IgA肾病患者外周血γδT细胞分泌TGF-β1的功能

目的：研究IgA肾病患者外周血γδT细胞分泌TGF-β1的功能。方法：用流式细胞仪分析外周血γδT细胞比率并检测血清IgA的水平，以抗TCRγδ单克隆抗体（mAb）固相法，体外选择性地扩增γδT细胞住体外培养的条件下，以抗CD3抗体刺激48h后．用ELISA法测定培养体系中TGF-β1的水平。结果：IgA肾病患暂外周血γδT细胞的比例升高，并与血清IgA的水平呈正相关。用抗TCRγδmAb固相法能获得高纯度的γδT细胞。经抗CD3抗体刺激的IgA肾病患者的γδT分泌TGF-β1的量比正常对照组明显升高。结论：IgA肾病患者的γδT细胞可通过大量分泌TGF-β1参与该病的发生、发展。     

IgA肾病大鼠外周血、肾组织γδT细胞分泌TGF-β1功能的实验研究

目的研究IgA肾病大鼠外周血、肾组织γδT淋巴细胞分泌细胞因子TGF-β1的功能。方法流式细胞仪分析IgA肾病大鼠外周血、肾组织γδT淋巴细胞比例以及血清IgA水平,并体外选择性扩增γδT细胞,在体外培养条件下,测定培养体系中细胞因子TGF-β1的表达。结果IgA肾病大鼠外周血、肾组织中γδT淋巴细胞比例升高,并能异常分泌TGF-β1细胞因子。结论γδT细胞可能是通过分泌TGF-β1参与IgA肾病的发生与进展。     

TGFβ1在IgA肾病患者肾组织中的表达

ＩｇＡ肾病是原发性肾小球疾病中最常见的类型之一 ,主要病变特点是弥漫性系膜细胞增生及系膜基质聚集和扩张。而系膜基质的过度积聚最终导致进行性肾小球硬化及肾功能衰竭。转化生长因子 - β(ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒβ ,ＴＧＦβ)是近年来引起人们     

IgA肾病患者血清IgA1对人肾小球系膜细胞转化生长因子β1/Smads信号通路的影响

目的 研究IgA肾病(IgAN)患者血清IgA1对人肾小球系膜细胞(HMC)转化生长因子β1(TGF-β1)、磷酸化Smad3(p-Smad3)和纤连蛋白(FN)的刺激作用,探讨IgA1对TGF-β1/Smads信号通路的影响.方法 体外培养HMC,分5组.即健康对照组、健康人IgA1(NIgA1)刺激组、健康人聚合IgA1(aNIgA1)刺激组、IgAN患者IgA1(PIgA1)刺激组和IgAN患者聚合IgA1(aPIgA1)刺激组.RT-PCR检测各组细胞TGF-β1、p-Smad3和FNmRNA的表达.Western免疫印迹检测HMC p-Smad3蛋白水平.ELISA检测HMC培养上清液中TGF-β1、FN蛋白水平.结果 PIgA1和aPIgA1能显著上调TGF-β1,P-Smad3、FN mRNA和蛋白的表达(P<0.05).aPIgA1上调三者mRNA表达的能力分别为PIgA1的1.5倍、1.3倍和1.5倍(均P<0.05).aPIgA1上调TGF-β1和p-Smad3蛋白表达的能力分别为PIgA1的2.1倍和1.6倍(均P<0.01).在aPIgA1刺激不同时间,TGF-β1和p-Smad3 mRNA表达于12 h达高峰(0.866±0.055和0.891±0.251),于24h回到基线水平.FNmRNA表达于24 h达高峰(0.968±0.031).TGF-β1和p-Smad3蛋白表达逐渐升高,TGF-β1于12 h达高峰[(246.960±1.270)ng/L],p-Smad3于6 h达高峰(0.490±0.046)后开始下降.FN蛋白表达逐渐升高,24 h达高峰[(1.804±0.038)mg/L](均P<0.01).结论 PIgA1和aPIgA1能显著上调HMC TGF-β1、p-smad3、和FNmRNA表达和蛋白水平.且aPIgA1的作用强于PIgA1,提示IgAN患者血清的IgA1,主要是aIgA1可通过TGF-β1/Smads信号通路在IgAN进展中起作用.     

SLE患者血中调节性T细胞及TGF-β1的表达

目的：检测系统性红斑狼疮（SLE）轻型与重型患者中调节性T细胞、TGF-β1和抗ds-DNA抗体的表达水平,并与正常健康人对比,分析它们之间的差异。方法：应用放射免疫分析和ELISA检测血清抗ds-DNA和TGF-β1的表达水平,采用流式细胞仪检测调节性T细胞的表达水平。结果：狼疮重型组中调节性T细胞显著低于狼疮轻型组和健康对照组（P〈0.05）;重型组抗ds-DNA抗体显著高于轻型组和健康对照组（P〈0.05）;重型与轻型的TGF-β1的表达水平差异无统计学意义,但重型组和轻型组的表达水平都比健康对照组明显降低。结论：调节性T细胞的表达数量可作为狼疮活动的指标,而血清TGF-β1的表达水平与其活动性无关。     

消渴颗粒剂对大鼠系膜细胞TGF-β1表达的影响

目的 :观察高糖和消渴颗粒剂含药血清对大鼠系膜细胞增殖及TGF - β1表达的影响 ,探讨消渴颗粒剂治疗糖尿病肾病的机制。方法 :采用系列筛网法分离肾小球 ,经胶原酶消化后 ,分装至塑料培养瓶中 ,在 5 %CO2 ,37℃恒温恒湿培养箱内孵育培养。 2 - 3周后进行转种。经相差显微镜、扫描电镜观察 (scaningelectronmicroscope,SEM) ,免疫细胞化学染色actin和desmin染色均为阳性 ,证实为系膜细胞后 ,进行以下实验。用 2 0mmol/L葡萄糖刺激系膜细胞 12h、2 4h、4 8h、72h和 96h ,以 5mmol/L葡萄糖为正常对照 ,MTT比色法观察系膜细胞的增殖情况…     

茶多酚对高糖所致人肾小球系膜细胞活性氧和TGF-β1表达的影响

目的 探讨高糖对人肾小球系膜细胞活性氧(ROS)和转化生长因子β1，(TGF-β1)表达的影响及茶多酚的干预作用。方法 培养人肾小球系膜细胞，分为正常对照组、高糖组、茶多酚组和茶多酚干预组，培养0、12、36h后，用分光光度比色法测定细胞上清液超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量，用半定量RT-PCR和免疫细胞化学法检测细胞内TGF-β1，mRNA和蛋白表达的变化。结果 高糖导致系膜细胞SOD活性下降和MDA含量升高，上调TGF-β1，mRNA和蛋白表达，随时间延长更为明显；茶多酚干预可拮抗高糖时系膜细胞的上述改变。结论 高糖能促进人肾小球系膜细胞ROS产生增加，上调TGF-β1 mRNA和蛋白表达，茶多酚能抑制高糖对系膜细胞的作用。     

TGF-β1诱导的调节性T细胞体内输注延长小鼠皮肤移植物存活

目的 利用TGF-β1体外诱导naYve T细胞分化为凋节性T细胞(Treg),通过体内输注延长小鼠皮肤移植物存活时间,并研究其相关机制. 方法 根据诱导条件不同分为3组:对照组(加入IL-2培养的C57BL/6小鼠T细胞)、MLR组(即混合淋巴细胞反应组,经同种抗原刺激活化的C57BL/6小鼠T细胞)和TGF-β组(经同种抗原刺激活化的C57BL/6小鼠T细胞,同时加入5.0ng/ml TGF-β1诱导).利用FACS检测CD4+CD25+T细胞比例,并用RT-PCR检测Foxp3的表达水平.建立小鼠皮肤移植模型,并于第0、l、2和3天输注上述细胞,观察皮肤移植物存活时间.术后第9天,取部分受鼠行移植物病理检测,用FACS检测脾脏中THl、TH2和CD4+CD25+Treg比例,并用Alamar Blue法检测淋巴细胞增殖能力. 结果 TGF-β组中CD4+CD25+T细胞比例高于对照组和MLR组(P<0.05),且其高表达Foxp3.将培养的细胞输注给受鼠后发现,输注MLR组细胞的受鼠其移植物平均存活时间(mean survival time,MST)为(9.4±1.3)d,低于对照组(P<0.05);而输注TGF-13组细胞小鼠MST为(22.8±1.9)d,较对照组和MLR组明显延长(P<0.05).病理检测亦显示TGF-β组受鼠移植物结构完整,无明显淋巴细胞浸润.FACS结果显示TGF-β组小鼠体内TH1细胞(CD4+TIM-3+)比例低于对照组和MLR组(P0.05),但低于对照组(P<0.05);而且TGF-β组中CD4+CD25+Treg比例明显高于对照组和MLR组(P<0.05).用Alamar Blue法检测受鼠外周淋巴细胞增殖活性显示,TGF-β组受鼠淋巴细胞增殖能力被明显抑制,低于对照组(P<0.05). 结论 TGF-β1可诱导T细胞分化为具有抑制能力的Treg将诱导后的细胞进行过继输注可使小鼠体内CD4+CD25+Treg比例升高,同时抑制TH1和TH2细胞分化扩增,并使得外周淋巴细胞增殖能力减弱,从而延长小鼠皮肤移植物存活时间.     

移植肾内TGF-β1表达与慢性移植物肾病的关系

为探讨转移生长因子(TGF-β1)与慢性移植物肾病(CAN)的关系，该研究对138例肾功能正常的肾移植受者术后检测尿TGr-β1，浓度，并挑选出浓度最高和最低各20例构成组Ⅰ、组Ⅱ，比较两组患者肾穿刺组织中TGF-β1。(TGF-＆mRNA和TGr-β1蛋白)的表达量、3年后CAN的发生率，并检测CAN者肾组织中TGF-β1的表达量。结果显示组ⅠTGr-β1的表达量和3年后CAN的发生率均明显大于组Ⅱ，CAN者肾组织中TGr-β1的表达量明显大于肾功正常时。TGr-β1与慢性移植物肾病的发生有着密切的关联，肾移植后检测尿TGF-β1对远期肾功能具有预测作用。     

EGCG对小鼠调节性T细胞的产生及细胞因子TGF-β1表达的影响

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对小鼠体内调节性T细胞(Treg)的产生及转化生长因子TGF-β1的表达和分泌的影响。方法:选择健康、雄性、体重相近的BALB/c小鼠40只,随机分为4组(n=10),设立不同剂量浓度的EGCG组(10、50、85 mg/kg)和对照组。EGCG组每天给予EGCG腹腔注射一次,连续注射3天,对照组每天给予等体积生理盐水腹腔注射一次,连续注射3天。采用流式细胞仪检测小鼠脾脏Treg细胞的产生。采用荧光定量PCR和ELISA方法分别检测小鼠脾脏细胞和外周血TGF-β1因子的表达和分泌水平。结果:与对照组相比较,EGCG处理组小鼠体内的Treg细胞的比例上升,TGF-β1的基因表达水平和蛋白分泌水平均明显增高,当EGCG剂量为85 mg/kg时,其促进作用最明显。结论:EGCG可促进小鼠体内的Treg细胞产生,增强TGF-β1表达和分泌。     

醛固酮对肾小球系膜细胞合成分泌纤维连接蛋白和TGF-β1表达的影响

目的：研究醛固酮（ALD）及其受体拮抗剂螺内酯（SPI）对大鼠肾小球系膜细胞合成分泌纤维连接蛋白（FN），以及对转化生长因子B1（TGF-β1）基因表达的影响。方法：（1）以不同浓度的ALD（10^-11、10^-9、10^-7mol／L）及／或10^-7mol／L SPI刺激肾小球系膜细胞48h后，用ELISA法测定培养上清中FN的浓度。用半定量RT-PCR法检测该细胞中FNmRNA和TGF-β1mRNA的表达。（2）以10^-9mol／L的ALD刺激系膜细胞不同时间（24、48、72h）后，分别用上述方法测定培养上清中FN的浓度和细胞中FNmRNA和TGF-β1mRNA的表达。结果：（1）ELISA的结果显示，ALD可促进系膜细胞合成分泌FN，且呈剂量和时间依赖性，SPI能拮抗ALD的作用。（2）半定量RT-PCR的结果显示，ALD可促进系膜细胞FNmRNA和TGF-β1mRNA的表达，也呈剂量和时间依赖性，SPI也能拮抗ALD的作用。结论：ALD在蛋白和基因水平上均可促进大鼠肾小球系膜细胞合成分泌FN，及TGF-β1mRNA的表达，SPI能拮抗ALD的作用，具有一定的肾脏保护作用，从而有益于延缓肾小球硬化的进展。     

EGR-1基因转染对环境中小鼠肾小球系膜细胞TGF-β及PDGF-B表达的影响

目的:观察EGR-1基因转染对高糖环境中小鼠肾小球系膜细胞TGF-β及PDGF-B表达的影响,探讨EGR-1在糖尿病肾病发病机制中的作用。方法:高糖环境中培养小鼠肾小球系膜细胞,采用LipofectamineTM2000瞬时转染EGR-1质粒,于培养12、24、48小时末,应用MTT法检测细胞增殖程度,免疫细胞化学和Western印迹法检测系膜细胞EGR-1、TGF-β及PDGF-B蛋白表达水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清Ⅳ型胶原浓度。结果:高糖环境中肾小球系膜细胞EGR-1、TGF-β及PDGF-B表达增强,细胞增殖明显,细胞上清液中Ⅳ型胶原浓度升高,EGR-1基因转染后上述变化较高糖组更加显著。结论:EGR-1可上调TGF-β及PDGF-B表达,促进系膜细胞增殖及系膜外基质积聚,是加速肾小球硬化的可能机制之一。     

血、尿Smad2和TGF-β1与IgA肾病尿蛋白及内生肌酐清除率之间关系的研究

目的检测分析血、尿Smad2、TGF-β1与IgA肾病患者尿蛋白定量及内生肌酐清除率(CCR)之间的关系。方法分别采集50例IgA肾病患者(IgAN组)及50例无肾脏疾病者(对照组)血和24h尿标本,采用免疫比浊法检测尿蛋白、酶联免疫吸附法检测血、尿肌酐,并计算患者CCR;采用Westernblot方法观察血、尿Smad2和TGF-β1表达情况。结果IgAN组与对照组相比,24h尿蛋白(P<0.01)、血肌酐(P<0.01)水平均高于对照组,CCR(P<0.01)低于对照组,出现肾功能轻度损伤。血、尿Smad2及TGF-β1水平均较对照组增高(P<0.01)。尿Smad2、TGF-β1与尿蛋白定量之间的存在一定正相关性(r分别为0.351,0.474,P<0.05)。但血清Smad2、TGF-β1与尿蛋白定量无明显相关性(P>0.05),血尿Smad2、TGF-β1与CCR无明显相关性(P>0.05)。结论IgAN患者血尿Smad2及TGF-β1均增高,尿液Smad2及TGF-β1与尿蛋白定量有一定相关性。     

TGF-β1诱导CD4+CD25-T细胞分化为CD4+CD25+调节性T细胞

目的 研究TGF-β1诱导CD4 CD25 调节性T细胞分化的能力及其相关机理.方法 ①利用丝裂霉素处理的Balb/C裸鼠脾细胞(同种抗原)刺激C57BL/6小鼠T细胞,同时给予TGF-β1予以干预(按TGF-β1剂量不同设立4组:对照组,低浓度组,中浓度组和高浓度组),共同培养5天后,用流式细胞仪检测CD4 CD25 T细胞比例;同时用RT-PCR检测培养细胞中Foxp3的表达水平.②在第一部分实验基础上,通过MACS分离获取C57BL/6小鼠CD4 CD25-T细胞,用同种抗原刺激后,给予TGF-β1干预,培养5 d后分离CD4 CD25 T细胞,利用混合淋巴细胞培养系统检测其抑制淋巴细胞增殖的能力.结果 T细胞经同种抗原刺激后,在中、高浓度TGF-β1诱导下CD4 CD25 T细胞比例均明显升高,Foxp3的表达水平也相应增加,与对照组相比有显著性差异(P＜0.05).TGF-β1可直接诱导CD4 CD25-T细胞转化为CD4 CD25 T细胞,转化后的CD4 CD25 T细胞可有效抑制淋巴细胞增殖.结论 TGF-β1可诱导CD4 CD25-T细胞转化为CD4 CD25 Treg,促进其表达Foxp3,并能够抑制淋巴细胞增殖.     

TGF-β1对Heymann肾炎肾小球细胞外基质的影响

目的 探讨TGF-β1对不同病变阶段主动型Heymann肾炎肾小球细胞外基质的影响。方法 建立主动型Heymann肾炎模型，在主动型Heymann肾炎第4、6、8和12周，用RT-PCR法检测TGF-β1 mRNA在病变肾组织内的表达，并用免疫组化SP法检测纤维连接蛋白和Ⅳ型胶原在Heymann肾炎病变各阶段大鼠肾小球内的表达，再用计算机图像分析系统进行定量分析。结果 自主动型Heymann肾炎模型诱发后第4周开始，TGF-β1 mRNA即有表达，至第8周最明显，第12周有所下调。主动型Heymann肾炎大鼠肾小球内纤维连接蛋白和Ⅳ型胶原的含量，随TGF-β1表达的上调和病变的进展而增多。结论 TGF-β1可能通过刺激主动型Heymann肾炎大鼠肾小球上皮细胞产生过量细胞外基质，从而介导了主动型Heymann肾炎病变的发生和发展。     

原发性高血压肾病患者血清TGF-β1和Cys C检测的临床意义

文献报告,TGF-β1能直接导致肾脏细胞肥大、细胞外基质过度积聚。胱抑素C（cystatin C,Cys C）是一种低分子量分泌性蛋白质,其血清中浓度与肾小球滤过率密切相关。国内尚少见有原发性高血压肾病患者血清TGF—β1和CysC水平的研究报告,为此,我们进行了探讨,现将结果报告如下。     

TGF-β诱导猪CD4+ T细胞来源的foxp3high调节性T细胞

目的:应用TGF-β2诱导猪CD4 T细胞,分析其细胞表型,并鉴定其免疫生物学特性。方法:用磁珠阳性分选的方法从健康猪外周血淋巴细胞中获取CD4 T细胞,应用TGF-β2诱导培养、扩增CD4 T细胞,监测其细胞表型和foxp3表达,采用混合淋巴细胞培养鉴定其免疫生物学特性。结果:TGF-β2能够诱导CD4 T细胞高表达foxp3,诱导扩增的细胞能抑制同基因CD4 CD25-T细胞的活化,具有免疫抑制功能。结论:TGF-β2能够诱导CD4 T细胞成为具有与天然CD4 CD25 调节性T细胞相似抑制活性的细胞。     

强的松联合依那普利对实验性IgA肾病小鼠肾组织表达TGF-β1的影响

目的 探讨强的松联合依那普利对IgA肾病(IgAN):b鼠肾组织TGF-β1含量及其mRNA表达的影响.方法 用"口服牛血清白蛋白联合尾静脉注射葡萄球菌肠毒素B"法复制小鼠IgAN模型,设正常对照组、模型对照组、强的松组、依那普利组和强的松联合依那普利治疗组.荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法分别检测各组小鼠.肾组织TGF-β1 mRNA表达、免疫组化SABC法检测各组小鼠肾组织TGF-β1的含量.结果 模型组小鼠.肾组织TGF-β1含量及其mRNA表达显著高于正常组(P＜0.05);强的松组、依那普利组和强的松联合依那普利治疗组小鼠肾组织TGF-β1含量及其mRNA表达分别低于模型组,差异均有显著性(P＜0.05);强的松联合依那普利治疗组TGF-β1含量及其mRNA表达分别低于强的松组和依那普利组(P＜0.05);强的松组TGF-β1含量及其mRNA表达低于依那普利组(P＜0.05).结论 IgAN肾组织TGF-β1含量及mRNA的表达明显增加;在抑制IgAN小鼠肾组织TGF-β1表达方面,单用强的松疗效优于单用依那普利、合用强的松和依那普利疗效优于单用强的松或单用依那普利.     

髓系细胞TGF-β1基因缺失增加小鼠对结肠炎的易感性

目的 探究髓系细胞中TGF-β1基因敲除对葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)引发的小鼠结肠炎发病进程的影响以及与神经肽因子的关系。方法 TGF-β1+/+LysM-Cre及TGF-β1f/fLysM-Cre小鼠分别分成2组,饮用无菌水的小鼠命名为TGF-β1+/+LysM-Cre water及TGF-β1f/fLysM-Cre water;饮用含2%DSS无菌水的小鼠命名为TGF-β1+/+LysM-Cre DSS及TGF-β1f/fLysM-Cre DSS。检测小鼠质量;记录死亡率;测量结肠长度;HE染色检测结肠组织中炎症细胞浸润情况;QRT-PCR及免疫组化检测结肠组织中炎症因子,神经肽及其受体的表达水平。结果 TGF-β1+/+LysM-Cre water及TGF-β1f/fLysM-Cre water小鼠均表征正常;而TGF-β1+/+LysM-Cre DSS及TGF-β1f/fLysM-Cre DSS小鼠的结肠炎症状明显,此外,相比TGF-β1+/+LysM-Cre DSS小鼠,TGF-β1f/fLysM-Cre DSS小鼠的质量降低更多,死亡率增加了60%,结肠长度更短,结肠组织炎症细胞浸润更明显,且QRT-PCR及免疫组化结果均显示其炎症因子、神经肽因子及受体表达水平更高。结论 髓系细胞敲除TGF-β1会增加小鼠对结肠炎的易感性,神经肽在其中发挥着一定的作用。     

TGF-β1对SW620结肠癌细胞PD-L1表达的影响

目的 研究TGF-β1对SW620结肠癌细胞体外增殖、迁移和PD-L1表达的影响,探讨ERK、AKT在TGF-β1调节PD-L1表达中的作用.方法 MTT法检测TGF-β 1对SW620细胞增殖能力的影响;细胞划痕方法检测TGF-β1对SW620细胞迁移能力的影响;Real-time PCR、Western blot和...