组织工程化神经修复神经缺损的临床研究进展

<正>研制组织工程化神经,借以修复长距离周围神经缺损是组织工程与再生医学、显微外科和修复重建外科领域的研究热点之一。组织工程化神经是人工神经移植物与种子细胞的有机结合,有时还辅加神经营养因子等以促进种子细胞的增殖、分化及促进神经修复。近年来人们对组织工程化神经进行了     

组织工程神经中雪旺细胞的形态

目的:观察组织工程神经中雪旺细胞的形态.方法:体外培养雪旺细胞,用倒置显微镜、扫描电镜和透射电镜观察雪旺细胞在PGLA膜上的生长情况和雪旺细胞在BAM凝胶中的形态,用BrdU标记雪旺细胞,观察雪旺细胞-PGLA复合体植入SD大鼠3wk后,雪旺细胞的存活情况.结果:倒置显微镜下,PGLA膜上的雪旺细胞形态与常规培养特点相同,BAM凝胶中雪旺细胞逐渐恢复双极状形态,形成类Büngner带结构,然后可见细胞从凝胶中迁出;扫描电镜下,雪旺细胞细长的双极状形态特点明显,许多细胞聚合类似于Büngner带;透射电镜下,雪旺细胞底部形成一些特殊的钉状突与PLGA膜内接触;免疫组化染色显示组织工程神经中雪旺细胞大量存活.结论:本实验的组织工程神经中雪旺细胞形态正常,生长良好.     

组织工程化胆管的研究进展

临床上由于医源性胆管损伤、胆管结石、胆管肿瘤、胆管感染等原因导致的的肝外胆管狭窄以及一些先天性胆管疾病的治疗,常用胆肠吻合内引流术或外引流术等方法处理,由于这些手术需要把胆管切除或者切开,再行各种方式的胆肠吻合,使得胆管、Oddis括约肌的结构缺损或者功能损害,术后发生胆漏、胆管阻塞、胆管感染甚至胆汁性肝硬化等并发症的风险     

组织工程化神经构建及其修复周围神经缺损的实验研究

目的探讨构建组织工程化神经及其修复周围神经缺损的作用.方法体外诱导人骨髓基质干细胞分化为雪旺细胞,与细胞外基质及可降解聚乳酸导管构建组织工程化神经;建立坐骨神经缺损10mm的动物模型,A组:经诱导骨髓基质干细胞分化为雪旺细胞与天然细胞基质(ECM)凝胶及可降解聚乳酸导管构建组织工程化神经桥接神经缺损;B组:单纯将ECM凝胶注入可降解聚乳酸导管桥接神经缺损;C组:自体神经移植组.术后12周进行神经电生理检测、新生神经组织学观察和轴突计数等检测坐骨神经功能恢复情况.结果诱导后成人骨髓基质干细胞具有雪旺细胞形态及特性;动物模型各组经移植术后12周,再生神经已通过缺损区长至远端.A组、C组各项检测指标均优于B组(PAB=0.021,PBC=0.001),A组与C组无显著性差异(P=0.065);A、B组聚乳酸导管降解吸收明显.结论人骨髓基质干细胞在体外可诱导分化为雪旺细胞,利用其与细胞外基质及可降解聚乳酸导管构建组织工程化神经可以修复周围神经缺损.     

组织工程化皮肤支架的研究进展

本文综述近年来国内外关于皮肤支架材料的研究现状 ,说明只要通过一定的手段对现有材料进行物理或化学的表面改性 ,提高生物材料对细胞的表面亲和性和相容性等 ,即可达到组织工程支架对材料的要求。     

组织工程化人工心脏瓣膜的研究进展

心脏瓣膜疾病是一类危及人类健康和生命的疾病,严重影响患者的工作和生活质量。外科手术予瓣膜置换是治疗心脏瓣膜疾病的有效方法。目前应用于临床的主要有生物瓣膜和机械瓣膜,各有优缺点：生物瓣膜容易钙化、衰败及破损撕裂,严重影响实际使用寿命;     

周围神经组织工程学修复的研究进展

组织工程学是一门应用生命科学和工程学的原理与方法 ,研究哺乳动物正常组织或病理组织结构和功能的相互关系 ,开发对损伤后器官或组织的形态和功能有修复、增进或改善作用的生物替代物的科学。其主要研究方法是将体外培养的功能相关的活细胞种植于细胞外基质替代物 (ECM )上 ,培养一段时间后再移植于体内以替代病损组织的功能 ,研究内容包括 :种子细胞的分离培养 ;生长因子等组织诱导因子的制备 ;细胞外基质替代物的研制 ;组织工程化组织对各种病损组织的替代研究。自 1987年组织工程学的概念被提出以来 ,国内外有关人工软骨、人工骨、人…     

组织工程人工神经对大鼠坐骨神经缺损后神经再生速度的影响

目的研究组织工程人工神经对大鼠坐骨神经缺损后神经再生速度的影响。方法建立15mm的SD大鼠右侧坐骨神经缺损模型后,用嗅球成鞘细胞（olfactory ensheathing cells,OEC）,雪旺氏细胞（Schwann cells,SC）,细胞外基质成份（extracellular matrix,ECM）以及自行制备的聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物（poly（DL-lactide-coglycolide）,PLGA）导管,构成OEC-SC-ECM-PLGA桥接体进行修复,同时设OEC-ECM-PLGA组、SC-ECM-PLGA组、ECM-PLGA组、PLGA组和自体神经移植组进行对照。在术后1,3,6,9周行神经再生速度检测。结果术后1、3、6w,由于新生神经纤维无法着色而无法计算神经再生速度,术后9w,OEC-SC-ECM-PLGA组和自体神经移植组的神经再生速度均为（0.71±0.00）mm/d,显著快于OEC-ECM-PLGA组的（0.60±0.05）mm/d和SC-ECM-PLGA组（0.60±0.09）mm/d（P〈0.05）。ECM-PLGA组和PLGA组神经再生速度均为零。结论 OEC-SC-ECM-PLGA桥接体可显著提高大鼠坐骨神经缺损后神经再生速度。     

直接植块法构建人胚雪旺细胞人工神经

目的 探索人组织工程神经的构造方法。方法 应用直接植块法将人胚雪旺细胞种植于鼠尾胶包埋的聚羟基乙酸和聚乳酸共聚物支架上，观察细胞在支架上的吸附迁移和生长情况。结果 直接植块法能在较短时间内使人胚雪旺细胞长满支架表面，且保持良好的功能状态。结论 直接植块法是一种实用的构建人组织工程人工神经的方法。     

脱细胞骨骼肌支架与雪旺细胞构建体外人工神经模型的研究

目的：研究来源于自体骨骼肌组织的脱细胞细胞支架和自体雪旺细胞作为种子细胞的混合培养物作为一种神经桥接物的可能性。方法：将体外培养、扩增的雪旺细胞与用化学萃取制备且经过无菌多聚赖氨酸预处理的脱细胞骨骼肌支架进行混合培养2周,用扫描电子显微镜观察两者生长与附着情况。结果：雪旺细胞可与自体脱细胞骨骼肌支架艮好附着,并在支架上增殖、迁移,形成类似Bungner带的雪旺细胞链。结论：将自体脱细胞骨骼肌支架与雪旺细胞混合培养而构建体外人工神经模型是可行的。     

骨髓基质干细胞构建组织工程神经修复神经缺损的研究进展

骨髓基质干细胞(BMSCs)存在于骨髓和其他一些组织(如脂肪等),它不仅具有干细胞的基本特征,而且具有自我更新和多向分化的潜能,它分离、培养的成功,以及向神经细胞分化的成功,为修复周围神经损伤提供了一种新的组织工程学种子细胞来源。本文就BMSCs作为种子细胞构建组织工程神经过程中的机制和所面临的新挑战进行综述,以探讨一种更新更有价值的周围神经缺损修复思路。     

应用组织工程方法修复大鼠周围神经损伤的研究

采用雪旺细胞和壳聚糖复合胶原导管,构建组织工程化人工神经,修复大鼠坐骨神经20mm缺损,拟探索一种实验性提高周围神经损伤后修复的质量和速度的方法。术后8周、12周,通过大体观察、组织学染色、神经示踪等技术进行评价。结果表明,术后8周、12周实验组大鼠新生的神经纤维已通过缺损部位,手术局部未出现明显的排斥反应;实验组各项指标优于对照组Ⅱ及对照组Ⅲ,与对照组Ⅰ相近。结果提示:组织工程化人工神经对缺损的坐骨神经修复具有良好的桥梁作用和促进神经生长的作用。     

BrdU标记冷冻胚胎雪旺细胞构建人工神经的研究

目的寻求人工神经较为理想的种子细胞。方法将体外扩增的胚胎兔雪旺细胞两步冷冻法处理后运用组织工程学的原理,5-溴脱氧尿嘧啶（5-bromodeoxyuridine,BrdU）标记后种植到去细胞基膜管中制备2cm长人工神经桥接体,经培养后,桥接修复兔正中神经缺损。结果16周后移植体再生神经中仍可见到大量BrdU阳性标记的雪旺细胞。冷冻雪旺细胞为种子细胞组,取得了与自体移植组相似的效果。结论冷冻保存胚胎雪旺细胞有可能成为人工神经较好的种子细胞来源;     

猕猴组织工程化周围神经的体外构建

目的:研究以猕猴骨髓基质干细胞作为种子细胞和以PLGA作为支架材料,体外构建猕猴组织工程化周围神经的方法.方法:采用密度梯度离心的方法分离培养猕猴骨髓基质干细胞,利用相差显微镜观察细胞生长情况,描绘其生长曲线;将4/0vicryl编织线在10倍手术显微镜下打散成PLGA细丝纤维,扫描电镜下观测其表面形态;将猕猴骨髓基质干细胞种植到经生物学修饰的PLGA纤维上共培养,倒置显微镜下观察细胞在支架材料上的生长情况.结果:采用密度梯度离心的方法可得到大量增殖能力强的猕猴骨髓基质干细胞;接种后的骨髓基质干细胞很快粘附于PLGA纤维上,生长、分裂、增殖良好,在PLGA纤维表面形成串珠样排列,部分细胞还形成连接在PLGA纤维间的链状或片状细胞桥.结论:猕猴骨髓基质干细胞与PLGA适合体外构建组织工程化周围神经.     

构建组织工程骨与生物蛋白胶双相接种法的实验研究

目的观察采用生物蛋白胶（fibrin glue,FG）双相接种技术促进组织工程骨体外构建的可行性。方法以生物蛋白胶为介质,用双相接种技术将羊骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）与同种异体冻干脱钙骨基质（freeze-dried demineralized bone matrix,FDBM）复合,在体外构建组织工程骨,以静置接种法作为对照。通过细胞计数、光学和电子显微镜及四甲基偶氮唑盐比色法（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）检测观察细胞在支架材料上的粘附、生长情况。结果双相接种法在不同接种密度时都可保持细胞上架率维持在80%左右,上架细胞的数量随接种细胞密度增加成比例增加;FG对细胞的增殖没有明显影响,提高接种密度使细胞生长曲线提前达到平台期,各组的细胞数量峰值接近。结论双相接种技术可显著提高种子细胞的上架效率,可以作为一种体外构建组织工程骨的好方法。     

施万细胞的功能及其在视神经保护中的应用

中枢神经损伤后的再生问题一直是近年来研究的热点,视神经作为中枢神经的代表在中枢神经系统损伤及再生的课题中得到了广泛而深入的研究。已有研究表明:哺乳类动物的视神经本身具有再生潜能,只是由于局部微环境阻止了视神经的再生。研究视神经的微环境及微环境的影响因素是研究视神经再生的关键。施万细胞(SCs)是一种主要的周围神经胶质细胞,可分泌多种神经营养因子,产生细胞外基质和细胞黏附分子,在视网膜神经节细胞再生中起重要的作用,可为视神经损伤的修复提供良好的微环境。本文就SCs的功能和在视神经保护中的作用以及SCs的移植应用前景进行综述。     

组织工程学的医学伦理分析

目的 探讨组织工程学研究与临床应用的医学伦理学问题。方法 从组织工程学研究的基本技术路线，包括种子细胞、人工材料、体内植入等方面阐述存在的伦理学问题及其对策。结果 异种与异体细胞和人工材料体内植入需要充分保护病人的知情权，保障临床应用的有效性和安全性。结论 需尽快制定相关标准，完善政策法规。     

椎间盘退变细胞组织工程研究进展

椎间盘退变是多因素引起的脊柱疾病,目前尚无有效的治疗方法。近年兴起的椎间盘细胞组织工程,内容涉及种子细胞、支架、生长因子及基因转染调控等,其中以细胞和支架为核心。细胞移植通过增加椎间盘细胞的数量使细胞外基质合成增加,支架则为细胞提供附着部位。同时,诱导细胞合成更多的细胞外基质,替代原有退变的椎间盘,相关研究尚处于初级阶段。     

聚乳酸-聚羟基乙酸套管复合不同材料修复周围神经缺损的比较研究

目的：研究聚乳酸-聚羟基乙酸（PLGA）套管复合不同材料修复周围神经缺损的能力,筛选周围神经组织工程的支架材料。方法：分别用装配有聚乳酸-聚羟基乙酸（PLGA）丝和人发角蛋白（HHK）的复合导管桥接大鼠10mm长的坐骨神经缺损,术后3、6、9、12周取材,做组织学检查及计量学分析。结果：两种材料均可以诱导神经再生,雪旺细胞和再生神经纤维沿套管的内外表面和桥接材料间隙迁移长入;3周时两种材料已经开始降解,9周时PLGA丝大部分降解,12周时完全降解,HHK降解速度慢于PLGA丝,6周时材料中段切片免疫组化染色显示PLGA丝组在雪旺细胞数量、神经纤维面积上都高于HHK组,有显著性差异。结论：两种材料均有诱导神经再生的作用,PLGA丝组效果更好;桥接丝外面的桥接套管是否有必要保留仍值得进一步的研究和探讨。     

组织工程学中的种子细胞移植免疫学问题研究

组织工程是应用组织与器官修复与功能重建的的新兴交叉学科,是研究异基因种子细胞的来源与由此而产生的细胞移植免疫学问题,从其免疫反应发生的类型特点与检测方法,免疫耐受诱导与建立,以及降低异基因种子细胞免疫原性的方法等方面的问题。特别对采用组织工程方法,纯化细胞培养去除抗原呈递细胞和杂细胞的方法,以及通过酶消化使细胞表面抗原变性或减弱、深低温冻存降低细胞表面活性、添加生长调节因子对免疫反应产生抑制作用、采用微孔支架和微囊包被等对细胞起到免疫隔离作用、基因治疗技术等移植前细胞处理降低免疫原性的方法进行了进一步的探讨,展示了异基因种子细胞在组织工程研究中的应用前景。