杀菌性／通透性增加蛋白的研究概况

中性粒细胞是机体抵抗微生物侵袭的中心环节,含有众多的抗微生物物质,其中对杀菌性/通透性增加蛋白(Bactericidal/permeability increas-ing Protein,BPI)的研究,近年来倍受关注,该蛋白不仅对革兰阴性菌有杀灭作用,而且具有中和内毒素的作用,被称为未来的“超级抗生素”,在革兰阴性菌脓毒症的治疗中具有特殊的地位和广阔的应用前景,BPI的性质及作用如表1所示.现就其研究概况作一综述.     

七氟烷对低温环境下失血性休克猪的心肌保护作用

目的探讨七氟烷对低温环境下失血性休克猪的心肌保护作用。方法巴马小型猪32头,雌雄不限,体质量20~25 kg,按随机数字表法分为4组,每组8头。分别为假手术组(S组)、失血性休克组(HS组)、七氟烷预处理组(Pre/Sev组)和七氟烷后处理组(Post/Sev组)。监测并记录各组平均动脉压、心率和中心体温,各组分别于休克前及休克后30、60、90、120、180和240 min共7个时间点采集血液,采用ELISA法检测血清中白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factorα,TNF-α)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的含量。结果与S组比较,HS组、Pre/Sev组和Post/Sev组血浆中TNF-α和IL-6含量在休克后60 min和90 min显著升高(P<0.05),其中TNF-α含量在休克120 min时达到高峰,休克180 min时显著低于120 min(P<0.05);血清中SOD含量显著降低(P<0.05)。与HS组比较,Pre/Sev组和Post/Sev组血浆中TNF-α和IL-6含量显著降低(P<0.05);血清中SOD含量显著升高(P<0.05)。Pre/Sev组和Post/Sev组各项比较差异无显著意义(P>0.05)。结论七氟烷对低温环境下失血性休克猪心肌具有保护作用,其主要机制与抑制炎症反应,增强机体抗氧化能力有关。     

内毒素亲和吸附剂SPV对失血性休克模型大鼠肠壁通透性与细菌移位的影响

目的:观察内毒素亲和吸附剂SPV对失血性休克模型大鼠肠壁通透性与细菌移位的影响。方法:将85只雄性SD大鼠随机分为正常组(5只)、休克组(每时间点各5只,共20只)以及SPV低、中、高剂量组(将蒙脱石散0.3 g、硫酸多黏菌素B 0.5 mg、维生素B_6 5 mg溶于生理盐水中制成总体积为5 mL的SPV溶液,即为低剂量;中、高剂量药物成分是低剂量的2、3倍。各剂量组每时间点各5只,共60只),各给药组大鼠分别灌胃SPV溶液5、10、15 mL,正常组和休克组大鼠灌胃生理盐水5 mL,均给药1次。末次给药30 min后,除正常组外其余各组大鼠均通过股动脉插管放血术复制失血性休克模型。于复苏后1、4、8、16 h分别检测各组大鼠血清中二胺氧化酶(DAO)、内毒素、D-乳酸的活性或含量以及计算肠道细菌移位阳性率。结果:与正常组比较,休克组大鼠各时间点血清DAO活性均显著增强,血清内毒素、D-乳酸的含量以及肠道细菌移位阳性率均显著升高(P<0.05)。与休克组比较,SPV各剂量组大鼠血清DAO活性(1～16 h各时间点)均显著减弱,血清内毒素、D-乳酸的含量(1～16 h各时间点)以及肠道细菌移位阳性率(SPV低剂量组4～16 h各时间点,SPV中、高剂量组1～16 h各时间点)均显著降低(P<0.05),且SPV中、高剂量组上述指标(1～16 h各时间点)均显著低于SPV低剂量组(P<0.05);而SPV中、高剂量组上述指标组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:内毒素亲和吸附剂SPV可剂量依赖性地改善失血性休克模型大鼠的肠壁通透性,并抑制细菌移位。这种作用与其降低血清内毒素、DAO、D-乳酸的活性或含量,下调肠道细菌移位阳性率有关。     

丙泊酚对内毒素休克兔的保护作用

目的探讨不同剂量丙泊酚对内毒素休克兔的保护作用。方法连续注射LPS复制内毒素休克模型,新西兰大白兔50只,雌雄不限,随机分为5组:正常对照组(A组);内毒素对照组(B组);丙泊酚2mg·kg-1·h-1组(C组);丙泊酚5mg·kg-1·h-1组(D组);丙泊酚10mg·kg-1·h-1组(E组)。C、D、E组均为LPS注入后30min后予丙泊酚持续静脉泵入。5h内观察动物的MAP、PaO2、pH,血清TNF-α。比较48h内存活率。结果与B组比较,C、D、E三组均能不同程度地逆转MAP的下降,降低血清TNF-α水平,降低死亡率(P<0·01或P<0·05)。结论丙泊酚对内毒素休克兔具有保护作用。不同剂量丙泊酚对内毒素休克兔的保护效果不尽相同,并非丙泊酚剂量越大就效果越好。     

雌激素对失血性休克犬肾功能的影响

目的:观察雌激素(Estradiol,E2)对失血性休克(Hemorrhagic shock,HS)犬肾功能的影响。方法:健康成年雄性犬10只,随机分为2组:HS模型组(HS组)、雌激素治疗组(E2组),每组5只,采用股动脉放血复制失血性休克犬模型,休克60min后行液体复苏,E2组同时给予雌激素治疗。连续监测血流动力学参数,检测血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)和肾组织缺氧诱导因子-lα(HIF-lα)水平,HE染色后观察肾组织病理学改变,并采用Paller评分法评估肾小管损伤程度。结果:与HS组比较,E2组血清SCr、BUN水平和肾小管Paller评分均下降,E2组肾组织HIF-lα表达水平升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论:E2能减轻HS犬肾脏的病理损害,对肾功能有一定的保护作用,其机制可能与E2上调HIF-lα表达水平有关。     

知母皂苷对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用

目的 在大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤模型中,初步研究知母皂苷对水通道蛋白4（aquapo rin-4,AQP-4）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、白介素1β（IL-1β）表达的影响。方法 240只SD大鼠分为6组（40只/组）：假手术组、模型组、知母皂苷低、中、高剂量组（SA,10,20,40 mg·kg^-1）和尼莫地平组（12 mg·kg^-1）。采用"插线法"造模。再灌注48 h后,观察每组大鼠的神经症状,并进行神经行为学评分;测定脑梗死范围、脑含水量;采用伊文思蓝法对各组血脑屏障的通透性进行检测;采用酶联免疫吸附实验（ELISA）对各组TNF-α、IL-6和IL-1β的含量进行测定;采用Western blot法对各组AQP-4的含量进行测定;采用HE染色法观察各组大鼠脑组织病理形态的变化。结果 知母皂苷组能改善造模后造成的神经功能缺损、脑组织病理形态学改变;降低脑含水量、脑梗死面积和血脑屏障的通透性;下调AQP-4、TNF-α、IL-6、IL-1β的表达。结论 知母皂苷对脑缺血/再灌注SD大鼠能起到一定的保护作用,这可能是由于AQP-4和TNF-α、IL-6、IL-1β表达下调,从而维持血脑屏障的稳定性有关。     

四逆汤对失血性家兔肿瘤坏死因子的影响

目的:探讨中药四逆汤对失血性休克家兔肿瘤坏死因子的影响。方法:采用动物分组对照实验,测量不同状态下动物血浆肿瘤坏死因子的变化。结果:与休克前比较,休克组的家兔血浆肿瘤坏死因子水平各时段均明显提高(P<0.01),而治疗组仅在治疗后30min家兔肿瘤坏死因子水平均明显提高(P<0.05),而其他时段与休克前比较未见显著差异(P>0.05)其他时段与休克前比较,虽有升高但无显著性差异(P>0.05),两组间各时段比较,未见显著性差异(P>0.05)。     

灵芝孢子粉对杏仁核点燃模型大鼠神经元的功能性保护作用及机制

目的观察灵芝孢子粉治疗后杏仁核点燃模型大鼠神经元IL-6和TNF-αmRNA表达水平的变化,探讨灵芝孢子粉对癫痫的作用及机制。方法雄性大鼠24只,制备杏仁核点燃模型后,分为灵芝孢子粉组、阴性对照组(生理盐水)、阳性对照组(苯巴比妥)。治疗2周后,检测海马组织IL-6和TNF-αmRNA表达情况。结果灵芝孢子粉组及阳性对照组TNF-α、IL-6的mRNA表达均较阴性对照组明显减低(P<0.05),灵芝孢子粉组与阳性对照组之间TNF-α、IL-6的mRNA表达无明显差异(P>0.05)。结论灵芝孢子粉能够影响癫痫发病过程中的细胞因子,并对神经系统具有镇静和保护功能。     

不同剂量乌司他丁对感染性休克兔肺损伤的保护作用及其机制探讨

目的 观察内毒素(ET)致感染性休克兔血浆中肿瘤坏死因子-a(TNF-a)、白介素-6(IL-6)和肺组织核转录因子-κB(NF-κB)水平变化,研究不同剂量乌司他丁(UTI)对感染性休克兔肺损伤的保护作用及其机制.方法 将50只健康日本长耳大白兔随机分为ET致休克模型组(对照组),地塞米松(DXM)干预组(DXM组)及三种不同剂量UTI干预组(U1组、U2组、U3组3个亚组),每组10只.采用ET(2mg/kg)一次性静脉注射方法复制兔感染性休克模型,造模成功后对照组应用0.9%氯化钠溶液2ml,DXM组用DXM(1mg/kg)、U1组用UTI(2.5×104)U/kg、U2组用UTI(5.0×104)U/kg、U3组用UTI(10.0×104)U/kg分别溶于2ml 0.9%氯化钠溶液静脉注射进行干预,监测兔的平均动脉血压(MAP)和呼吸频率(RR)的变化,检测休克0h和干预后2h、4h、6h和12h等时间点血浆中的TNF-a、IL-6水平,HE染色观察肺组织病理形态学变化,免疫组化染色检测肺组织NF-κB的表达.结果 在0h,5组兔的MAP、RR及TNF-a、IL-6水平差异无统计学意义(P＞0.05);3个UTI亚组与对照组及DXM组在休克后不同干预时间点MAP、RR及TNF-a、IL-6水平比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);肺组织病理变化在对照组肺损伤最强,U3组最轻,差异有统计学意义(P＜0.05);NF-κB在肺组织的表达在对照组最强,U3组最轻,差异有统计学意义(P＜0.05).MAP、RR及TNF-a、IL-6的水平和NF-κB表达在3个UTI亚组间随着UTI剂量的加大,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 UTI能改善ET所诱导的感染性休克兔的MAP、RR和 TNF-a、IL-6的变化,尤以大剂量改善效果更明显.UTI对ET所诱导的感染性休克兔肺损伤有明显的保护作用,且UTI的肺保护作用与剂量成正相关性.通过抑制NF-κB信号转导通路抑制TNF-a和IL-6的表达是UTI肺保护作用的重要机制之一.     

N-乙酰-L-半胱氨酸对失血性休克大鼠再灌注损伤的保护作用

目的　为临床应用抗氧化剂N 乙酰 L 半胱氨酸 (NAC)防治失血性休克提供实验基础。方法大鼠放血致休克 (失血量 4 9% ,血压 4～ 5 .3kPa) ,30min后 ,回输全血并再灌注 3h。回输全血的同时 ,分别给予NAC (15 0mg·kg- 1)和银杏叶提取物(Egb ,5 0mg·kg- 1) ,3h后检测血浆乳酸脱氢酶(LDH)、谷 草转氨酶 (GOT)活性和组织匀浆丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶 (MPO)活性 ,并观察肾和肝组织病理变化。结果　给予NAC可明显降低缺血再灌注所致的血浆LDH、GOT活性及心、肝、肺和肾组织MPO活性和MDA含量增高 ,病理观察也显示组织损伤改善。Egb也有一定的改善作用 ,但不如NAC作用显著。结论　再灌早期给予NAC可抑制自由基的产生和脂质过氧化反应 ,对休克复苏再灌注损伤具有较好的保护作用     

Effects of recombinant humanen dothelial-derived interleukin-8 on hemorhagic shock in rats

目的：研究重组人内皮细胞衍生的白细胞介素－８（ＩＬ８）对失血性休克的作用．方法：大鼠股动脉放血至ＭＡＢＰ５３２ｋＰａ，维持９０ｍｉｎ，复制晚期失血性休克模型．输血后，静脉注射ＩＬ８２５０μｇ·ｋｇ－１．放免法测定血浆ＥＴ１和６ＫＰＧＦ１α含量．结果：给予ＩＬ８后，ＭＡＢＰ显著提高，休克状态改善，２ｈ存活率相应提高；休克晚期血浆ＥＴ１水平比正常明显升高（２１±４ｖｓ８２±１８ｎｇ·Ｌ－１，Ｐ＜００１），血浆６ＫＰＧＦ１α含量明显降低（１０７±１２ｖｓ１５７±１１ｎｇ·Ｌ－１，Ｐ＜００１）．ＩＬ８显著降低血浆ＥＴ１水平（１０±４ｎｇ·Ｌ－１，Ｐ＜００１），提高血浆６ＫＰＧＦ１α含量（３６８±１６ｎｇ·Ｌ－１，Ｐ＜００１）．结论：ＩＬ８具有较好的抗休克作用．     

硫氮卓酮对失血性休克犬胰腺的保护作用及其机制的研究

杂种犬１１只，快速失血使平均动脉压达６．０ｋＰａ．维持９０ｍｉｎ，回输全部血液，２４０ｍｉｎ处死动物。硫氮卓酮（Ｄｉｌｔｉａｙｅｍ，Ｄｉｌ，ｎ＝６）组于休克３０ｍｉｎ时静脉输注Ｄｉｌ（６００１μｇ·ｋｇ－１．１５ｍｉｇ内输完）。休克组在相同时间输入等量生理盐水。结果显示，和休克组比较，Ｄｉｌ治疗能降低胰腺组织黄嘌呤氧化酶（ＸＯ）活性，减少脂质过氧化产物丙二醛生成，增加谷胱甘肽过氧化物酶、Ｃｕ－Ｚｎ超氧化物酶（Ｃｕ－ＺｎＳＯＤ）和Ｍｎ－ＳＯＤ活性。并减轻胰腺损伤程度。提示Ｄｉｌ能保护休克时的胰腺，其机制与减少自由基生成，增加自由基清除酶活性有关。     

亚甲蓝对创伤性休克兔肺损伤的保护作用

目的通过测定创伤性休克兔血浆超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）变化以及肺组织病理学改变,评价亚甲蓝（MB）对创伤性休克的疗效及对肺缺血再灌注损伤的保护作用。方法将日本长耳大白兔18只随机分为3,组：对照组、创伤性休克生理盐水复苏组（NS组）和创伤性休克MB复苏组（MB组）,每组6只,记录休克前（T4）、休克末（T2）、复苏末（T3）,复苏后0．5h（T4）、2h（T5）、4h（T6）时间点平均动脉压（MAP）的变化,并测定血浆SOD、MDA,复苏后4h放血处死动物,取肺测定肺叶湿重／干重比,并观察肺形态病理学变化。结果对照组SOD、MDA在各时间点变化不明显。另外2组在MDA水平变化明显升高,且生理盐水复苏组高于MB复苏组（P〈0．05）,SOD明显降低,生理盐水复苏组明显低于MB复苏组（P〈0．05）。肺组织病理学观察显示亚甲蓝对缺血再灌注损伤肺具有保护作用。结论亚甲蓝可能通过抑制氧自由基（ROS）的过度生成,对创伤性休克及其引起的缺血再灌注肺损伤（L／R）产生保护作用。     

胡黄连苷元（香荚兰乙酮）对失血性休克及内毒素诱导“两次打击”损伤的保护作用

目的:评价胡黄连苷元对大鼠“两次打击”损伤的保护作用.方法:采用大鼠“两次打击”损伤模型(失血性休克40 mmHg 45 min后iv细菌内毒素LPS 150 μg/kg).大鼠随机分为七组:对照组,内毒素组,失血组,失血/内毒素组和失血/内毒素 胡黄连苷元(2.5,5.0,10.0 mg/kg)组.胡黄连苷元溶于复苏液(生理盐水,NS)中并在2 h内经静脉给药。在LPS或NS注射后,观察大鼠8,16,24及48 h存活率;检测肺组织(iv LPS后3 h及6 h)及血清(失血前,失血后及iv LPS/NS后0,0.5,1,2,4,6 h)丙二醛含量;检测肺及肝组织(iv LPS/NS后 3 h及 6 h)髓过氧化物酶活性.结果:与对照组比较,“两次打击”损伤大鼠8 h(64.3％,P<0.05),16 h(35.7％,P<0.01),24 h(28.6％,P<0.01),48 h(14.3％,P<0.01)存活率显著降低;血清及肺组织丙二醛含量显著增多,肺、肝组织髓过氧化物酶活力显著升高.胡黄连苷元剂量依赖性升高失血性休克大鼠平均动脉压(P<0.05),提高大鼠存活率,降低血清及组织丙二醛含量,下调肺及肝组织髓过氧化物酶活力.结论:胡黄连苷元可保护由失血性休克及细菌内毒素诱导的大鼠“两次打击”损伤.     

阴脱汤对失血性休克家兔血浆内皮素、肿瘤坏死因子及一氧化氮含量的影响

目的和方法:观察阴脱汤对失血性休克家兔休克前后血浆内皮素(ET)、肿瘤坏死因子(TNF)、一氧化氮(NO)含量及一氧化氮合酶(NOS)活性的影响,探讨阴脱汤对失血性休克的治疗作用。结果:阴脱汤能明显降低失血性休克家兔血浆ET、TNF、NO水平及NOS活力的升高(P <0 .0 5 )。结论:阴脱汤(YTT)可通过调节ET、TNF、NO水平及NOS活力等作用治疗失血性休克     

果糖二磷酸钠镁对失血性休克大鼠肾脏的保护作用

目的探讨果糖二磷酸钠镁(FDPM)对失血性休克大鼠肾脏的保护作用及其机制。方法按照Wiggers改良法建立失血性休克模型,模型成功后分别自股静脉注射FDPM(90.0、45.0、22.5mg.kg-1),1.6-二磷酸果糖(37.5mg.kg-1),硫酸镁(3.4mg.kg-1)及等容量生理盐水,于休克前、休克末、给药后10、、30、60min及回输血后0、30、60min检测平均动脉压的变化,并测定血清中的尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)含量和肾脏组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、Na+-K+-ATPase、Mg2+-ATPase、Ca2+-ATPase活性的变化。结果FDPM能够升高失血性休克大鼠的平均动脉压(MAP),减少血清中的BUN和Cr含量,同时降低肾脏组织MDA含量和提高SOD、Na+,K+-ATPase、Mg2+-ATPase、Ca2+-ATPase活性。结论FDPM能够有效的减轻失血性休克大鼠肾脏组织缺血缺氧性损伤,改善能量代谢,增加ATP酶活性,减轻自由基损伤,从而起到保护肾脏的作用。     

The Role of Liver and Kidney on the Pharmacokinetics of a Recombinant Amino Terminal Fragment of Bactericidal/Permeability-Increasing Protein in Rats

Purpose. The pharmacokinetics of rBPI₂₃, a recombinant amino terminal fragment of bactericidal/permeability-increasing protein that binds to and neutralizes endotoxin, was investigated. Methods. rBPI₂₃ was administered to rats at doses 0.01–10 mg/kg and plasma rBPI₂₃ levels were measured by ELISA. rBPI₂₃ was also administered to bilaterally nephrectomized rats. In addition, rBPI₂₃ was administered intra-hepatically via the pyloric vein to determine the first-pass effect by the liver. rBPI₂₃ concentrations were also simultaneously measured in the right atrium and aorta to determine the removal of rBPI₂₃ by the lungs. Results. The concentration-time profile of rBPI₂₃ was described by a 3-compartmental model with parallel first order and Michaelis-Menten (saturable) elimination. The clearance of rBPI₂₃ was not altered by bilateral nephrectomy. Clearance of intra-hepatically administered rBPI₂₃ was 4.5 fold lower than intra-femorally administered rBPI₂₃. The concentration difference of rBPI₂₃ between aortic and right atrial blood was no greater than 11%. Clearance of rBPI₂₃ in rats could be reduced up to 10 fold by co-administration of heparin. Uptake by liver of intra-hepatically administered rBPI₂₃ was prevented by co-administration of heparin. Conclusions. rBPI₂₃ is not significantly cleared by the kidneys, and no more than 11% of the rBPI₂₃ was removed by the lungs with each pass. The liver could remove 78% of the rBPI₂₃ from the hepatic circulation. Studies with heparin suggest rBPI₂₃ is cleared by binding to heparan sulfate sites in the liver.     

不同复苏液对失血性休克大鼠血中粘附分子表达的影响

目的：观察不同复苏液对失血性休克大鼠血浆血小板α颗粒膜糖蛋白-140（GMP-140）、血清可溶性血管细胞粘附分子-1（sVCAM-1）及可溶性细胞间粘附分子-1（sICAM-1）表达的影响,并探讨其可能机制。方法：50只SD大鼠随机分为5组（对照组、假手术组、休克组、林格组和万汶组）,每组10只。建立失血性休克大鼠模型后,复苏各组在失血性休克1h后给予不同复苏液（林格氏液、6%中分子羟乙基淀粉130/0.4）,复苏2h后采血,检测血浆GMP-140、血清sVCAM-1及sICAM-1的变化。结果：与对照组比较,休克组和林格组GMP-140、sVCAM-1、sICAM-1均明显升高（P〈0.01）,而万汶组改变不明显;与假手术组相比,休克组的GMP-140、sVCAM-1、sICAM-1明显升高（P〈0.01）;林格组的GMP-140亦明显升高,余两项指标未见明显变化;万汶组的GMP-140、sVCAM-1、sICAM-1改变不明显;相对于休克组,林格组的sVCAM-1下降明显（P〈0.01）,sICAM-1虽有下降,但差异无统计学意义;而万汶组的GMP-140、sI-CAM-1、sVCAM-1均明显低于休克组和林格组（P〈0.01）。结论：大鼠失血性休克可使纤溶功能亢进,血小板和凝血系统被活化;采用万汶＋林格液复苏在调节凝血功能方面优于单用林格液复苏;休克早期经充分的液体复苏后,不管是万汶还是林格液都可能会改善微循环。其可能的原因是血液稀释具有抗缺血再灌注损伤的作用,应用万汶可能减少内皮细胞损伤并改善微循环。