安体康注射液体外抑瘤作用及对放化疗增效作用的研究

目的评价安体康注射液体外抑瘤作用及对荷瘤小鼠放化疗的增效作用。方法采用结晶紫比色法测定药物对人肺癌G6细胞、人胃腺癌MKN28细胞、人肝癌SMMC7721细胞的抑制作用,用IC50评测其效果。3个剂量给药组(0.45、0.90、1.80 g·kg-1)分别与环磷酰胺、顺氯氨铂、阿霉素合用,2个剂量给药组(0.90、1.80 g·kg-1)分别与60Co照射合用,与单用放化疗药物组比较瘤质量、抑瘤率、增效率。结果安体康注射液对G6、MKN28、SMMC7721细胞的IC50分别为0.381、0.365、0.371 mg·mL-1。合用药各组与相对应的放化疗药物单用组比较,平均瘤质量均小于单用药组,且差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论安体康注射液对G6、MKN28、SMMC7721细胞的生长有较强的抑制作用,对荷瘤小鼠环磷酰胺、顺氯氨铂、阿霉素化疗和60Co放疗有增效效应。     

胞嘧啶脱氨酶基因与前体药物5-氟胞嘧啶对人肝癌的基因治疗作用(英文)

目的:探讨胞嘧啶脱氨酶基因(CD)与前体药物5-氟胞嘧啶(Flu)对肝癌的抗肿瘤作用,方法:应用逆转录病毒法,将CD基因转导入肿瘤细胞,体外应用克隆分析法测定Flu对肿瘤细胞的细胞毒性;应用裸鼠移植瘤模型研究CD基因/Flu体系对肝癌的抗肿瘤作用,结果:前体药物Flu对人肝癌在体外和裸鼠体内具有明显的抗癌作用.与5-氟尿嘧啶10 mg·kg~(-1)相比,前体药物Flu 500 mg·kg~(-1)对裸鼠肝癌移植瘤有更强的抗癌作用.CD基因/Flu对人肝癌裸鼠移植瘤具有旁观者杀伤效应.结论:CD基因/Flu体系在治疗肝癌中有潜在的价值。     

异甘草素和3-甲氧基异甘草素对人肝癌Bel-7402细胞的抗癌活性

<正>肝癌多药耐药(MDR)不仅限制了化疗效果,也是导致肝癌复发转移的重要原因,如何逆转多药耐药性已是肿瘤药物干预研究的热点。人肝癌Bel-7402细胞株作为一种体外模型,在新型抗癌候选药物研究中较为常用。国内学者利用此种模型从天然药物中筛选出了对肝癌Bel-7402细胞具有明显抑制活性的黄芩苷、虫草素、蜂毒素、蛇葡萄素、川芎嗪等天然活性成分,并探讨其在肝癌的辅助治疗、逆转耐药性等方面的应用价值[1-4]。本课题组研究发现,甘草查耳酮成分异甘草素(isoliquiritigenin,ILG)对人宫颈癌SiHa细胞具     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子在肝癌细胞7721中对多药耐药的调节作用

目的采用2种方法构建人肝癌多药耐药细胞模型,封闭其细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)(CD147)的表达,研究其生物学特性。探讨EMMPRIN在肝癌细胞中对多药耐药的作用。方法应用人肝癌细胞株7721,采用浓度梯度诱导法和高浓度阿霉素间接诱导法构建人肝癌多药耐药细胞模型(7721/Adm1和7721/Adm2细胞),应用RNAi技术封闭7721/Adm1和7721/Adm2细胞EMMPRIN的表达,构建封闭EMMPRIN的人肝癌多药耐药细胞7721/Adm1/RNAi和7721/Adm2/RNAi细胞。用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、流式细胞技术检测EMMPRIN、细胞表面多药耐药基因(MDR-1)mRNA及其表达产物的表达水平。噻唑蓝(MTT)法检测上述各细胞的多药耐药性。结果 2种多药耐药模型可用于肝癌多药耐药研究。多药耐药细胞7721/Adm1和7721/Adm2中EMMPRIN,MDR-1的表达水平较7721细胞均升高,且增加了其对多种化疗药物的耐药性。而利用RNAi封闭EMMPRIN的7721/Adm1和7721/Adm2细胞可致MDR-1表达降低,增加了其对化疗药物的敏感性。结论 EMMPRIN是参与肝癌细胞7721多药耐药且为调节多药耐药的重要分子。     

一氧化氮供体JS-K联合阿司匹林促进人肝细胞癌细胞凋亡

目的 研究一氧化氮供体(JS-K)与阿司匹林联合用药协同诱导人肝细胞癌(肝癌)HepG2和SMMC7721细胞凋亡的作用.方法 人肝癌HepG2和SMMC7721细胞分别设立细胞对照组(只加等量二甲亚砜,终浓度<0.01％)、JS-K 5μmol·L-1组、阿司匹林5,10和20 mmol·L-1组、JS-K 5μmo...     

片仔癀调控膜联蛋白A1/VEGF通路对人肝癌细胞系HepG2作用的影响

目的研究片仔癀对人肝癌细胞系HepG2作用的影响,并探讨其作用机制。方法培养人肝癌细胞HepG2,将细胞分为空白对照组(Normal)、片仔癀不同浓度剂量组(浓度分别为1、10、100 mg·L~(-1)),药物作用24 h后,收集细胞进行以下相关检测:MTT比色法检测不同浓度片仔癀对HepG2细胞活性的影响;集落形成实验观察细胞存活能力;Western blot法检测凋亡相关指标Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9的表达,膜联蛋白A1/VEGF通路相关指标(ANXA1、VEGF、VEGFR、NF-κB p50);结果与空白对照组比较,不同浓度片仔癀能够抑制体外人肝癌细胞株HepG2细胞活性,抑制细胞集落形成,促进HepG2细胞凋亡蛋白表达,促进细胞ANXA1蛋白表达,抑制VEGF、VEGFR表达,及抑制核蛋白NF-κBp50表达;结论片仔癀能够抑制体外人肝癌细胞株Hep G2活性,其主要作用机制与促进Hep G2细胞凋亡蛋白,促进细胞ANXA1蛋白,抑制VEGF/VEGF受体,及NF-κB信号通路相关。     

广西眼镜蛇毒蛋白Natrin在体外诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡作用的研究

目的观察广西眼镜蛇毒蛋白Natrin在体外对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖抑制作用及凋亡诱导作用。方法以不同浓度的Natrin作用于SMMC-7721细胞24 h后,用MTT法检测细胞的生长抑制率;AO/EB双染色法、透射电子显微镜法观察细胞凋亡、流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期。结果 Natrin对人肝癌SMMC-7721细胞有体外抑制作用,随着药物浓度的增大抑制率也随之增大,24 h半数抑制浓度IC50为138.69 mg·L-1;给药后,荧光显微镜下与透射电子显微镜下细胞呈现典型的凋亡形态改变;流式细胞仪检测到随着药物浓度的增大凋亡百分数也随之增大;Natrin能诱导SMMC-7721细胞发生S期和G2/M期阻滞。结论Natrin在体外能抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖并诱导其凋亡。     

川陈皮素对肝癌细胞的抑制作用

目的 研究川陈皮素对肝癌细胞的抑制作用.方法 不同浓度的川陈皮素作用于人肝癌细胞SMMC-7721细胞,用MTF法、细胞生长曲线实验研究其对SMMC-7721细胞的生长抑制作用,Giemsa染色观察细胞形态变化,初步研究其体外抑瘤作用;建立小鼠H22肝癌移植性实体瘤模型,研究川陈皮素对肝癌的体内抑制作用.结果 MTT法提示川陈皮素为2～128mg·L-1时,对SMMC-7721的48 h抑制率为3%～80%,IC50为26.2 mg·L-1;生长曲线提示,川陈皮素对SMMC-7721细胞的抑制作用呈明显时效和量效关系;Giemsa染色后细胞、细胞核出现明显的凋亡形态学变化;体内实验表明,川陈皮素500 mg·kg-1,ig给药10 d,对小鼠移植性肿瘤H22抑制率为48.35%(P＜0.01),并呈剂量依赖性.结论 川陈皮素对人肝癌细胞SMMC-7721具有明显体外抗增殖作用,对小鼠移植性肿瘤H22有一定的抑制作用.     

新化合物2-[(4-苄氧基)苯胺基]-6-环己胺基嘌呤的体外抗肿瘤活性

目的研究新化合物2-[(4-苄氧基)苯胺基]-6-环己胺基嘌呤(S701)的体外抗肿瘤活性。方法采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法),检测S701在1⁵0μmol·L-1浓度范围内对人肺癌A549细胞、人结直肠腺癌Lo Vo细胞和人肝癌BEL-7402细胞存活率的影响,计算半数抑制浓度(IC50),并观察相应的细胞形态学变化。结果在150μmol·L-1浓度范围内对人肺癌A549细胞、人结直肠腺癌Lo Vo细胞和人肝癌BEL-7402细胞存活率的影响,计算半数抑制浓度(IC50),并观察相应的细胞形态学变化。结果在1⁵0μmol·L-1浓度范围内,S701作用24 h对人肺癌A549细胞、人结直肠腺癌Lo Vo细胞和人肝癌BEL-7402细胞存活率均表现出不同程度的抑制作用,且呈现出一定的浓度依赖趋势。S701 A549细胞、Lo Vo细胞和BEL-7402细胞的IC50分别为13.43、28.56、13.02μmol·L-1。形态学结果显示,S701对上述三种肿瘤细胞均有不同程度的杀伤作用,其作用随浓度的增加而增强。结论新化合物S701可抑制A549细胞、Lo Vo细胞和BEL-7402细胞的生长,在体外具有一定的抗肿瘤活性。     

板蓝根高级不饱和脂肪组酸的体外抗人肝癌BEL-7402细胞活性

目的 :研究板蓝根高级不饱和脂肪组酸体外抗人肝癌BEL 74 0 2细胞的活性。方法 :MTT法测定细胞毒作用 ,集落形成实验观察药物对肝癌细胞增殖的抑制作用 ,PCR ELISA试剂盒测定细胞的端粒酶活性。结果 :板蓝根高级不饱和脂肪组酸能抑制BEL 74 0 2细胞的增殖 ,其IC50 为 0 6mg·mL-1,有促使肿瘤细胞向正常细胞逆转的趋势 ,可降低端粒酶活性的表达。结论 :板蓝根高级不饱和脂肪组酸具有体外抗肿瘤活性     

虎杖白藜芦醇对人肝癌HepG-2细胞株增殖和生长周期的影响

目的探讨虎杖中白藜芦醇对人肝癌Hep G-2细胞株增殖和生长周期的影响。方法采用微波辅助法提取虎杖中白藜芦醇,将12.5,25.0,50.0,100.0μmol·L-1白藜芦醇作用人肝癌Hep G-2细胞,采用噻唑蓝(MTT)法检测虎杖中白藜芦醇对肝癌细胞Hep G-2细胞抑制增殖作用,在倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,流式细胞术(FCM)检测细胞周期的分布。结果虎杖中白藜芦醇能显著抑制Hep G-2细胞的生长,并呈现时间-浓度依赖性。流式细胞仪结果显示,白藜芦醇作用于细胞Hep G-2且细胞被阻滞于S期,呈现出剂量依赖性。不同药物浓度白藜芦醇(12.5,25.0,50.0,100.0μmol·L-1)作用人肝癌Hep G-2细胞株48 h后,随着药物浓度的增大,G0/G1期的比例逐渐减小,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。而实验组细胞S期的比例随着浓度增大而增加,分别达到(44.82±1.21)%,(54.00±1.71)%,(65.21±3.66)%,(77.50±4.21)%,与对照组(34.75±3.92)%比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论虎杖中白藜芦醇能明显抑制肝癌Hep G-2细胞的增殖,并诱导其细胞凋亡,可引起肝癌Hep G-2细胞的S期阻滞。     

小白菊内酯对人肝癌细胞HepG-2细胞Caspase-3和NF-κB蛋白表达的影响

目的:研究小白菊内酯对人肝癌细胞HepG-2增殖抑制和诱导凋亡作用的机制.为小白菊内酯在临床上早日应用于肝癌患者提供理论及实验依据.方法:用体外培养的方法培养人肝癌HepG-2细胞;用四唑盐(M TT)比色法检测小白菊内酯对人肝癌HepG-2细胞的抗增殖及细胞毒作用;用倒置显微镜、HE染色光学显微镜;用免疫组织化学染色法检测小白菊内酯作用人肝癌HepG-2前后Caspase-3、NF-κB蛋白阳性表达变化的情况.通过以上实验研究小白菊内酯在体外对人肝癌HepG-2在细胞增殖、细胞凋亡等方面的影响及其作用机制.结果:(1)MTT法结果显示:小白菊内酯对人肝癌HepG-2细胞的作用影响具有浓度和时间依赖性;(2)细胞形态学观察:倒置显微镜观察到对照组细胞贴壁生长,伸展性良好,细胞呈梭形和多角形,细胞之间连接紧密.小白菊内酯作用人肝癌HepG-2 24h以后,增殖速度减慢,细胞贴壁能力下降,细胞之间连接疏松.药物作用48h以后,增殖速度大大减慢,大部分细胞变圆漂浮在培养瓶中.药物作用72h以后,几乎无活细胞,并且可见死细胞碎片;HE染色光学显微镜下观察:对照组细胞呈梭形和多角形,细胞之间连接紧密,细胞胞浆丰富,细胞核完整;药物作用24h以后,细胞伸展减弱,有一部分细胞呈现圆形,细胞之间连接疏松,核浓缩,染色质出现边聚;药物作用48h后视野中可见凋亡细胞和死亡细胞,细胞浆浓缩、染色质浓缩成新月形和“出泡”现象的变化;(3)免疫组化结果显示:实验组Caspase-3表达增加,NF-κB表达降低,与对照组相比具有显著性差异(P＜0.05).结论:小白菊内酯对人肝癌HepG-2细胞有明显的抑制增殖作用,呈现出浓度和时间的依赖性;小白菊内酯对人肝癌HepG-2细胞株有诱导凋亡作用,其诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡机制可能与NF-kB、Caspase-3等信号转导有关.     

红枣多糖对人肝癌 HepG2细胞的抑制作用

目的：研究红枣多糖对体外培养肝癌细胞增殖的抑制作用并初步探究其可能的作用机理。方法采用M T T法测定红枣多糖对体外培养的人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用;流式细胞术检测红枣多糖对人肝癌细胞HepG2周期和凋亡的影响;Real time RT-PCR检测红枣多糖对人肝癌细胞HepG2中Bcl-2和caspase3 mRNA表达的影响。结果 MTT检测发现随着药物浓度的增高OD值呈现梯度递减,红枣多糖对 HepG2的IC50＝13 mg／mL ,最高浓度40 mg／mL下所得最大抑制率为68．79％;流式细胞仪检测细胞凋亡结果可见早期凋亡率随药物浓度的增加而变大;流式细胞周期分析结果可见G0-G1期细胞数逐渐增多,S期细胞数有下降趋势,并有剂量依赖性;Real time RT-PCR检测发现Bcl-2凋亡抑制基因mRNA表达随药物浓度增高而降低,而凋亡关键基因caspase-3 mRNA的表达随药物浓度增高而升高。结论红枣多糖对体外培养的肝癌细胞增值具有抑制作用,将肝癌细胞HepG2阻滞于G1期,并通过下调Bc 1-2而上调caspase-3 mRNA表达诱导 HepG2细胞凋亡。     

小分子靶向肽（RGD）2C与力达霉素的偶联物抗肿瘤作用研究

目的：考察小分子靶向肽（RGD）：C与力达霉素的偶联物的抗肿瘤作用。方法：MTr法观察偶联物和力达霉素在体外对人口腔鳞癌KB细胞、人乳腺癌MCF-7细胞以及人肝癌Bel7402细胞的细胞毒性。克隆形成法观察其对人肝癌Bel7402细胞克隆形成的抑制作用。采用C57BIM6小鼠Lewis肺癌移植瘤模型观察其实验治疗作用。结果：MrlT法结果表明,偶联物对人口腔鳞癌KB细胞、人肝癌Bel7402细胞和人乳腺癌MCF-7细胞的细胞毒性比力达霉素分别下降13倍、46倍和186倍。克隆形成法表明．偶联物对人肝癌Bel7402细胞的克隆形成抑制率比力达霉素下降10倍。0．2,0．1,O．05mg·kg-1偶联物对C57BL／6小鼠Lewis癌皮下原发瘤的生长抑制率分别为35．8％,25．6％和10．3％;0．05mg·kg-1素对肿瘤生长的抑制率为32．4％。0．2,0．1,0．05mg·kg-1偶联物对小鼠Lewis癌肺转移的抑制率分别为69．6％,50．5％和34．2％,0．05mg·kg-1达霉素、0．05mg·kg-1力达霉素＋1mg·kg-1（RGD）：C肽的抑制率分别为53．3％和54．9％。结论：按等细胞毒性剂量来计算,偶联物体内抗肿瘤活性和抗肿瘤转移活性比力达霉素强,提示小分子靶向肽RGD与力达霉素偶联后发挥了一定的导向作用。     

α-双炔失碳酯的体外抗肿瘤作用及阻断细胞G_1期(英文)

α-双炔失碳酯(α-Ano)对体外培养的小鼠肝癌细胞和P388细胞的生长均有抑制作用,20μg·ml~(-1)药物对小鼠肝癌细胞的DNA和RNA的合成均有明显抑制作用,利用抽提的小鼠肝癌细胞核进行RNA转录的无细胞系统实验,证明α-Ano对RNA聚合酶无影响,细胞动力学的研究资料表明,α-Ano能使P388细胞阻断在G-1/G_0期,使它们不能进入到S期,从而抑制了P388细胞的增殖。     

聚谷氨酸天冬氨酸顺铂复合物的体内毒性和抑瘤活性

目的:研究聚谷氨酸天冬氨酸顺铂复合物(PGA-Asp-CDDP)的体内毒性和抑瘤活性。方法:采用透析法、MMT法、昆明鼠和BALB/c裸鼠SMMC-7721肝癌模型检测PGA-Asp-CDDP的缓释作用,细胞毒性,体内毒性和抑瘤活性。结果:PGA-Asp-CDDP的10 h时顺铂累计释放率为32%,与人肝癌细胞SMMC-7721孵育72 h的IC50为(45.5±10.3),累计给药为12 mg·kg-1时体内毒性显著下降,并且对肝癌模型有显著抑瘤效果(P<0.01)。结论:聚谷氨酸天冬氨顺铂复合物有望成为治疗肝癌的一种安全有效的药物。     

腺苷对肝癌细胞自噬和增殖的作用

目的研究腺苷对肝癌细胞增殖和自噬的作用。方法腺苷作用于HepG2细胞,CCK-8法观察细胞增殖的变化,Western blot研究LC3-Ⅱ和LC3-Ⅰ蛋白的表达,MDC染色观察自噬体数量。结果腺苷(1.0~4.0 mmol·L~(-1))作用于HepG2细胞,在12、24、48 h可明显抑制细胞增殖(P<0.01)。低浓度腺苷(0.2、0.5、1.0 mmol·L~(-1))处理细胞24h,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ明显降低,腺苷(1.0 mmol·L~(-1))对HepG2细胞自噬抑制作用最强(P<0.01),高浓度腺苷(4 mmol·L~(-1))反而增强Hep G2细胞内自噬(P<0.05)。腺苷(1.0mmol·L~(-1))作用细胞24 h,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值在6、12、24 h检测点明显降低,MDC染色显示自噬体减少,在12 h检测点发现LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ最低(P<0.01),自噬体基本消失。结论腺苷抑制肝癌细胞增殖,低浓度腺苷抑制细胞自噬,高浓度腺苷促进细胞自噬,对提高肝癌药物的治疗效果有重要意义。     

没药甾酮下调PXR/P-gp通路逆转肝癌化疗耐药机制

目的 研究没药甾酮(guggulsterone, GS)能否通过调控孕烷X受体(pregnane X receptor, PXR)/P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)通路增强化疗药物对人肝癌细胞增殖抑制和凋亡诱导作用。方法 以人肝癌细胞HepG2为研究对象,检测GS、化疗药物顺铂(cis-platinum, DDP)和5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-FU)单独或联合使用对HepG2细胞增殖、凋亡、MDR1 mRNA转录,及PXR/P-gp通路的调控作用。结果 与DDP、5-FU单药组相比,联用GS(30μmol·L^-1)24 h明显增强DDP、5-FU对HepG2细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用。与5-FU单药组相比,联用GS(30μmol·L^-1)24 h明显下调PXR、P-gp表达和MDR1 mRNA转录水平。进一步研究发现,PXR激动剂利福平能够诱导PXR和P-gp表达,与GS联用后,PXR和P-gp明显下调;PXR抑制剂酮康唑能够抑制PXR/P-gp表达,与GS联用后,PXR和P-gp进一步下调。结论...     

葛根素对γδT细胞杀伤肝癌SMMC-7721细胞的影响

目的探讨葛根素对人γδT细胞杀伤肝癌SMMC-7721细胞的影响及机制。方法异戊烯焦磷酸法(isopentenylpyrophosphate,IPP)体外扩增人外周血γδT细胞,不同浓度葛根素作用于γδT细胞24,48,72 h,CCK8法检测葛根素对γδT细胞增殖率的影响,FCM检测γδT细胞穿孔素(perforin,PFP)、颗粒酶B(granzyme B,Gra B)及CD107a的表达情况,LDH释放法检测γδT细胞对肝癌SMMC-7721细胞的杀伤活性,Western blot法检测γδT细胞中P-ERK1/2和Bcl-2的表达情况。结果葛根素作用人γδT细胞48 h后,葛根素1.6~100μmol·L?1浓度组的γδT细胞增殖明显(P<0.05),葛根素12.5~50μmol·L?1浓度组人γδT细胞PFP、Gra B及CD107a表达明显高于对照组(P<0.05),葛根素3.125~50μmol·L?1浓度组人γδT细胞P-ERK1/2和Bcl-2表达显著增高(P<0.05),且葛根素3.125~50μmol·L?1浓度组人γδT细胞对肝癌SMMC-7721细胞杀伤活性较对照组明显增强(P<0.05)。结论葛根素能够促进人γδT细胞增殖,并能够提高γδT细胞对肝癌SMMC-7721细胞的杀伤活性,其机制可能与上调γδT细胞表面的PFP,Gra B和CD107a的表达及活化P-ERK1/2和Bcl-2的表达有关。     

龙胆苦苷等6种中草药提取物对SMMC-7721人肝癌细胞增殖的影响

目的　研究龙胆苦苷等 6种中药有效成分对 SMMC- 772 1人肝癌细胞增殖的影响。方法　 MTT法测定不同浓度的 SMMC- 772 1人肝癌细胞活力 ,观察药物对癌细胞增殖的影响。结果　 10 2 ,10 4和 10 6nmol.L-1的土贝母皂苷、10 4nmol.L-1和 10 2 nmol.L-1的龙胆苦苷、10 2 nmol.L-1的白屈菜红碱、 3个不同浓度的血根碱及 1g.L-1的败酱草提取物作用于细胞 4 8h后对细胞具有明显的杀伤效应 ;10 mg.L-1的败酱草提取物和 1g.L-1和 10 mg.L-1的威灵仙提取物对肝癌细胞具有促生长作用。结论　龙胆苦苷、土贝母皂苷、白屈菜红碱和血根碱能抑制 SMMC- 772 1人肝癌细胞增殖 ;败酱草提取物能促进肝癌细胞增殖 ;低浓度威灵仙提取物抑制、高浓度促进肝癌细胞增殖。