温阳补肾方对去卵巢大鼠骨密度及骨标志物的影响

目的探讨温阳补肾方对去卵巢大鼠骨密度及骨标志物的影响。方法取3月龄健康雌性SD大鼠40只,随机分为正常组、对照组、模型组和治疗组,每组10只。正常组大鼠行假手术,其余3组大鼠行双侧卵巢摘除术,术后30 d开始治疗,治疗组大鼠灌胃给予温阳补肾方,对照组大鼠给予戊酸雌二醇,治疗组及对照组大鼠各自按1 mL·100 g-1体质量灌胃;正常组和模型组大鼠每日按体质量给予同等剂量的生理盐水。于给药治疗12周后测定血清中骨原交联水平及Ⅰ型胶原N端前肽(PINP)、碱性磷酸酶(AKP)、钙和磷的水平;骨密度测量仪测骨密度。结果与正常组比较,模型组大鼠PINP水平明显升高,骨原交联水平下降,差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,治疗组大鼠骨原交联水平升高,PINP水平降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。与对照组比较,模型组大鼠血清AKP水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,治疗组大鼠血清AKP水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组和正常组比较,模型组大鼠骨密度明显下降(P<0.05);与模型组比较,治疗组大鼠骨密度明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论温阳补肾方能提高血清中AKP的水平,增加骨密度,抑制骨吸收,促进骨形成,具有防治骨质疏松症的作用。     

补肾活血方对大鼠子宫内膜细胞病理形态学及凋亡的影响

目的：探讨补肾活血方治疗子宫内膜异位症的细胞凋亡机制。方法：以雌性8～12周龄Wistar大鼠建立大鼠子宫内膜异位症模型,随机分为模型组、中药低剂量组、中药高剂量组及西药组,每组6只,共干预4周。采用光镜、电镜、TUNEL法检测药物干预前后模型大鼠异位及在位子宫内膜的病理形态学及凋亡细胞的阳性率。结果：①与模型组比较,各治疗组均有不同程度抑制异位内膜生长的作用,并可观察到异位内膜组织中典型的细胞凋亡形态学变化：细胞核固缩,染色质凝集,核破裂及凋亡小体形成等,其中以中药高剂量组及西药组的改变最明显,其次为中药低剂量组。②对在位子宫内膜进行镜下观察发现：中药组与正常的子宫内膜结构基本相同,表现为腺体及间质生长良好,腺上皮及黏膜上皮呈高柱状,间质密集,而西药组呈萎缩性改变,腺上皮萎缩,黏膜上皮呈扁平状,间质减少。③与模型组和中药低剂量组比较,中药高剂量组、西药组大鼠异位子宫内膜细胞平均凋亡指数升高,差异有统计学意义（P〈0.01）。与西药组比较,中药高剂量组异位子宫内膜细胞平均凋亡指数升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。西药组大鼠在位子宫内膜细胞平均凋亡指数较模型组、中药低剂量及中药高剂量组明显升高,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：子宫内膜异位症的发生与细胞凋亡能力的下降有关;补肾活血方能促进异位内膜细胞发生凋亡,使异位病灶萎缩、消退,而对在位子宫内膜无不良影响。     

补肾活血方对大鼠子宫内膜异位症血管生长因子等影响的研究

目的探讨血管内皮生长因子 (VEGF)、转化生长因子 (TGF—β)在子宫内膜异位症 (EM)发病机制中的作用及相互关系 ,观察补肾活血方对两因子的影响及对EM的治疗作用。方法采用种植内膜方法建立EM动物模型 ,拟补肾活血方治疗 ,用丹哪唑对照 ,以免疫组化SP法检测VEGF、TGF—β在异位内膜组织中的表达。结果补肾活血方能降低VEGF、TGF—β在异位内膜组织中表达 ,与模型组比较有统计学差异 (P <0 .0 5 ) ;VEGF、TGF—β在EM中表达呈正相关。 结论VEGF、TGF—β在EM发生发展中起重要作用 ,补肾活血方可通过调节两因子的表达来抑制异位内膜的生长。     

去卵巢大鼠成骨细胞雌激素受体表达的研究

目的 观察研究去卵巢SD大鼠成骨细胞内雌激素受体(ER)表达水平的变化规律.方法 SD雌性大鼠随机分为正常对照组和去卵巢(OVX)后第5周组、第7周组;采用二次酶消化、反复贴壁法分离纯化培养大鼠颅骨成骨细胞,进行钙钴法碱性磷酸酶(ALP)染色,I型胶原免疫组化染色来观察、鉴定大鼠成骨细胞.应用半定量Western blot对各组SD大鼠成骨细胞内雌激素受体进行检测.结果 通过ALP染色、I型胶原免疫组化及形态学观察符合成骨细胞特征.western blot显示雌激素受体表达OVX组明显低于正常组,第7周组低于第5周组.结论 随着去卵巢后时间延长,成骨细胞表达的雌激素受体下降,骨质疏松风险变大.     

补肾活血方对大鼠卵巢局部VEGFmRNA表达的影响

目的探讨补肾活血方对大鼠多束卵巢形成中血管内皮生长因子的基因表达(VEGFmRNA)的影响。方法选用未成年24 d龄SD雌性大鼠60只,随机分为模型对照组、西药对照组、补肾活血方高剂量组、补肾活血方低剂量组、正常对照组5组。用Bogovich法建立大鼠多囊卵巢病理模型。以克罗米酚为对照,用原位杂交法观察补肾活血方对多囊卵巢大鼠局部VEGFmRNA的影响。结果模型组卵巢局部VEGFmRNA存在颗粒细胞、卵泡膜细胞、间质细胞及血管内皮细胞表达的显著增高。用补肾活血方高、低剂量和西药对照治疗后,卵巢局部VEGFmRNA的表达明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01),说明补肾活血方高、低剂量组与西药组对VEGFmRNA的表达具有抑制作用。补肾活血方高、低剂量组与西药组比较,高剂量组抑制作用优于西药组,差异具有显著统计学意义(P<0.01);低剂量组与西药组比较差异无统计学意义(P>0.05),补肾活血方高、低剂量组比较,高剂量组抑制作用优于低剂量组,差异具有显著统计学意义(P<0.05)。结论VEGFmRNA可能参与多囊卵巢综合征的发病机制有关。以补肾活血立法的补肾活血方能降低多囊卵巢大鼠局部VEGFmRNA的显著增高表达,降低VEGFmRNA在卵巢局部的作用。提示补肾活血方可能通过VEGFmRNA途径切入卵泡发育、促卵泡优势化、卵泡成熟、基质降解、诱发局部类炎症反应,使排卵成功。     

补肾化瘀方对多囊卵巢模型大鼠子宫内膜胞饮突及ER、PR蛋白表达的影响

目的:观察补肾化瘀方对多囊卵巢模型大鼠子宫内膜胞饮突及雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)蛋白表达的影响。方法:100只SD大鼠随机选取30只为空白对照组;另70只为模型制备组,均以颈背部皮下注射脱氢表雄酮(dehydroepiandrostexone,DHEA)溶液建立多囊卵巢模型大鼠。造模成功后,随机分为模型对照组、达英-35组、补肾化瘀方组,分别给予蒸馏水、达英-35及补肾化瘀方对大鼠灌胃给药,连续灌胃21 d,停药7 d为1个周期,3个周期后停药。按雌雄鼠11合笼,并于妊娠第4天处死大鼠。采用扫描电镜观察各组多囊卵巢模型大鼠子宫内膜胞饮突表达,免疫组化法检测大鼠子宫内膜ER、PR蛋白的表达。结果:补肾化瘀方可提高多囊卵巢模型大鼠胞饮突的表达,与空白对照组、模型对照组、达英-35组比较,补肾化瘀方组大鼠子宫内膜表面微绒毛低矮,局部消失,可见大量胞饮突,表面光滑,形态基本规则,边界清楚。ER表达:与空白对照组比较,模型对照组、达英-35组、补肾化瘀方组分别0.491±0.020、0.379±0.014、0.383±0.019,高于空白对照组,差异有显著统计学意义(P<0.01);与模型对照组比较,达英-35组、补肾化瘀方组低于模型对照组,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。PR表达:与空白对照组比较,模型对照组、补肾化瘀方组分别为0.292±0.02、0.215±0.012,显著高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.01),达英-35组为0.210±0.014,高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);与模型对照组比较,达英-35组、补肾化瘀方组低于模型对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾化瘀方可提高多囊卵巢模型大鼠子宫内膜胞饮突的表达,降低ER、PR蛋白水平,这可能是其改善子宫内膜容受性的机制之一。     

补肾方对去卵巢大鼠学习记忆的调整作用

目的　探讨补肾方对去卵巢大鼠学习记忆的调整作用 ,为中医“肾”与“智”的关系及补肾治疗阿尔茨海默病 ( Alzheimer's disease,AD)提供实验基础。方法　将雌性 SD大鼠 4 0只 ,随机分成卵巢切除组、假手术组、卵巢切除 +补肾方治疗高、低剂量组。治疗 12周 ,测定各组动物血清雌二醇 ( E2 )、血清钙含量 ;Y -电迷宫检测学习记忆能力 ;测定海马组织乙酰胆碱 ( Ach)含量、乙酰胆碱酯酶 ( Ach E)活性 ;HE染色观察海马组织形态学变化。结果去卵巢 18周 ,大鼠学习记忆力明显下降 ;海马组织 Ach含量下降 ;海马锥体细胞层、分子层、多形细胞层细胞浓缩 ,出现大小不同空泡 ,锥体细胞顶树突消失 ,细胞排列紊乱 ,嗜银染色可见神经纤维增粗 ,大脑皮质颞叶出现老年斑。补肾方能提高血清 E2 、血清钙水平 ( P<0 .0 5 ) ,明显提高学习记忆成绩 ,并能提高海马组织 Ach含量及 Ach E活性 ( P<0 .0 5 ) ,对海马神经元的变性具有明显的改善作用。结论　补肾方对雌激素缺乏所致的学习记忆能力下降具有明显的改善作用 ,其机制可能是通过提高血清 E2 水平 ,调节 Ca,P代谢 ,从而提高中枢胆碱能神经系统功能实现的     

益气补肾活血方对失用性骨质疏松模型大鼠BMD、BGP、BAP的影响

目的观察益气补肾活血方对失用性骨质疏松大鼠骨密度(BMD)、大鼠骨钙素(BGP)、大鼠骨特异性碱性磷酸酶(BAP)等指标的影响。方法将假手术大鼠作为空白对照组,大鼠右侧股骨骨折后石膏固定的方法建立废用性骨质疏松模型,分为益气补肾活血方组、钙尔奇组、模型对照组。灌胃给药60 d后,骨密度仪检测BMD、骨矿盐(BMC),ELISA法检测血清中BGP、BAP的含量。结果益气补肾活血方组与钙尔奇组全身及股骨BMD及BMC均显著高于模型对照组(P0.05),两组之间比较,差异无统计学意义(P0.05);模型对照组血清BGP最低,与其他组比较差异有统计学意义(P0.05);益气补肾活血方组与钙尔奇组均能降低血清中BAP含量,与模型对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论益气补肾活血方能够有效防止失用性骨质疏松模型大鼠的骨量丢失,并能有效抑制骨吸收的发生,促进骨形成。     

补肾活血方对大鼠佐剂性关节炎疗效的实验研究

目的观察补肾活血方对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用,并探讨其作用机制。方法将48只大鼠,按体重随机分为补肾活血方高剂量组(高剂量组)、补肾活血方中剂量组(中剂量组)、补肾活血方低剂量组(低剂量组),雷公藤组,模型组,正常对照组,每组8只。除正常对照组外,各组用完全弗氏佐剂造模,造模后各治疗组给补肾活血方水溶液灌胃,雷公藤组用雷公藤多苷片水溶液灌胃,正常对照组用蒸馏水灌胃。观测关节炎指数(AI)、足跖肿胀厚度、体重(W)的改变,测定血清免疫球蛋白(IgG、IgM)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)的含量。结果与模型组比较,补肾活血方各治疗组抑制左、右足跖肿胀和AI升高,TNF-α、IgG、IgM、IL-1的含量明显下降(P0.01,P0.05)。结论补肾活血方有治疗大鼠佐剂性、继发性关节炎的作用,其机制可能与抑制自身免疫的病理性反应有关。     

穴位激光照射对去势大鼠子宫雌激素受体mRNA表达的影响

目的 探讨雌激素水平降低对子宫雌激素受体基因表达的影响,以及穴位激光照射肾俞穴对去卵巢大鼠子宫雌激素受体基因表达的调整作用.方法 选用3月龄Sprague-Dawley雌性大鼠,将动物分为正常对照组(Nor),去卵巢组(OVX)和去卵巢穴位激光照射组(OVX+L)3组.采用半定量RT-PCR方法获得大鼠子宫雌激素受体α(ERα)和雌激素受体β(ERβ)mRNA的逆转录表达产物cDNA,用琼脂糖凝胶电泳方法检测,计算机图像分析系统进行统计分析.结果 与正常对照组比较,去卵巢组大鼠子宫内ER αmRNA的RT-PCR表达产物减少(P<0.05),ER βmRNA的RT-PCR表达产物增加(P<0.05);与去卵巢组相比,去卵巢穴位激光照射组大鼠子宫内ER αmRNA的RT-PCR产物升高(P<0.05),ER βmRNA的RT-PCR产物增加(P<0.05).结论 大鼠去卵巢后,子宫ER α的表达水平显著下降,穴位激光照射对去势大鼠子宫ERmRNA的表达有一定的调节作用.可能与穴位激光照射对去势大鼠生殖内分泌系统的调节有关.     

外源性雌激素对去卵巢大鼠抗氧化能力及海马神经元线粒体的影响

目的用去卵巢大鼠作为雌性更年期的动物模型,探讨补充外源性雌激素对血清抗氧化能力、海马神经元线粒体形态结构的影响及与凋亡的关系.方法用HE染色和电子显微镜观察海马神经元细胞形态和线粒体超微结构的变化,用荧光显微镜检测海马神经元的凋亡,用生化法和RIA测定血清中MDA、SOD和E2等指标.结果未补E2组海马神经元线粒体出现损伤,补充大剂量E2组,其形态基本正常;血清中MDA、SOD与E2浓度呈负相关;未补充E2组海马神经元凋亡明显,随着补充剂量增加,凋亡逐渐减少.结论外源性E2对海马区神经元的保护作用,可能与血清抗氧化能力提高,减少线粒体损伤和海马神经元凋亡有关.     

The effect of estrogen on the Restoration of bone mass and bone quality in ovariectomized rats

Thereareabundantlyevidencesboneexperiencesarapidlossaftermenopause.Althoughthisbonelosswasconsideredduetoseveralfactors,estrogendefi-ciencywasregardedwithmainresponsibility['j.Studiesshowedthatestrogendeficiencyaffectedtheskeletalsiteswithmainlycancellousbone,suchasvertebra,hip,theendsoflOngbonesetcL!],resultingofthehighriskfractureinoftheseparts.Withthedevelopmentofthestudyonthepathogenesisofos-teoporosis,itwasobservedthatbonemateriaIquali-ty,usua1lyconsideredinvariant,probablycontributesmor…     

补肾活血方对多囊卵巢大鼠卵巢MMP-2、9的表达干预研究

目的 观察补肾活血方对多囊卵巢(PCO)大鼠基质金属蛋白晦-2,9(MMP-2、9)表达的影响,探讨补肾活血方治疗PCO排卵障碍的机制.方法选用未成年24日龄SD雌性大鼠60只,随机分为模型对照组、西药对照组、补肾活血方高剂量组、补肾活血方低剂量组、正常对照组共5组.建立大鼠PCO病理模型,采用原位杂交法检潮各组卵巢组织中MMP-2、9基因的表达水平.结果 各组大鼠卵巢中卵泡的颗粒细胞和发育良好的卵泡膜细胞中均可检潮到MMP-2和MMP-9的杂交信号.模型组MMP-2与MMP-9表达强度明显超过正常组、补肾活血方高剂量组、低剂量组及西药对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);补肾活血方高剂量组MMP-2与MMP-9的表达接近正常组,差异无统计学意义(P>0.05);补肾活血方低剂量组、西药对照组与正常组相比,MMP-2与MMP-9的表达均较正常组高,差异具有统计学意义(P<0.05);补肾活血方低剂量组与西药对照组MMP-2与MMP-9的表达强度相似,但均超过补肾活血方高剂量组的表达强度,差异具有统计学意义(P<0.01).结论 MMPs的过度表达可能是卵巢排卵障碍的关键因素,提示MMPs参与了卵巢排卵过程;大鼠PCO动物模型卵巢局部MMP-2、9异常高表达与PCO大鼠卵巢排卵障碍有关,补肾活血方通过抑制MMP-2、-9的异常高表达,从而发挥治疗多囊卵巢排卵障碍的作用,这可能是其促进卵巢排卵的机制之一.     

戊酸雌二醇对去卵巢大鼠子宫、阴道、乳腺雌激素受体表达的影响

以去卵巢大鼠为研究模型,观察戊酸雌二醇对去卵巢大鼠子宫、阴道、乳腺组织病理变化及雌激素受体α(ERα)和雌激素受体β(ERβ)表达的影响,探讨其雌激素样作用机制。采用HE染色法观察去卵巢大鼠组织的病理改变;采用免疫组织化学和Western blot技术检测子宫、阴道、乳腺ERα和ERβ蛋白的表达水平。结果显示,戊酸雌二醇可明显拮抗去卵巢大鼠靶器官的萎缩,其机制可能与上调靶器官雌激素受体(ERs)表达有关。     

清肝化痰活血方对非酒精性脂肪性肝炎模型大鼠的干预作用

目的观察清肝化痰活血方对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)模型大鼠的影响,并探讨其作用机制。方法雄性SD大鼠36只分为对照组6只、模型组10只、清肝化痰活血方干预组(清肝组)10只、胆宁片干预组(胆宁组)10只。对照组普通饲料喂养;其余3组均采用高脂饮食复制NASH动物模型,清肝组、胆宁组分别给予清肝化痰活血方药液和胆宁片混悬液灌胃,对照组和模型组同时予生理盐水灌胃。造模12周末处死各组大鼠,检测体质量、肝指数、炎症活动度计分、血清丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、门冬氨酸氨基转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)含量和肝组织中TG、FFA、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果第12周时模型组和胆宁组大鼠体质量、肝指数、炎症活动度计分、血清AST、ALT、γ-GT、TG、TC、FFA水平、肝组织TG、MDA、FFA含量均高于对照组和清肝组(P<0.05),SOD活性均低于对照组和清肝组(P<0.05);胆宁组体质量、肝指数、炎症活动度计分及血清ALT、TG、TC和FFA水平、肝组织TG、FFA均较模型组降低(P<0.05);与对照组比较,清肝组炎症活动度计分、血清TG增高(P<0.05),肝组织SOD活性降低(P<0.05)。结论清肝化痰活血方对NASH模型大鼠有良好的防治作用,其作用机制可能是通过调节脂质代谢,减轻脂类在肝脏的积聚,抗脂质过氧化,缓解氧化应激。     

补肾活血方对PCO大鼠卵巢COX-1mRNA表达的影响

目的探讨环氧化酶（COX—1）的表达在多囊卵巢卵泡破裂中的作用及补肾活血方治疗多囊卵巢排卵障碍的作用机制。方法选用未成年24d龄SD雌性大鼠60只。随机分为模型组、克罗米酚对照组、补肾活血方高剂量组、补肾活血方低剂量组、正常对照组5组,每组12只。用Bogovieh法建立大鼠多囊卵巢病理模型。以克罗米酚为对照,采用原位杂交法检测各组卵巢组织中环氧化酶COX-1基因的表达水平。结果模型组与正常组比较,卵泡内膜细胞COX—1 mRNA表达明显增加,两者比较差异有统计学意义（P〈0．01）;补肾活血方高剂量组与正常组相比。差异无统计学意义（P〉0.05）。结论COX—1 mRNA在卵巢卵泡内膜细胞水平升高可能是PCOS发病的重要因素或环节。补肾活血方可能通过影响COX—1mRNA水平。从而发挥治疗多囊卵巢排卵障碍的作用．这可能是其促进卵巢排卵的作用机制之一。     

补肾活血方治疗多囊卵巢综合征105例

采用补肾活血方治疗多囊卵巢综合征105例,痊愈72例,有效23例,无效10例,妊娠52例,总有效率90．48％。