胃癌淋巴管E钙黏蛋白、β连环素的表达与癌转移的关系

目的:探讨胃癌淋巴管E钙黏蛋白、β连环素的表达与癌转移的相关性。方法:胃癌标本32例,正常胃组织标本2例。通过免疫组织化学方法,用淋巴管内皮透明质酸受体-1(LYVE-1)标记定位,观察胃癌淋巴管E钙黏蛋白和β连环素的表达。结果:LYVE-1在淋巴管阳性表达,正常组织淋巴管E钙黏蛋白、β连环素表达阴性。胃癌组织淋巴管的E钙黏蛋白表达阴性。β连环素在淋巴管的表达,低分化组表达率为56.5%,与高分化癌淋巴管的表达率(43.3%)有明显差异;有淋巴结转移组表达率58.5%,和无转移癌表达率(43.3%)也有明显差异。结论:E钙黏蛋白/β连环素复合物在介导肿瘤细胞进入淋巴管中起一定的作用,β连环素弱阳性表达与癌的转移有正相关性。     

淋巴管内皮细胞透明质酸受体-1在发育小鼠肾内的表达

目的:探讨淋巴管内皮细胞透明质酸受体-1(LYVE-1)在发育小鼠肾内的表达.方法:胚胎期第13～18天(E13～18)的胎鼠和出生后第4、 14和21天(P4～21)及成年小鼠的肾,行LYVE-1免疫组织化学显色.结果:LYVE-1免疫阳性淋巴管丛最早在胚胎期第14天的小鼠肾检测到,主要位于肾皮质的动脉周围.在胚胎期第15天的肾小球中最早检测到LYVE-1免疫阳性细胞,但LYVE-1免疫阳性细胞在肾小球中的数量和位置不定.结论:LYVE-1免疫阳性细胞主要位于肾动脉周围淋巴管,在肾小球中也有LYVE-1表达.     

胃癌组织淋巴管LYVE-1、钙粘蛋白的表达及其与癌转移的关系

目的：探讨胃癌组织钙粘蛋白的表达与癌淋巴道转移的相关性。方法：取胃癌标本14例，正常胃组织标本2例。通过E-cadherin、β-catenin和LYVE-1免疫组化方法，观察肿瘤淋巴管的表达。结果：LYVE-1在正常和癌组织淋巴管阳性表达，正常淋巴管E．cadherin、β-catenin表达阴性，β-catenin在胃癌淋巴管表达弱阳性，β-catenin在淋巴管的表达与肿瘤的分化程度及有无转移有负相关性。结论：LYVE-1在淋巴管特异性表达，E-cadherin／β-catenin复合物在淋巴道转移过程中，对肿瘤细胞与淋巴管内皮细胞的粘附起一定的作用，但不是主要作用。     

LYVE-1蛋白在小鼠碱烧伤角膜的表达及意义

目的观察淋巴管内皮透明质酸受体(LYVE-1)在小鼠碱烧伤角膜内的表达情况,探讨角膜新生淋巴管形成的时间过程及角膜疾病后新生淋巴管形成的作用。方法应用NaOH溶液制作小鼠角膜碱烧伤模型,分别于角膜碱烧伤后第1d、3d、5d、7d和12d取材。采用免疫组化法,观察正常角膜和碱烧伤后不同时间段角膜内LYVE-1的表达情况。结果在正常角膜组织中,LYVE-1表达于角膜上皮细胞和内皮细胞内。在角膜碱烧伤后1d、3d和5d,LYVE-1主要表达于角膜上皮内及入侵角膜基质的炎性细胞内;碱烧伤后7d,可见大量LYVE-1呈条索样表达于角膜基质中,并可见少量LYVE-1阳性表达于开放状态的淋巴管;碱烧伤后12d,角膜基质内新生淋巴管数量增多。结论正常角膜组织储备LYVE-1生物因子,在炎性角膜中,LYVE-1可能在角膜新生淋巴管运输透明质酸(HA)的过程中发挥重要作用。     

右旋柠烯对大鼠结直肠癌E-钙黏蛋白和β-连环素表达的影响

目的观察D-limonene(右旋柠烯)对大鼠结直肠癌的生长和E-cad(E-钙黏蛋白,E-cadherin)、β-cat(β-连环素,β-catenin)表达的影响,从分子学角度探讨其抗肿瘤的机制。方法皮下注射致癌剂二甲基肼(dimethylhydrazine,DMH)构建大鼠原发肠癌模型,中期后给予D-limonene干预,免疫组化染色观察癌组织E-cad、β-cat的表达情况。结果E-cad和β-cat在两组均有异常表达,治疗组异常表达率低;β-cat对照组异位表达增加。结论D-limonene降低了E-cad、β-cat异常表达率,可能抑制了肿瘤的发展和转移。     

E-钙黏蛋白、β-连环蛋白和Podoplanin在人胃腺癌中的表达及意义

目的：探讨E-钙黏蛋白（E—cadhefin）及β-连环蛋白（β-catenin）在人胃腺癌中的表达和在淋巴道转移中的作用。方法：取60例胃腺癌组织样本和30例正常组织,应用免疫组织化学方法观察E—Cad和β-Cat在人胃腺癌组织中的表达,应用Podoplanin标记淋巴管,检测胃腺癌组织中的微淋巴管密度（MLVD）。结果：60例胃腺癌组织中,E—Cad和β—Cat的表达与分化程度、淋巴结转移、TNM分期具有相关性,差异有统计学意义（P〈0．05）。E—cad的表达与肿瘤直径、浸润深度具有相关性,差异有统计学意义（P〈0．05）,而β-Cat的异常在这两组中无明显差异（P〉0．05）。Podoplanin只表达淋巴管,癌组织中的LMVD高于正常胃组织（P〈0．01）,癌周边缘区的LMVD高于肿瘤中心组织（P〈0．01）。LMVD的表达与分化程度、淋巴结转移、TNM分期具有相关性,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：E—Cad和β—Cat异常表达在胃腺癌进展中起重要作用,在淋巴转移过程中使肿瘤细胞进入淋巴导管起了一定促进作用。     

肺癌组织中E-cadherin、HIF-1α蛋白表达及意义

目的 研究肺癌组织中E-cad、HIF-1α蛋白的表达.方法 应用免疫组织化学SP法检测99例肺癌组织中E-cad和HIF-1α蛋白表达状况.结果 E-cad和HIF-1α蛋白在99例肺癌中的总阳性率分别为63.6%和56.6%.E-cad蛋白在细支气管肺泡癌组的表达显著高于小细胞癌组,HIF-1α蛋白的表达低于小细胞癌组(P均<0.05).E-cad蛋白在淋巴结无转移组的表达显著高于淋巴结转移组(P<0.05),HIF-1α蛋白在两组间的表达差异无显著性(P>0.05).E-cad蛋白在Ⅰ~Ⅱ期肺癌组表达高于Ⅲ~Ⅳ期肺癌组(P<0.01),HIF-1α蛋白的表达低于Ⅲ~Ⅳ期肺癌组(P<0.05).E-cad蛋白表达与HIF-1α蛋白表达呈负相关(P<0.05).结论 肺癌组织中E-cad和HIF-1α蛋白表达可能与肿瘤侵袭性有关.     

小鼠恶性黑色素移植瘤模型的建立及其淋巴管内皮细胞透明质酸受体1的表达

目的:建立小鼠皮肤恶性黑色素移植瘤模型,探讨小鼠皮肤恶性黑色素移植瘤组织内淋巴管的生成情况。方法:体外培养B16瘤细胞,接种B16瘤细胞于C57BL/6小鼠右侧背部皮内,构建C57BL/6小鼠皮肤恶性黑色素移植瘤模型;应用H-E染色、淋巴管内皮细胞透明质酸受体1(1ymphatic vessel endothelial hyaluronan receptor-1, LYVE-1)免疫组化染色确认模型和观察肿瘤组织内淋巴管的生成情况。结果:建立了恶性黑色素移植瘤模型;LY- VE-1主要着色于正常组织和移植瘤组织中淋巴管内皮细胞的细胞膜上;恶性黑色素瘤组织中淋巴管密度明显高于正常皮肤组织。结论:构建C57BL/6小鼠皮肤恶性黑色素移植瘤模型是获得恶性黑色素瘤组织和进一步研究的有效手段;LYVE-1是特异性较高的淋巴管内皮标记物;小鼠皮肤恶性黑色素移植瘤组织中可能存在淋巴管的新生。     

吲哚类化合物MAZ51对小鼠移植瘤生长及淋巴管生成的影响

目的:观察吲哚类化合物MAZ51对小鼠移植瘤生长及淋巴管生成的影响,并探讨其作用机制.方法:皮下注射肉瘤(S180)腹水型瘤株构建小鼠移植瘤模型,成瘤后给予MAZ51,观察其对移植瘤生长的影响.免疫组织化学标记淋巴管,分析移植瘤周边区和正常皮肤的毛细淋巴管密度(LMVD).结果:移植瘤周边区的LMVD高于正常皮肤组织.给予MAZ51后,明显减慢移植瘤的生长,但瘤周边区的LMVD并没有变化.结论:实验结果显示肿瘤周边区有淋巴管新生.MAZ51影响移植瘤的生长,但不影响淋巴管的生成.     

胃癌组织中微淋巴管密度与侵袭转移的关系

目的:探讨胃癌微淋巴管密度(LMVD)与侵袭转移的相关性。方法:应用免疫组化SP法检测胃癌组织和正常胃组织淋巴管内皮细胞透明质酸受体-1(LYVE-1)的表达,并计数LMVD,分析LMVD与侵袭转移的关系。结果:胃癌组织癌周区处于开放状态的功能性微淋巴管明显增多。胃癌组织LMVD较正常胃组织LMVD增多,差异有统计学意义(P0.05)。有淋巴结转移胃癌中LMVD明显多于无淋巴结转移者,直径≥5cm胃癌LMVD明显多于直径5cm者,侵及浆膜胃癌组织LMVD明显多于未侵及浆膜者,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:胃癌组织LMVD与肿瘤大小、浸润深度和淋巴转移有密切关系,可以作为肿瘤诱导生成淋巴管研究的量化指标,有助于胃癌的预后判断及治疗方案的评价。     

JAM-1、E-cadherin及β-catenin在大鼠胃癌组织的表达

目的研究鼠胃癌组织粘附分子JAM-1,E-cadherin及β-catenin的表达情况,探讨胃癌的转移机制。方法诱发大鼠胃癌模型,用免疫组化及免疫印迹方法检测大鼠不同病理分期胃癌组织中JAM-1、Ecadherin及β-catenin的表达。结果 JAM-1表达水平随着胃癌的进展而下降,在癌细胞、血管和淋巴管表达的面密度随着胃癌的进展而下降。E-cadherin和β-catenin在胃癌细胞的阳性表达率随着胃癌的发生、进展而下降,E-cadherin表达于正常胃及胃癌组织的血管,β-catenin阳性表达于淋巴管而未见血管。结论 JAM-1,E-cadherin,β-catenin在胃癌组织表达水平随着胃癌的进展而下降,可能参与癌转移机制。     

肺癌患者手术前后血清TGF-α、TGF-β1和SE-Cad检测的临床意义

目的:探讨了肺癌患者手术治疗前后血清TGF-α、TGF-β1和SE-Cad水平的变化及意义。方法:应用放射免疫分析和酶联法对32例肺癌患者进行了手术治疗前后血清TGF-α、TGF-β1和SE-Cad检测,并与35名正常健康人作比较。结果:肺癌患者在手术前血清TGF-α、TGF-β1和SE-Cad水平非常显著地高于正常人组(P<0.01),经手术治疗6个月后则与正常人组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:检测肺癌患者手术治疗前后血清TGF-α、TGF-β1和SE-Cad水平的变化对观察病情和预后判定具有重要的临床价值。     

EBV-LMP2A和β-catenin蛋白在鼻咽癌中的表达关系及意义

目的 探讨EB病毒编码的潜伏膜蛋白2A(latent membrane protein 2A,LMP2A)和β-连环素(β-catenin)在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)中的表达关系及其临床意义.方法 应用免疫组化SP法检测LMP2A和β-catenin蛋白在32例鼻咽黏膜慢性炎、56例NPC和18例NPC淋巴结转移灶中的表达,采用Westem blot法和免疫荧光细胞化学染色法观察LMP2A和β-catenin蛋白在CNE2-LMP2A细胞及其对照组CNE2-Vector和CNE2细胞中的表达.结果 (1)LMP2A在NPC及其淋巴结转移灶中的阳性率分别为89.3％ (50/56)和77.8％(14/18),均明显高于鼻咽黏膜慢性炎(37.5％,12/32)(P均＜0.01);β-catenin在NPC及其淋巴结转移灶中的异常表达率分别为62.5％ (35/56)和83.3％(15/18),均明显高于鼻咽黏膜慢性炎(3.1％,1/32)(P均＜0.01);LMP2A与β-catenin正常表达呈负相关(rs=-0.391,P ＜0.01);LMP2A和β-catenin蛋白在鼻咽癌T分期、N分期和临床分期组间表达率的差异均有统计学意义(P ＜0.05或P＜0.01).(2)CNE2-LMP2A细胞中β-catenin蛋白表达水平明显高于CNE2-Vector和CNE2细胞;CNE2-LMP2A细胞中β-catenin胞质和胞核的表达水平明显高于CNE2-Vector和CNE2(P均＜0.01).结论 LMP2A高表达和β-catenin异常表达与鼻咽癌临床生物学行为进展密切相关,其机制可能与LMP2A上调β-catenin蛋白水平并促进其核转位有关.     

褪黑素抑制白介素-1β诱导的人脐静脉内皮细胞通透性

目的 观察褪黑素(MLT)对自介素-1B(IL-1β)诱导的内皮通透性改变的影响.方法 用不同浓度的IL-1β和MLT干预人脐静脉内皮细胞(HUVECs).用Transwell系统检测透过单层HUVECs的荧光标记的葡聚糖.用免疫荧光和Western blot检测HUVECs钙黏素(VE-cadhefin)的表达.结果...     

胃癌中E-cadherin、MMP-2的表达及侵袭转移机制

目的 通过检测E-cadherin和MMP-2蛋白在胃癌中的表达,探讨它们在肿瘤转移和侵袭过程中的作用.方法 取胃癌组织50例,正常胃黏膜10例;应用SP法免疫组化检测E-cadherin、MMP-2蛋白的表达.结果 (1)胃癌组织中E-cadherin蛋白的阳性表达率为46%(23/50),明显低于正常黏膜100%(10/10,P<0.001).转移组阳性表达率为35.29%(12/34)明显低于非转移组68.75%(11/16),差异有显著性(P<0.05).与临床分期、浸润分级的关系显示,Ⅲ-Ⅳ期和T3-T4级癌组织中E-cadherin蛋白表达分别明显低于Ⅰ-Ⅱ期和T1-T2级(P<0.05).E-cadherin表达还与组织学分级相关:胃癌分化程度低则阳性表达率也低;分化程度高则阳性表达率也高,差异有显著性(P<0.05).(2)MMP-2在胃癌组织中阳性表达率为74%(37/50),而正常胃黏膜上皮细胞中几乎无棕染颗粒,其差异有显著性(P<0.05).转移组MMP-2阳性表达率(82.35%)明显高于非转移组(56.25%,P<0.05).MMP-2的表达与组织学分级明显相关:随着胃癌分化程度降低,MMP-2阳性表达率升高(P<0.05);Ⅲ-Ⅳ期胃癌表达明显高于Ⅰ-Ⅱ期(P<0.05);T3-T4级MMP-2阳性表达率高于T1-T2级(P<0.001).(3)MMP-2与E-cadherin表达之间呈高度负相关(相关系数r=-0.368,P<0.009).结论 MMP-2在胃癌中均呈高表达,而E-cadherin则反之.E-cadherin蛋白表达减弱与胃癌侵袭转移潜能相关,可作为胃癌侵袭转移的生物学标志之一.     

Notch1在TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞转分化中的表达和意义

目的:探讨Notch1蛋白及其mRNA在TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞转分化(KTECT)中的动态表达及意义.方法:以体外培养的人近端肾小管上皮细胞株( HK-2)为研究对象,实验分为空白对照组及TGF-β1( 10 ng/mL)诱导组.加入TGF-β1作用后分别于12 h、24h、48 h及72 h在倒置相差显微镜下观察细胞形态的变化;用细胞免疫组化染色法检测α-平滑肌肌动蛋白( α-SMA)、E-钙黏连素(E-cadherin)和Notch1蛋白表达的变化;用RT-PCR法检测α-SMA mRNA、Ecadherin mRNA和Notch1 mRNA表达的变化.结果:与空白对照组相比较,在加入TGF-β1作用后12 h、24h、48 h及72h,TGF-β1诱导组α-SMA蛋白及其mRNA表达明显增加(P＜0 05);Notch1蛋白及其mRNA在TGF-β1作用后的24h、48h、72 h表达逐渐增加(P＜0.05);E-cadherin蛋白及其mRNA表达在24h、48 h、72 h明显减少(P＜0.05);Notch1蛋白及其mRNA的表达与E-cadherin蛋白及其mRNA的表达呈负相关(r蛋白=-0.937;rmRNA=-0.921;假设检验结果(P＜0.05),与α-SMA蛋白及其mRNA的表达呈正相关(r蛋白=0.958;rmRNA=0.944;假设检验结果(P＜0.05).结论:Notch1极有可能参与了TGF-β1诱导的KTECT.     

喉癌中血管内皮素-1的表达与血管内皮生长因子-C、淋巴管生成及预后的关系

目的:探讨血管内皮素-1(ET-1)在喉癌组织中的表达与血管内皮生长因子-C(VEGF-C)、淋巴管密度(LVD)、淋巴转移之间的关系及其在喉癌预后中的意义.方法:以45例经病理确诊的喉癌组织为实验组,20例喉良性病变组织为对照组,采用免疫组织化学SP法对上述组织中ET-1、VEGF-C蛋白的表达进行分析,同时采用5′-核苷酸酶-碱性磷酸酶双重染色法(5'-Nase-ALP)计数LVD,并结合临床病理特征和生存资料进行相关分析.结果:喉癌组织中ET-1和VEGF-C的表达均高于良性病变组织,且ET-1和VEGF-C的表达具有相关性;在喉癌组织中ET-1的表达与瘤内LVD和瘤周LVD、淋巴结转移、淋巴管浸润、TNM临床分期呈正相关,ET-1+/VEGF-C+、VEGF-C的表达与生存率呈负相关,其中ET-1+/VEGF-C+组具有高危死亡率.结论:ET-1促进喉癌淋巴管生成和淋巴管转移,ET-1信号途径和VEGF-C信号途径可能对喉癌淋巴管生成和转移有协同促进作用,联合检测ET-1和VEGF-C的表达可成为独立判断喉癌预后的新的生物学指标.     

p120-catenin缺失下调E-cadherin/β-catenin复合体在肺癌细胞系的表达

目的探讨catenin家族的重要成员p120-catenin(p120ctn)对E-cadherin介导的细胞粘附作用的调节及机制,检测在活体内外肺癌细胞系中p120ctn对E-cadherin/β-catenin复合体的调节作用。及其对肺癌细胞侵袭和转移能力的影响。方法应用siRNA技术建立p120ctn基因沉默的多种癌细胞系后,采用Western Blot,Transwell分析,裸鼠移植实验等方法进行检测。结果在成功干扰p120ctn表达的肺癌细胞系中,应用Western Blot和RT-PCR方法,我们观察到E-cadherin的蛋白表达出现不同程度的减弱,但mRNA的表达几乎没有变化;而β-catenin在蛋白和mRNA水平上都出现了明显的表达减弱。同时应用Transwell和裸鼠移植实验,我们在活体内外还观察到p120ctn缺失的肺癌细胞系具有较强的侵袭转移能力。结论肺癌细胞系中p120ctn的表达缺失可能通过下调E-cadherin和β-catenin的表达,参与肺癌细胞的侵袭和转移。     

甲状腺乳头状癌组织中E-cadherin、β-catenin 和cyclinD1蛋白表达及意义

目的 探讨甲状腺乳头状癌组织中E-cadherin、β-catenin和cyclinD1蛋白表达对其发生、发展的影响.方法 应用免疫组化EnVision法检测36例甲状腺乳头状癌组织、27例甲状腺腺瘤旁组织E-cadherin、β-catenin 和cyclinD1的蛋白表达,同时分析三者表达水平的变化与其它病理参数的关系.结果 E-cadherin在甲状腺乳头状癌的表达下降,阳性率为30.56%(P<0.05),与肿瘤淋巴结转移相关(P<0.01);β-catenin在癌组织中细胞核/核周区呈强阳性表达,且表达率明显升高为80.56%(P<0.01),其异常表达与肿瘤淋巴结转移相关(P<0.01);cyclinD1在癌组织中的阳性表达率为72.22%(P<0.01),与肿瘤淋巴结转移有关(P<0.05).此外,E-cadherin的低表达与cyclinD1的过表达呈负相关(P<0.05),β-catenin的异位高表达与cyclinD1的过表达呈正相关(P<0.05).结论 E-cadherin表达缺失和β-catenin异位高表达可能通过诱导cyclinD1的过表达,进而影响甲状腺乳头状癌的发生和发展.     

肺腺癌原发灶及其胸腔渗出液中MMP-2、E-cadherin和β-catenin的表达

目的　研究基质金属蛋白酶2(MMP 2)、上皮钙黏蛋白(E cadherin,E- cad)和β- 连环蛋白(β- catenin)在肺腺癌原发灶及其恶性胸腔渗出液中的表达和相关性及其与患者生存的关系。方法　采用免疫组织化学S- P法检测MMP 2、E cad和β- catenin在30例人原发性肺腺癌与肺腺癌并发的恶性胸腔渗出液中癌细胞表达的关系。结果　MMP 2、E cad和βcatenin在肺腺癌原发灶的阳性表达率分别低于恶性胸腔渗出液。肺腺癌原发灶中MMP 2、E- cad和β- catenin的表达与肺腺癌分化程度和淋巴结转移能力有关(P<0 .05);MMP 2和E -cad在原发灶中的表达呈负相关,在恶性胸腔渗出液中的表达无相关。E -cad和β-catenin在原发灶中的表达呈正相关,在恶性胸腔渗出液中的表达无相关。MMP 2阳性组肺腺癌患者的累积生存率低于MMP- 2阴性组(P<0 .05)。β- catenin阴性组肺腺癌患者的累积生存率低于β-catenin阳性组(P<0. 05)。结论　肺腺癌原发灶MMP 2的表达上调与E cad和β- catenin的表达下调在肺腺癌浸润、转移中起重要作用,可作为预测肺腺癌预后的指标之一。