多重聚合酶链反应检测麻疹和风疹病毒感染的研究

用多重聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测２１份临床疑似麻疹患者的血清和咽拭子标本中麻疹病毒和风疹病毒,其中麻疹阳性９份,风疹阳性６份,ＩｇＭ－ＥＬＩＳＡ检测麻疹ＩｇＭ抗体阳性３份,麻疹ＰＣＲ检测阴性,而风疹ＰＣＲ检测证实为风疹病毒,该法不仅简便,敏感,特异的区别麻疹和风疹病毒感染,而且为消灭麻疹野病毒监测提供了检测手段。     

酶联免疫吸附试验(ELISA)测定风疹病毒抗体的探讨

本文介绍ELISA测定风疹病毒抗体的方法。用ELISA和HAI两种方法同时测定300份脐血。HAI效价≥1:8的274份阳性脐血中265份ELISA也是阳性。总的不符合率仅4.3％。比较来看,ELISA是一种简便、敏感和有效地检测风疹病毒抗体的方法。     

Taqman技术检测NG、CT、Uu的临床研究

目的：评价Taqman技术检测临床标本中主要性病病原体的应用价值。方法：应用Taqman技术、常规PCR技术及培养法检测100份性病科门诊患者生殖泌尿道拭子标本，比较三种方法检测淋病奈瑟菌（NG），沙眼衣原体（CT），解脲支原体(Uu)的灵敏度。500份性病科门诊患者生殖泌尿道拭子标本同时经Taqman技术及常规PCR技术检测，结果不符者使用培养法验证，以比较Taqman技术及常规PCR技术的特异性。结果：在100份临床标本检测中，Taquman技术、常规PCR及培养法检出阳性率分别为41％，35％，21％。在500份送检标本中，Taqman技术检出阳性标本204份，常规PCR检出阳性标本181份，其中结果不符的41份标本经重复培养验证，37份与Taqman技术检测结果相符。结论：Taqman技术具有良好的敏感性和特异性，集PCR扩增、杂交及荧光自动化检测于一体，实验过程简便、快速、易于质控，是检测性病病原体的有效方法。     

检测淋病柰瑟菌、沙眼衣原体、解脲支原体的临床方法评价

目的：评价Taqman技术检测临床标本中主要性病病原体的应用价值。应用：Taqman技术，常规PCR技术及培养法检测100份性病科门诊患者生殖泌尿道拭予标本，比较3种方法检测淋病票瑟菌（NG）、沙眼衣原体（CT）、解脲支原体（Uu）的灵敏度。500份性病科门诊患者生殖泌尿道拭子标本同时经Taqman技术及常规PCR技术检测，结果不符者使用培养法验证，以比较Taqman技术及常规PCR技术的特异性。结果：在100份临床标本检测中，Taqman技术，常规PCR及培养法检出阳性率分别为41％，35％，21％，在500份送检标本中，Taqman技术检出阳标本204份。常规PCR检出性标本181份，其中结果不符的41例分标本经重复培养验证。37例与Taqman技术测结果相符。结论：Taqman技术具有良好的敏感性和特异性，集PCR扩增，杂交及荧光自动化检测于一体，实验过程简便，快速，易于质控，是检测性病病原体的有效方法。     

荧光PCR法检测泌尿生殖道沙眼衣原体、解脲支原体感染

目的 采用荧光PCR技术检测泌尿生殖道分泌物中沙眼衣原体(CT)和解脲支原体(UU)，探讨检测CT和UU最佳方法。方法 应用荧光PCR技术、CT抗原法和UU培养法同时检测75份标本。结果 75份标本中，荧光PCR检测CT阳性率10．6％，与CT抗原法比较符合率98．7％；荧光PCR检测UU阳性率22．7％，与UU培养法比较，符合率100％。结论 荧光PCR是检测CT和UU一个较好的方法。     

风疹病毒RNA Taq Man实时荧光定量RT-PCR方法及参考标准的建立

目的建立风疹病毒RNA TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法,制备风疹病毒RT-PCR扩增子作为该方法的参考标准品。方法设计引物与探针,优化PCR条件,建立风疹病毒RNA实时荧光定量RT-PCR方法,并制备风疹病毒RT-PCR扩增子作为该方法的参考标准品。结果制备的风疹病毒特异性扩增子参考标准品为503 bp的片断,原液浓度为2.75×109copies/μl,纯度为92%;采用该特异性扩增子参考标准品建立的标准曲线相关系数r为-0.9993（r2=0.9986）,P〈0.001。结论本研究建立的风疹病毒特异性扩增子参考标准品稳定性好,纯度高;特异性扩增子参考标准品浓度的对数值与Ct值之间具有良好的线性关系,证实了本研究建立的风疹病毒RNATaqMan实时荧光定量RT-PCR方法定量的准确性。因而,建立的风疹病毒RNA实时荧光定量RT-PCR方法简便快捷、定量准确,可用于临床标本中风疹病毒RNA的定量检测。     

异常孕产史妇妇风疹病毒感染的研究

了解孕妇风疹病毒的感染率；为早期预测异常妊娠的出现，及时防治提供理论依据。方法采用酶联免疫吸附法检测２０６例有异常孕产史妇妇和８１０例正常孕妇清中特异性抗风疹ＩｇＭ抗体。结果有异常孕产史的妇女风疹病毒感染率明显高于对照组。结论风疹病毒感染是造成异常妊娠的主要原因之一；孕前或孕早期进行风疹病毒感染的检测，对降低异常妊娠的出现具有重要意义。     

育龄妇女风疹76例免疫检测的调查分析

目的：调研张家口市育龄妇女风疹的免疫水平。方法：采用ELISA法，对76名育龄妇女进行了风疹病毒特异的IgG、IgM检测。结果：76例中IgG阳性60例，IgM全为阴性，易感率为20．05％。结论：张家口市育龄妇女风疹病毒易感率较高，及时检测风疹病毒的免疫状况，给予正确的导向尤为重要。     

实时荧光PCR和RT—PCR方法检测登革病毒的比较研究

目的通过2种检测登革病毒方法的比较，以提高检测登革病毒的灵敏度和特异性。方法利用Taqman MGB技术，根据登革病毒3’端非编码区的一段高度保守序列，设计登革1～4型荧光PCR通用引物和TaqmanMGB探针，以登革热毒株作为标准，以乙脑毒株作对照，建立实时荧光PCR检测登革病毒的快速方法。并对10份ELISA法检测阳性的临床血清标本进行RT—PCR及荧光PCR扩增。结果RT—PCR检测10份临床血清标本，2份阳性，阳性率为20％。实时荧光PCR检测登革病毒与乙脑病毒无交叉反应，检测10份临床血清标本，5份阳性，阳性率为50％。从RNA提取到检测结果仅需4h。结论Taqman MGB实时PCR检测方法快速、敏感性高、特异性强，可作为登革病毒的快速检测方法，应用于登革热的临床早期诊断。     

1997～1998年银川市各医院就诊孕妇风疹病毒感染的检测

通过对1997－1998年银川市各医院就诊早、中期孕妇感染风疹病毒的情况进行血清学检测及分析，为有效预防风疹病毒的感染提供依据。采用ELISA法检测386例早、中期孕妇血中抗风疹病毒IgG、IgM类抗体。结果：IgG阳性163例，阳性率为42．2％；IgM阳性31例，阳性率为8．1％。与外地区相比较，本次检测银川市各医院就诊的早、中期孕妇血中IgG阳性率较低，IgM阳性率较高。     

小鼠腹部心脏移植模型的显微外科技巧及并发症的预防

 目的 探讨小鼠腹部心脏移植术的手术技巧及并发症的预防和处理。 方法 雄性昆明（KM）小鼠60只，随机分供、受体2组，采用大鼠Ono术式进行小鼠腹部异位心脏移植，小鼠供体升主动脉与受体腹主动脉端侧吻合，供体肺动脉与受体下腔静脉吻合，实验30例。 结果 实验成功率86.7％(26/30)。取供心时间(9.4±1.2)min，供心修取时间(14.8±1.2)min，受体手术时间(60.4±2.4)min，其中吻合时间(29.8±2.5)min。结论 掌握小鼠心脏移植的显微外科技巧和正确的处理手术并发症，可以成功建立小鼠腹部心脏移植模型。     

风疹病毒R16株体外感染人胚晶状体上皮细胞的初步研究

目的观察风疹病毒R16株体外感染人胚晶状体上皮细胞的生物学特性。方法利用相差显微镜、透射电子显微镜、免疫细胞化学技术观察风疹病毒R16株在人胚晶状体上皮细胞中的形态学及生长特性。结果风疹病毒R16株体外感染人胚晶状体上皮细胞后,细胞不产生明显的病变效应。受病毒感染的人胚晶状体上皮细胞生长速度较慢,10d后可在细胞质内观察到呈不规则球形、由单层脂质膜包绕、直径60～80nm的病毒颗粒,包括致密核心和无致密核心两种颗粒。而在胞核中未发现病毒颗粒。结论风疹病毒R16株能在人胚晶状体上皮细胞中增殖,为进一步研究风疹病毒感染后先天性白内障的发生机制打下基础。     

风疹分子流行病学及其疫苗应用近况

风疹病毒是一种重要的胎儿致畸病毒,疫苗接种可预防风疹及先天性风疹综合征的发生。近年来,分子生物学研究的进展,不仅加深了对病毒本身的认识,也促进了风疹的临床诊断、基因工程疫苗等方面的进展。本文对风疹病毒的分子生物学特性、分子流行病学及疫苗应用近况进行了综述。     

Rubella Virus Infections During Pregnancy, Toronto, 1963-66

Among 670 pregnant women who attended the antenatal clinics of two Toronto city hospitals and one suburban hospital between May 1963 and January 1966, 29 of 550 patients apparently acquired rubella neutralizing antibodies, including 12 whose initial sera were collected during the first trimester. None developed overt rubella. Although rubella antibodies were detected in 61 to 79% of mothers aged 20 years or more, and antibody conversions were detected in 4 to 10% of mothers in each five-year age group between 16 and 39 years, tho rubella syndrome did not appear among any of their offspring. Five of seven other infants, aged 4 to 22 weeks, with the rubella syndrome excreted rubella virus. Rubella neutralizing antibodies were detected in all seven of these infants; these persisted at least 56 weeks in one subject. One mother who received gamma globulin during the first trimester was delivered of an infant who showed signs of the rubella syndrome.     

Congenital rubella affecting an infant whose mother had rubella antibodies before conception

A woman who had had high titres of rubella antibodies some months before she became pregnant gave birth to an infant in whom congenital rubella was confirmed at 4 months. Rubella haemagglutination inhibition tests, complement fixation tests, and immunofluorescence tests with anti-human IgG were carried out on sera from the mother. Rubella antibody titres in sera obtained in March 1971, seven and a half months before conception, were equivalent to 400 units, which is usually taken as indicating good immunity. Rubella virus was isolated from the baby's nose and throat in July 1973 but was not isolated from a cervical swab taken from the mother in December 1973; tests of her immunological competence did not show any definite abnormality. The presence of high levels of rubella haemagglutination inhibition antibodies does not invariably confer immunity or exclude the possibility of congenital rubella in a subsequent pregnancy.     

Congenital rubella syndrome with positive serology and virus isolation

An effective live attenuated rubella vaccine was available since 1969 and congenital rubella syndrome can be prevented with appropriate vaccination. We report a baby with congenital rubella syndrome born in Klang valley to indicate that the Universal Rubella Vaccination Programme adopted by the Ministry of Health Malaysia since 2002 has yet to achieve its effect of eliminating transmission of rubella and preventing congenital rubella infection in the community. To our knowledge, the virus isolate represents the first successful isolation of rubella virus in this country and will serve as the reference strain for future comparison in molecular epidemiological tracking of rubella virus activity this country.     

实时荧光定量RT-PCR与ELISA检测孕妇血清风疹病毒的比较分析

目的应用TaqMan实时荧光定量RT-PCR技术定量检测孕妇血清标本中风疹病毒RNA,并与ELISA法比较其敏感度与特异度,为孕妇早期风疹病毒检测提供迅速准确的方法。方法收集126例已确诊风疹病毒阳性孕妇血清标本与107例女性健康查体者血清标本,同时进行实时荧光定量RT-PCR核酸检测与风疹病毒ELISA法IgM抗体检测,比较两种方法的敏感度与特异度。结果以细胞培养法为金标准,实时荧光定量RT-PCR法敏感度为92.9%,特异度为98.1%。ELISA IgM抗体法的敏感度和特异度分别为97.6%,86.9%。两种方法的敏感度无显著性差异（p〉0.05）,实时荧光定量RT-PCR法的特异度明显高于ELISA IgM抗体法（p〈0.01）。结论实时荧光定量RT-PCR简便快捷、敏感性高、特异性高、定量准确,在临床风疹病毒基因检测中具有很大的应用潜力。     

风疹易感人群婚前风疹疫苗接种预防先天性风疹综合征

目的探讨婚前风疹易感人群风疹疫苗接种在提高孕妇对风疹的免疫力,预防先天性风疹综合征中的作用.方法对10 913例婚前风疹病毒抗体IgG阴性者给予国产风疹减毒活疫苗注射.3个月随防671例,比较风疹疫苗接种前后该地区孕妇近期风疹感染的发病率.结果818例风疹病毒抗体IgG阴性者接种后抗体转阳率为99.8%.风疹疫苗接种前后3年孕妇近期风疹感染率分别为0.37%及0.08%,有明显下降,有非常显著差异(P＜0.001).结论应用国产风疹减毒活疫苗对婚前易感人群作预防接种可提高育龄妇女对风疹的免疫力,降低孕期风疹感染的发生率,是预防先天性风疹综合征及风疹致畸的有效、安全措施.     

重庆市2008～2013年风疹流行病学特征分析

目的：了解自2008年风疹疫苗使用以来重庆市风疹的流行病学特征。方法采用Excel软件对2008～2013年重庆市风疹疫情相关数据进行描述流行病学分析。结果2008～2010年,重庆市风疹报告发病率从18．97／10万下降至2．07／10万,2011～2012年出现反弹趋势;4～6月为发病高峰时间,6～14岁为发病主要人群;风疹疫苗接种率逐年上升,2012年后达到90％以上,但中小学生接种覆盖率低;5年共暴发风疹疫情100起,报告病例占总个案报告病例数的18．74％,暴发地点多为中小学（91％）。结论中小学校学生为风疹主要发病对象;6～7岁再免有助于控制学龄儿童风疹暴发、流行;应逐步实施适龄儿童以外人群的风疹免疫预防。     

2004—2009年宁夏风疹疫情分析

目的了解近年来宁夏风疹疫情特征,为风疹疫情的防控提供基础数据。方法对国家疾病监测信息管理系统上报的宁夏风疹监测数据进行描述性分析。结果 2004-2007年,宁夏风疹报告发病率波动在4.82-8.46/10万,2009年高达53.25/10万,个别县区报告发病率高达388.66/10万。该病多发于春末夏初季节,15岁以下儿童发病占报告病例总数的78.74%。风疹突发公共卫生事件累计报告病例,占6年报告病例总数的16.95%。结论近年来,宁夏风疹报告发病率呈现上升趋势,局部地区出现暴发疫情,3-15岁的托幼儿童和中小学生是主要发病群体。