5μg·ml-l处理24h可引起凋亡抑制基因p53、Bcl2的明显下降、凋亡促进基因cmyc的明显升高以及肿瘤细胞内Ca2 超载,最终诱导SGC7901细胞凋亡。实验还证实SW主要作用于肿瘤细胞的S期,使瘤细胞主要积聚在S期。结论:SW通过多种途径诱导细胞凋亡可能是其发挥抗癌作用的重要机制。     

四嗪二甲酰胺诱导人胃癌AGS、SGC7901细胞系凋亡及其分子机制的实验研究

目的：观察四嗪二甲酰胺（ZGDHu-1）体外抑制胃癌细胞株AGS和SGC7901增殖并诱导细胞凋亡及其作用机制。方法：将不同浓度的ZGDHu-1与AGS和SGC7901细胞在体外培养，用台盼蓝染色、SRB法、5′溴-2′脱氧尿苷（Brdu）-ELISA法观察ZGDHu-1对AGS和SGC7901细胞增殖的抑制作用；用细胞形态学、DNA凝胶电泳、DNA含量及细胞周期分析、Annexin—V／PI双标记、Hoechst33258荧光染色等技术检测细胞凋亡。用流式细胞术观察经ZGDHu-1作用后AGS和SGC7901细胞bcl-2、bax、P53蛋白质和P38MAPK和Star3磷酸化表达的变化的表达改变。结果：ZGDHu-1能抑制AGS和SGC7901细胞增殖和活力，呈现作用时间和剂量的量效关系。AGS和SGC7901细胞与ZGDHu-1作用后，大部分细胞阻滞于G2-M期；出现典型的细胞形态改变，DNA片断化，亚G1峰检出并显著增加，Annexin—V＋／PI-表达升高，Hoechst33258荧光染色后出现凋亡细胞的特征性改变等均证实ZGDHu-1能诱导AGS和SGC7901细胞凋亡。AGS和SGC7901细胞经不同浓度的ZGDHu-1体外培养后，bcl-2蛋白有所下调，但主要是上调bax和P53蛋白，导致bax／bcl-2比值明显增高，均并呈现剂量依赖性；磷酸化P38MAPK表达增强，而磷酸化Stat3表达降低。结论：ZGDHu-1通过诱导细胞凋亡抑制AGS和SGC7901细胞增殖，其机制可能与上调bax和P53的表达，增强P38MAPK的磷酸化和抑制STAT3的活化有关。     

四君子汤及拆方含药血清对胃癌细胞株侧群细胞的生长抑制研究

目的:考察四君子汤及拆方含药血清对胃癌细胞株侧群(Side population,SP)细胞的生长抑制作用.方法:选择不同分化程度的人胃癌细胞株MKN-28、SGC-7901和BGC-823,以荧光染料Hoechst 33342染色,维拉帕米拮抗对照,应用流式细胞仪检测并分选出SP细胞和non-SP细胞;MTT法观察两组细胞的体外增殖活性;克隆形成实验考察两组细胞的集落形成能力;应用中药血清药理学方法,酶标仪MTT比色法观察四君子汤及拆方不同剂量、不同浓度含药血清对胃癌细胞SP细胞的生长抑制作用.结果:胃癌细胞株MKN-28、SGC-7901和BGC-823中SP细胞比例分别为3.40％、2.00％、1.07％,与non-SP细胞相比,SP细胞具有较强的体外增殖活性(P＜0.05)和较强的克隆形成能力(P＜0.01);加药组以20％高剂量血清组最为明显.四君子汤及拆方含药血清对这3株细胞的SP细胞增殖均有明显的抑制作用,呈剂量和浓度依赖性.结论:四君子汤及拆方含药血清能明显抑制胃癌SP细胞的生长.     

阿司匹林对胃癌细胞株的作用研究

目的观察阿司匹林对人胃癌细胞株SGC7901生长及人胃癌裸鼠移植瘤生长的作用,并初步探讨其作用机制。方法采用MTT法检测不同浓度阿司匹林对胃癌细胞增殖及细胞周期的影响;建立人胃癌裸鼠移植模型,给予阿司匹林30天,观察肿瘤大小。结果阿司匹林对胃癌细胞的增殖具有抑制作用,且呈一定的时间和剂量依赖性;阿司匹林对裸鼠移植瘤的生长具有抑制作用。结论阿司匹林对胃癌细胞及裸鼠移植瘤均具有一定的抑制作用,其机制可能是通过环氧化物水解酶（COX）途径生成的相关因子抑制新生血管而起作用。     

MTT法测定紫杉醇与奥沙利铂在不同分化程度胃腺癌细胞株中的敏感性

目的:采用MTT法测定不同分化程度胃腺癌细胞株对紫杉醇、奥沙利铂的敏感性。方法:以不同浓度的紫杉醇、奥沙利铂分别处理MKN45(低分化)和SGC7901(中分化)2种胃腺癌细胞株,采用MTT法检测紫杉醇、奥沙利铂对胃腺癌细胞增殖的影响。结果:紫杉醇、奥沙利铂分别对2株胃腺癌细胞的增殖均具有显著的抑制作用,中分化的SGC7901细胞株对2种化疗药物的敏感性明显高于低分化的MKN45细胞株,而低分化的MKN45细胞株对紫杉醇更敏感。结论:不同分化程度的胃腺癌细胞株对紫杉醇、奥沙利铂敏感性不同。     

CQ11逆转多药耐药人胃癌细胞株对多柔比星的耐药

目的:探讨氯喹衍生物CQ11对耐长春新碱(vincristine,VCR)人胃癌多药耐药(multidrug resistance,MDR)细胞株SGC7901/VCR的耐药逆转作用。方法:将SGC7901和SGC7901/VCR细胞分别与各种浓度的多柔比星(doxorubicin,DOX)和/或CQ11在体外共同培养,采用MTT法检测其细胞毒作用;采用荧光分光光度计测定细胞内DOX蓄积量。结果:SGC7901/VCR细胞对DOX的耐药程度是SGC7901细胞的37.5倍。1.0、2.5和5.0 mol/L的CQ11分别使DOX对SGC7901/VCR细胞的敏感性分别增加到2.2倍(P<0.01)、5.5倍(P<0.01)和14倍(P<0.01)。DOX蓄积实验表明,CQ11能显著增加SGC7901/VCR细胞内DOX蓄积,而对SGC7901细胞内DOX蓄积无明显影响。结论:通过增加细胞内DOX蓄积量,CQ11在体外能有效逆转SGC7901/VCR细胞对DOX的耐药性。     

RXRγ、RARβ在9-cis-RA抑制人胃癌SGC7901细胞生长中的作用

目的:探讨维甲类X受体(RXR)γ、RARβ在RXR激动剂9-顺维甲酸(9-cis-RA)抑制人胃癌SGC7901细胞生长中的作用.方法:体外培养SGC7901细胞给予9-cis-RA干预,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞术、HE染色、免疫组化染色、Western-blot检测9-cis-RA作用后SGC7901细胞生长情况、凋亡率、细胞周期的改变、RXRγ及RARβ表达情况.结果:SGC7901细胞与9-cis-RA共同培养48 h后,肿瘤细胞生长受到抑制,其作用具有浓度及时间依赖性.流式细胞仪检测显示处于G0/G1期的细胞增多,凋亡率增高,免疫组化及Western-blot 检测显示20 μmol/L 的9-cis-RA 作用72 h后,RXRγ、RARβ蛋白表达增加.结论:9-cis-RA可通过上调RXRγ、RARβ蛋白表达诱导细胞凋亡从而抑制人胃癌SGC7901细胞生长.     

人胃癌顺铂耐药细胞系的建立及其生物学特征

目的:国内外普遍应用体外建立的耐药细胞系作为研究模型。为探讨胃癌对顺铂耐药的机理,本研究首次建立人胃癌顺铂耐药细胞系并且研究其生物学特性。方法:采用逐步递增顺铂浓度,间歇作用体外诱导法建立人胃癌顺铂耐药细胞系SGC 7901/DDP;M TT法测定药物敏感性;光镜、电镜、M TT法活细胞计数、流式细胞仪及其相关P-糖蛋白的表达等方法观察其生物学特征的改变。结果:历时5个月建成人胃癌顺铂耐药细胞系SGC 7901/DDP,其对顺铂的耐药指数为14.68,并且与5-氟尿嘧啶、丝裂霉素等多种抗癌药有不同程度的交叉耐药性;SGC 7901/DDP的细胞形态及其P-糖蛋白的表达;体外群体倍增时间较亲代细胞延长;细胞周期分析发现其S期与G2/M期细胞减少、G0/G1期细胞增多。结论:SGC 7901/DDP细胞具有耐药特征,耐药性能稳定,与P-糖蛋白的表达有关。     

Smilax glabra Roxb targets Aktp-Thr308 and inhibits Akt-mediated signaling pathways in SGC7901 cells

Background: Smilax glabra Roxb (SGR) as a novel anti-tumor agent has been paid attention in several types of cancer cells. However, the effect of SGR on SGC7901 cells has not been investigated.

Purpose: We investigate the effect and potential mechanisms of SGR on SGC7901 cells in this study.

Methods: Three kinds of gastric cancer cell lines (BGC823, SGC7901 and MKN45) and one kind of human embryonic kidney cell line (HEK293) were exposed to varying concentrations of SRG. Then, we observed the effect of SRG on these cell lines and the changes on proliferation, invasion and apoptosis. Finally, we detected the signaling pathway in which SGR may involve.

Results: SGR effectively suppressed the proliferation of SGC7901 cell lines by inhibiting the phosphorylation of Akt (Thr308). Moreover, we found SGR could significantly induce SGC7901 cell lines apoptosis by inhibiting Akt^p-Thr308/Bad pathway and inhibit its migration and invasion partly by inhibiting Akt^p-Thr308/MMPs pathway.

Discussion: SGR could effectively suppress the proliferation and invasion of SGC7901 cell lines by inhibiting the phosphorylation of Akt (Thr308) and its downstream relative pathways.

Conclusion: SGR could effectively suppress the phosphorylation of Akt (Thr308) and then inhibit the proliferation and invasion of SGC7901 cell and enhance its apoptosis through Akt-mediated signaling pathways.     

用GC-MS法分析姜黄和片姜黄中挥发油成分并研究其体外抗肿瘤作用简

目的：分析姜黄和片姜黄中的挥发油成分,对其体外抗肿瘤作用进行研究.方法：采用水蒸气蒸馏法提取两种药材饮片中的挥发油,用GC MS法对挥发油成分做鉴别和分析.采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法,以A-549人肺癌细胞株和SGC-7901人胃癌细胞株研究姜黄和片姜黄中挥发油成分的体外抗肿瘤作用.结果：姜黄和片姜黄中挥发油成分的含量分别为1.5％和1.2％.姜黄挥发油的主要成分为β-姜黄酮、芳姜黄烯、β-倍半水芹烯、吉玛酮和姜烯等,抑制A-549人肺癌细胞株和SGC-7901人胃癌细胞株的IC50分别为227.8和129.7 μg/ml.片姜黄挥发油的主要成分为莪术二酮、1,8-桉树脑、吉玛酮、异莪术醇、莪术醇和樟脑等,抑制A-549人肺癌细胞株和SGC-7901人胃癌细胞株的IC50分别为202.1和230.0 μg/ml.结论：姜黄和片姜黄中的挥发油成分有显著差异,两种挥发油对A-549人肺癌细胞株和SGC-7901人胃癌细胞株均有较弱的抑制作用.     

苦参碱和氧化苦参碱对胃癌细胞株SGC7901/VCR耐药性的作用

目的研究苦参碱和氧化苦参碱对人胃癌细胞株SGC7901/VCR耐药性的作用。方法以SGC7901/VCR为研究对象,用SRB法测定苦参碱和氧化苦参碱对SGC7901/VCR耐药细胞的增殖抑制率,计算IC50和IC10,并进一步计算其耐药倍数和逆转倍数。流式细胞术检测罗丹明123的荧光强度变化。结果苦参碱和氧化苦参碱对SGC7901/VCR均存在抑制作用,且呈剂量依赖。VCR耐药倍数为33.4倍;0.78 mg/ml苦参碱逆转倍数为1.92倍;0.71 mg/ml氧化苦参碱逆转倍数为3.39倍;细胞内罗丹明123浓度较明显增加(P<0.01)。结论低毒浓度的苦参碱和氧化苦参碱对人胃癌耐药细胞株SGC7901/VCR具有一定的耐药逆转作用,且氧化苦参碱优于苦参碱。     

美洛昔康不诱导胃癌细胞耐药

目的旨在了解环氧合酶-2(cyc looxygenase-2,COX-2)抑制剂美洛昔康对胃癌细胞的长期作用能否导致胃癌细胞对其产生耐药性。方法采用浓度递增法结合大剂量冲击法,美洛昔康长期作用于胃癌SGC7901细胞,时间达6个月,尝试诱导胃癌美洛昔康耐药株,命名为SGC7901/M,并用MTT法测定药物敏感性,光镜、电镜观察细胞形态学改变,活细胞计数法和克隆形成技术了解其生物学特性。结果药物敏感分析显示,胃癌细胞经过美洛昔康长期作用,对美洛昔康并没有出现抗性,其IC50与亲代细胞比较差异无统计学意义(P>0.05),分别为4.6×10-4±2.23×10-4mol.L-1,3.54×10-4±2.34×10-4mol.L-1。SGC7901/M细胞对美洛昔康的耐药指数约为1.3。SGC7901/M细胞与亲代细胞形态学比较,光镜及电镜均未显示差异,两种细胞在经1×10-3mol.L-1美洛昔康作用24 h后,均表现出细胞受到明显损伤和凋亡的形态。无论从生长曲线上还是克隆形成率上都显示SGC7901/M细胞与亲代细胞的生长特性无差异。结论美洛昔康可抑制胃癌细胞生长,长期用药不诱导胃癌细胞产生耐药性。