来氟米特在大鼠异种心脏移植排斥反应中对NF-κB P65的影响

目的 复制小鼠到大鼠异种心脏移植模型,探讨来氟米特(Ieflunomide,Lef)在大鼠异种心脏移植排斥反应中对NF-κB P65的影响.方法 实验动物按随机数字表法分成4组,每组6只空白移植组、环孢素A(CsA)组、来氟米特(Lef)组、Lef CsA组.采用免疫组化法和蛋白印迹杂交法检测各组移植心肌组织中NF-κB P65的表达;凝胶电泳迁移率法检测NF-κB DNA结合活性.结果单用CsA不能延长移植心脏存活时间[(2.50±1.05)d],也不能抑制移植心肌NF-κB P65蛋白的表达(263.09±28.81,IOD)和NF-κB DNA结合活性(227.49±14.83,IOD);而单用Lef可显著延长移植心脏存活时间[(4.17±1.33)d],也能显著抑制移植心肌NF-κB P65蛋白的表达(173.48±5.85,IOD)和NF-κB DNA结合活性(109.96±12.46,IOD),与空白移植和CsA组比较,均有显著性差异(P＜0.05).Lef与CsA联合应用使移植心脏存活(6.50±2.56)d,抑制移植心肌组织中NF-κB P65蛋白的表达(67.79±3.79,IOD)和NF-κB DNA结合活性(43.61±7.42,IOD)最为显著,与其他3组比较,均有显著性差异(P＜0.05).结论 在大鼠心脏异种移植中Lef与CsA联用可通过显著抑制NF-κB P65蛋白表达和NF-κB DNA结合活性来延长移植心脏的存活时间,二者具有免疫协同作用.     

NF-κB P65在大鼠异种心脏移植后心肌中的表达及意义

目的 复制小鼠→大鼠异种心脏移植模型,探讨核转录因子κB(nuclearfactor-κB,NF-κB)P65蛋白在异种移植心肌中的表达及NF-κB的DNA结合活性.方法 动物随机数字法分成2组:A组(对照组),n=6;B组(移植组),n=6.采用免疫印迹杂交法(Western blot)检测对照组及移植组心肌组织NF-κB P65表达,凝胶电泳迁移率实验检测NF-κB DNA结合活性.结果 移植组的NF-κB P65蛋白表达和NF-κB DNA结合活性均显著高于对照组(P＜0.05).结论 NF-κB的激活可能在大鼠异种移植心脏排斥反应中起着重要作用.     

异种移植中的超急排斥反应

<正> 随着免疫移植理论和移植外科技术的发展,器官移植广泛应用于临床,然而,全世界都存在着供体器官远远不能满足受者需要的问题。异种移植有可能解决这一矛盾,但异种移植最大的障碍就是在几分钟至几小时内发生的超急排斥反应(hyperacute rejection,HAR)。供、受体间种源关系越远,越易发生超排反应,与人种源关系最近的灵长类却因数量少,生长缓慢,不易饲养,易将某些可感染人的病毒传递给受者以及伦理方面的原因而不能满足需要,与人种源关系较远的物种中,猪可能是较为合适的一种,猪可在6个月内成熟,其脏器大小与人相似,特别是它的多乳头肾与人肾有相似的肾小球滤过率,总肾血流量和浓缩能     

异种移植超急性排斥反应

异种移植排斥反应比同种移植排斥反应强烈 ,且目前的药物难以控制。一般分为超急性排斥反应 (ＨＡＲ) ,延迟性异种移植排斥反应 (ＤＸＲ)和细胞介导的异种移植排斥反应。近 1 5年来 ,异种移植研究的最大成就就是基本弄清了ＨＡＲ的发生机理并发展了防治ＨＡＲ的诸多措施 ,本文就ＨＡＲ的研究进展综述如下。1　ＨＡＲ的病理表现ＨＡＲ发生于非协调性异种移植 ,在移植物血管再通后数分钟至数小时发生。表现为移植物内广泛血管内血栓形成和血管外出血 ,免疫荧光检查有ＩｇＭ和补体Ｃ3沉积 ,移植物失去功能。ＨＡＲ是由Ⅰ型内皮细胞 (ＥＣ)活化…     

NF-κB核苷酸圈套技术制备imDC联合超声介导对抗同种异基因大鼠胰十二指肠移植排斥反应研究

目的探讨NF-κB核苷酸圈套技术制备im DC联合超声介导抗同种异基因大鼠胰十二指肠移植排斥反应的作用。方法建立同种异基因大鼠胰十二指肠移植模型,分为对照组、NF-κB核苷酸圈套技术组、超声介导处理组及联合治疗组。检测细胞因子INF-γ、IL-4及IL-10水平及INF-γ、IL-4及IL-10 mRNA的表达;统计各组大鼠的生存率。结果联合治疗组生存周期最长,与其他组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。联合治疗组IL-4及IL-10水平最高,与其他组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 NF-κB核苷酸圈套技术制备im DC联合超声介导可协同增加抗同种异基因大鼠胰十二指肠移植排斥反应。     

NF-κB在移植排斥反应中作用的研究进展

临床器官移植是终末期器官功能衰竭患者的最佳治疗方案,然而,同种异体排斥反应仍然是器官移植的主要障碍。核因子-κB(nuclearfactor-κB,NF-κB)作为一种重要的核内转录因子,参与免疫反应、炎性反应以及细胞凋亡等多种反应物质基因的表达调控,在器官移植排斥反应中起着关键性作用。本文就NF-κB的结构、功能及在器官移植排斥反应中作用和应用前景作一综述。1NF-κB的概述1.1NF-κB的组成NF-κB是Sen和Baltimore首先于1986年从B细胞核抽提物中发现的一种能和免疫球蛋白κ链基因增强子κB序列(GGGACTTTCC)特异性结合的核蛋白因…     

NF-κB在急性移植肾排异中的作用

目的研究转录因子NF-κB在肾移植急性排斥反应中的作用.方法ACI大鼠为供体,LEW大鼠为受体建立急性排斥动物模型,将移植肾分离制成核蛋白提取液,采用gelshift方法观察移植肾组织NF-κB与炎性基因启动子中特殊基因序列的结合能力,并以LEW大鼠同为供受体的移植肾作为对照.结果在急性排斥反应移植肾中,NF-κB的结合能力明显高于无排斥反应的同系移植肾.结论NF-κB在同种异体移植物中的强表达可能是急性排斥中的关键因素,提示可通过抑制NF-κB活性来降低移植物的排斥反应.     

细胞免疫在异种胰岛移植排斥反应中的作用

虽然胰岛移植作为治疗 1型糖尿病的一种手段已获成功[1] ,但不能长期维持其效果 ,主要是移植后排斥反应。为了更深入的了解T细胞亚群在胰岛异种移植中的作用 ,我们把成年猪胰岛分离纯化后移植给经链脲佐菌素 (STZ)诱发的糖尿病小鼠 ,探讨细胞免疫在排斥反应中的作用。1　材料与方法1.1.　实验动物　昆明系小鼠 18～ 2 1g,由 (吉林大学动物部提供 ) ,成年杂种猪 (长春市郊区屠宰厂提供 )。1.2　主要试剂　STZ(购于sigma公司 )。抗小鼠CD4、CD8单克隆抗体 ,(北京大学基础医学院免疫系单克隆抗体研究室 )。胶原酶 (由吉林大学地方病研究所…     

异种小肠移植模型的建立及排斥反应初步观察

目的：了解仓鼠消化道解剖特点,建立稳定的仓鼠－大鼠异种小肠移植模型并初步观察其排斥反应的特点,为进一步研究异种移植免疫特点奠定基础。方法：在解剖１０只仓鼠了解其消化道及血供特点并建立稳定的仓鼠至大鼠异位小肠移植模型后分别行仓鼠－仓鼠和仓鼠－大鼠腹部异位小肠移植２５例及３５例,通过对移植肠活力及系膜淋巴结观察并结合组织病理检查,了解供肠存活时间和病理变化特点。结果：发现仓鼠小肠较短,平均１５（１５±２）ｃｍ,其系膜也较短小;移植术后３天供肠系膜淋巴结明显肿大,第４天供肠色泽略暗边缘动脉搏动减弱,绒毛间质明显充血水肿并有淋巴细胞浸润,部分绒毛脱落。第５天移植肠颜色发暗,动脉搏动消失,对剌激无反应,淋巴结极度肿大。血管内血栓广泛形成及组织间隙出血水肿,绒毛大面积脱落,淋巴结严重出血水肿。结论：仓鼠－大鼠小肠移植后供肠存活时间为４．５（４．５±１．０）天,其病变特点为广泛的血栓形成、肠间隙出血水肿和大片绒毛坏死脱落     

静脉注射用免疫球蛋白抑制异种移植超急排斥反应的作用机制

目的探讨猪-人非协调性异种移植中超急性排斥反应(HAR)及静脉注射用免疫球蛋白(IVIG)抑制HAR的作用机制。方法以体外游离器官血液灌注系统为基础,建立猪-人异种器官移植模型。实验分A、B、C即人血灌注、人血加IVIG灌注和猪血灌注三组,观察HAR的发生并进行血清补体及其活性的检测以及组织病理和免疫荧光的研究。结果A组移植器官发生HAR的平均时间为(39.3±11.2)min,B、C两组的移植器官在180min内未发生HAR。A组移植器官的组织病理学研究可见广泛微血栓形成和中性粒细胞浸润,B、C两组则无明显的病理改变;免疫荧光研究还发现A、B两组的移植器官沿其肾小球毛细血管有明显的IgM和补体C1q的沉积,A组移植器官则另有显著C3沉积而B组未见;B组加用IVIG前后,其血清补体C3和总补体溶血活性水平均无明显变化;A、B两组移植器官灌注过程中均有大量的血清补体C4消耗。结论IVIG抑制猪-人非协调性异种移植HAR的机制在于,阻止补体激活经典途径中C3和其后的补体活性成分在异种移植物内皮细胞表面的沉积或附着,籍此保护移植物内皮细胞免于活化和损伤。     

异种移植超急性与急性排斥反应及其对策研究进展

器官移植作为治疗终末期器官衰竭患者的一种比较有效的方法,在临床上得到了越来越广泛的应用,然而这也使人类器官供体相对缺乏的状况越来越严重,激起人们对异种移植的强烈兴趣。考虑到器官的功能特点、形状和大小,基因调控和控制病毒传播的难易程度等因素,使得猪成为理想异种移植供体之一。     

异种移植胎肠细胞介导排斥反应的免疫学机制

目的:用大鼠游离胎肠移植于小鼠模型研究细胞介导排斥反应(CMXR)的免疫学机理.方法:观察同种和异种胎肠游离移植各组移植物的病理改变和浸润细胞的表型,并用原位杂交方法检测移植物内Th细胞因子mRNA表达.结果:(1)移植胎肠的存活率同种移植组高于异种移植组(P＜0.01);(2)异种移植胎肠主要发生细胞介导的排斥反应;(3)异种移植物内浸润细胞主要为CD4 T细胞和ED2 MФ,其IL-4、IL-5和IL-10mRNA阳性细胞均明显高于IFN-γmRNA阳性细胞(P＜0.01).结论:CMXR与同种移植急性排斥反应存在本质差异,其特点是排斥程度强烈,异种移植胎肠内以CD4 T细胞和ED2 MФ浸润为主,且Th2细胞功能增强.大鼠至小鼠游离胎肠移植模型是研究CMXR的较为理想的动物模型.     

异种移植超急性排斥反应

1　异种移植排斥反应概述器官移植现在被认为是终末期器官衰竭患者最有效的治疗手段 ,然而人类器官供体缺乏严重限制了它的广泛应用 ,这就激起人们对异种移植的兴趣。异种移植是指不同种属动物之间组织或器官的转移。由于不同种属动物遗传背景不同 ,器官移植后产生的反应有差异 ,1970年R .Calne首次将异种器官移植分为 :①协同性异种移植 :指供、受体双方进化关系较近 ,类似于第一次同种移植排斥反应的异种移植 ,移植物存活以日为计 ,如狒狒、猩猩的器官移植给人。②非协同性异种移植 :指供、受体双方进化关系较远 ,类似于第二次接触抗原的…     

异种动物移植中超急排斥反应动物模型的建立

目的 用豚鼠对大鼠的异种肠管移植，来探索建立异种肠管移植超急排斥反应模型。方法 用豚鼠和Wistar大鼠分别作为供体和受体，以豚鼠的远端空肠作为移植物，把肠系膜上动脉与主动脉吻合，肠系膜上静脉与门静脉吻合，移植肠管两端分别与大鼠肠管吻合，重建消化道连续性。结果 移植物存活时间为5min到40min，超急排斥反应由病理学方法确认。结论 豚鼠到大鼠的小肠移植是肠管异种移植超急排斥反应的一个有效模型，该模型的建立有利于进一步探讨异种移植超急排斥反应的免疫学机制，并对今后将此技术用于临床提供理论依据。     

种植受者血管内皮细胞对抗异种移植超急性排斥反应的 …

为探讨种植受者血管内皮细胞在抗异种移植超急性排斥反应方面的意义,选用豚鼠→大鼠移植模型,先分离、培养大鼠动脉内皮细胞,然后将其种植于去内皮的豚鼠动脉内壁,并以免疫组化技术检测了种植大鼠内皮细胞的豚鼠动脉与大鼠血清反应的情况。结果显示：大鼠血清与正常的豚鼠动脉一起培养后,前者所含ＩｇＭ、Ｃ３沿后者内皮细胞表面沉积、种植大鼠内皮细胞的豚鼠动脉与大鼠血清反应后免疫荧光反应呈阴性,即无ＩｇＭ和Ｃ３。以上结     

NF-κB在急性移植肾排异中的作用

目的研究转录因子NF-κB在肾移植急性排斥反应中的作用。方法 ACI大鼠为供体，LEW大鼠为受体建立急性排斥动物模型，将移植肾分离制成核蛋白提取液，采用gelshift方法观察移植肾组织NF-κB与炎性基因启动子中特殊基因序列的结合能力，并以LEW大鼠同为供受体的移植肾作为对照。结果 在急性排斥反应移植肾中，NF-κB的结合能力明显高于无排斥反应的同系移植肾。结论 NF-κB在同种异体移植物中的强表达可能是急性排斥中的关键因素，提示可通过抑制NF-κB活性来降低移植物的排斥反应。     

苏木单体物对大鼠心脏移植后NF-κB信号传导途径的影响

目的 探讨苏木中药对移植心脏的保护作用及可能的作用机制.方法 建立大鼠腹腔同种异位心脏移植模型.实验分为3组:A组为空白对照组;B组为苏木(Caesalpinia sappan,CS)中药组;C组为环孢素(CsA)组.每组8只大鼠.术后第2天开始灌药,第7天取供心.Western blot 法检测心肌组织中NF-κB及IκBα的表达水平.结果 与移植对照组相比CsA及CS组移植物的病理损害明显减轻;NF-κB及IκBα的表达水平给药组较对照组差异显著(P<0.05),但两种药物组之间的差异不显著(P>0.05).结论 苏木中药可能通过抑制NF-κB信号传导途径的激活,减缓急性排斥反应的发生从而减轻移植物的病理损伤,发挥保护移植心脏的作用.     

免疫活性细胞在异种移植急性血管性排斥反应中的意义

目的 探讨免疫活性细胞在异种移植急性血管性排斥反应(AVR)中的意义。方法 猪到猕猴腹腔内异位心脏移植，使用高纯度的眼镜蛇毒因子完全清除受体体内补体，建立AVR模型。常规病理检查，并采用免疫组化法检测移植心CD4^ T细胞、CD8^ T细胞和巨噬细胞浸润程度，检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。结果 移植心内大量淋巴细胞浸润，其中50％为巨噬细胞，CD4^ T细胞占15％，CD8^ T细胞占25％；ICAM-1和TNF-α表达明显上调。结论 细胞机制在异种移植AVR发生、发展过程中发挥重要作用。     

AMPK抑制NF-κB信号及炎症反应的研究进展

腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）是能量代谢平衡的重要调节器,AMPK可以抑制由核因子-κB （NF-κB）信号诱导的炎症反应.AMPK不直接作用于NF-κB,通过其下游靶分子如SIRT1、PGC-1α、P53和FoxO等,抑制NF-κB信号及炎症反应.综述AMPK参与的抑制NF-κB信号途径及炎症反应,强调激活AMPK对维持机体健康和延缓衰老具有重大作用.     

异种心脏移植急性血管排斥反应期动物模型的建立

为建立异种心脏移植急性血管排斥反应期动物模型,选择豚鼠和SD大鼠分别作为供体和受体。豚鼠升主动脉与大鼠腹主动脉端侧吻合,豚鼠主肺动脉与大鼠下腔静脉端侧吻合,受体鼠术前静脉注射眼睛蛇毒因子(CVF)60U/kg,术后腹腔注射CVF60U·kg-1·8h-1,抑制超急性排斥反应,另腹腔注射细胞免疫排斥反应抑制剂(FK506)0.25mg·kg-1·6h-1。结果显示:移植成功率88.9%(16/18),平均存活时间24.00±3.05h,病理学检查发现排斥心脏内广泛血栓形成,间质出血及炎症细胞浸润,部分心肌有局灶梗塞和凝固性坏死,符合急性血管排斥反应期的表现。该模型手术操作简单,不需显微镜,稳定可靠,是研究异种心脏移植急性血管排斥反应期较理想的动物模型。