血小板源性生长因子(PDGFs)对大鼠腰椎间盘退变的影响

目的 探讨血小板源性生长因子(PDGFs)对大鼠椎间盘退变的影响.方法 选择36只成年健康Sprague-Dawley(SD)大鼠,雌雄不限,其中24只大鼠通过手术方法建立椎间盘退变模型,剩余大鼠作为空白对照组(n=12).造模成功大鼠随机分为实验组(n=12)和阴性对照组(n=12).实验组大鼠在造模当日和造模4周开始腹腔注射PDGFs(100ng·kg-1),隔日1次,连续4周;阴性对照组大鼠腹腔注射等量生理盐水;空白对照组仅切开皮肤后缝合,不予注射任何试剂.于造模后4周和8周每组分别处死6只大鼠,完整取出L3,4椎间盘,应用间苯三酚法测定蛋白多糖含量;取L4,5椎间盘后进行固定、切片,观察椎间盘组织学形态;取L5,6椎间盘应用流式细胞仪检测各组大鼠椎间盘细胞的凋亡情况.结果 造模当日和4周开始注射PDGFs的实验组椎间盘蛋白多糖含量及细胞凋亡率与阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 PDGFs对大鼠椎间盘退变过程有预防和治疗作用.     

白细胞介素-1受体拮抗剂对大鼠退变椎间盘治疗作用的研究

目的 探讨白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1Ra)对已开始退变椎间盘细胞基质代谢的影响.方法 36只大鼠采用去双上肢及折尾法建立大鼠退变椎间盘模型,随机分为实验组和对照组,每组18只.实验组从造模3个月后给予腹腔注射IL-1Ra(50 ng·kg-1),隔日1次,对照组不给予任何处理.造模后4、5、6个月每组分别处死6只大鼠,完整取出L4-5椎间盘后进行固定、切片,HE染色观察椎间盘形态学变化,免疫组化染色法测定Ⅱ型胶原的含量;取出L5-6椎间盘,使用间苯三酚法测量蛋白多糖含量.结果 实验组大鼠椎间盘Ⅱ型胶原灰度值低于对照组,蛋白多糖含量高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 IL-1Ra可以延缓已退变的大鼠椎间盘继续退变,本研究为IL-1Ra应用于临床治疗椎间盘退变提供了理论依据.     

miR-146 a/27 a在SD大鼠OA软骨、滑膜组织中的表达及意义

目的：观察切断前交叉韧带( ACLT)构建SD大鼠骨性关节炎( OA)模型的病理特点,并检测 miR-146a和 miR-27a在OA动物模型软骨、滑膜组织中的表达情况。方法120只SD大鼠随机分为实验组和对照组,实验组行左膝前交叉韧带切断术,对照组只打开关节腔不切断前交叉韧带,分别于术后2、4、8周获取关节软骨、滑膜组织,对软骨情况进行大体及组织学评分,应用RT-PCR检测软骨和滑膜组织中miR-146a、miR-27a的表达情况。结果实验组术后2周软骨表面粗糙,色泽灰暗,4周和8周病变程度加重,对照组关节软骨无明显退变;实验组不同时间段Mankin评分与对照组比较差异有统计学意义( P<0．01)。实验组和对照组2、4、8周时软骨组织中miR-146a的相对表达量分别为(0．58±0．13)vs(0．66±0．14)、(0．43±0．08) vs (0．68±0．12)、(0．18±0．06)vs(0．61±0．07),各个时间点差异均有统计学意义(P<0．01);同期检测到软骨组织中miR-27a、滑膜组织中miR-146a和miR-27a在实验组和对照组各时间点的表达量差异有统计学意义( P<0．01)。应用Pearson相关分析显示,miR-146a、miR-27a在软骨组织中的表达情况与 Mankin评分呈显著负相关(r=-0．92、-0．89,P<0．05),而滑膜、软骨中miR-146a和miR-27a的表达呈线性正相关(r=0．78、0．80,P<0．05)。结论 miR-146a 和 miR-27a 在 SD 大鼠OA模型软骨组织、滑膜组织中呈低表达,且与OA软骨病变程度呈负相关。     

转化生长因子-β1在退变黄韧带中过度表达

目的 探讨转化生长因子(TGF)-β1在黄韧带退变过程中的作用.方法 退变黄韧带标本来自8例退变性腰椎管狭窄症患者.其平均年龄58.6岁.8例青少年型急性腰椎间盘突症患者的黄韧带标本作为正常对照,平均年龄24.2岁.在术前MRI像上测量黄韧带厚度;用逆转录聚合酶链式反应检测黄韧带中Ⅰ型胶原和TGF-β1的mRNA表达;免疫印迹法检测TGF-β1的蛋白表达:免疫组织化学染色观察TGF-β1在黄韧带组织中的定位表达.结果 退变组的黄韧带厚度[(4.70±0.40mm)]明显厚于对照组[(2.50±0.36mm)](P<0.001).退变组黄韧带的型胶原mRNA表达高于对照组(P=0.007).退变组黄韧带的TGF-β1 mRNA和蛋白表达均高于对照组(P=0.008、P=0.004).TGF-β1阳性表达定位于黄韧带成纤维细胞的胞浆.结论 TGF-β1在退变黄韧带中过度表达,表明它可能在腰椎黄韧带退变过程中起重要作用.     

前交叉韧带损伤后炎症因子致膝关节创伤后骨关节炎的研究进展

]膝关节创伤后骨关节炎是一种常见的膝关节软骨退变性疾病,前交叉韧带损伤是其常见的发病原因之一。前交叉韧带损伤可通过刺激炎症因子生成,诱导细胞凋亡,破坏软骨细胞外基质,降解基质中的Ⅱ型胶原蛋白和蛋白多糖,减少膝关节软骨细胞数量,最后导致膝关节创伤后骨关节炎发生。因此,深入了解前交叉韧带损伤后炎症因子在膝关节创伤后骨关节炎发生发展中的具体作用机制,可为临床膝关节创伤后骨关节炎的诊断和治疗提供指导。     

母源性十溴联苯醚对子代大鼠卵巢和软骨发育的影响

目的 研究Wistar母鼠在孕前和孕期喂灌十溴联苯醚(BDE-209)对子代大鼠卵巢和软骨发育的影响.方法 20只雌性Wistar大鼠,随机分成观察组和对照组各10只.观察组雌鼠胃灌BDE-209 1 500 mg/(kg·d),对照组胃灌等量的纯花生油,30 d后按雌雄比例1:2合笼,雌鼠继续经口给药,方法同前,直至分娩后停止胃灌.出生后21 d处死雌性子鼠,取右侧卵巢、膝关节,观察组织学改变,采用免疫组化与图像分析技术.测定卵母细胞GDF-9,软骨表层2型胶原蛋白的表达水平.结果 观察组子代雌鼠卵母细胞GDF-9含量较对照组明显减少(P<0.01);膝关节骺板软骨增厚,软骨表层2型胶原蛋白表达明显减少(P<0.05).结论 孕前和孕期喂灌BDE-209可造成子代大鼠卵巢和软骨发育异常.     

雌激素在大鼠颈椎间盘退变中的作用

目的:研究雌激素在SD大鼠颈椎间盘退变过程中的作用。方法:30只8月龄雌性SD大鼠随机平分为对照组、模型组、实验组,通过切除双侧卵巢和颈后肌肉创建雌激素缺乏大鼠颈椎动静失衡模型,实验组补充外源性雌激素。造模后3月通过观察颈椎间盘形态、细胞凋亡率及测量蛋白多糖含量来比较3组之间颈椎间盘退变程度。结果:形态学观察比较实验组椎间盘退变程度重于对照组而轻于模型组;椎间盘细胞凋亡率模型组>实验组>对照组,3组之间具有显著差异(P<0.01);蛋白多糖含量模型组<实验组<对照组,3组之间具有显著差异(P<0.01)。结论:雌激素对大鼠颈椎间盘退变具有抑制作用,能够延缓椎间盘的退变进程。     

硫化氢在内毒素休克大鼠急性肺损伤中的作用及其与一氧化氮、一氧化碳的关系

目的 探讨硫化氢(H2S)在内毒素休克(ES)大鼠急性肺损伤(ALI)中的作用及一氧化氮(NO)、一氧化碳(CO)与其作用机制的关系.方法 将64只雄性SD大鼠随机分为对照组(经尾静脉注射生理盐水0.5 ml/kg)、脂多糖组(经尾静脉注射脂多糖复制ES模型)、脂多糖+硫氢化钠[NaHS(外源性H2S供体)]组、脂多糖+炔丙基甘氨酸(PPG)组,每组16只.给药后连续监测平均动脉压(MAP)的变化,6 h后处死,测定肺系数;光镜观察肺组织形态学改变并观测肺损伤的定量评价指标(IQA);化学法检测血浆H2S含量、肺组织丙二醛、NO和CO含量、髓过氧化物酶(MPO)、胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)、一氧化氮合酶(NOS)和血红素氧合酶(HO)活性;用免疫组织化学法和Western印迹检测肺组织诱生型NOS(iNOS)和HO-1蛋白表达.结果 脂多糖组大鼠MAP明显低于对照组,肺组织出现明显的结构损伤,脂多糖组大鼠IQA、肺系数、肺组织丙二醛含量、MPO活性、血浆H2S含量和肺组织CSE活性均明显高于对照组(P<0.05或P<0.01);脂多糖+NaHS组大鼠血浆H2S含量和肺组织CSE活性均高于脂多糖组,而血压低于脂多糖组,且大鼠肺损伤加重;脂多糖+PPG组大鼠血压高于脂多糖组,且大鼠肺损伤减轻(均P<0.05);脂多糖组肺组织中eNOS活性明显低于对照组[(5.26±0.25)U·mg-1·prot-1vs(6.45±0.42)U·mg-1·prot-1],而iNOS活性和NO含量均高于对照组[(12.6±0.6)U·mg-1·prot-1vs(10.5±0.7)U·mg-1·prot-1、(144±25)μmol/L vs(68±5)μmol/L,P<0.05或P<0.01];脂多糖+PPG组肺组织中eNOS活性明显高于脂多糖组,iNOS活性[(10.2±0.4)U·mg-1·prot-1]、蛋白表达和NO含量[(74±5)μmol/L]均明显低于脂多糖组(P<0.05或P<0.01),而脂多糖+NaHS组肺组织中eNOS活性[(4.81±0.23)U·mg-1·prot-1]明显低于脂多糖组,iNOS活性[(14.6±0.4)U·mg-1·prot-1]、蛋白表达和NO含量[(217±18)μmol/L]均明显高于脂多糖组(P<0.05或P<0.01);脂多糖组肺组织中HO活性[(173±31)pkat/g]、蛋白表达和CO含量[(3.63±0.24)%]均明显高于对照组[(125±22)pkat/g、(2.48±0.33)%,均P<0.05]和脂多糖+PPG组[(88±17)pkat/g、(2.98±0.23)%,均P<0.05],而脂多糖+NaHS组肺组织中HO活性[(263±37)pkat/g]、蛋白表达和CO含量[(4.35±0.32)%]均明显高于脂多糖组(均P<0.05).结论 H2S生成增多参与了ES大鼠肺组织炎症损伤的发生,此作用与其引起的eNOS活性下降,iNOS活性升高及随后产生的大量NO有关;H2S可上调ES大鼠肺组织HO-1/CO体系,这可能是机体针对损伤产生的内源性的代偿性保护反应.     

医用臭氧对特发性肺间质纤维化大鼠的影响

目的探讨医用臭氧治疗特发性肺纤维化的可行性。方法将40只清洁级雄性wistar大鼠随机分为试验组和对照组。所有大鼠采用气管内滴入博来霉素的方法制造肺纤维化模型,对照组大鼠隔日腹腔内注射生理盐水,实验组大鼠隔日腹腔内注射医用臭氧。于第28 d每组随机选取10只检测肺功能后处死,取右肺制作组织切片观察肺纤维化程度,取左肺检测超氧化物歧化酶及羟脯氨酸含量。每组剩余10只观察生存时间。结果对照组大鼠各肺功能指标均较实验组明显下降(P0.05)。对照组大鼠肺纤维程度较实验组严重,肺纤维化程度评分显著高于实验组[(1.9±0.5)分比(1.2±0.4)分,p0.05]。实验组大鼠肺组织中超氧化物歧化酶含量较对照组明显升高[(208.48±29.37)U·mg~(-1)·pro~(-1)比(163.34±21.42)U·mg~(-1)·pro~(-1),P0.05],羟脯氨酸的含量较对照组明显降低[(2.25±0.28)mg/g比(2.68±0.37)mg/g,P0.05]。实验组大鼠中位生存期显著长于对照组(79 d比59 d,P0.05)。结论医用臭氧能延缓大鼠肺纤维化的进展。     

MMP-13、TIMP-1在兔骨关节炎模型的表达及其意义

目的 评价切断家兔膝关节内侧副韧带、前交叉韧带,切除内侧半月板制作骨关节炎模型的方法的可行性;研究MMP-13、TIMP-1在软骨退变过程中的病理作用.方法 30只实验家兔随机平均分成3组,左侧膝关节仅打开后缝合作为自身对照,右侧膝关节制作骨关节炎模型.分别在术后4w、8w、12w处死动物,观察关节软骨的病理变化并按照标准给予评分.检测MMP-13、TIMP-1的蛋白表达.结果 三组模型的实验侧关节软骨退变程度随造模时间延长而逐渐加重.MMP-13、TIMP-1分别在术后4w、8w表达最强.MMP-13、TIMP-1积分光密度值比值逐渐减小.结论 MMP-13、TIMP-1在骨关节炎软骨退变过程中起着重要的作用.MMP-13/TIMP-1比值的大小与软骨退变程度成负相关,可以作为反映软骨退变程度的参考指标.     

颈椎软骨终板Ank表达的变化

目的 观察ANK/ANKH(ANK/ANKH)在正常颈椎软骨终板和退变软骨终板中的表达变化,探讨软骨终板中ANK/ANKH的表达与椎间盘退变的相关性.方法 选择2007年11月至2009年2月45例颈椎骨折、脱位及颈椎病患者术中取出的颈椎软骨终板,其中实验组28例,男17例,女11例;对照组17例,男10例,女7例.对照组术前MRI检查软骨终板均为Miller分级0级,术后病理证实椎间盘无明显退变或Thompson椎间盘退变病理分级1级;实验组Miller分级1～3级,Thompson病理分级3～5级.VON KOSSA染色观察标本的钙化情况,免疫组织化学SABC染色法、逆行聚合酶链反应和免疫印迹方法检测ANK的表达.结果 VON KOSSA染色显示实验组可见较多的矿化结节,对照组出现少量或无矿化结节.免疫组织化学染色显示终板软骨细胞有Ankh蛋白表达,主要定位于细胞膜.实验组ankh基因mRNA表达(0.682±0.154)低于对照组(0.805±0.171),差异有统计学意义(P＜0.05).实验组Ankh蛋白表达(0.172±0.030)低于对照组(0.196±0.028),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 伴随软骨终板的退变,ANK/ANKH的表达明显降低且与椎间盘的退变程度呈正比,提示调节ANK在终板软骨细胞中的表达有可能会阻止椎间盘的退变.     

高脱乙酰度羧甲基壳聚糖对兔骨关节炎软骨MMP-1,3表达的作用

目的 :观察高脱乙酰度羧甲基壳聚糖 (CMCTS)经关节腔注射对实验性兔膝骨关节炎软骨退变的影响。方法 :18只大白兔行右膝关节前交叉韧带切断术 ,随机分为 2组 ,每组 9只 ,实验组于术后第 0 ,2 ,4周经关节腔内注射 3%高脱乙酰度CMCTS 0 .15mg·kg-1,对照组同一时间点注射等容生理盐水 0 .15mg·kg-1。于第 6周全部处死大白兔 ,对比两组大白兔股骨髁关节软骨的大体改变和病理变化 ,并用免疫组化的方法对比两组的基质金属蛋白酶 1(MMP 1)及基质金属蛋白酶 3(MMP 3)的表达情况。结果 :实验组退变软骨的大体评分及病理变化轻于对照组 ,免疫组化方法显示MMP 1,3的表达明显低于对照组。结论 :高脱乙酰度CMCTS能明显降低骨关节炎软骨中MMP 1,3的表达水平 ,延缓软骨的退变程度 ,具有软骨保护作用 ,值得进一步深入研究。     

兔膝关节内侧副韧带重度损伤后重建手术对关节软骨保护作用的研究

目的 通过动物实验研究自体肌腱移植重建膝关节内侧副韧带对膝关节软骨退变的影响,为临床使用肌腱重建手术治疗严重膝内侧副韧带损伤,进而减少骨性关节炎的发生提供实验依据.方法 取24只成年新西兰大白兔,两侧膝关节内侧副韧带(MCL)于中段完全切断做成自身对照模型.随机选取实验组,模拟人半腱肌腱重建内侧副韧带进行手术,对照组未行重建手术.术后4、12、162L 24周分别安乐死处死6只兔子,通过组织学切片、免疫组织化学和电镜观察膝关节软骨细胞的凋亡及其凋亡调控基因BCL-2的表达情况.结果 组织学观察:实验组软骨的表面情况及软骨细胞的排列、形态均好于对照组,而且24周时对照组出现了大量的软骨陷窝内细胞消失.免疫组织化学:实验组和对照组均可见BCL-2阳性表达细胞,实验组中的BCL-2阳性表达细胞所占百分比与对照组比较,差异有显著性(P＜0.05).透射电镜:实验组各组仅出现退变的软骨细胞,未见凋亡的软骨细胞,对照组各组均出现了退变的软骨细胞和凋亡的软骨细胞,在24周组尤其严重.结论 MCL重度损伤后用半腱肌腱重建MCL,能够使软骨细胞的排列和形态较好的维持.MCL重度损伤后用半腱肌腱重建MCL能够减缓软骨的退变,减少软骨细胞的凋亡.     

NO在卵巢切除鼠椎间盘中的表达及意义

目的: 研究一氧化氮(NO)在卵巢切除后鼠椎间盘组织中的含量, 并探讨其意义.方法:6月龄雌性SD大鼠64只,实验组32只,行双侧卵巢切除术;对照组32只,行假手术.术后3个月两组分别以Prodigy骨密度仪作大鼠腰椎骨密度值(BMD)测定;同时分别摘取子宫组织,进行病理学检查;分别取两组大鼠L4～L5椎间盘,取匀浆液测定NO和一氧化氮合酶(NOS)含量.结果:大鼠腰椎BMD两组之间有非常显著性差异(P<0.01);病理学检查实验组子宫明显萎缩;椎间盘NO含量实验组为(13.195±0.045)nmol/mg Pr,对照组为(10.399±0.036)nmol/mg Pr;术后3个月实验组大鼠椎间盘NOS含量实验组为(3.487±0.024)U/mg Pr,对照组为(2.766±0.021)U/mg Pr.两组之间均有非常显著性差异(P<0.01).结论:NO和NOS在卵巢切除鼠椎间盘的退变中起重要作用.     

去势大鼠关节软骨病理变化的研究

目的研究去势导致骨质疏松SD大鼠模型胫骨近端关节软骨的病理变化,探讨雌激素水平降低对关节软骨退变的影响.方法 48只8月龄SD大鼠随机分为实验组和对照组.3个月后造成骨质疏松模型,分别于2、4、8、12周后处死大鼠,切取胫骨上端标本,进行大体病理观察及I、II、III型胶原和sox9免疫组织化学研究.结果 HE染色显示2、4周对照组和实验组的软骨厚度、软骨细胞数量相近,关节面平整,潮线完整连续.8周时,实验组与对照组相比软骨厚度变薄(P<0.05),关节面有局部破坏不光滑,潮线欠完整连续,软骨细胞数量基本相近;12周时,实验组与对照组相比软骨厚度明显变薄(P<0.05),软骨细胞明显增多,关节面不光滑有剥脱,潮线明显不连续;8、12周时,Ⅱ型胶原的表达明显减少,sox9的表达在各个时间点无明显差异;8、12周时,与实验组相比对照组的Mankins’评分显著降低(P<0.05).结论骨质疏松情况下关节软骨的结构、代谢等会发生改变,雌激素水平降低可以导致大鼠关节软骨退化.     

吸烟对大鼠骨骼肌细胞葡萄糖转运子4基因表达及蛋白含量的影响

目的:探讨吸烟对胰岛素抵抗(IR)大鼠骨骼肌细胞葡萄糖转运子4mRNA基因表达及蛋白含量的影响。方法:正常6周龄Wistar大鼠48只,随机分为3组,分别为正常饲养组、高脂饲养组及糖尿病组,每组再随机分为吸烟组与对照组,吸烟组进行12周熏烟实验,应用高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术进行IR的评价。应用RT-PCR及免疫组化技术检测被动吸烟大鼠及各自对照组大鼠骨骼肌细胞葡萄糖转运子4mRNA基因表达及蛋白含量的影响。结果:正常吸烟组、高脂饲养及糖尿病吸烟组葡萄糖输注率(GIR)明显低于各自对照组[(27.21±4.71)比(34.93±4.91)mg/(kg·min);(12.78±2.34)比(21.68±2.27)mg/(kg·min);(13.81±2.34)比(17.22±1.90)mg/(kg·min);P<0.01]。正常饲养吸烟组、高脂饲养吸烟组及糖尿病吸烟组大鼠骨骼肌细胞葡萄糖转运子4mRNA基因的表达量及蛋白含量与各自对照组相比无明显差异[(0.53±0.04)比(0.58±0.06)mg/(kg·min);(0.40±0.09)比(0.42±0.04)mg/(kg·min);(0.35±0.10)比(0.37±0.06)mg/(kg·min);P>0.05及(7.84±0.44)比(8.21±0.42)mg/(kg·min);(6.48±0.47)比(6.81±0.24)mg/(kg·min);(4.96±0.39)比(5.10±0.57)mg/(kg·min);P>0.05]。结论:吸烟能导致大鼠IR,吸烟对大鼠骨骼肌细胞葡萄糖转运子4mRNA基因表达及蛋白含量无明显影响,葡萄糖转运子4mRNA基因表达及蛋白含量可能不参与吸烟致IR的发生机制。     

IL-15在兔膝创伤性关节炎模型中的表达研究

目的观察兔膝创伤性关节炎早期白介素15(IL-15)炎性因子的表达及其变化,以进一步探讨创伤性关节炎的发生机制。方法将48只健康新西兰大白兔随机分为实验组和对照组,每组24只。实验组行左后膝关节前后交叉韧带切断和内侧半月板切除术;对照组行单侧膝关节切开术作为假手术对照。2组分别在术后6、12、24h,1、2、3、4周7个时间点抽取关节液,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定关节液中IL-15含量表达。组织学观察其关节软骨和滑膜的变化。结果48只大白兔中进入结果分析29只。2组术后6h兔膝关节液中IL-15含量较其他时间点明显增高(P<0.05);术后1周IL-15表达较术后24h明显降低(P<0.05);术后1、2、3、4周4个时间点的IL-15表达成升高趋势;实验组术后各时间点IL-15含量均高于对照组(均P<0.05)。实验组术后4周,关节软骨失去原有的光泽,呈灰黄色,有裂纹,HE染色见表层略不平整,有小裂隙,纤维组织增生,玻璃样变性,局灶性软骨基质异染性减弱,软骨细胞减少,软骨基质纤维化。结论创伤后兔膝创伤性关节炎早期IL-15高表达,关节软骨及滑膜退变,创伤性关节炎早期与IL-15关系密切。     

鹿瓜多肽穴位注射结合运动疗法对膝骨关节炎模型大鼠膝关节软骨Ⅱ型胶原、血清MMP-3水平的影响

目的观察鹿瓜多肽穴位注射结合中等强度运动对膝骨关节炎模型大鼠膝关节软骨Ⅱ型胶原、血清基质金属蛋白酶3(MMP-3)水平的影响。方法 48只SD大鼠随机分成正常对照组、模型组、穴位注射组和注射结合跑台组,每组12只。参照文献,采用膝关节腔内注射碘乙酸钠建立膝骨关节炎大鼠模型。正常对照组和模型组大鼠不干预,穴位注射组大鼠膝关节腔内注射鹿瓜多肽注射液(0.1mL/100g),注射结合跑台组大鼠在穴位注射组基础上结合中等强度的跑台训练,共6周。光镜观察各组大鼠膝关节软骨病理变化,检测各组大鼠膝关节软骨Ⅱ型胶原含量及血清MMP-3水平。结果干预6周后,穴位注射组和注射结合跑台组O’Driscoll组织学评分均高于模型组[(8.52±1.08)分、(12.68±0.85)分比(5.34±0.57)分,P均<0.05],注射结合跑台组O’Driscoll组织学评分高于穴位注射组[(12.68±0.85)分比(8.52±1.08)分,P<0.05];穴位注射组和注射结合跑台组大鼠膝关节软骨Ⅱ型胶原含量均高于模型组[(54.79±2.29)、(73.79±2.36)比(41.93±2.03),P均<0.05],注射结合跑台组大鼠膝关节软骨Ⅱ型胶原含量高于穴位注射组[(73.79±2.36)比(54.79±2.29),P<0.05];穴位注射组和注射结合跑台组大鼠血清MMP-3水平均低于模型组[(16.04±0.49)、(8.89±0.39)比(24.68±0.56),P均<0.05],注射结合跑台组大鼠血清MMP-3水平低于穴位注射组[(8.89±0.39)比(16.04±0.49),P<0.05]。结论鹿瓜多肽穴位注射结合中等强度运动能提高膝骨关节炎模型大鼠膝关节软骨Ⅱ型胶原含量,降低模型大鼠血清MMP-3水平。     

辛伐他汀对大鼠移植肝胆管损伤的防治作用

目的 探索辛伐他汀对大鼠移植肝胆管损伤的防治作用. 方法 建立重建肝动脉的大鼠肝移植模型,设置实验组、对照组和假手术组,应用高效液相色谱法、生化、组织病理、免疫组化及RT-PCR方法检测胆汁胆盐的成分的变化,观察肝脏组织的病理学变化. 结果 ①辛伐他汀能明显增加大鼠胆汁中磷脂分泌,实验组[(3.874 8±1.414 8)mg/dl]、假手术组[(1.982 1±0.413 5)mg/dl]与对照组[(1.428 5±0.538 7)mg/dl]比较差异有统计学意义(P＜0.05).②对照组胆管损伤严重,而实验组的病理学变化则较对照组轻微;胆管损伤严重程度评分(bile duct injury severity score, BDISS):对照组为(8±1)分,明显高于实验组[(4±2)分]和假手术组(0分)(P<0.05).③磷脂转运蛋白(Mdr2 P-糖蛋白)及Mdr2 mRNA的表达,实验组较对照组有明显增强(P＜0.05). 结论 辛伐他汀能增加大鼠移植术后胆汁中磷脂成分的分泌,对移植肝胆管及肝脏组织有一定保护作用.     

PGC-1α在海人酸(KA)诱导培养大鼠海马神经元氧化应激损伤中的作用

 目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子(peroxisome proliferator activated receptor γ coactivator,PGC)-1α 在海人酸(kainic acid,KA)诱导的培养大鼠海马神经元氧化应激及神经损伤中的作用。方法 离体培养大鼠海马神经元,采用电穿孔基因转染技术分别转染PGC-1α shRNA质粒和空载体质粒。培养7 天后,用KA刺激上述海马神经元24 h,检测转染空载体质粒海马神经元(空白对照组,n=10)、KA刺激的转染PGC-1α shRNA质粒(实验组,n=11)和KA刺激的空载体质粒海马神经元(KA对照组,n=10)的谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量、超氧化物歧化酶(superoxidase dismutase,SOD)和乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)活性变化。FJB染色检测KA刺激24 h后实验组和KA对照组培养大鼠海马神经元神经损伤情况。结果 KA刺激24 h,培养的大鼠海马神经元GSH含量和SOD活性分别为(5.74±0.54) μmol·L-1·μg-1 protein和(10.57±1.25) U/mg protein,较空白对照组显著降低［(9.38±0.72) μmol·L-1·μg-1 protein,P<0.01;(23.12±3.23) U/mg protein,P<0.01］;LDH活性为(2.21±0.18) mmol NADH,H+/min/100 mg protein,较空白对照组海马神经元显著增高［(1.29±0.09) mmol NADH,H+/min/100 mg protein,P<0.01］。转染PGC-1α shRNA质粒组,KA刺激24 h海马神经元GSH含量和SOD活性分别为(3.37±0.42) μmol·L-1·μg-1 protein和(4.54±0.91) U/mg protein,较KA对照组海马神经元明显降低(P均<0.05);LDH活性为(2.74±0.19) mol/NADH+/min/mg protein,较KA对照组海马神经元显著增加(P<0.01)。FJB染色显示转染PGC 1α shRNA质粒组,KA刺激24h培养大鼠海马神经元损伤较KA对照组明显增加(P<0.05)。结论 PGC-1α基因下调加重KA刺激后培养大鼠海马神经元损伤,可能与其加重氧化应激损伤有关。