镉对小鼠体液免疫功能和淋巴细胞钙稳态的影响

在本研究中,以 CdCl_2连续给雌性 LACA 小鼠灌胃染毒14天,在0.3mg/kg/day剂量下(累积剂量相当于1/50LD_(60))即可明显抑制 LACA 小鼠脾淋巴细胞 IgM-PFC(IgM 空斑形成细胞数),其抑制率为42.12%(P<0.001),同时淋巴细胞胞内游离 Ca~(2+)浓度比对照组增加35%(P<0.05)。而且 CaM(钙调素)含量随灌胃剂量的增加(0.3-2.4mg/kg/day)而呈下降趋势(r=-0.9996,P<0.001),但同期测定的脾淋巴细胞 Ca~(2+),Mg~(2+)-ATPase 活性和膜脂流动性未见明显改变(P>0.05)。说明在此剂量范围内镉对 LACA 小鼠脾淋巴细胞 IgM-PFC 的抑制与胞内游离 Ca~(2+)浓度的增加及 CaM 含量的下降有一定相关,而与 Ca~(2+)、Mg~(2+)-ATPase 活性和膜脂流动性的关系不明显。     

镉对小鼠细胞免疫功能和淋巴细胞钙稳态的影响

以 Cdcl2 连续给雌性 LACA小鼠灌胃染毒 14天 ,在 0 .3mg/kg/day剂量下 ,即可引起淋巴细胞胞内游离钙浓度比对照组增加 35 % ( P<0 .0 5 ) ,而且 CAM含量随灌胃剂量的增加 ( 0 .3～ 2 .4mg/kg/day)而呈下降趋势 ( r=-0 .9996,P<0 .0 0 1)。但同期测定的脾淋巴细胞 Ca2 + .Mg2 + -ATP和膜脂流动性未见明显改变 ( P<0 .0 5 ) ,说明在此剂量范围内镉对 L ACA小鼠脾淋巴细胞胞内游离钙浓度的增加及 CAM含量的下降有相关性 ,而在 Ca2 + .Mg2 + -ATP和膜脂流动性方面影响关系不明显。     

钙调蛋白抑制剂W-7对肝癌细胞增殖的影响

目的初步了解钙调蛋白抑制剂及与化疗药物联用时对肝癌细胞增殖的影响，方法用钙调蛋白抑制剂W-7[N-（6-氨基己烷基）-5-氯-1萘-磺胺]处理肝癌细胞（Alexander株），观察不同浓度W-7对肝癌细胞摄取［3H］-TdR的影响、对ADMIC50的影响、与化疗药物（ADM，5-FU，MMC，VCR）联用时对肝癌细胞（Alexander株,离体肝癌细胞）杀伤的影响。结果①W-7能显著抑制肝癌细胞增殖，抑制效应与W-7的剂量及作用时间相关。②W-7能显著降低ADM对Alexander细胞的IC50。W-77.5μmol·L-1时，ADM的IC50为0.5mg·L-1;W-715μmol·L-1时，ADM的IC500.3mg·L-1，而对照为3mg·L-1。③与化疗药联用时，能提高化疗药物对肝癌细胞株及离体肝癌细胞的杀伤，并且其杀伤效果与W-7的浓度相关。结论钙调蛋白抑制剂对肝癌细胞的增殖有较强的抑制作用，可作为在肝癌患者化疗时一种辅助用药，增强化疗药物疗效、减少化疗药物用量，从而降低其毒副作用。     

苯并（a）芘对小鼠脾淋巴细胞钙稳态的影响

苯并（ａ）芘对小鼠脾淋巴细胞钙稳态的影响张海洲，张铣，薛彬苯并（ａ）芘（ＢａＰ）是广泛存在于环境中的污染物，不但具有致癌活性［１］，而且是一种免疫抑制剂。实验表明，无论是在体内还是在体外，Ｂａｐ对小鼠脾淋巴细胞的体液免疫功能和细胞免疫功能都有明显的抑...     

钙和镉对金属硫蛋白在小鼠肝合成中的影响

研究了小鼠经口给于钙盐和镉盐后，钙和镉在小鼠肝金属硫蛋白合成中的相互影响。结果发现：单独给于钢（８ｍｇ／ｋｇ）时，镉能诱导肝金属硫蛋白的合成；单独给于钙（２０ｍｇ／ｋｇ）时，肝ＭＴ的含量无明显的增加；但同时经口给于钙和镉（２０＋８ｍｇ／ｋｇ），则肝ＭＴ含量比单独给于镉时的肝ＭＴ含量明显增加（Ｐ＜０．０５），Ｃａ＋Ｃｄ组的肝Ｚｎ浓度大大高于Ｃｄ组。     

钙调昼白抑制剂W—7对肝癌细胞增殖的影响

目的 初步了解钙调蛋白抑制剂及与化疗药物联用时对肝癌细胞增殖的影响，方法 用钙调昼白抑制剂Ｗ－７［Ｎ－（６－氨基己烷基）－５－氯－１萘－磺胺］处理肝癌细胞（Ａｌｅｘａｎｄｅｒ株），观察不同浓度Ｗ－７对肝癌细胞摄取［＾３Ｈ］－ＴｄＲ的影响、对ＡＤＭ ＩＣ５０的影响、与化疗药物（ＡＤＭ，５－ＦＵ，ＭＭＣ，ＶＣＲ）联用时对肝癌细胞（Ａｌｅｘａｎｄｅｒ株，离体肝癌细胞）杀伤的影响。结果 ①Ｗ－７能显著抑制     

人工蛹虫草子实体对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

目的：观察人工蛹虫草子实体及其不同提取物对正常小鼠脾淋巴细胞增殖的影响，分析其影响免疫功能的有效提取部位。方法：以不同浓度提取物与脾细胞共孵育72h，采用MTT法测定淋巴细胞的增殖，观察提取物对淋巴细胞增殖的影响。另以10mg·kg^-1，30mg·kg^-1剂量人工蛹虫草子实体的水提取物及微粉化原药水溶液小鼠ig给药11d，制备脾淋巴细胞悬液，培养72h后测定细胞增殖。结果：在体外。水提取物有显著增强脾淋巴细胞增殖效应，且与ConA和LPS有协同促增殖效应，水提醇沉提取物可促进正常淋巴细胞增殖，而对ConA、LPS活化后的增殖无明显影响；甲醇提取物对淋巴细胞增殖有抑制作用。体内给予水提物和子实体微粉水溶液两个剂量也均显示促进淋巴细胞的自然增殖作用（P〈0．05），但对ConA或LPS活化后的淋巴细胞无协同作用。结论：人工蛹虫草子实体含有免疫促进和免疫抑制的成分。其水溶性和中等浓度的醇溶性成分有免疫促进作用。甲醇提取物抑制淋巴细胞增殖。     

α-细辛醚对癫痫大鼠的海马钙稳态调控的影响

目的研究α-细辛醚对癫痫大鼠的海马钙稳态的影响。方法大鼠癫痫持续状态(SE)后,观察α-细辛醚对海马游离Ca2+浓度、游离钙调蛋白(CaM)平均通道荧光值、总CaM及钙调蛋白依赖性蛋白激酶(CaMK)IIa-mRNA表达的变化的影响。结果模型组SE后,各时相海马游离Ca2+显著增高(P<0.05);CaM平均通道荧光值显著降低(P<0.05);SE后12～72 h,游离CaM表达较正常组明显增强(P<0.05);CaMK IIa-mRNA表达显著降低(P<0.05)。与模型组相比,α-细辛醚组游离Ca2+浓度显著降低,游离CaM平均通道荧光值明显增加,总CaM表达显著降低,CaMK IIa-mRNA表达明显增强(P<0.05)。结论α-细辛醚可下调SE后海马游离Ca2+浓度及结合CaM表达,并上调CaMK IIa-mRNA表达。     

低氧暴露对小鼠脾淋巴细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究低氧暴露诱导淋巴细胞数量减少与细胞增殖和凋亡的关系。方法 从C57BL/6小鼠脾中分离淋巴细胞,将淋巴细胞分别在低氧（1%O₂）和常氧（21%O₂）环境中培养12、24、48 h。用流式细胞术检测T、B淋巴细胞数量;羧基荧光素乙酰乙酸和AnnexinⅤ-FITC/PI方法分别检测淋巴细胞的增殖和凋亡;扫描电镜观察淋巴细胞形态;实时荧光定量逆转录PCR和Western blot检测凋亡相关因子鼠源B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）、bcl-2同源拮抗剂-杀伤蛋白（Bak）和胱天蛋白酶-3（caspase-3）的mRNA和蛋白表达水平。结果 低氧暴露12、24、48h,可降低T、B淋巴细胞数量,抑制淋巴细胞增殖,促进细胞凋亡;扫描电镜观察显示,同一时间下,低氧组淋巴细胞更早出现凋亡特征形态学变化;低氧暴露12、24、48 h,淋巴细胞Bak和caspase-3的mRNA和蛋白表达水平均上调,而bcl-2的mRNA和蛋白表达水平均下调。结论 低氧暴露通过抑制淋巴细胞增殖、促进凋亡,从而介导淋巴细胞数量下降。     

家兔心衰心肌细胞钙渗漏与钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ表达的关系

目的探讨家兔心衰心肌细胞钙渗漏与蛋白激酶A(PKA)和Ca2+/钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ(CaMKⅡ)表达和活性的关系。方法 30只家兔随机均分为假手术组和心衰组。通过超容量负荷联合压力负荷制备家兔心衰模型,用心脏多谱勒和心导管术测定家兔心脏功能,应用钙成像系统进行肌浆网钙回摄和钙渗漏试验。采用Western blot法和γ-32P掺入法测定CaMKⅡ和PKA的蛋白表达水平和活性;应用ELISA法测定血浆去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)和脑钠肽(BNP)水平。结果与假手术组相比,心衰组家兔左室舒张末压、血浆NE、E和BNP水平均明显增加(P<0.01),而射血分数明显降低(P<0.01),肌浆网钙回摄功能下降(P<0.05),而钙渗漏增加(P<0.01),PKA的蛋白表达水平和活性均下降(P<0.05),而CaMKⅡ蛋白表达水平和活性均增加(P<0.05)。结论家兔心衰心肌细胞钙渗漏与CaMKⅡ蛋白表达水平和活性增加相关。     

镉诱导HEK293细胞胞内钙稳态的失调引发细胞凋亡

目的　研究镉诱导HEK2 93细胞钙稳态失调及其引发细胞凋亡的机制。方法　通过吖啶橙 /溴乙锭双荧光染色法检测细胞凋亡 ,并通过MTT法检测细胞生长抑制 ;以Fluo 3/AM和Fura 2 /AM为探针检测胞浆内游离钙离子浓度 ([Ca2 +]i)的变化 ;使用钙调磷酸酶试剂盒测定镉对钙调磷酸酶活性的影响。结果　镉诱导HEK2 93细胞的凋亡和生长抑制呈浓度依赖性 ;镉通过引发胞内钙库的释放后引起胞外钙离子内流 ;钙信号阻断剂能显著地抑制镉引起的细胞凋亡 ;镉使胞内钙调磷酸酶的活性显著增加。结论　 [Ca2 +]i 升高使钙调磷酸酶活化可能在镉引发细胞凋亡过程中起重要作用。     

非酒精性脂肪肝与钙稳态关系的研究进展

钙离子（Ca²⁺）是细胞内重要的第二信使,其主要储存在内质网和线粒体中,参与调控细胞多种生理功能及维持内质网、线粒体功能。内质网和线粒体对钙离子的摄取与释放直接影响胞内钙离子水平的变化,继而影响细胞正常生理功能。病理条件下,细胞内钙离子稳态失衡,可引发细胞生理功能异常并进一步影响内质网、线粒体功能。非酒精性脂肪肝（NAFLD）是临床常见病和多发病,其主要病理特征是：肝脏脂肪样变性、内质网应激、线粒体损伤和非特异性炎性反应等。其中持续的内质网应激及线粒体功能障碍是NAFLD发生发展的重要诱因。而细胞内钙稳态的变化可直接导致内质网及线粒体功能异常,继而影响NAFLD的发生发展。本文主要从钙稳态的主要影响因素以及钙稳态变化与NAFLD的关系两方面进行阐述,为寻求和研发防治NAFLD的药物提供新的方向。     

白芍总甙对大鼠腹腔巨噬细胞Ca2+跨膜转运的影响

通过检测大鼠腹腔巨噬细胞(M_ф     

牛磺酸对培养乳鼠心肌细胞胞浆游离钙浓度的影响

在培养的单个SD乳鼠心肌细胞,观察了牛磺酸对KCl, 去甲肾上腺素(NE)和毒毛花苷G引起的胞浆游离Ca^２＋浓度(［Ca^２＋］_i)变化的影响. 当细胞外CaCl₂浓度为1.3 mmol·L^-１时, 牛磺酸10, 20 mmol·L^-１不影响心肌细胞静息［Ca^２＋］_i; 但能浓度依赖性地抑制35 mmol·L^-１ KCl和1 μmol·L^-１毒毛花苷G升高［Ca^２＋］_i的作用.10 μmol·L^-１ NE在含Ca^２＋的缓冲液中能引起双相的［Ca^２＋］_i变化, 即快速升高相和持续升高相.牛磺酸20 mmol·L^-１能抑制NE引起的［Ca^２＋］_i持续升高, 而对快速升高相无显著影响. 在无 Ca^２＋ 的缓冲液中, 牛磺酸不影响NE升高［Ca^２＋］_i的作用. 结果提示牛磺酸可能通过减少心肌细胞电压依赖性Ca^２＋内流和Na⁺/Ca^２＋交换而抑制KCl, NE和毒毛花苷G引起的［Ca^２＋］_i升高.     

Effects of the Chinese herb component phellopterin on the increase in cytosolic free calcium in PC12 cells

The present study investigated the effects of the Chinese Herb component, phellopterin on high K⁺ and glutamate‐induced extracellular calcium influx and caffeine or cyclopiazonic acid (CPA)‐induced calcium release from internal stores in attached PC12 cells. Attached cells were loaded with the calcium fluorescent indicator Fluo‐3/AM with the final concentration of 5 µM for 50 min at 37°C and cytosolic free Ca²⁺ measured as fluorescent intensity (FI) (excitation: 488 nm; emission: 535 nm). When PC12 cells were exposed to extracellular Ca²⁺([Ca²⁺]₀) 2.0 mM, the FI for resting [Ca²⁺]_i was 1,188±163, high K⁺ (75 mM) and glutamate (10 mM) induced an increase in [Ca²⁺]_i with peak values of 4,270±982 and 3,096±402, respectively. Phellopterin (0.1–100 µM) had no apparent effect on resting [Ca²⁺]_i, but inhibited high K⁺ and glutamate induced the increase in [Ca²⁺]_i in a dose‐dependent manner. When PC12 cells were exposed to Ca²⁺‐free solution, the FI for resting [Ca²⁺]_i was 804±77. Caffeine (40 mM) and CPA (30 µM) stimulated Ca²⁺ release from caffeine‐ryanodine and inositol 1,4,5‐tris‐phosphate (InsP₃₎‐sensitive internal calcium stores, inducing an increase in [Ca²⁺]_i to 2,938±362 and 1,816±291, respectively. Phellopterin (0.1–100 µmol/L) inhibited caffeine and CPA stimulated intracellular calcium release in a dose‐dependent manner. In summary, phellopterin, a novel component isolated from Changii radix, inhibited Ca²⁺ influx induced by stimulation of voltage‐gated and receptor‐dependent calcium channels with a greater inhibition of receptor‐dependent calcium channels. It also inhibited Ca²⁺ release from caffeine‐ryanodine and InsP₃‐sensitive internal stores, being more potent for caffeine stimulation. Phellopterin may be a promising candidate for the development of new classes of calcium antagonists. Drug Dev Res 68:79–83, 2007. © 2007 Wiley‐Liss, Inc.     

镉对在体大白鼠心肌动作电位的影响

在体大白鼠,采用浮置微电极观察氯化镉对心脏动作电位的影响。结果表明,1％CaCl_2O.2ml静脉注射使动作电位时程缩短,振幅降低,周期延长。提示镉可能有降低心肌细胞自律性,抑制兴奋性及传导性等作用。     

Effect of taurine on intracellular free calcium concentration in cultured neonatal rat heart cells

在培养的单个ＳＤ乳鼠心肌细胞，观察了牛磺酸对ＫＣｌ，去甲肾上腺素（ＮＥ）和毒毛花苷Ｇ引起的胞浆游离Ｃａ２＋浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）变化的影响．当细胞外ＣａＣｌ２浓度为１．３ｍｍｏｌ·Ｌ－１时，牛磺酸１０，２０ｍｍｏｌ·Ｌ－１不影响心肌细胞静息［Ｃａ２＋］ｉ；但能浓度依赖性地抑制３５ｍｍｏｌ·Ｌ－１ＫＣｌ和１μｍｏｌ·Ｌ－１毒毛花苷Ｇ升高［Ｃａ２＋］ｉ的作用．１０μｍｏｌ·Ｌ－１ＮＥ在含Ｃａ２＋的缓冲液中能引起双相的［Ｃａ２＋］ｉ变化，即快速升高相和持续升高相．牛磺酸２０ｍｍｏｌ·Ｌ－１能抑制ＮＥ引起的［Ｃａ２＋］ｉ持续升高，而对快速升高相无显著影响．在无Ｃａ２＋的缓冲液中，牛磺酸不影响ＮＥ升高［Ｃａ２＋］ｉ的作用．结果提示牛磺酸可能通过减少心肌细胞电压依赖性Ｃａ２＋内流和Ｎａ＋／Ｃａ２＋交换而抑制ＫＣｌ，ＮＥ和毒毛花苷Ｇ引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高．     

白芍总甙对B淋巴细胞增殖和白介素1生成的调节作用

白芍总甙（ＴＧＰ）对脂多糖（ＬＰＳ）诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖反应的量效曲线呈钟形，用贴壁法除去脾细胞中巨噬细胞（ＭΦ）或加入１０μｍｏｌ·Ｌ１吲哚美辛（Ｉｎｄ）可使ＴＧＰ量效曲线的下降支消失，再加５％同系小鼠腹腔ＭΦ中或前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）０．０２２０μｍｏｌ·Ｌ１可使量效曲线下降支再现．同步检测ＴＧＰ对ＬＰＳ诱导大鼠腹腔ＭΦ产生ＰＧＥ２与白介素１（ＩＬ１）．结果表明，ＴＧＰ０．５－３ｌ２．５μｇ·ｍＬ１对ＬＰＳ诱导的ＩＬ－１产生曲线呈钟形．而ＴＧＰＬＰＳ的ＰＧＥ２产生曲线呈浓度依赖性地增高；在１２．５－３１２．５μｇ·ｍＬＴＧＰ范围内，１０μｍｏｌ·Ｌ１Ｉｎｄ可使高浓度ＴＣＰＬＰＳ的ＩＬ－１释放曲线明显抬高。提示ＴＧＰ对ＬＰＳ诱导的Ｂ细胞增殖反应和ＩＬ－１诱生的负调节作用都与其促进ＭΦ释放ＰＧＥ２有关．     

异钩藤碱体外对家兔血小板聚集和胞浆游离钙离子浓度的影响

目的研究异钩藤碱对血小板内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响,以探讨其抗血小板聚集作用的可能机制。方法比浊法测定家兔血小板聚集功能;双波长Fura-2荧光法测定血小板胞浆[Ca2+]i。结果异钩藤碱0.33~1.30mmol.L-1体外给药对ADP和凝血酶引起的血小板聚集有浓度依赖性的抑制作用。存在细胞外钙时,异钩藤碱对基础状态血小板的[Ca2+]i和ADP及凝血酶诱导的[Ca2+]i水平有浓度依赖性的降低作用,而无细胞外钙存在时,则均无明显影响,表明其可抑制血小板的外钙内流,对内钙释放无明显抑制作用。结论异钩藤碱可抑制血小板聚集,其作用机制可能与其抑制血小板胞浆[Ca2+]升高有关。