增殖细胞核抗原、p53、p21ras及EGFR蛋白在人脑胶质瘤中的表达及意义

本文应用免疫组化技术检测 10 2例手术切除人脑胶质瘤组织标本中增殖细胞核抗原 ( PCNA ) p53、p2 1ras及 EGFR蛋白的表达 ,现报告如下。1　材料与方法1.1　组织标本 :收集本院 1990～ 1997年手术切除脑胶质瘤标本 10 2例 ,经 10 %甲醛溶液固定 ,石蜡包埋 ,连续切片 ,HB染色并经病理诊断证实胶质瘤无疑 (按WHO脑瘤分类 )。另取 14例正常脑组织为对照。1.2　试剂与染色方法 :鼠抗人 PCNA单克隆抗体为美国 ZYMed公司产品 ,鼠抗人 p53( D— 1)、p2 1ras、单克隆抗体为 Dako公司产品 ,EGFR多克隆抗体为美国 SANTACRUZ公司产品 ,A…     

尖锐湿疣的病理组织学观察及HPVAg检测

尖锐湿疣是由人类乳头状瘤病毒（HPV）感染所引起的一种性传播疾病。对我科收集的40例尖锐湿疣进行回顾性研究，旨在对尖锐湿疣的病理诊断问题作进一步探讨。1临床资料与方法本组40例均为临床活俭病例，女28例，男12例．女与男之比为2、3：1，年龄在21～45岁。单发者15例，多发者（三个部位以上）25例。12例男性患者中明茎冠状沟8例，肛周3例，会明1例。28例女性患者中会明13例，肛周5例．宫颈4例．阴道4例，尿道口2例。每例连续切片2张，1张做HE常规染色，用于病理组织学观察，另一张做免疫组化（ABC法）染色，所用抗HPV－Ag抗体购自…     

恶性黑色素瘤的免疫组化和透射电镜诊断

无色素性黑色素瘤(恶黑)形态结构无特异性,常易误诊。近年来发现S-100蛋白可做为恶黑的诊断标记,尤其是对无色素性恶黑有意义,国内尚未见同类研究的报道。本文通过S-100蛋白免疫组化和透射电镜观察不同色素程度的恶黑,现报道如下: 材料和方法 一、材料 从我科档案及活检中选取40例恶黑,其中7例新鲜取材组织同时做透射电镜观察。 二、组化及免疫组化染色 1.显示黑色素的Lilli氏硫酸亚铁染色。 2.抗S-100蛋白免疫组化(ABC法)染色(S-100染色):抗S-100蛋白抗体和显色剂AEC为Dako公司试剂,兔ABC药盒购于美国Vector公司。用AEC显色,苏木素复染封片。阴性对照用PBS代替第一抗体,阳性对照为脑脉络膜丛乳头状瘤切片。结     

从大容量人源噬菌体抗体库中筛选抗黑素瘤特异性抗体

目的：用黑素瘤（MM）细胞系筛选大容量人源噬菌体抗体库，获得能与MM细胞特异性结合的人源性单链抗体（scFv）．方法：用完整的MM细胞对大容量人源噬菌体抗体库进行4轮“吸附-洗脱-扩增”筛选，并通过细胞ELISA法对随机挑选的克隆进行抗原结合活性测定，得到的阳性克隆进一步做DNA序列测定和免疫组化染色鉴定．结果：从80个随机挑选的克隆中，筛得1株抗MM细胞的抗体，该抗体对人的鳞癌细胞、角质形成细胞、黑素细胞、角蛋白、胰蛋白酶、转铁蛋白及小鼠igG等细胞或抗原的结合反应均呈阴性．免疫组化染色显示，该抗体与MM细胞系Libr的染色呈阳性，对黑素细胞和痣细胞的染色呈阴性．DNA测序结果表明，该抗体VH属于人IgG VH5亚群，VL属于人Vκ亚型．结论：通过筛选噬菌体抗体库获得到1株抗MM细胞的特异性抗体，为MM的靶向治疗研究奠定了基础．     

成人视网膜前体细胞的体外分离培养和鉴定

 【目的】对成人视网膜前体细胞进行体外分离、培养和鉴定。【方法】成人眼球12只，“机械分离联合酶消化法”分离出睫状上皮层的色素性细胞。10ng／mL碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）＋10ng／mL表皮生长因子（EGF）的无血清DMEM／F12培养液中培养，并从三方面鉴定其神经干细胞特性：A．免疫荧光染色检测神经干细胞特异性抗原神经巢蛋白Nestin的表达；B．自我更新能力：原代神经球消化传代后，继续培养观察新神经球的形成；C．多向分化潜能：原代细胞培养4～5d，改用含10mL／L胎牛血清的DMEM/F12培养液。继续培养7～10d，分别用抗神经丝蛋白（NF）抗体、抗微管相关蛋白-2（MAP2）抗体、抗胶质纤维酸性蛋白（GFAP）抗体、抗视紫质蛋白抗体、抗β-微管蛋白抗体以及抗无长突细胞特异性抗体作免疫荧光细胞染色。【结果】0．48％±0．08％（1：208）原代细胞在含bFGF＋EGF无血清培养条件下能保持增殖未分化状态。形成神经球样结构，消化传代后90．1％±8．3％的第二代细胞能重新形成新的神经球样结构，具有自我更新能力：原代及传代后的神经球均表达神经干细胞特异性抗原nestin；在含10mL／L胎牛血清的促分化培养液中。细胞分别分化为可表达神经细胞、星形神经胶质细胞和感光细胞等特异性抗原的细胞，表明具有多向分化潜能。【结论】在成人眼睫状体扁平部分离得到具有干细胞特性的视网膜前体细胞，并在体外成功进行培养鉴定。     

对肺炎支原体特异性抗体的实验室检测及临床应用

目的：对呼吸道感染患者进行肺炎支原体（Mp）检测，以期协助临床早诊断、早治疗。方法：对980例呼吸遥感染者同时作冷凝集试验并用间接免疫荧光法检测抗-Mp-特异性抗体（IgG,IgM）。结果：980例呼吸道感染者，检出Mp特异性抗体阳性180例，阳性率18．4％。〈3岁、-6岁、-14岁、〉14岁4个年龄组Mp特异性抗体阳性率分别为8．1％（12／148）、23．6％（44／186）、31．0％（31／100）、5．3％（3／56）。在186例临床诊断为Mp感染的病例中，抗-Mp—IgG阳性118例，敏感性63、4％，抗-Mp—IgM阳性160例，敏感性86．0％，冷凝集试验阳性86例，敏感性46．2％，抗-Mp—IgM敏感性较冷凝集试验高（P〈0．05）。结论：间接免疫荧光法检测血清Mp抗体可作为早期诊断Mp感染的指标之一。     

先天性巨结肠患者RET和血管内皮素-β受体的表达及其临床意义

目的 探讨RET抗体、血管内皮素-β受体（endothelin-β receptor，EDNRB）抗体在先天性巨结肠（Hirschsprung’s disease，HD）患者体内的分布情况及其意义。方法 结合光镜下肠壁的形态特征，并应用免疫组化技术对33例临床病理确诊为先天性巨结肠的病变肠段及10例正常结肠行RET抗体、EDNRB抗体免疫组化染色，比较RET和EDNRB的染色结果和分布特点。结果 RET在肠段神经纤维上表达，HD狭窄段中表达减少（P〈0．01）；EDNRB在肠段血管上表达，长、短型HD中表达减少（P〈0．01）。结论 RET、EDNRB基因与HD的发生及类型相关。可为HD的诊断与治疗提供新的研究方向。     

乳腺癌腋窝阴性淋巴结内微小转移的免疫组化检测和临床意义

目的　探讨应用免疫组化方法检测乳腺癌腋窝常规检测阴性淋巴结内微小转移灶。方法　应用单克隆抗细胞角蛋白（ Ａ Ｅ１／ Ａ Ｅ３） 和抗上皮膜（ Ｅ Ｍ Ａ） 抗体,采用 Ａ Ｂ Ｃ 免疫组化染色,观察淋巴结内阳性表达。结果　６７ 例患者的阴性淋巴结４７３ 枚中,有１６ 例（２３ ．９ ％ ） 共３７ 枚淋巴结中发现微小转移灶,其阳性和阴性病人的癌复发,转移和预后差异性均有显著意义（ Ｐ＜ ０ ．０５） 。结论　免疫组化技术对乳腺癌腋窝阴性淋巴结的检测具有十分重要意义。     

重型病毒性肝炎的血清病原学研究

为了解重型病毒性肝炎（重肝）的病原分型及其与预后的关系，应用酶联免疫法对120例重肝患者进行了甲型肝炎病毒抗体（抗-HAV）IgM、HBV标志（HBVM）、丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）的检测。结果显示：抗HAV－IgM阳性19例（15．8％）；HBVM阳性90例（75．0％）；抗-HCV阳性29例（24．2％），其中19例合并HBV感染，单纯抗-HCV阳性6例；三型病毒标志阴性者16例（13．3％）。乙型重肝较甲型重肝、丙型重肝病死率高。慢性重肝、急性重肝较亚急性重肝预后差。HBV复制标志阳性患者预后较差。提示HBV是本地区重肝的主要病原，且预后较差。     

反复自然流产免疫病因分型

目的：探讨反复自然流产（RSA）免疫病因分型及其临床意义。方法：对204例RSA患者进行封闭抗体，抗独特性抗体，细胞毒指数，透明带抗体，抗磷脂抗体，血型抗体进行检测及分型。结果：在204例RSA患者中，I型患者（母－胎免疫识别低下型）占54．90％，Ⅱ型患者9母－胎免疫识别过度型）占5．88％，Ⅲ型患者（母－胎免疫识别紊乱型）占30．88％，Ⅳ型患者（不明原因）8．33％。I型Ⅲ型患者的封闭抗体春抗独特型抗体均呈明显缺乏趋势，且占病人总数的85．9％。与I型和Ⅳ型,Ⅱ型和Ⅲ型病人以自身抗体及同种血型抗体异常增高为其免疫学特征。结论：反复自然流产免疫原因分型对选择针对性诊疗方案具有临床实际意义，即I型和Ⅲ型患者可选择淋巴细胞, 增强母－胎免疫识别；ⅣⅡ型患者则应选择免疫抑制的治疗方案，以缓解自身抗体及同种抗对对胚胎抗原的损伤；Ⅲ型患者还可选择淋巴细胞免疫加免疫抑制治疗方案，从而有助于提高反复自然流产的临床疗效。     

PCNA与AgNoRs在鼻咽癌组织中表达的定量研究

1　材料和方法1.1　材料　选取南方医院耳鼻咽喉科 1980 / 1993鼻咽部活检组织的存档蜡块共计 10 0例 .病理诊断为鼻咽粘膜炎症 2 2例 ,鼻咽癌 78例 ,其中病理分化 级者 19例 ,分化 级者 2 0例 ,分化 级者 2 0例 ,泡状核细胞癌 19例 .1.2　方法　免疫组化染色采用 L AS- SP方法 ,第 1抗体为鼠抗人 PCNA单克隆抗体 PC10 (美国 ZYMED公司产品 ) ,工作液稀释度 1∶ 2 0 0 ;第 2 ,第 3抗体采用 MOSP Kit试剂盒 (美国 ZYMED公司产品 ) ,工作液均稀释为 1∶ 30 0 .每例染片 3张 ,包括阴性对照 ,PCNA染色并进行苏木精染色 ,复染结果…     

免疫组化和核酸原位杂交在尖锐湿疣病理诊断中的意义

目的 探讨免疫组化和核酸原位杂交检验人乳头瘤病毒（HPV）和尖锐湿疣（CA）病理诊断中的意义。方法 44例病理形态学诊断为尖锐湿疣的石蜡包埋组织标本。用HPV多克隆抗体和HPV-11单克隆抗体行免疫组化染色，用分别针对HPV6和HPV11-DNA的寡核苷酸探针行原位杂交。结果 ①免疫组化染色：37/44例（84.1%)HPV多克隆抗体染色阳性；6/44型（13.7%）HPV-11单克隆抗体染色阳性；②原位杂交：有38/44例（86.4%)表达HPV-DNA，其中既表达HPV6-DNA又表达HPV11-DNA者26例（59.1%) ；③联合应用免疫组化和原位杂交技术检测，有43/44例（97.7%）呈阳性反应。结论 免疫组化和原位杂交技术检测HPV是病理诊断尖锐湿疣的重要辅助手段，二者的联合使用明显提高了HPV的检出率。在临床应用中结合形态学改变，可提高尖锐湿疣诊断的准确性。     

促凋亡基因bax在胆管癌组织中的表达及临床意义

（１）目的 探讨促凋亡基因ｂａｘ在胆管癌组织中的表达。（２）方法 应用抗ｂａｘ多克隆抗体分别对２０例胆管癌和７例先天性胆总管囊肿组织的石蜡切片进行免疫组化染色。（３）结果 ２０例胆管癌组织有１１例ｂａｘ蛋白表达阳性（５５．００％），而７例先天性胆总管囊肿仅１例表达阳性（１４．２９％），两组间差异有显著性（Ｘ＾２＝６．７３，Ｐ〈０．０１），随肿瘤分化程度的增高，阳性表达增强，但差异无显著性（Ｘ＾２＝     

两种方法检测肺癌患者CAP43蛋白的结果比较

目的 探讨肺癌患者血清和肿瘤组织中Cap43蛋白的表达水平与肺癌不同组织学分型间的关系。方法 通过建立双抗体夹心ELISA法初步定性和定量检测91肺癌患者与正常人群血清中Cap43蛋白含量，并采用免疫组化S-P方法检测83例肺癌术后病例的肿瘤组织切片中Cap43蛋白表达程度。结果 初步建立的双抗ELISA血清学检测方法中确定的包被羊抗人NDRG1多克隆抗体，Ⅰ抗兔抗人Cap43多克隆抗体，辣根酶（HRP）标记的羊抗兔Ⅱ抗的最佳工作浓度分别为1：750，1：1200，1：350，标准蛋白曲线的回归方程为：y=0.53566＋0．00046x，R2=0．9939，P〈0．0001。应用该方法初步检测结果提示肺癌患者血清腺癌组Cap43含量明显高于鳞癌组（P〈0．05），同时免疫组化检测结果也提示肺腺癌组的Cap43表达程度比鳞癌组高（P〈0．05）。结论 肺癌患者血清中以及肿瘤组织Cap43的表达程度与其肿瘤的组织学类型密切相关。     

抗β2和α1肾上腺素能受体的自身抗体与高血压的相关性研究

目的 明确抗G-蛋白偶联家族中β2和α1肾上腺素能受体的自身抗体与原发性高血压的病程进展相关。方法 应用酶联免疫吸附测定（ELISA）技术，以细胞外第二环表位肽段的合成肽作为抗原，检测50例高血压心脏病、40例单纯高血压和40例正常人血清中抗G-蛋白偶联家族中β2和α1受体的自身抗体。结果 （1）高血压心脏病患者血清中抗G-蛋白偶联型β2和α1受体自身抗体的阳性率分别为42．0％（21／50）和34．0％（17／50），明显高于单纯高血压的22．5％（9／40）和15．O％（6／40），以及正常对照组的7．5％（3／40）和10．0％（4／40）（P〈0．05）；（2）高血压心脏病抗体阳性患者的抗体滴度分别为1：143、1：126与单纯性高血压的1：120和1：96比较无明显差异（P〉0．05），但两组阳性抗体滴度均明显高于正常对照组的1：48和1：36（P〈0．05）；（3）高血压心脏病抗β2受体自身抗体阳性患者，其中81％（17／21）的患者同时具有α1受体的自身抗体。结论 高血压心脏病患者血清中存在抗G-蛋白偶联家族中与心血管疾病相关的β2和α1受体的自身抗体；单纯高血压自身抗体的阳性率同正常人，但阳性抗体的抗体滴度同高血压心脏病。大约80％以上的患者同时具有上述2种受体的自身抗体，多抗体阳性可能是自身免疫反应的多重性表现，提示免疫学机制参与原发性高血压的病理生理过程，参与心肌和血管重构和／或功能变化过程，其机理有待深入研究。     

子宫性索样肿瘤1例临床病理分析

目的：探讨子宫性索样肿瘤（UTROSCT）的临床病理及免疫组化特点。方法：对1例UTROSCT进行临床病理分析,并应用CD10、CD99、calretinin、Vim、ER、PR、α-Inhibin、SMA、bcl-2以及EMA抗体进行免疫组化染色。结果：肿瘤上皮样细胞呈巢状、索状、梁状等性索状排列。CD99、calretinin、Vim、PR弥漫（＋）;α-Inhibin、CD10、SMA、bcl-2和ER局部（＋）;EMA（-）。结论：UTROSCT确诊主要依赖于病理形态特点及免疫组化标记结果。     

系统性红斑狼疮患者自身抗体检测的临床意义

目的：探讨抗核小体抗体（anti—nucleosome antibody，ANuA）、抗双链DNA（anti—doublestrandedDNA，dsDNA）、抗史密斯抗体D1（Anti—SmD1antibody，SmD1）等特异性自身抗体联合检测在SLE的诊断及临床应用中的价值。方法：分别用酶联免疫吸附（ELISA）法和间接免疫荧光法检测SLE患者及对照组患者血清中的ANuA、抗dsDNA、抗SmD1抗体，并分析它们之间的关系。结果：70例SLE患者中单项检测抗dsD—NA、抗SmD1、ANuA的阳性率分别为40．O％、75．7％、64．3％，三者联合检测后的阳性率为87．1％。结论：抗SmD1、ANuA、抗dsDNA联合检测提高了诊断的敏感性，对SLE的诊断和治疗有重要意义。     

肺癌脆性三联组氨酸Fhit蛋白的表达丢失

探讨肺癌脆性组氨酸三联体（FHIT）基因（Fhit）的蛋白表达状况及其与临床病理指标的可能关系。取本院1999年12月～2000年7月外科手术切除的52例原发性肺癌组织标本, 其中鳞癌35例，腺癌17例；已有淋巴结转移24例（16例鳞癌，8例腺癌），无淋巴结转移癌28例；组织学分级:Ⅰ级癌8例、Ⅱ级癌26例、Ⅲ级癌18例。兔抗人FHIT（Zymed, 购自北京中山公司）抗体稀释度为1∶ 200，4℃过夜；免疫组化染色均按SP药盒（Zymed）试剂及方法进行。判断标准：观察Fhit蛋白的分布、阳性强度和阳性率。染色强度与阳性细胞百分比的乘积≥2分为免疫反应阳…     

虎红染色剂在干眼诊断中的应用

目的：评价自制虎红染色剂在诊断干眼中的应用。方法：对434例（868眼）主诉眼干涩不适的患进行裂隙灯检查，三项诊断性试验（虎红染色、Schirmer试验和泪膜破裂时间BUT）以及实验室检查。结果：虎红染色阳性140例，264眼占30．41％，Schirmer试验＜10mm/5min98例，186眼占21．43％，BUT＜10s165例，317眼占36．52％。虎红染色阳性率与其他两项试验的阳性率差异无显性（P＞0．05）。89例伴有实验室检查异常，占虎红染色阳性140例的63．57％。结论：虎红染色是诊断干眼的一种快捷、准确的试验方法，该试剂配制简便，可以推广采用。     

自身抗体检测在自身免疫性肝病诊断中的应用

目的：了解自身免疫性肝病患者可能出现的各种自身抗体阳性率，以提高对该病的认识。方法：分别应用间接免疫荧光法和欧蒙斑点法检测92例自身免疫性肝病患者和30例健康人的ANA、SMA、AMA、AMA-M2,抗LKM-1、抗SLA／LP。92例患者分为四组：自身免疫性肝炎27例，原发性胆汁性肝硬化29例；原发性硬化性胆管炎6例；不明原因肝损伤30例。结果：自身免疫性肝炎组ANA、SMA、抗LKM-1、抗SLA／LP的阳性率分别为81．5％、51．9％、11．1％、18．5％。原发性胆汁性肝硬化组ANA、AMA、AMA．M2阳性率为89．7％、93．1％、89．7％，原发性硬化性胆管炎组检测ANA1例（16．7％），不明原因肝损伤ANA9例（30％），AMA3例（10％）。结论：多数自身免疫性肝病伴有特异性自身抗体的出现；自身抗体的检测对临床肝病学具有重要的意义。