补阳还五汤对体外培养的大鼠皮层神经元缺氧凋亡的影响

目的 探讨补阳还五汤对神经元缺氧凋亡的作用。以及对神经元缺氧过程氧自由基（OFR）、一氧化氮（NO）生成和bcl-2基因表达的影响。方法 采用Daniel方法建立神经元缺氧凋亡模型。加入补阳还五汤药物血清，应用碘化丙啶（propidium iodide,PI)染色法经流式细胞仪检测神经元凋亡率，分光光度法检测丙二醛（MDA），NO浓度，免疫组化法检测bcl-2表达。结果 补阳还五汤显著抑制缺氧导致的神经元凋亡，并减少神经元缺氧过程NO、OFR的生成，上调bcl-2基因的表达。结论 补阳还五汤对神经元缺氧凋亡有抑制作用，其机制可能与其减少神经元缺氧过程NO、OFR生成，及上调bcl-2基因表达有关。     

补阳还五汤对大鼠脑皮层神经元生长的影响

目的：观察含补阳还五汤的药物血清对体外培养大鼠脑皮层神经元生长的影响，为补阳还五汤治疗缺血性脑损伤提供实验依据。方法：以体外培养新生SD乳鼠大脑皮层神经元为观察对象，采用四唑盐（MTT）比色法测定细胞生长情况，观察含药血清对常规培养及在缺氧状态下神经元生长的影响，结果：补阳还五汤对常规培养及在缺氧条件下培养的神经元有显著促进生长作用，与空白血清组比较有显著差（P＜0．05），结论：大鼠以补阳还五汤灌胃给药后，其血清中的药物成份有促进体外培养神经元细胞生长的作用。     

补阳还五汤对体外培养的大鼠皮层神经元缺氧凋亡的影响

目的探讨补阳还五汤对神经元缺氧凋亡的作用,以及对神经元缺氧过程氧自由基(OFR)、一氧化氮(NO)生成和bcl-2基因表达的影响。方法采用Daniel方法建立神经元缺氧凋亡模型,加入补阳还五汤药物血清,应用碘化丙啶(propidiumiodide,PI)染色法经流式细胞仪检测神经元凋亡率,分光光度法检测丙二醛(MDA)、NO浓度,免疫组化法检测bcl-2表达。结果补阳还五汤显著抑制缺氧导致的神经元凋亡,并减少神经元缺氧过程NO、OFR的生成,上调bcl-2基因的表达。结论补阳还五汤对神经元缺氧凋亡有抑制作用,其机制可能与其减少神经元缺氧过程NO、OFR生成,及上调bcl-2基因表达有关。     

补阳还五汤对大鼠脑皮层神经元生长的影响

目的观察含补阳还五汤的药物血清对体外培养大鼠脑皮层神经元生长的影响,为补阳还五汤治疗缺血性脑损伤提供实验依据。方法以体外培养新生SD乳鼠大脑皮层神经元为观察对象,采用四唑盐(MTT)比色法测定细胞生长情况。观察含药血清对常规培养及在缺氧状态下神经元生长的影响。结果补阳还五汤对常规培养及在缺氧条件下培养的神经元有显著促进生长作用,与空白血清组比较有显著差(P<0.05)。结论大鼠以补阳还五汤灌胃给药后,其血清中的药物成份有促进体外培养神经元细胞生长的作用。     

补阳还五汤含药血清对缺氧缺糖损伤PC12细胞凋亡影响的正交试验研究

【目的】观察补阳还五汤对缺氧缺糖（oxygen-glucose deprivation, OGD）损伤PC12细胞凋亡的影响,筛选补阳还五汤中抑制OGD损伤PC12细胞凋亡的主要药味。【方法】将补阳还五汤中7种单味药即黄芪、赤芍、当归尾、地龙、川芎、桃仁、红花作为实验因素,每个因素选取有或无2个水平,按L8（27）正交试验表安排试验。采用OGD细胞模型,运用中药血清药理学方法和流式细胞术技术,以细胞凋亡率为评价指标,利用直观分析和方差分析法,比较空白血清组（有氧+含糖培养基+空白血清）、模型组（缺氧+无糖培养基+空白血清）和补阳还五汤（缺氧+无糖培养基+含药血清）以及各拆方对OGD损伤PC12细胞凋亡的影响。【结果】与空白血清组比较,模型组PC12细胞凋亡率显著增加,差异有统计学意义(P<0．01);与模型组比较,补阳还五汤组的凋亡率显著降低,差异有统计学意义(P<0．01)。正交试验分析显示：补阳还五汤中对OGD损伤PC12细胞凋亡具有显著性影响的药味为桃仁、红花、赤芍(P<0．01),其余药味作用不显著(P>0．05),含赤芍的拆方细胞凋亡率低于不含赤芍的拆方。【结论】补阳还五汤具有抑制OGD损伤PC12细胞凋亡的作用,其中发挥作用的主要药味为赤芍。     

补阳还五汤中黄芪剂量对大鼠神经细胞凋亡的影响

目的观察补阳还五汤中不同黄芪剂量对大鼠大脑皮质神经细胞缺血缺氧再灌注损伤的影响。方法将新生sD大鼠大脑皮质细胞取出分成8组,第1组为正常细胞培养组;第2组为大鼠皮质神经细胞缺氧缺糖再给氧损伤（模拟神经细胞缺血缺氧再灌注损伤）造模组,第3至8组在造模的基础上,分别加入黄蓖剂量依次为0、30、60、90、120、150g的补阳还五汤黄芪剂量加减方的含药血清。双染法荧光显微镜观察细胞的形态变化和坏死、凋亡的发生率,流式细胞仪测定细胞凋亡情况,评价含药血清的影响。结果黄芪剂量在0～60g时,增加其剂量则细胞死亡率、凋亡率均明显下降（P均〈0．05）;黄芪剂量增加至90、120、150g后,细胞死亡率下降明显（P均〈0．05）,但该i组间细胞死亡率相近（P〉0．05）;细胞凋亡率在60g后不再下降,至90、120、150gi组间稳定在同一水平（P〉0．05）。结论补阳还五汤中黄芪剂量在较小时逐渐增加可能提高对缺血缺氧再灌注损伤细胞坏死和凋亡的抑制作用,而当黄芪剂量增加到90g后。再增加剂量可能并不能提高其抑制凋亡的作用。     

补阳还五汤对大鼠实验性心肌缺血的影响

采用垂体后叶素诱发Ｗｉｓｔａｒ大鼠心肌缺血模型,观察补阳还五汤对其保护作用。结果表明补阳还五汤可显著抑制大鼠Ｔ波变化,提高大鼠血浆ＳＯＤ活性、降低ＭＤＡ含量,对血素ＬＤＨ、ＣＰＫ的释放也有显著的抑制作用。提示本方对心肌缺血损伤的保护作用可能与其减轻氧自由基对心肌膜脂质过氧化损伤反应有关。     

补阳还五汤治疗缺血性脑血管病的研究进展

中风是目前老年人的三大病死原因之一,其中以缺血性中风更为常见.中医认为,正气存内,邪不可十,邪之所凑,其气必虚,中风的基本致病根源均是气虚,病邪的核心为血瘀,故气虚血瘀成为最基本的病理机制.     

醒脑静对大鼠皮层神经细胞的保护作用

[目的]研究麝香、冰片等组成的醒脑静对神经细胞的保护作用。[方法]利用原代培养的大鼠大脑皮层神经细胞,观察醒脑静对抗谷氨酸(10μmol·L-1,3h)对脑细胞的兴奋毒性作用。[结果]醒脑静能减少谷氨酸所造成的细胞内乳酸脱氢酶漏出量,减轻细胞的形态学改变。[结论]醒脑静能够对抗谷氨酸介导的兴奋性毒性,对培养的大鼠大脑皮层细胞具有保护作用。     

补阳还五汤对全脑缺血模型大鼠恢复脑血流灌注后的皮层神经元钙信号的影响

【目的】观察补阳还五汤预干预对全脑缺血大鼠皮层神经元L型Ca^2＋通道的影响,探讨Ca^2＋信号异常参与缺血性神经元损伤的机制及补阳还五汤抗脑缺血的分子机制。【方法】72只SD大鼠随机分为12组,即假手术组（2组）、模型组和补阳还五汤组（此2组各分为缺血再灌注后2、12、2,4、48、72h5个时间点组）;补阳还五汤各组按0．64g／kg剂量灌胃,每天2次,连续5d。除假手术组外,各组均参照改良的Pulsinelli4血管闭塞法复制全脑缺血大鼠模型,缺血后的大鼠分别在存活2、12、2,4、48、72h后进行皮层神经细胞急性分离,单通道电流经EPC-9膜片钳放大器放大,采用Pulse＆Pulsefit采集入计算机,检测各组大鼠血流再灌注后不同时间点的L型Ca^2＋通道的平均开放时间和开放概率。【结果】模型大鼠皮层神经元L型Ca^2＋通道因缺血激活而开放,其开放时间在再灌后各时间点均比假手术组延长,开放概率分别在再灌注2h和2,4h时出现高峰;而补阳还五汤组的皮层神经元L型Ca^2＋通道的开放时间在再灌72h时比模型组降低（P〈O．01）,其开放概率在模型组出现第1个高峰时（再灌2h）被显著性地降低至与假手术组相仿水平（与模型组比较P〈0.01,与假手术组比较P〉0．05）。【结论】补阳还五汤在缺血再灌早期（再灌2h）,主要通过降低L型Ca^2＋通道开放概率,即影响L型Ca^2＋通道的可利用性以减少Ca^2＋内流。而在缺血再灌后期（再灌72h）,主要通过降低L型Ca^2＋’通道开放时间,即影响L型Ca^2＋通道开放特性以减少Ca^2＋内流。     

补阳还五汤和黄芪对脑缺血再灌注后星形胶质细胞的影响

[目的]为了探讨补阳还五汤和黄芪对脑缺血再灌注后星形胶质细胞（AS）的影响。[方法]采用沙土鼠双侧颈动脉夹闭脑缺血模型。于脑缺血15min再灌注24h和48h后运用免疫组织化学技术观察星型胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的动态表达。[结果]缺血15min再灌注24h后，GFAP免疫阳性反应达高峰，补阳还五汤和黄芪可使GFAP免疫反应减轻；缺血15min再灌注48h后GFAP表达减弱，补阳还五汤和黄芪可使其增强。[结论]补阳还五汤和黄芪对脑缺血再灌注后星形胶质细胞的调节作用可能与脑缺血损伤后神经功能的恢复有关。     

补阳还五汤对大鼠全脑缺血再灌注的药效研究

【目的】比较补阳还五汤复方胶囊与原方汤剂保护和修复大鼠全脑缺血再灌注损伤神经细胞的作用,并从抗氧化角度探讨其作用机制。【方法】选用SD雄性大鼠,随机分为假手术组,模型组,补阳还五汤原方汤剂组(剂量为10 g.kg-1.d-1),复方胶囊高、中、低剂量组(剂量分别为7.56、3.78、1.89 g.kg-1.d-1);采用4血管闭塞法复制全脑缺血再灌注模型,比较补阳还五汤复方胶囊和原方汤剂对海马CA1区病理形态结构的修复程度,并对血清及脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及脑组织含水量进行测定。【结果】原方汤剂组及复方胶囊各剂量组对海马CA1区神经元细胞病理形态变化均有康复改善作用,且复方胶囊中剂量组作用最为显著;在血清和脑组织中,原方汤剂组及复方胶囊组均可使SOD活性显著升高,MDA含量显著下降(P<0.01),且以复方胶囊中剂量组作用最为明显;原方汤剂组及复方胶囊各剂量组均可显著降低脑组织含水量(P<0.01),其中复方胶囊高剂量组作用最明显。【结论】补阳还五汤原方汤剂及复方胶囊对大鼠全脑缺血再灌注损伤均有保护作用,但复方胶囊疗效更为确切。     

补阳还五汤对沙鼠脑缺血损伤细胞凋亡的影响及机理研究

目的：研究 阳还五汤对沙鼠脑缺血损伤后神经细胞凋亡的作用及可能的作用机理。方法：采用沙土鼠双侧颈总动脉夹闭脑缺血再灌注模型,于再灌后１２０ｈ取大脑半球,在解剖显微镜下切取海马,电镜观察神经细胞凋亡的情况;同样模型,于缺血再灌注后４８ｈ取脑组织测定Ｎａ＾＋、Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶、Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶、Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性、乳酸含量、ＮＯ含量、一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性、氨基酸含量等。结果：补阳还五汤     

补阳还五汤对脊髓损伤大鼠脊髓组织血小板活化因子受体mRNA表达的影响

[目的]观察补阳还五汤对脊髓损伤(SCI)模型大鼠脊髓组织血小板活化因子受体(PAF-R)mRNA表达的影响.[方法]选用SPF级Wistar大鼠,随机分为4组:正常组、模型组、补阳还五汤组(剂量为40 g·kg-1·d-1)、金纳多组(剂量为45.5 mg·kg-1·d-1);采用Allen's法复制中度SCI模型,造模成功后观察1周;连续给药2周后,取各组脊髓组织,采用实时逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组脊髓组织PAF-R mRNA表达水平.[结果]模型组大鼠脊髓组织PAF-R mRNA表达显著降低(P＜0.01);补阳还五汤组及金纳多组均可抑制脊髓组织PAF-R mRNA表达,与模型组比较差异有显著性意义(P＜0.01),而两给药组之间比较无显著性差异(P＞0.05).[结论]补阳还五汤对损伤脊髓的保护作用可能与其能减少PAF-R数目,抑制PAF-R活性,从而阻断PAF发挥损伤效应有关.     

补阳还五汤对鼠脑缺血再灌注后脑组织兴奋性氨基酸的作用

【目的】观察补阳还五汤对沙土鼠脑缺血及再灌注损伤与脑组织兴奋性氨基酸(EAA)的影响。【方法】复制沙土鼠双侧颈总动脉夹闭脑缺血模型,于缺血后15min再灌注48h,取脑组织测定天冬氨酸(GJu)、谷氨酸(Asp)、γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸(Gly)的含量。【结果】缺血15min后,脑组织Glu、Asp、GABA含量升高(P<0.05或P<0.01),补阳还五汤可降低脑组织Glu含量(P<0.05);缺血15min再灌注48h后,脑组织Glu及Asp含量升高(P<0.05),补阳还五汤可使脑组织Glu含量降低(P<0.05)。【结论】补阳还五汤抗缺血性脑损伤的作用机理可能与其对抗脑缺血及再灌注后EAA的升高有关。     

巴戟素补肾健脑作用的神经活动基础

巴戟素是广州中医药大学新近从补肾中药巴戟天中提取的一种糖类单体物。为探讨巴戟素的补肾健脑的神经作用机制, 本实验以大鼠离体海马脑片为标本, 从细胞分子水平上观察巴戟素对大鼠海马脑片缺氧状态下的诱发群锋电位（ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｓｐｉｋｅ, ＰＳ） 和突触传递长时程增强（ｌｏｎｇ ｔｅｒｍ ｐｏｔｅｎｔｉａｔｉｏｎ , ＬＴＰ） 的影响。结果观察到巴戟素对脑缺氧损伤具有保护作用, 并能增强脑的记忆功能; 并观察到其作用机制与一氧化氮（ＮＯ） 有一定关系。实验结果从神经活动角度为中医补肾健脑理论增补了现代科学内容, 同时对开发巴戟素的临床应用提供了实验依据     

补阳还五汤对慢性脑缺血大鼠学习记忆能力及血小板活化因子含量的影响

[目的]探讨补阳还五汤对慢性脑缺血大鼠学习记忆能力的影响及其可能的作用机制.[方法]选用SPF级SD大鼠,采用双侧颈总动脉结扎法复制慢性脑缺血大鼠模型,再将经Morris水迷宫筛选的合格模型动物随机分为模型组,金纳多组(剂量为45 mg·kg-1·d-1),补阳还五汤高、低剂量组(中药高、低剂量组,剂量分别为40、20 g·kg-1·d-1),并与假手术组进行对照,检测各组大鼠的学习记忆能力及脑组织中血小板活化因子(PAF)含量.[结果]在Morris水迷宫定向航行实验中,给药各组第1天及中药低剂量组第2、3天逃避潜伏期明显缩短,与模型组比较差异均有显著性意义(P<0.05);在空间探索实验中,中药各组穿越平台次数均有增加,但与模型组比较差异无显著性意义(P>0.05);模型组脑组织PAF含量与假手术组比较显著升高(P<0.05),各给药组脑组织PAF含量显著降低(与模型组比较,P<0.05).[结论]补阳还五汤能明显改善慢性脑缺血大鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与降低脑组织中PAF含量有关.     

芪苓柴虎汤提取物抗乙型肝炎病毒的细胞实验研究

[目的]探计芪苓柴虎汤(QD)提取物的抗乙型肝炎病毒(HBV)作用。[方法]QD提取物处理乙肝病毒转染的细胞(2．2．15细胞)，用ELISA法测定HBsAg和HBeAg。[结果]QD制成的4个不同工艺提取物对HBV—DNA转染的2．2．15细胞分泌的HBsAg、HBeAg均有明显的抑制作用，并呈一定的剂量依赖关系。[结论]芪苓柴虎汤在体外对HBV有一定的抑制作用，为临床治疗慢性乙型肝炎提供了实验依据。