胃癌鸟氨酸脱羧酶基因表达及临床意义

目的从mRNA和蛋白质水平研究鸟氨酸脱羧酶在胃癌中的表达，探讨其在胃癌形成中的作用。方法采用半定量RT PCR技术检测胃癌及相应癌旁组织中ODC mRNA的表达量，采用Western blot在蛋白质水平检测胃癌及相应癌旁组织中ODC的表达量，并做统计学分析。结果21例胃癌组织中ODC在mRNA和蛋白质水平的表达量均高于癌旁组织（P<0.01）。ODC的表达量低分化胃癌组织显著高于高中分化（P<0.01）。结论ODC表达增强在胃癌发生发展中起重要作用，提示ODC可作为胃癌的基因诊断与治疗的靶点。     

脑胶质瘤中鸟氨酸脱羧酶的基因表达及其临床意义

目的:研究鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)在脑胶质瘤中的基因表达,以了解脑胶质瘤中多胺代谢及ODCmRNA表达的临床意义。方法:采用RT-PCR检测30例脑胶质瘤及其邻近正常脑组织手术标本中的ODCmRNA表达情况,采用配对样本t检验及Spearman等级相关分析对实验结果进行统计学处理。结果:脑胶质瘤组织ODCmRNA扫描值较正常脑组织明显升高(P<0.0001)。肿瘤组织ODCmRNA表达与肿瘤分级之间无显著相关性(P>0.05)。结论:ODC基因表达增强在脑胶质瘤的发生、发展中起重要作用。     

良性增生前列腺组织中鸟氨酸脱羧酶基因表达的研究

为探讨鸟氨酸羧酶（ＯＤＣ）基因表达与前列腺良性增生的关系，采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹和ＲＮＡ斑点杂交技术，测定分析了正常人（１０例）和良性前列腺增生症（ＢＰＨ）病人（１５例）前列腺组织中ＯＤＣｍＲＮＡ的丰度。结果显示，良性增生前列腺组织中ＯＤＣｍＲＮＡ丰度较正常前列腺组织显著升高。经密度扫描测定结果显示，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ迷分析中ＢＰＨ前列腺组织中ＯＤＣｍＲＮＡ丰度的为对照组的６－２０倍，斑点杂交为５     

良性增生前列腺组织中鸟氨酸脱羧酶基因表达的研究

为探讨鸟氨酸脱羧酶（ＯＤＣ）基因表达与前列腺良性增生的关系,采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹和ＲＮＡ斑点杂交技术,测定分析了正常人（１０例）和良性前列腺增生症（ＢＰＨ）病人（１５例）前列腺组织中ＯＤＣｍＲＮＡ的丰度。结果显示,良性增生前列腺组织中ＯＤＣｍＲＮＡ丰度较正常前列腺组织显著升高。经密度扫描测定结果显示,Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分析中ＢＰＨ前列腺组织中ＯＤＣｍＲＮＡ丰度约为对照组的６～２０倍,斑点杂交为５倍以上。提示ＯＤＣ基因表达增强在良性前列腺增生症形成中起重要作用     

卵巢癌组织中鸟氨酸脱羧酶基因过度扩增及其临床意义

目的检测鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)基因在卵巢癌组织、癌旁组织及卵巢良性肿瘤中的表达,探讨ODC过度扩增在卵巢肿瘤发生、发展中的作用。方法应用RT-PCR方法检测40例卵巢癌组织、15例癌旁正常卵巢组织、15例卵巢良性肿瘤中ODC基因的表达,比较ODC在不同卵巢组织中的阳性表达率。结果ODC在癌旁正常卵巢组织中表达率为26.67%,在15例卵巢良性肿瘤组织中均无表达,在卵巢癌组织中表达率为65%。统计学分析结果显示ODC在卵巢癌组织的表达明显高于癌旁正常卵巢组织和卵巢良性肿瘤,差异均有统计学意义(P<0.05);ODC在浆液性癌表达阳性率为83.33%,较其他类型卵巢恶性肿瘤的50.00%明显增加,差异有统计学意义(P=0.028)。在Ⅰ,Ⅱ期患者ODC阳性率为54.55%,其中强阳性2例;Ⅲ,Ⅳ期患者ODC阳性率68.97%,其中强阳性17例,两者相比差异无统计学意义(P=0.469),而强阳性率Ⅲ,Ⅳ期为58.62%明显高于Ⅰ,Ⅱ期的18.18%,差异有统计学意义(P=0.034)。在中、高分化癌组织中ODC强阳性表达率为20%,低分化癌组织中强阳性表达率为64%,差异有统计学意义(P=0.018)。在癌旁正常卵巢组织中ODC表达较卵巢良性肿瘤有增高趋势,但差异无统计学意义(P=0.10)。结论ODC过度扩增可能在卵巢癌的发生、发展中起重要作用。     

EGF 对前列腺细胞中鸟氨酸脱羧酶基因表达的调控

目的 :探讨EGF诱导前列腺增殖的分子机理。方法 :以MTT法测定不同浓度表皮生长因子(EGF)对前列腺癌细胞PC 3的促增殖作用 ;以最适浓度EGF(5 0ng/ml)刺激该细胞 ,分别于 0、1、3、6、12、2 4h提取总RNA ,用斑点杂交法分析测定各组细胞中ODCmRNA丰度 ;用免疫组化及流式细胞术两种方法检测EGF刺激细胞后ODC蛋白表达量的变化。结果 :①EGF能促进PC 3细胞的增殖 ,而且随着EGF浓度的升高 ,细胞增殖活性增加 ;②斑点杂交显示 ,EGF刺激细胞后 3h ,ODCmRNA开始明显升高 ,12h达高峰 (约为 0h的 3.6 6倍 ) ,至 2 4h时有所降低 ;③免疫组化及流式细胞术检测显示 ,EGF刺激细胞 3d后ODC蛋白阳性细胞表达率明显升高。结论 :EGF诱导ODC基因表达可能是其促进前列腺细胞增殖的分子机制之一     

雄激素与培养前列腺细胞中鸟氨酸脱羧酶基因表达的关系

为研究雄激素致前列腺良性增生的分子机理，分离培养了人胎儿前列腺间质细胞，并给予ＤＨＴ（１～１００００μｇ／Ｌ）刺激，ＭＴＴ法测定。结果显示，ＤＨＴ对该细胞具有刺激增殖作用，其最适刺激浓度为１０００μｇ／Ｌ。斑点杂交结果显示，鸟氨酸脱羧酶（ＯＤＣ）ｍＲＮＡ的表达在ＤＨＴ（１０００μｇ／Ｌ）刺激６ｈ时开始升高，２４ｈ时达高峰，３０ｈ时有所降低。提示雄激素刺激前列腺间质细胞增殖的分子机理部分是通过刺激前列腺间质细胞的ＯＤＣ基因表达来完成的。     

鸟氨酸脱羧酶与细胞增殖

鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)为多胺生物合成途径中的第一个限速酶(催化合成多胺的第一步反应,即催化L-鸟氨酸脱羧生成腐胺),具有超常转变率和对于刺激的迅速反应性。而多胺广泛存在于生物体的各种细胞和组织中,是一种重要的代谢调控物质,它可直接与DNA相互作用,调节DNA构象,并参与RNA及蛋白质的合成,与细胞增殖、分化密切相关。已有研究表明,哺乳动物细胞增殖体现出完全的多胺依赖性。     

茶多酚对成纤维细胞L929中鸟氨酸脱羧酶的抑制作用

目的:探讨茶多酚对成纤维细胞L929的增殖抑制作用及其作用机制。方法:体外培养小鼠成纤维细胞L929,加入茶多酚、二氟甲基鸟氨酸(DFMO)作用于细胞。用MTT法观察茶多酚对细胞增殖抑制作用,利用琼脂糖凝胶电泳和流式细胞技术检测细胞的调亡,RT鄄PCR技术检测鸟氨酸脱羧酶(ODC)基因的表达。结果:20μmol/L的茶多酚即能明显抑制L929细胞的增殖,促进细胞的调亡,其半数有效浓度为200μmol/L。RT鄄PCR显示细胞中ODCmRNA表达明显下降(P<0.05)。200μmol/L的茶多酚的抑制效果与5mmol/L的DFMO的作用效果相似。二者共同作用于细胞时,对ODC的活性抑制作用更强,抑制效果更佳。结论:茶多酚能通过抑制细胞中ODC的表达来抑制细胞的增殖。     

鸟氨酸脱羧酶与胃癌

<正>在正常细胞周期中,细胞的生长、分化均受到某些酶的调控.鸟氨酸脱羧酶(Ornithime decarboxylase,ODC)广泛分布在动物体内,它是多胺(Polyamines)合成的关键酶.而多胺能够刺激DNA、RNA和蛋白质的合成,并且参与维持细胞膜及细胞骨架结构的稳定性.凡生长旺盛或迅速增生的组织,其ODC的活性和多胺的含量均增加.近年来研究发现ODC与肿瘤的关系十分密切.现就其与幽门螺杆菌感染及胃癌的关系概述如下.1 ODC的生物学作用1.1 ODC与多胺合成 ODC是一个胞浆酶,是以磷酸吡哆醛为辅因子的氨基酸脱羧酶.它与S一腺苷蛋氨酸脱羧酶(SAMDC)和精脒、精胺合成酶(spermidine/spermine synthase)共同调控多胺(包括腐胺、精脒和精胺)的合成,其中ODC被公认为是多胺合成的第一个酶     

鸟氨酸脱羧酶基因沉默对子宫内膜癌细胞Ishikawa的影响

目的利用RNA干扰技术,观察鸟氨酸脱羧酶（ornithine decarboxylase,ODC）基因在子宫内膜癌Ishikawa细胞的沉默效应及对Ishikawa细胞增殖周期的影响。方法设计合成以鸟氨酸脱羧酶基因为靶向目标的siRNA序列质粒,利用脂质体介导的方法将质粒转染至子宫内膜癌Ishikawa细胞,实验分三组：Ishikawa组,pSUPER-EGFP组,pSUPER-EGFP-ODC组。用Real-time PCR和Western blot检测ODC的表达情况。采用MTT和流式细胞术来检测ODC基因沉默对Ishikawa细胞生长的影响。结果 Real-time PCR和Western显示pSUPER-EGFP-ODC组细胞ODC mRNA和蛋白质表达水平明显下降。MTT示pSUPER-EGFP-ODC能显著抑制Ishikawa细胞的增殖活性,与Ishikawa相比,差异有高度统计学意义（P〈0.01）。流式细胞术结果示pSUPER-EGFP-ODC能显著阻滞Ishikawa细胞于G0/G1期,S期细胞数相应减少,并诱导细胞凋亡,与Ishikawa相比,差异有高度统计学意义（P〈0.01）。结论转染靶向ODC基因的siRNA序列质粒能够下调ODC基因的表达,抑制人子宫内膜癌细胞Ishikawa在体外的增殖,阻滞Ishikawa细胞于G0/G1期并诱导细胞凋亡。     

腺病毒介导的鸟氨酸脱羧酶和S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶双反义RNA抑制肺癌A-549细胞的实验研究

目的：探讨鸟氨酸脱羧酶（ODC）和S－腺苷甲硫氨酸脱羧酶（AdoMetDC）双反义重组腺病毒（Ad-ODC-AdoMetDCas）介导的ODC和AdoMetDC反义RNA对肺癌A 549细胞增殖和侵袭的抑制作用。方法：采用FACS检测Ad-GFP感染细胞中GFP表达,以测定不同MOI的腺病毒对肺癌A-549细胞的基因转染效率;应用MTT法观察Ad-ODC-AdoMetDCas对肺癌A-549细胞生长增殖的影响;采用Western印迹和HPLC的方法分别检测腺病毒对肺癌A-549细胞中ODC和AdoMetDC蛋白表达以及胞内多胺含量的抑制作用,并应用TUNEL标记检测法观察Ad-ODC-AdoMetDCas对肺癌细胞凋亡的影响。结果：基因转染效率结果显示,以50 MOI的Ad-GFP感染肺癌细胞48h后,大约有75% 肺癌A-549细胞GFP表达阳性;Ad-ODC-AdoMetDCas对肺癌A-549细胞生长增殖有明显抑制作用。Ad-ODC-AdoMetDCas可明显抑制肺癌细胞中ODC和AdoMetDC基因表达 ,基因抑制率大于60％（P＜0.05）。HPLC结果显示,肺癌A-549细胞感染Ad-ODC-AdoMetDCas后,细胞内三种多胺含量都明显降低（P＜0.05）。TUNEL标记检测结果证实,Ad-ODC-AdoMetDCas可引起肺癌A-549细胞明显凋亡。结论：ODC和AdoMetDC双反义腺病毒具有显著抑制肺癌增殖和侵袭的作用,对于肺癌的防治研究具有一定的意义,有望成为治疗肺癌的基因药物。     

鸟氨酸脱羧酶与女性常见恶性肿瘤

鸟氨酸脱羧酶(Ornithine decarboxylase,ODC)是调控细胞内多胺生物合成的限速酶,参与胚胎发育、细胞周期、细胞增殖分化等重要的生理过程,同时也是肿瘤细胞的快速增殖所必须,是目前研究较多的抗肿瘤治疗的潜在分子靶点之一。本文简要综述ODC与女性常见恶性肿瘤关系的研究进展。     

P53基因突变与肺癌预后复发转移的关系

目的 探讨Ｐ５３基因突变与肺癌病理特征、预后、复发转移的关系。方法 聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法检测１５５例原发肺癌手术标本中Ｐ５３基因５～８外显子突变。结果 小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）Ｐ５３突变率８０％,非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）５３．８％（７８／１４５）。９４例随访病人中,Ｐ５３阳性组一年存活率为６８．６０％,而Ｐ５３阴性组为９７．７％（Ｐ〈０．０５）。Ｐ５３突变组术后     

非小细胞肺癌组织中Survivin、MVD基因的表达及对预后的影响

目的:研究非小细胞肺癌组织中Survivin、MVD基因的表达及其对预后的影响。方法:应用免疫组化S-P法检测肺癌、癌旁及肺良性瘤样病变组织中Survivin、MVD的表达,分析两项指标对患者预后的影响。结果:肺癌、癌旁及肺良性瘤样病变组织中Survivin表达率为69.7%穴63/96雪、16.1%穴5/31雪、0穴0/20雪穴P<0.05雪,MVD值为24.44±7.79、19.37±5.26和11.83±6.52(P<0.05);Survivin、MVD阳性组术后生存期明显短于阴性组穴P=0.042,P=0.039雪。结论:肺癌组织中Survivin、MVD的表达明显高于癌旁和肺良性瘤样病变组织,其表达与肺癌患者的预后有关,是判断预后的良好指标。     

ODC和AdoMetDC双反义腺病毒载体对食管癌细胞凋亡的影响

目的探讨ODC和AdoMetDC双反义腺病毒载体(Ad-ODC-AdoMetDCas)对食管癌Eca109细胞凋亡作用的影响。方法应用MTT法实验观察Ad-ODC-AdoMetDCas对食管癌Eca109细胞生长增殖的影响;采用Western印迹和HPLC分别检测腺病毒载体对食管癌Eca109细胞中ODC和AdoMetDC蛋白表达以及胞内多胺含量的抑制作用,同时应用原位末端标记（TUNEL）法观察Ad-ODC-AdoMetDCas对食管癌Eca109细胞凋亡作用的影响,应用透射电镜进一步观察细胞超微结构的改变。结果应用MTT法实验表明,Ad-ODC-AdoMetDCas对食管癌Eca109细胞生长增殖有显著抑制作用（P<0.05）。以Ad-ODC-AdoMetDCas感染食管癌Eca109细胞,可明显抑制食管癌Eca109细胞中ODC和AdoMetDC基因表达（P<0.05）。HPLC结果显示,食管癌Eca109细胞感染Ad-ODC-AdoMetDCas后,细胞内三种多胺含量均明显降低（P<0.05）。TUNEL标记检测结果显示,Ad-ODC-AdoMetDCas可明显引起食管癌Eca109细胞凋亡（P<0.05）,透射电镜下可见典型的细胞凋亡特征,表现为细胞体积缩小,核皱缩、碎裂,染色质呈块状边集等。结论ODC和AdoMetDC双反义腺病毒载体能显著抑制食管癌细胞生长增殖,降低细胞多胺合成,促进细胞凋亡,为探讨食管癌基因治疗的可行性提供了实验依据。