胃癌组织淋巴管LYVE-1、钙粘蛋白的表达及其与癌转移的关系

目的：探讨胃癌组织钙粘蛋白的表达与癌淋巴道转移的相关性。方法：取胃癌标本14例，正常胃组织标本2例。通过E-cadherin、β-catenin和LYVE-1免疫组化方法，观察肿瘤淋巴管的表达。结果：LYVE-1在正常和癌组织淋巴管阳性表达，正常淋巴管E．cadherin、β-catenin表达阴性，β-catenin在胃癌淋巴管表达弱阳性，β-catenin在淋巴管的表达与肿瘤的分化程度及有无转移有负相关性。结论：LYVE-1在淋巴管特异性表达，E-cadherin／β-catenin复合物在淋巴道转移过程中，对肿瘤细胞与淋巴管内皮细胞的粘附起一定的作用，但不是主要作用。     

胃癌淋巴管E钙黏蛋白、β连环素的表达与癌转移的关系

目的:探讨胃癌淋巴管E钙黏蛋白、β连环素的表达与癌转移的相关性。方法:胃癌标本32例,正常胃组织标本2例。通过免疫组织化学方法,用淋巴管内皮透明质酸受体-1(LYVE-1)标记定位,观察胃癌淋巴管E钙黏蛋白和β连环素的表达。结果:LYVE-1在淋巴管阳性表达,正常组织淋巴管E钙黏蛋白、β连环素表达阴性。胃癌组织淋巴管的E钙黏蛋白表达阴性。β连环素在淋巴管的表达,低分化组表达率为56.5%,与高分化癌淋巴管的表达率(43.3%)有明显差异;有淋巴结转移组表达率58.5%,和无转移癌表达率(43.3%)也有明显差异。结论:E钙黏蛋白/β连环素复合物在介导肿瘤细胞进入淋巴管中起一定的作用,β连环素弱阳性表达与癌的转移有正相关性。     

几种淋巴管特异性标记物在人癌组织中的表达

目的：对已发现的几种淋巴管特异性标记物在人类多种肿瘤中的表达进行观察，从而找出适合于肿瘤组织淋巴管研究的标记物。方法：取人结肠癌、肺癌、胃癌和喉癌手术材料，免疫组化法观察LYVE-1、Podoplanin和VEGFR-3在癌组织的表达。结果：LYVE-1只表达于淋巴管内皮，Podoplanin主要表达于淋巴管，此外在少数小静脉上也有表达，VEGFR-3则同时表达于淋巴管与小血管，在癌细胞的胞浆中也可呈阳性表达。结论：LYVE-1、Podoplanin可以作为肿瘤组织内淋巴管的特异标记物。     

JAM-1、E-cadherin及β-catenin在大鼠胃癌组织的表达

目的研究鼠胃癌组织粘附分子JAM-1,E-cadherin及β-catenin的表达情况,探讨胃癌的转移机制。方法诱发大鼠胃癌模型,用免疫组化及免疫印迹方法检测大鼠不同病理分期胃癌组织中JAM-1、Ecadherin及β-catenin的表达。结果 JAM-1表达水平随着胃癌的进展而下降,在癌细胞、血管和淋巴管表达的面密度随着胃癌的进展而下降。E-cadherin和β-catenin在胃癌细胞的阳性表达率随着胃癌的发生、进展而下降,E-cadherin表达于正常胃及胃癌组织的血管,β-catenin阳性表达于淋巴管而未见血管。结论 JAM-1,E-cadherin,β-catenin在胃癌组织表达水平随着胃癌的进展而下降,可能参与癌转移机制。     

血管内皮生长因子C及其受体3在人恶性黑色素瘤组织内的表达及意义

目的 观察人恶性黑色素瘤组织内血管内皮生长因子C(VEGF-C)及其受体3(VEGFR-3)的表达,探讨VEGF-C和VEGFR-3在恶性黑色素瘤淋巴管生成及淋巴道转移中的作用.方法 取人恶性黑色素瘤组织48例(石蜡标本30例,术后新鲜组织18例),应用免疫组织化学和RT-PCR技术,观察VEGF-C和VEGFR-3蛋白及mRNA在恶性黑色素瘤组织内的表达情况.以淋巴管内皮透明质酸受体(LYVE-1)标记淋巴管,计数恶性黑色素瘤组织淋巴管数密度.结果 VEGF-C和VEGFR-3蛋白主要表达于恶性黑色素瘤细胞胞浆内,在肿瘤周围的血管和淋巴管内皮上也可见VEGFR-3蛋白表达,VEGF-C和VEGFR-3蛋白在淋巴结转移组恶性黑色素瘤组织内的表达水平明显高于无淋巴结转移组(P<0.05).在18例新鲜恶性黑色素瘤中,淋巴结转移组VEGF-C和VEGFR-3mRNA的表达明显高于无淋巴结转移组(P<0.01).LYVE-1表达于肿瘤间质内的淋巴管内皮细胞,淋巴结转移组恶性黑色素瘤组织中的淋巴管数密度(LMVD)为9.845±2.454,无淋巴结转移组恶性黑色素瘤组织中的淋巴管数密度为6.534±2.193,淋巴结转移组恶性黑色素瘤组织内的淋巴管数密度明显高于无淋巴结转移组(P<0.01).结论恶性黑色素瘤组织内VEGF-C表达明显增高,并通过上调其受体VEGFR-3的表达促进恶性黑色素瘤组织内淋巴管的生成,从而促进恶性黑色素瘤的淋巴道转移.     

p120-catenin缺失下调E-cadherin/β-catenin复合体在肺癌细胞系的表达

目的探讨catenin家族的重要成员p120-catenin(p120ctn)对E-cadherin介导的细胞粘附作用的调节及机制,检测在活体内外肺癌细胞系中p120ctn对E-cadherin/β-catenin复合体的调节作用。及其对肺癌细胞侵袭和转移能力的影响。方法应用siRNA技术建立p120ctn基因沉默的多种癌细胞系后,采用Western Blot,Transwell分析,裸鼠移植实验等方法进行检测。结果在成功干扰p120ctn表达的肺癌细胞系中,应用Western Blot和RT-PCR方法,我们观察到E-cadherin的蛋白表达出现不同程度的减弱,但mRNA的表达几乎没有变化;而β-catenin在蛋白和mRNA水平上都出现了明显的表达减弱。同时应用Transwell和裸鼠移植实验,我们在活体内外还观察到p120ctn缺失的肺癌细胞系具有较强的侵袭转移能力。结论肺癌细胞系中p120ctn的表达缺失可能通过下调E-cadherin和β-catenin的表达,参与肺癌细胞的侵袭和转移。     

趋化因子受体CCR7的表达与卵巢癌淋巴管入侵及淋巴结转移的关系

目的 观察趋化因子受体CCR7在卵巢癌组织内的表达情况,分析CCR7的表达与肿瘤淋巴管入侵和淋巴结转移之间的关系。方法 取临床资料完整的卵巢癌病例64例,其中,淋巴结转移组40例,无淋巴结转移组24例。应用免疫组化法和Western blot技术观察CCR7在卵巢癌组织内的表达。以D2-40作为淋巴管内皮特异性标记物,观察卵巢癌组织内肿瘤淋巴管入侵的情况。结果 免疫组化法和Western blot检测结果表明,CCR7表达于卵巢癌细胞浆和胞膜内,有淋巴结转移组的表达量明显高于无淋巴结转移组(p<0.05)。D2-40表达于卵巢癌组织内淋巴管内皮细胞,肿瘤淋巴管入侵在CCR7阳性组的发生率明显高于CCR7阴性组的发生率,CCR7表达与肿瘤淋巴管入侵发生率有显著相关性(p<0.05)。结论 CCR7的表达与卵巢癌发生肿瘤淋巴管入侵和淋巴结转移密切相关,提示CCR7在卵巢癌淋巴结转移中可能起重要作用。     

肺癌细胞中p120-catenin的基因缺失促进肺癌细胞的侵袭和转移能力

目的探讨肺癌细胞中p120-catenin(p120ctn)在非小细胞肺癌侵袭、转移中的作用及其可能的机制。方法应用siRNA方法干扰肺癌细胞系BE1,SPC,LTE中p120ctn的表达后,应用Westernblot及RT-PCR方法检测E-cadherin、β-catenin蛋白及mRNA表达情况的变化;应用流式细胞术及Transwell实验检测肺癌细胞增殖、侵袭和转移能力变化;应用Pull-down方法检测小GTP酶活性的变化;应用体内侵袭实验检测肿瘤形成情况。结果 p120ctn表达下调明显地减弱E-cadherin和β-catenin的蛋白表达,同时,还可以下调β-catenin的mRNA表达。p120ctn表达下调还能使Cdc42和Rac1活性增高,RhoA的活性降低,并且促进肺癌细胞的增殖、侵袭和转移。将稳定转染了p120siRNA和转染空质粒的细胞克隆分别移植至裸鼠皮下,发现整合了p120siRNA的荷瘤鼠的肿瘤生长迅速,侵袭和转移能力增强。结论 p120-catenin的缺失可促进肺癌细胞的侵袭和转移能力,其机制可能通过下调E-cadherin和β-catenin的表达从而降低细胞间粘附,以及激活Cdc42/Rac1、失活RhoA来实现。     

LYVE-1蛋白在小鼠碱烧伤角膜的表达及意义

目的观察淋巴管内皮透明质酸受体(LYVE-1)在小鼠碱烧伤角膜内的表达情况,探讨角膜新生淋巴管形成的时间过程及角膜疾病后新生淋巴管形成的作用。方法应用NaOH溶液制作小鼠角膜碱烧伤模型,分别于角膜碱烧伤后第1d、3d、5d、7d和12d取材。采用免疫组化法,观察正常角膜和碱烧伤后不同时间段角膜内LYVE-1的表达情况。结果在正常角膜组织中,LYVE-1表达于角膜上皮细胞和内皮细胞内。在角膜碱烧伤后1d、3d和5d,LYVE-1主要表达于角膜上皮内及入侵角膜基质的炎性细胞内;碱烧伤后7d,可见大量LYVE-1呈条索样表达于角膜基质中,并可见少量LYVE-1阳性表达于开放状态的淋巴管;碱烧伤后12d,角膜基质内新生淋巴管数量增多。结论正常角膜组织储备LYVE-1生物因子,在炎性角膜中,LYVE-1可能在角膜新生淋巴管运输透明质酸(HA)的过程中发挥重要作用。     

血管内皮生长因子D在卵巢上皮癌组织内的表达与淋巴结转移的关系

目的观察血管内皮生长因子D(vascular endothelial growth factor D,VEGF-D)在卵巢上皮癌组织内的表达,探讨VEGF-D在卵巢癌淋巴管生成中的作用及其与淋巴结转移的关系。方法取人卵巢上皮癌组织78例,免疫组化法观察VEGF-D在卵巢上皮癌组织内的表达情况。以淋巴管内皮特异性标记物D2-40标记淋巴管,计数癌组织内淋巴管数密度。结果VEGF-D蛋白主要表达于卵巢癌细胞胞浆内,在淋巴结转移组卵巢癌组织内的表达水平明显高于无淋巴结转移组(P<0.01)。淋巴结转移组卵巢癌组织内的淋巴管数密度明显高于无淋巴结转移组(P<0.01)。结论VEGF-D表达与卵巢癌淋巴管数密度及淋巴结转移之间具有显著的相关性。     

乳腺癌淋巴管LYVE-1和PROX-1表达程度与肿瘤淋巴转移的关联性分析

目的观察乳腺浸润性导管癌患者肿瘤组织中乳腺癌淋巴管LYVE-1和PROX-1的表达程度与肿瘤淋巴转移的关联性。方法选择乳腺浸润性导管癌患者90例为实验组,以60例乳腺良性病变患者为对照组,检测实验组患者肿瘤组织LYVE-1和PROX-1的水平,与对照组患者组织的LYVE-1和PROX-1的水平进行比较;将实验组患者按转移、复发情况进行分类,观察LYVE-1和PROX-1表达与肿瘤淋巴转移的关系。结果实验组患者肿瘤组织的LYVE-1和PROX-1阳性淋巴管密度(LVD)明显高于对照组,实验组患者中有淋巴转移患者的LYVE-1和PROX-1阳性LVD明显高于无淋巴转移患者,差异具有统计学意义(P<0.05);LYVE-1和PROX-1阳性LVD之间无相关性;logistic回归分析,LYVE-1和PROX-1是肿瘤转移的相关因素,对LYVE-1、PROX-1与转移的关系绘制ROC曲线,AUC分别为0.716、0.672;按ROC曲线分析所得诊断临界值进行分组,随访观察一年,LYVE-1、PROX-1阳性LVD升高患者,淋巴转移率较高。结论乳腺浸润性导管癌患者肿瘤组织LYVE-1和PROX-1表达与淋巴管生成有关,表达程度高的患者更易发生淋巴转移。     

VEGF-C在卵巢癌局部淋巴结内淋巴管生成中的作用

目的观察血管内皮生长因子-C(VEGF-C)在卵巢癌组织内的表达,分析其与卵巢癌局部淋巴结内淋巴管生成之间的关系。方法取卵巢癌64例,其中,有淋巴结转移40例,无淋巴结转移24例。应用免疫组化法和Western blot技术观察VEGF-C在卵巢癌组织内的表达。以D2-40作为淋巴管内皮特异性标记物,检测卵巢癌局部淋巴结内淋巴管生成情况。结果 VEGF-C主要表达于卵巢癌细胞浆和胞膜以及癌组织周围浸润的炎性细胞,在有淋巴结转移组的表达率明显高于其在无淋巴结转移组的表达率。Western blot检测结果表明,VEGF-C蛋白在有淋巴结转移的卵巢癌组织中的表达量高于其在无淋巴结转移的卵巢癌组织内的表达量。D2-40表达于卵巢癌局部淋巴结内的淋巴管内皮细胞,在有转移的淋巴结内可见大量新生的淋巴管,淋巴管腔内存在入侵的肿瘤细胞,在无转移的淋巴结内观察到新生的淋巴管。在无淋巴结转移组病例中,卵巢癌组织VEGF-C阳性者局部淋巴结内淋巴管密度明显高于VEGF-C阴性者淋巴结内的淋巴管密度。结论 VEGF-C的表达与卵巢癌淋巴结转移密切相关,卵巢癌在发生局部淋巴结转移之前存在淋巴结内淋巴管生成的现象,卵巢癌组织内VEGF-C的表达在卵巢癌局部淋巴结内的淋巴管生成中可能发挥重要作用。     

抑癌基因PTEN和血管内皮生长因子-C表达与乳腺癌淋巴管密度的相关性及其临床意义

目的:研究乳腺癌中抑癌基因PTEN和血管内皮生长因子-C(VEGF-C)表达与肿瘤间质淋巴管密度(LVD)的相关性及其临床意义。方法:应用EliVision免疫组化法检测90例乳腺浸润性导管癌组织和30例乳腺纤维腺瘤组织中PTEN、VEGF-C和淋巴管内皮细胞透明质酸受体1(LYVE-1)的表达,计算LYVE-1标记的乳腺癌间质淋巴管的密度,分析PTEN和VEGF-C与LVD的关系。结果:PTEN和VEGF-C在乳腺癌中的表达阳性率分别为48.9%、47.8%,LVD为(8.03±2.26)个/HPF,与良性对照组比较均有显著差异(P<0.01)。PTEN阳性率随乳腺癌淋巴结转移的出现和临床分期的升高而降低(P<0.05),乳腺癌VEGF-C阳性率随淋巴结转移的出现和临床分期的升高而增加(P<0.05),PTEN阳性组乳腺癌的LVD水平低于PTEN阴性组(P<0.05),VEGF-C阳性组乳腺癌的LVD水平高于VEGF-C阴性组(P<0.01),PTEN阳性组乳腺癌的VEGF-C阳性率低于PTEN阴性组(P<0.05)。结论:PTEN和VEGF-C的异常表达与乳腺癌间质淋巴管密度密切相关,在乳腺癌的淋巴管生成及侵袭转移过程中具有重要作用。     

VEGF-D的表达与结肠癌淋巴管生成及淋巴结转移的相关性

目的探讨血管内皮生长因子-D(Vascular endothelial growth factorD,VEGF-D)在结肠癌组织中的表达规律,及其与结肠癌淋巴管密度(LVD)、淋巴结转移之间的关系。方法采用免疫组化法对43例人结肠癌组织和14例结肠良性病变组织的VEGF-D表达进行分析,以LYVE-1标记淋巴管,测算淋巴管密度,统计分析结肠癌中的VEGF-D表达与结肠癌临床病理特征的关系。采用Western-blot法检测16例人结肠癌组织中淋巴结转移组和无淋巴结转移组的VEGF-D蛋白表达。结果免疫组化结果显示结肠癌组织中VEGF-D的阳性率明显高于结肠良性病变组织,并且与结肠癌组织的LVD成正相关。Western-blot结果显示结肠癌中淋巴结转移组的VEGF-D的表达量较无淋巴结转移组明显增加,VEGF-D表达与患者的肿瘤浸润深度、淋巴结转移和Dukes分期显著相关,而与年龄和肿瘤大小无关。结论结肠癌组织中VEGF-D的高表达可能与结肠癌的淋巴管的新生及淋巴结转移有关。     

14-3-3 ζ与β连接素在人T1期非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 观察14-3-3 ζ 和β连接素(β-catenin)在人T₁期非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,探讨两者与非小细胞肺癌发展、侵袭和转移的关系。 方法 采用免疫组织化学、免疫荧光双标、激光扫描共焦显微技术和Western blotting,检测 NSCLC 及正常肺组织中14-3-3 ζ 和β-catenin 蛋白的表达。 结果 与正常肺组织相比,14-3-3 ζ 在NSCLC 中的表达显著增强,且表达与肺癌的分化程度和淋巴结转移有关,而与病理学分型无关。β-catenin 在NSCLC中的表达与正常肺组织相比减弱,且其表达与肺癌的分化程度呈正相关,与淋巴结转移呈负相关,而与肺癌病理学分型无关。 结论 14-3-3 ζ 和β-catenin与T₁期NSCLC发展、侵袭和转移密切相关。14-3-3 ζ 高表达可能促进了NSCLC的发展与转移,因此14-3-3 ζ可以作为非小细胞肺癌又一个有效的治疗靶点。     

Smad4和VEGF-C在喉癌中的表达及其与淋巴管生成之间的关系

目的观察Smad4与VEGF-C在喉癌组织内的表达情况,分析Smad4和VEGF-C的表达与喉癌组织内淋巴管生成及淋巴结转移之间的关系。方法取喉癌病例58例,其中淋巴结转移组34例,无淋巴结转移组24例。应用免疫组化法和Western blot技术观察Smad4和VEGF-C在喉癌组织内的表达。以D2-40特异性标检测喉癌组织内淋巴管生成情况。结果 Smad4在无淋巴结转移的喉癌组织内的表达率明显高于其在有淋巴结转移组的表达率。Smad4表达阳性组的淋巴管数密度(LVD)明显低于Smad4表达阴性组的LVD。VEGF-C在淋巴结转移组的表达率明显高于其在无淋巴结转移组的表达率。Smad4的表达与VEGF-C的表达呈显著的负相关性(r=-0.391)。结论 VEGF-C在喉癌淋巴管的发生及淋巴结转移中发挥重要作用。Smad4与VEGF-C的表达呈负相关,Smad4可能有抑制喉癌淋巴管生成和淋巴道转移的作用。     

VEGF-C表达与胰腺癌淋巴结转移及预后的关系

目的 观察血管内皮生长因子(VEGF)-C在胰腺癌组织内的表达情况,分析VEGF-C的表达与胰腺癌淋巴结转移和预后之间的关系。方法 取胰腺癌病例52例,其中,伴淋巴结转移组36例,无淋巴结转移组16例。应用免疫组化法和Western blot技术观察VEGF-C在胰腺癌组织内的表达。以D2-40作为淋巴管内皮特异性标记物,观察胰腺癌组织内淋巴管生成的情况。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线判断VEGF-C的表达对胰腺癌预后的影响。结果 Western blot和免疫组化法检测结果表明,VEGF-C主要表达于胰腺癌细胞浆内,淋巴结转移组阳性表达量明显高于无淋巴结转移组(p<0.05)。D2-40表达于胰腺癌组织内淋巴管内皮细胞,VEGF-C阳性组淋巴管数密度明显高于VEGF-C阴性组(p<0.05),表明VEGF-C的表达与胰腺癌淋巴管生成密切相关。Kaplan-Meier生存分析表明VEGF-C表达阴性患者的生存率均高于VEGF-C表达阳性患者,VEGF-C的表达影响患者的预后。结论 VEGF-C在胰腺癌的淋巴管生成和淋巴结转移过程中发挥重要作用,VEGF-C的表达是影响胰腺癌患者预后的主要因素之一。     

人参皂甙Rh-2对细胞间连接黏附分子在小鼠移植瘤淋巴管表达的影响

目的观察细胞间黏附分子(JAM)在小鼠移植瘤淋巴管内皮细胞的表达及人参皂甙Rh-2的影响,探讨JAM在癌淋巴管转移中的意义。方法于小鼠前肢皮下接种S180小鼠癌性腹水,成瘤后给予人参皂甙Rh-2灌服,6周后取材。用免疫组化法观察LYVE-1、JAM-1、JAM-2在淋巴管内皮细胞的表达。结果在对照组肿块的周边部可见LYVE-1阳性表达的淋巴管,JAM-1、JAM-2在淋巴管有阳性表达,用药组表达减少。结论JAM-1、JAM-2在淋巴管内皮细胞的表达可能与癌淋巴管转移有关。     

甲状腺乳头状癌组织中E-cadherin、β-catenin 和cyclinD1蛋白表达及意义

目的 探讨甲状腺乳头状癌组织中E-cadherin、β-catenin和cyclinD1蛋白表达对其发生、发展的影响.方法 应用免疫组化EnVision法检测36例甲状腺乳头状癌组织、27例甲状腺腺瘤旁组织E-cadherin、β-catenin 和cyclinD1的蛋白表达,同时分析三者表达水平的变化与其它病理参数的关系.结果 E-cadherin在甲状腺乳头状癌的表达下降,阳性率为30.56%(P<0.05),与肿瘤淋巴结转移相关(P<0.01);β-catenin在癌组织中细胞核/核周区呈强阳性表达,且表达率明显升高为80.56%(P<0.01),其异常表达与肿瘤淋巴结转移相关(P<0.01);cyclinD1在癌组织中的阳性表达率为72.22%(P<0.01),与肿瘤淋巴结转移有关(P<0.05).此外,E-cadherin的低表达与cyclinD1的过表达呈负相关(P<0.05),β-catenin的异位高表达与cyclinD1的过表达呈正相关(P<0.05).结论 E-cadherin表达缺失和β-catenin异位高表达可能通过诱导cyclinD1的过表达,进而影响甲状腺乳头状癌的发生和发展.     

Smad4和VEGF-C的表达与乳腺癌淋巴管生成之间的关系

目的观察Smad4和血管内皮生长因子(VEGF)-C在人乳腺癌组织内的表达情况,分析Smad4和VEGF-C的表达与乳腺癌淋巴管生成及淋巴结转移之间的关系。方法取乳腺癌病例56例,其中,淋巴结转移组35例,无淋巴结转移组21例。应用免疫组化法和Western blot技术观察Smad4和VEGF-C在乳腺癌组织内的表达。以D2-40作为淋巴管内皮特异性标记物,检测乳腺癌组织内淋巴管生成情况。结果 Smad4在无淋巴结转移组的表达率明显高于其在有淋巴结转移组的表达率,Smad4表达阳性组的淋巴管数密度(LVD)明显低于Smad4表达阴性组。而VEGF-C在淋巴结转移组的表达率明显高于其在无淋巴结转移组的表达率。Smad4的表达与VEGF-C的表达呈显著的负相关性(r=-0.314)。Western blot检测结果表明,VEGF-C蛋白在有淋巴结转移乳腺癌组织中的表达量高于其在无淋巴结转移乳腺癌组织内的表达量,而Smad4在有淋巴结转移乳腺癌组织内的表达量明显低于其在无淋巴结转移组的表达量。结论 VEGF-C在乳腺癌淋巴管的发生及淋巴结转移中发挥重要作用,与Smad4的表达呈负相关,Smad4可能通过调节VEGF-C蛋白的表达而抑制乳腺癌淋巴管生成和淋巴道转移的作用。