MT1-MMP与甲状腺乳头状癌侵袭转移的研究进展

甲状腺乳头状癌是最常见的甲状腺癌,恶性程度较低,部分患者可出现淋巴结或远处转移,预后不佳。甲状腺乳头状癌的侵袭转移能力可能与膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)密切相关。在甲状腺乳头状癌等多种恶性肿瘤的浸润及转移过程中,MT1-MMP可发挥分解细胞外基质以及活化MMPs等作用,对疾病进展起到促进作用。对MT1-MMP抑制剂的研究是甲状腺乳头状癌靶向治疗药物的研究方向之一,目前针对MT1-MMP的不同作用已经研发出多种类型的靶向药物,对甲状腺乳头状癌的治疗具有重要意义。     

miR-181靶向TIMP3调控胆囊癌细胞迁移及侵袭的实验研究

目的研究miR-181靶向金属蛋白酶组织抑制因子3(TIMP3)调控胆囊癌细胞迁移及侵袭的作用。方法培养胆囊癌GBC-SD细胞,转染miR-181 mimic、阴性对照(NC)mimic、TIMP3 siRNA、NC siRNA、表达TIMP3的重组质粒、空白质粒,荧光定量PCR检测miR-181的表达量,Western blot检测TIMP3的表达量,Transwell检测细胞迁移和侵袭活力,生物信息学分析及荧光素酶报告基因实验验证miR-181靶向TIMP3;皮下注射转染miR-181 mimic或NC mimic的GBC-SD细胞后建立荷瘤鼠模型,检测移植瘤质量及miR-181、TIMP3表达量。结果细胞实验显示:转染miR-181 mimic促进细胞迁移及侵袭、抑制细胞中TIMP3的表达及双荧光素酶报告基因的荧光素酶活力;转染TIMP3 siRNA促进细胞迁移及侵袭;转染表达TIMP3的重组质粒后,miR-181 mimic促进细胞迁移、侵袭的作用减弱。动物实验显示:转染miR-181 mimic使移植瘤的质量减轻、移植瘤中TIMP3的表达增加。结论 miR-181具有促进胆囊...     

氯沙坦对糖尿病大鼠肾组织MT3-MMP及TIMP2 mRNA表达的影响

目的 观察糖尿病大鼠肾组织膜3型基质金属蛋白酶(MT3-MMP)及组织2型金属蛋白酶抑制物(TIMP2)mRNA表达的变化及氯沙坦对它们的影响。方法 建立糖尿病大鼠模型并将之分为正常对照组(A组)、糖尿病组(B组)、糖尿病+氯沙坦组(C组)。饲养18周后取出肾脏以RT-PCR法检测MT3-MMP、TIMP2及TGF-β1mRNA的表达,电镜观察大鼠肾小球基底膜厚度及系膜基质密度(系膜基质面积/系膜面积),收集24h尿检测尿白蛋白。结果 B组大鼠肾组织MT3-MMPmRNA、TIMP2mRNA和TGFβ1mRNA表达以及均显著高于A组,C组显著低于B组,但与A组无显著差异。B组尿白蛋白、基底膜厚度及系膜基质密度显著高于A组,C组均显著低于B组。P<0.05。结论 氯沙坦治疗可延缓糖尿病肾病的发生,并可抑制糖尿病大鼠肾组织MT3-MMP及TIMP2mRNA表达。     

硫化氢对糖尿病大鼠心肌组织中MT1-MMP和TIMP-2蛋白表达及心肌纤维化的影响及其机制

目的:观察气体信号分子硫化氢(H₂S) 对糖尿病(DM)大鼠心肌纤维化和膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)和基质金属蛋白酶组织抑制因子2(TIMP-2)蛋白表达的影响,探讨其在心肌纤维化发生发展中的作用和相关机制。方法:52只SD大鼠随机分为对照组(Control组)、糖尿病模型组(DM组)、硫化氢干预糖尿病组(DM+H₂S组)和硫化氢干预正常组(H₂S组),每组13只。以链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立DM大鼠模型,模型构建成功后对照组(n=12)和DM组(n=9)大鼠每天腹腔注射生理盐水;DM+H₂S组(n=9)和H₂S组(n=10)大鼠每天腹腔注射100 μmol·kg^-1硫氢化钠溶液,8周后处死大鼠取左心室心肌组织,VG染色观察大鼠心肌组织形态学;Western blotting法检测大鼠心肌组织中Ⅲ型胶原、MT1-MMP和TIMP-2蛋白的表达水平。结果:与对照组比较,DM组大鼠心肌细胞排列紊乱,胶原沉积增多,心肌存在明显心肌纤维化,心肌组织中Ⅲ型胶原蛋白、MT1-MMP和TIMP-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与DM组比较,DM+H₂S组大鼠心肌纤维化有所改善,心肌组织中Ⅲ型胶原蛋白、MT1-MMP和TIMP-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:H₂S可改善DM大鼠的心肌纤维化并下调Ⅲ型胶原蛋白的表达,其机制可能与其下调MT1-MMP蛋白表达以及改善MT1-MMP/TIMP-2蛋白失衡有关。     

MT1-MMP 在乳腺癌中表达的研究

目的：探讨膜型基质金属蛋白酶-1（MT1-MMP）表达与乳腺癌临床病理因素的关系。方法用免疫组化法检测69例乳腺癌组织及27例正常乳腺组织中MT1-MMP的表达水平,分析其与乳腺癌临床分期、淋巴结转移和器官转移的相关性。结果MT1-MMP蛋白在69例乳腺癌组织中阳性表达61例（88．4％）,在27例正常乳腺组织中无一例阳性表达（P＜0．01）;在T1＋T2与T3＋T4两组阳性表达为24例（77．4％）和37例（97．4％）（P＜0．05）;在N0＋N1与N2＋N3两组阳性表达为14例（70％）和47例（95．9％）（P＜0．01）;在M0与M1两组阳性表达为39例（82．98％）和22例（100％）（P＜0．05）。结论MT1-MMP蛋白参与了乳腺癌的浸润生长和扩散转移过程,是乳腺癌发生发展中的重要生物学事件。     

微小RNA-181a在肝癌组织的表达及其对肝癌细胞增殖、侵袭能力的影响

目的 探讨微小RNA-181a在肝癌组织的表达水平及其对肝癌细胞增殖、侵袭能力的影响。方法 选取西安市第九医院2016年8月—2018年3月的肝癌患者68例作为观察组。荧光定量PCR检测比较微小RNA-181a的表达水平。培养肝癌细胞hepG2,通过转染的方法使hepG2内的微小RNA-181a进行过表达（过表达组）和抑制表达（低表达组）,用CCK-8法检测体外细胞48 h内的扩增情况,裸鼠活体成像检测体内的扩增情况。Western-blot检测生长因子EGF、VEGF和TGF-β的表达量。Transwell验证微小RNA-181a的表达对细胞侵袭能力的影响。结果 与对照组肝组织相比,观察组肝癌组织的微小RNA-181a的表达量更低（P<0.05）。第24小时开始,过表达组的细胞增殖率低于正常表达组和低表达组,低表达组裸鼠体内的荧光强度高于正常表达组和高表达组（P<0.05）。低表达组EGF、VEGF和TGF-β的蛋白表达量高于正常表达组和过表达组（P<0.05）。48 h后,低表达组（51个/cm²）侵入细胞的数量多于正常表达组（35个/cm²）,多于过表达组的12个/cm²。结论 微小RNA-181a的表达水平能够调控肝癌细胞的增殖速率和侵袭能力。     

大肠癌中MT1-MMP和RECK基因表达的研究

目的探讨膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)和RECK基因在大肠癌中的表达及其临床病理意义。方法采用免疫组织化学SP法检测216例大肠癌组织及20例正常大肠黏膜组织中MT1-MMP与RECK的表达,并分析它们的表达与大肠癌临床病理因素的关系。结果MT1-MMP蛋白在216例大肠癌组织中的阳性表达率为81.5%,在20例大肠正常黏膜中的阳性表达率为0(P<0.01);在Ⅰ Ⅱ与Ⅲ Ⅳ期的阳性表达率分别为67.1%和88.4%(P<0.01);在T1 T2与T3 T4两组的阳性表达率分别为72.5%和88.0%(P<0.05);在N0与N1 N2两组的阳性表达率分别为65.7%和89.0%(P<0.01);在M0与M1两组的阳性表达率分别为77.7%和94.0%(P<0.01)。RECK在216例大肠癌组织中的阴性表达率为41.7%,在20例大肠正常黏膜中的阴性表达率为0(P<0.01);在Ⅰ Ⅱ与Ⅲ Ⅳ期的阴性表达率分别为21.4%和51.4%(P<0.01);在T1 T2与T3 T4两组的阴性表达率分别为26.4%和52.8%(P<0.01);在N0与N1 N2两组的阴性表达率分别为25.7%和49.3%(P<0.01);在M0与M1两组的阴性表达率为34.3%和66.0%(P<0.01);RECK阴性表达组(5年生存率为25.6%)较阳性表达组(5年生存率为52.4%)预后差(P<0.01)。结论MT1-MMP蛋白在大肠癌中的表达与肿瘤分期、淋巴结转移、器官转移及预后有关,在大肠癌的侵袭、转移中发挥重要作用。     

卡维地洛对大鼠颈动脉损伤后MMP－9 和TIMP－1 表达的影响

目的:观察卡维地洛( CAＲ) 对大鼠颈动脉损伤血管组织MMP－9、TIMP－1 表达的影响,探讨卡维地
洛防治再狭窄的机制。方法:雄性Wistar 大鼠90 只,随机分为假手术组、损伤组和CAＲ 组,后两组行颈动脉球
囊损伤术。三组均于术后1 d、3 d、7 d、14 d、28 d 处死大鼠。光镜下观察血管损伤后内膜增生情况,用免疫组化
和ＲT－PCＲ 法检测MMP－9、TIMP－1 在各组术后不同时间点的表达情况。结果: 与损伤组比较,术后14 dCAＲ
组内膜面积、内膜与中膜面积比值显著减少,管腔面积显著扩大( P＜0． 05) ; 与损伤组比较,CAＲ 组术后3 ～ 14
dMMP－9 表达显著减少( P＜0． 05) ,而TIMP－1 表达无显著变化。结论: 卡维地洛有效抑制大鼠颈动脉损伤后
MMP－9 表达,抑制了VSMCs 迁移、增殖,改善了细胞外基质的合成与降解平衡,从而减轻再狭窄。     

层粘连蛋白,MMP 2、MMP 9及TIMP 1在人脑原发性胶质瘤的表达及临床意义

目的探讨层粘连蛋白(LN)和基质金属蛋白酶(MMP)-MMP 2、MMP 9与其组织抑制因子(TIMP)TIMP 1在原发性人脑胶质瘤侵袭行为中的作用。方法利用免疫组织化学技术SP法检测LN和MMP 2、MMP 9以及TIMP 1在正常脑组织、高低度恶性胶质瘤和脑内转移瘤中的表达情况;通过电镜观察胶质瘤中血管基底膜变化特征,并与免疫组织化学表达结果作对照比较。结果 (1)正常脑组织和胶质瘤血管基底膜及血管内皮细胞上均有LN的表达,而瘤细胞未见染色。LN的表达强度与胶质瘤恶性度呈正相关(P＜0.05),在高度恶性胶质瘤侵袭边缘的细胞间可见LN的弱阳性表达;而脑内转移瘤则表现散在的瘤细胞浆膜阳性表达,基底膜及内皮细胞未见表达。(2)正常脑组织中,MMP 2阳性表达在血管基底膜及血管内皮细胞上,其他部位未见表达,而MMP 9均无表达。在胶质瘤中MMP 2和MMP 9阳性染色不仅见于血管基膜及血管内皮细胞,而且也见于侵袭边缘的瘤细胞。70例人脑胶质瘤标本中,MMP 2、MMP 9的阳性表达率分别为40％(28/70),67.1％(47/70),差别具有显著性(P＜0.05);MMP 2、MMP 9在低度恶性胶质瘤中阳性率分别为14.3％(4/28),32.1％(9/28),差别无显著性(P＞0.05);MMP 2、MMP 9在高度恶性胶质瘤标本中阳性率分别为57.1％(24/42),90.5％(38/42),差别具有显著性(P＜0.01).(3)MMP 2表达强度与CT表现的瘤周水肿程度无关(P＞0.05),但表达与否与CT影像上表现的瘤周水肿程度明显相关(P＜0.01).MMP 9阳性表达与否及强度与瘤周水肿程度明显相关(P＜0.05)。(4)MMP 2,MMP 9在转移瘤中表达率无明显差别(P＞0.05);在转移瘤与高度恶性胶质瘤之间表达亦无明显差别(P＞0.05).(5)TIMP 1在低、高度恶性胶质瘤中表达率分别为7.14％(2/28),50.0％(21/42),与相应级别中的MMP 9的表达存在差别(P＜0.05).(6)电镜下可见基膜完整呈不同程度的局限性或广泛性增厚,与LN免疫组织化学结果相一致。胶质膜侧见大小不一的虫蚀样空洞。结论 (1)BM上的LN可能来源于血管内皮细胞。在BM上的过度表达可能参与构成阻止胶质瘤细胞向颅外转移的屏障。(2)MMP 2、MMP 9在人脑胶质瘤中作为恶性表型及侵袭指标之一,其中MMP 9比MMP 2更重要.(3)MMP 2在正常脑组织血管基膜上表达,提示可能与血管的发生有关;而肿瘤血管BM上的MMP 9表达一方面参与了肿瘤新血管的形成,有利于肿瘤生长;另一方面可能有利于胶质瘤细胞沿着血管侵袭.(4)胶质瘤中MMP 9与TIMP 1之间失衡是促进其侵袭的重要因素之一。     

MiR-181b suppresses proliferation of and reduces chemoresistance to temozolomide in U87 glioma stem cells

MicroRNAs regulate self renewal and differentiation of cancer stem cells.There,we sought to identify the expression of miR-181b in glioma stem cells and investigate the biological effect of miR-181b on glioma stem cells in this study.MiR-181b expression was measured by real-time PCR in glioma stem cells isolated from U87 cells by FACS sorting.After miR-181b was overexpressed in U87 glioma stem cells by miR-181b lentiviral expression vector and/or treatment of temozolomide,secondary neurosphere assay,soft agar colony assay and MTT assay were performed.Compared with U87 cells,the expression of miR-181b was significantly decreased in U87 glioma stem cells.Overexpression of miR-181b decreased neurosphere formation by U87 glioma stem cells in vitro and suppressed colony formation in soft agar,and the cell growth inhibition rates increased in a time-dependent manner in U87 glioma stem cells infected with miR-181b lentivirus.Furthermore,miR-181b had a synergistic effect on temozolomide-induced inhibition of secondary neurosphere and soft agar colony,and on cell growth inhibition rates.MiR-181b functions as a tumor suppressor that suppresses proliferation and reduces chemoresistance to temozolomide in glioma stem cells.     

异丙酚抑制胶质瘤U87细胞增殖和侵袭的作用机制及其对miR-134表达的影响

目的： 探讨异丙酚对胶质瘤U87细胞增殖、侵袭的影响,并探讨其抗肿瘤作用的可能机制。方法： 胶 质瘤 U87 细胞分为空白组、阳性对照组和异丙酚处理组(1.00、2.00、5.00 mmol/L)。采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞增殖能力,Transwell小室检测异丙酚对U87细胞侵袭、迁移能力的影响;采用real time PCR检测细胞微RNA-134(microRNA-134,miR-134)的表达;采用蛋白质印迹法检测增殖细胞核抗原Ki-67、侵 袭相关蛋白基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9, MMP-9)以及磷酸肌醇3激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路相关蛋白 的表达。结果： 与空白组相比,阳性对照组和异丙酚处理组48 h后U87细胞增殖倍数,细胞侵袭和迁移数量,Ki- 67、MMP-2 和 MMP-9 蛋白表达,以及磷酸化 PI3K (p-PI3K)/PI3K 和磷酸化 Akt(p-Akt)/Akt 比值均显著降低(均 P< 0.05);miR-134水平显著升高(P<0.05)。与阳性对照组和1.00 mmol/L异丙酚处理组相比,2.00和5.00 mmol/L异丙酚 处理组48 h后U87细胞增殖倍数,细胞侵袭和迁移数量,Ki-67、MMP-2和MMP-9蛋白表达,以及p-PI3K/PI3K和p Akt/Akt比值均显著降低(均P<0.05);miR-134水平显著升高(P<0.05)。与2.00 mmol/L异丙酚处理组相比,5.00 mmol/L 异丙酚处理组48 h后U87细胞增殖倍数,细胞侵袭和迁移数量,Ki-67、MMP-2和MMP-9蛋白表达,以及p-PI3K/ PI3K和p-Akt/Akt比值均显著降低(均P<0.05);miR-134水平显著升高(P<0.05)。结论：异丙酚能降低人胶质瘤U87细 胞增殖速度,降低 U87 细胞侵袭和迁移能力,这可能是通过上调 miR-134 表达、抑制 PI3K/Akt 信号通路激活来实 现的。     

氟西汀辅助治疗前后精神分裂症患者外周血miR-181b 表达差异研究

目的:探讨氟西汀治疗精神分裂症的疗效及对患者外周血miR-181b表达的影响。方法:选取我院2016年5月-2017年5月收治的精神分裂症患者160例,按照随机数字表法均分为观察组和对照组,每组80例。对照组患者给予抗精神病药物治疗,观察组患者在此基础上加用氟西汀治疗。治疗８周后检测两组患者的miR-181b表达水平,观察两组患者生活质量评分变化并记录不良反应的发生情况。结果:治疗前两组患者miR-181b表达水平比较,差异无统计学意义（P>0.05）;同组治疗前后相比,两组患者miR-181b表达水平均显著降低（P<0.05）,观察组明显低于对照组,两组之间具有显著性差异（P<0.05）。治疗前两组患者的生活质量评分比较,差异无统计学意义（P>0.05）;治疗后两组患者的生活质量评分均高于治疗前,且观察组明显高于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。观察组不良反应发生率与对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论:氟西汀可通过调控患者外周血miR-181b的表达从而发挥其抗精神病的作用,有利于提高患者的生活质量。     

MicroRNA-181b和microRNA-130a在冠状动脉粥样硬化性心脏病患者血浆中的表达及临床意义

目的探讨microRNA-181b（miR-181b）和microRNA-130a（miR-130a）在冠状动脉粥样硬化性心脏病（简称冠心病）患者血浆中的表达及临床意义。方法选取106 例冠心病患者和40 例健康者作为对照组,收集临床资料,行冠状动脉造影检查及Gensini评分,利用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测冠心病患者和对照组血浆中miR-181b 和miR-130a 的表达,利用受试者工作特征曲线（ROC 曲线）对血浆中miR-181b 和miR-130a 的相对表达量在评估冠心病患者病程进展中的价值进行分析。结果冠心病患者血浆中miR-181b 和miR-130a 相对表达量与对照组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,冠心病患者血浆中miR-181b 相对表达量低于对照组,而miR-130a 相对表达量则高于对照组,冠心病患者中,中重度组患者血浆miR-181b 相对表达量低于轻度组,而miR-130a 相对表达量则高于轻度组;Pearson 相关分析显示,冠心病患者血浆中miR-181b 相对表达量均与Gensini 积分、脂蛋白a（Lp-a）、高敏C 反应蛋白（hs-CRP）呈负相关（r =-0.504、-0.382 和-0.415,p <0.05）,血浆中miR-130a 相对表达量均与Gensini 积分、Lpa 和hs-CRP 呈正相关（r =0.586、0.335 和0.394,p <0.05）;ROC 曲线分析显示,冠心病患者血浆中miR-181b 相对表达量在评估患者病程进展时,曲线下面积0.871（95%CI：0.807,0.936）,敏感性75.0%,特异性82.3%,血浆中miR-130a 相对表达量在评估患者病程进展时,曲线下面积0.931（95%CI：0.887,0.976）,敏感性93.2%,特异性81.2%。结论冠心病患者血浆中miR-181b 表达水平降低,而miR-130a 表达水平升高,且均与患者病情严重程度有关,可作为评估患者病情进展的指标。     

SHG-44神经胶质瘤干细胞分化为胶质瘤细胞前、后miR-92b基因的表达变化

目的观察SHG-44神经胶质瘤干细胞分化为胶质瘤细胞前、后miR-92b基因表达的变化。方法从人胶质瘤SHG-44细胞中筛选出肿瘤干细胞并进行荧光免疫鉴定;将肿瘤干细胞诱导分化为胶质瘤细胞;逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法和实时荧光定量PCR法测定分化前、后miR-92b基因前体的转录水平。结果 RT-PCR产物的电泳结果显示,在干细胞及分化后的胶质瘤细胞中均出现miR-92b基因前体的目标条带。运用实时荧光定量PCR法对目的基因进行表达相对定量的2-ΔΔt法,以干细胞miR-92b前体基因为参照,分化后的胶质瘤细胞miR-92b基因前体表达量为2.95,约为干细胞表达量的3倍。结论 miR-92b基因可能在神经胶质瘤干细胞的分化过程中发挥了重要作用。     

血清miR-181b在儿童阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征中的作用及意义

目的探讨血清miR-181b在儿童阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)中的作用及意义。方法选取2018年1—12月湖州市中心医院收治的OSAHS患儿60例,经多导睡眠监测仪监测,按照病情分为轻度OSAHS组与中重度OSAHS组,每组各30例。选取同一时期来湖州市中心医院进行健康体检的无OSAHS症状患儿30例为对照组。对受试者进行Achenbach儿童行为量表(CBCL)检测、韦氏儿童智力量表(WWISC)检测,以及血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S100β、miR-181b水平检测。结果轻度、中重度OSAHS组CBCL评分,NSE、S100β、miR-181b水平显著高于对照组;中重度OSAHS组CBCL评分、NSE、S100β、miR-181b水平显著高于轻度OSAHS组,WISC显著低于轻度OSAHS组(P0.05)。OSAHS患者血清miR-181b水平与NSE、S100β水平、CBCL评分均呈显著正相关(P0.05),与WISC呈显著负相关(P0.05)。结论通过对血清中的miR-181b水平进行检测,能够对OSAHS患儿认知行为障碍的程度、脑损伤的程度进行早期的筛查,提高诊断水平。     

MiR-181a靶向RASSF1A促进骨肉瘤细胞的生长和转移

目的：探讨miR-181a是否靶向调控抑癌基因RAS相关区域家族1A(Ras-association domain family 1,isoform A,RASSF1A),从而促进骨肉瘤细胞的生长和转移。方法：采用real-time PCR检测30例人骨肉瘤组织及其癌旁正常骨组织中miR-181a的表达,并分析miR-181a表达水平与骨肉瘤患者临床病理特征的相关性。在骨肉瘤细胞MG-63中瞬时转染miR-181a模拟物和miR-181a抑制剂,分别采用MTT和transwell检测miR-181a对骨肉瘤细胞生长和转移的作用。随后,预测并通过双荧光素酶报告基因验证miR-181a与RASSF1A基因3'-非编码区(3'-untranslated region,3'-UTR)的特异性结合作用。结果：与癌旁正常骨组织比较,miR-181a在骨肉瘤组织中高表达(P<0.001),但其表达水平与骨肉瘤患者的性别、年龄、肿瘤大小及肿瘤病理分期等无明显相关性(P>0.05)。MTT及transwell结果显示过表达miR-181a促进了MG-63细胞生长、迁移和侵袭,显著高于阴性对照组(P<0.05);而抑制miR-181a的表达降低了MG-63细胞生长、迁移和侵袭,显著低于阴性对照组(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测结果显示miR-181a可靶向结合RASSF1A基因3'-UTR,从而调控RASSF1A的表达。结论：miR-181a可特异性结合RASSF1A基因3'-UTR,下调RASSF1A基因的表达,从而促进人骨肉瘤细胞MG-63的生长和转移。     

过表达miR-23b-3p对甲状腺未分化癌FRO细胞侵袭和迁移的影响

目的探讨miR-23b-3p对甲状腺未分化癌(ATC)FRO细胞侵袭和迁移能力的影响。 方法qRT-PCR法检测52例ATC癌组织及其癌旁组织中miR-23b-3p和锌指E盒结合同源框1(ZEB1)的表达水平,并分析两者的相关性。培养人ATC细胞株FRO,将miR-23b-3p mimic及其阴性对照转染至FRO细胞中,qRT-PCR检测miR-23b-3p和ZEB1 mRNA表达水平。体外三维培养观察细胞血管生成拟态(VM)形成能力;Transwell法检测细胞侵袭和迁移能力;Western blotting检测ZEB1、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9蛋白表达水平,双荧光素酶报告实验验证miR-23b-3p和ZEB1的靶向调控关系。 结果ATC组织中miR-23b-3p表达水平低于癌旁组织,而ZEB1的表达水平高于癌旁组织,且两者在ATC组织中的表达水平呈负相关。过表达miR-23b-3p能显著下调ZEB1表达水平,抑制FRO细胞VM形成以及侵袭和迁移能力,同时抑制细胞中VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白表达。荧光素酶报告实验证实ZEB1是miR-23b-3p的靶基因。 结论过表达miR-23b-3p可能通过靶向下调ZEB1表达抑制FRO细胞的侵袭和迁移能力。     

太白银莲花皂甙-1诱导胶质瘤U87MG细胞凋亡及机制研究

目的 研究太白银莲花皂甙-1对人脑胶质母细胞瘤U87MG凋亡的影响,并探讨其可能的分子机制.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度不同时间(6、24、48、72 h)太白银莲花皂甙-1对U87MG细胞生长增殖的抑制作用;应用倒置显微镜和Hoehst荧光染色、末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素脱氧尿嘧啶核苷酸缺口末端标记法(TUNEL)、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)检测太白银莲花皂甙-1作用U87MG细胞后形态的变化和凋亡情况;通过免疫印迹法法检测太白银莲花皂甙-1处理后细胞凋亡相关蛋白Survivin及活化的Caspase-3的表达.结果 太白银莲花皂甙-1可明显抑制U87MG细胞的增殖,诱导其凋亡;同时下调Survivin表达,激活了凋亡蛋白Activated Caspase-3的表达.结论 体外实验显示,太白银莲花皂甙-1对U87MG细胞具有显著的增殖抑制作用,并能成功诱导人脑胶质母细胞瘤U87MG细胞发生凋亡,其机制可能与抑制细胞增殖及诱导细胞凋亡有关.