青蒿素对人宫颈癌Hela细胞的抑制作用

1 研究背景 青蒿素（Artemisinin）又名黄花蒿素、黄蒿素,是从菊科植物黄花蒿（artemisia annual）中提取的有效抗疟成分,为我国传统抗疟中药。其化学成分是含内过氧化基团的倍半萜内酯化合物。近年来的国内外研究表明,青蒿素及其衍生物（青蒿琥酯、二氢青蒿素、蒿甲醚）具有抗肿瘤作用,可抑制肿瘤细胞生长和诱导肿瘤细胞凋亡,同时也发现青蒿素及其衍生物不仅与传统化疗药不存在交叉耐药,而且能逆转肿瘤细胞的多药耐药现象。青蒿素及其衍生物体外对多种肿瘤细胞具有抑制、杀伤作用,对人肺腺癌A549细胞、人乳腺癌（MCF-7细胞）、人结肠癌（SW620细胞）生长有明显抑制和杀伤活性。     

红景天酪醇对人宫颈癌细胞增殖的抑制作用

目的 研究红景天酪醇对体外培养的人宫颈癌Hela细胞的抑制作用.方法 采用集落形成实验和MTT实验研究红景天酪醇对体外培养Hela细胞的杀伤作用.结果 红景天酪醇明显影响Hela细胞的集落形成,抑制Hela细胞的活性和功能状态.结论 红景天酪醇对Hela细胞的增殖具有明显的抑制作用,提示红景天酪醇可能对宫颈癌具有一定的防治作用.     

以Celecoxib为基础的联合方案对宫颈癌细胞抑制作用的研究

目的:探讨环氧化酶-2(cox-2)抑制剂Celecoxib与化疗药顺铂(DDP)联合应用对人宫颈癌Hela细胞的作用及机制。方法:用免疫细胞化学SP法检测Hela细胞cox-2蛋白表达后,将Celecoxib、DDP单独或联合处理Hela细胞,用MTT法检测细胞增殖的抑制率,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡。结果:Celecoxib可下调Hela细胞cox-2蛋白表达,抑制其增殖作用呈浓度和时间依赖性。在一定浓度范围内DDP也抑制Hela细胞生长,作用呈量效关系。Celecoxib与DDP联合应用后抗增殖作用较单一用药显著增强(P<0.05),DDP浓度≥1 mg/L时两者有协同或相加作用。Celecoxib及DDP均可有效诱导Hela细胞凋亡,联用凋亡率明显增加并出现G0-G1期细胞阻滞。结论:Celecoxib与DDP联用可通过抑制增殖、诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞对Hela细胞有协同抗肿瘤效应,提示两者联合可能在宫颈癌临床治疗上具有潜在价值。     

γ-分泌酶抑制剂DAPT对人宫颈癌Hela细胞体外增殖的影响

目的 探讨γ-分泌酶抑制剂DAPT对人宫颈癌Hela细胞系增殖和凋亡的影响.方法 体外培养人宫颈癌Hela细胞;MTT法检测不同浓度DAPT(1.0、5.0、10.0 μmol/L)对Hela细胞增殖的抑制作用;流式细胞术分析不同浓度DAPT对Hela细胞凋亡率及细胞周期分布的影响.结果 3 种浓度的DAPT均能显著抑制Hela细胞的增殖,抑制率分别为22.847%、32.492%、46.565%,作用呈明显剂量依赖性;不同浓度的 DAPT能使Hela细胞凋亡率明显增加,分别为,且使S期、G2/M期细胞比例减少,G0/G1期细胞比例显著增加,作用呈剂量依赖性.结论 DAPT对体外培养的人宫颈癌Hela细胞具有抑制增殖、调节细胞周期、诱导凋亡的作用.     

青蒿素联合琥珀酸亚铁对人肝癌细胞SMMC-7721选择性抑制作用的实验研究

目的研究青蒿素联合琥珀酸亚铁对人肝癌细胞SMMC-7721的选择性抑制作用。方法将人肝癌细胞株SMMC-7721接种于小鼠腰部皮下,制成小鼠荷瘤动物模型,分别用青蒿素、琥珀酸亚铁、青蒿素＋琥珀酸亚铁、生理盐水（对照组）对荷瘤小鼠进行干预,观察小鼠肿瘤体积的变化;TUNEL法检查肿瘤细胞的凋亡,计算抑瘤率和凋亡指数。结果青蒿素和青蒿素＋琥珀酸亚铁与生理盐水相比,明显抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长（P〈0.05）,其抑瘤率分别为33.21%和55.04%,2组间存在明显差异（P〈0.05）。青蒿素联合琥珀酸亚铁表现出明显的促凋亡作用,凋亡指数为31.35%,与对照组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。结论青蒿素和青蒿素联合琥珀酸亚铁对人肝癌细胞SMMC-7721均有肿瘤抑制作用和促进肿瘤细胞凋亡的作用,但是联合用药作用更强。     

Egr-1基因在人宫颈癌Hela细胞中的表达及其对细胞凋亡的作用

目的　研究不同剂量60 Co射线照射后Egr 1基因在人宫颈癌Hela细胞中的表达及与细胞凋亡的关系。方法　将人宫颈癌Hela细胞株进行体外培养 ,用不同剂量的60 Co射线照射 ,流式细胞仪记录细胞周期的分布和凋亡率 ,电子显微镜观察细胞形态 ,半定量RT PCR法检测Hela细胞Egr 1基因的表达。结果　放射线可抑制人宫颈癌Hela细胞的生长 ,诱导其凋亡。照射后细胞凋亡率随照射剂量增加而增加 ,至 12 0 0cGy时达高峰值 ,与对照组相比均有极显著性差异 (P <0 .0 1) ;照射后Hela细胞出现G0 /G1期阻滞 ,S期明显减少 ,且呈剂量依赖性 ,与对照组相比均有极显著性差异 (P <0 .0 1) ;照射后Egr 1基因表达随照射剂量增加而增加 ,至 12 0 0cGy时达峰值 ,与对照组比均有极显著性差异 (P <0 .0 1) ,Egr 1基因表达与凋亡率相关 (r=0 .96 9,P <0 .0 1)。结论　60 Co射线可引起人宫颈癌Hela细胞周期阻滞并诱导细胞凋亡 ,Egr 1基因为促凋亡基因 ,可能与宫颈癌的发生、发展及预后有关     

青蒿素对人胰腺癌JF305细胞增殖抑制作用研究

目的 研究不同浓度的青蒿素对人胰腺癌细胞JF305增殖的抑制作用,并初步探讨其作用机制.方法 常规体外培养人胰腺癌JF305细胞,加入不同浓度的青蒿素处理48 h.倒置显微镜下观察细胞形态的改变,MTT法检测青蒿素对细胞增殖情况的影响,Hochest33258荧光染色法观察细胞凋亡形态学改变.结果 倒置显微镜结果表明,随着药物浓度的增加,细胞数目逐渐减少.MTT结果表明,青蒿素对JF305细胞的增殖具有明显的抑制作用,且抑制作用随药物浓度的增加而增强.Hochest33258荧光染色结果表明,给药组细胞发生典型的凋亡形态改变.结论 青蒿素对胰腺癌细胞JF305的增殖有明显的抑制作用,并能诱发细胞凋亡.     

玉竹提取物B对Hela细胞的抑制作用

目的 观察玉竹提取物B(EB-PAOA)对人宫颈癌Hela细胞株的抑制作用。方法 体外培养宫颈癌Hela细胞，将其与不同浓度的EB-PAOA共育，观察细胞变化并绘制EB-PAOA对Hela细胞的生长曲线；用MTT比色分析法测定EB-PAOA对Hela细胞的抑制率。结果 EB-PAOA抑制了Hela细胞的增殖，旦呈时间-剂量依赖性。结论 EB-PAOA对体外培养的Hela细胞具有明显的抑制作用。     

米非司酮对宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用

目的 :探讨米非司酮对人子宫颈癌Hela细胞增殖的影响。方法 :采用MTT测定 ,观察不同浓度米非司酮 (10 ,5 ,2 .5 μmol/L)对Hela细胞增殖的抑制作用 ;通过ABC免疫组化法 ,检测用药后Hela细胞Ki 6 7抗原表达的变化。结果 :3个浓度的米非司酮对Hela细胞增殖均有抑制作用 ,并呈剂量依赖性 ,其中以 10 μmol/L浓度抑制作用最强 ,抑制率达 5 7.6 9% ;2 .5 μmol/L米非司酮可使Ki 6 7抗原表达明显减少。 结论 :米非司酮体外对PR阳性的人宫颈癌细胞有明显的抑制作用 ,通过降低细胞Ki 6 7抗原的表达而抑制其增殖。     

三氧化二砷对人宫颈癌Hela细胞的放射增敏作用

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)对人宫颈癌Hela细胞的放射增敏作用及其机制。方法:MTT法确定As2O3对Hela细胞的半数致死浓度(ID50);克隆形成法观察20%ID50的As2O3对Hela细胞的放射增敏作用;流式细胞仪测定细胞周期。结果:细胞生长抑制率随As2O3浓度增加而增高;As2O3+照射组的细胞存活率、D0值和Dq值均小于单纯照射组(P<0.05);存活曲线肩区(Dq)变小,放射增敏比(SER)为1.39;As2O3和γ-射线均能使细胞阻滞在G2/M期,联合应用比单独应用抑制作用显著(P<0.01)。结论:As2O3对宫颈癌Hela细胞株有明显的放射增敏作用;可能与As2O3改变细胞周期有关。     

改良的甲基化特异PCR法在人宫颈癌Hela细胞检测中的应用

目的介绍一种CpG岛甲基化分析方法，即甲基化特异PCR法（methylation—specific PCR，MSP）以及对该方法的改良。方法用亚硫酸氢盐修饰被测DNA后，进行甲基化与非甲基化特异PCR的扩增，并对MSP法进行改良。应用该法分析人宫颈癌Hela细胞中RASSF1A、p16基因5＇CpG岛甲基化状态。结果发现人宫颈癌Hela细胞中有RASSF1A、p16基因的甲基化，改良后的MSP更容易获得较好的效果。结论MSP法是一种较为简便、灵敏和具特异性的甲基化检测方法，改良后该方法更加简便可行。     

青蒿素对人肝癌HepG2细胞增殖的影响

目的：研究不同浓度和作用不同时间的青蒿素对人肝癌细胞HepG2生长的抑制作用。方法取对数生长期的细胞接种于96孔板,给予不同浓度的青蒿素0．10．20．40．60．81．01．2 mmol／L）处理,给药24 h后在倒置显微镜下观察细胞形态的改变,并用MTT法检测药物的细胞毒作用。结果倒置显微镜下,细胞随药物浓度和作用时间的增加对细胞的毒性作用增强,细胞数目均有所减少,多数细胞体积固缩变小,失去原有肿瘤细胞形态而略呈圆形。 MTT结果显示,不同浓度青蒿素对肿瘤细胞的抑制效果呈现出浓度和时间的依赖性。1．2 mmol／L的青蒿素,作用细胞24 h后的抑制率达到了81．33％。结论青蒿素在体外对肝HepG2细胞的增殖有明显的抑制作用,并呈现一定的时间和剂量依赖性。     

白藜芦醇对人宫颈癌Hela细胞凋亡、增殖影响的实验研究

目的研究白藜芦醇对宫颈癌Hela细胞体外生长的影响,并初步探讨其作用机制。方法用不同浓度的白藜芦醇作用于人宫颈癌Hela细胞,通过MTT法来检测白藜芦醇对人宫颈癌Hela细胞增殖的影响;TdT酶介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL试剂盒）检测白藜芦醇对Hela细胞凋亡的影响。结果不同浓度白藜芦醇浓度对Hela细胞均有抑制作用。白藜芦醇在25～100μmol/L范围内呈时间和剂量依赖。在100μmol/L已达到作用浓度平台期。50μmol/L及以上浓度的白藜芦醇对Hela细胞有明显的凋亡阳性反应,随时间延长凋亡率增加。结论达到一定浓度的白藜芦醇就能够对人宫颈癌Hela细胞产生明显的抑制增殖作用。白藜芦醇在对Hela细胞抑制其增殖的同时诱导其凋亡。     

米非司酮对宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用

目的：探讨米非司酮对人子宫颈癌Ｈｅｌａ细胞增殖的影响。方法：采用ＭＴＴ测定,观察不同浓度米非司酮（１０,５,２．５μｍｏｌ／Ｌ对Ｈｅｌａ细胞增殖的抑制作用;通过ＡＢＣ免疫组化法,检测用药后Ｈｅｌａ细胞Ｋｉ－６７抗原表达的变化。结果３个浓度的米非司酮对Ｈｅｌａ细胞２均有抑制作用并呈剂量依赖性,其中以１０μｍｏｌ／Ｌ浓度抵制作用最强,抑制率达５７．６９％．２．５μｍｏｌ／Ｌ米非司酮可使Ｋｉ－６７抗原表     

青蒿素对人乳腺癌细胞MDA-MB-435辐照后染色体畸变率的影响

目的应用常规染色体分析研究青蒿素对p53功能突变的人乳腺癌细胞MDA-MB-435的放射敏感作用。方法通过MTT法测定不同药物浓度及不同药物作用时间对细胞毒性的影响,常规染色体制片,计数细胞分类项中双着丝粒体（dic）和着丝粒环（r）数量,将经过青蒿素作用的乳腺癌细胞染色体畸变率（dic＋r）同单纯照射的细胞染色体畸变率进行统计分析。结果青蒿素对实验细胞MDA-MB-435毒性较小,200μmol/L浓度时作用24h细胞存活率〉95%,48h细胞存活率〉80%。参考存活曲线确定常规染色体畸变分析实验的药物浓度为200μmol/L,作用时间为24h。将得到的数据进行回归拟合,可以得到药物作用及未经药物作用的剂量效应曲线,比较两组曲线,青蒿素作用组的染色体畸变率明显高于单纯照射细胞（P〉0.05）。结论青蒿素能增加辐射对乳腺癌细胞MDA-MB-435的染色体损伤。     

Apoptin对宫颈癌Hela细胞的抑制效应

目的：探讨Apoptin基因对人宫颈癌Hela细胞的抑制作用和作用方式。方法：应用脂质体转染法将重组质粒pVAX1-Apoptin和载体质粒pVAX1分别体外转染Hela细胞,作为重组质粒pVAX1-Apoptin组和载体质粒pVAX1组,同时设空白细胞对照组。应用Western blotting检测Apoptin基因在Hela细胞中的表达;运用噻唑兰(MTT)分析法检测重组质粒对Hela肿瘤细胞的抑制作用;罗丹明123 和DCFA 染色测定线粒体跨膜电位(ΔΨm) 和活性氧水平变化;底物染色反应检测caspase-3活性。结果：pVAX1-Apoptin组转染48 h后,Hela细胞的抑制率为69.28%,明显高于对照组（0.74%）和pVAX1组（10.11%）（P<0.01）。与对照组比较,pVAX1-Apoptin组线粒体ΔΨm下降(P<0.01),细胞内活性氧水平升高(P<0.05), caspase-3活性增强(P<0.01)。结论：Apoptin可通过诱导Hela细胞凋亡,进而特异性杀伤Hela肿瘤细胞。     

鸦胆子油乳联合顺铂对宫颈癌HeLa细胞的抑制作用及其机制

目的研究鸦胆子油乳联合顺铂对宫颈癌HeLa细胞的增殖抑制与凋亡作用,探讨鸦胆子油乳联合顺铂的抗肿瘤作用及其机制。方法采用甲基噻唑基四唑法检测HeLa细胞生长抑制率;流式细胞仪检测各组药物对HeLa细胞凋亡的影响;免疫细胞化学法检测Survivin和Caspase-3蛋白表达水平。结果空白对照组、顺铂组、鸦胆子油乳组和鸦胆子油乳联合顺铂组HeLa细胞的凋亡率分别为(9.91±0.35)%、(13.65±0.18)%、(10.68±0.21)%、(15.56±0.37)%;顺铂组、鸦胆子油乳组、鸦胆子油乳联合顺铂组与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);鸦胆子油乳联合顺铂组与顺铂组和鸦胆子油乳组比较差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。空白对照组、鸦胆子油乳组、顺铂组和鸦胆子油乳联合顺铂组Survivin蛋白表达阳性细胞率分别为(84.22±2.96)%、(61.77±4.40)%、(29.47±3.74)%、(13.75±1.79)%,经两两比较差异均有统计学意义(P<0.01);Caspase-3蛋白表达阳性细胞率分别为(12.70±3.42)%、(38.32±2.76)%、(71.36±3.14)%、(91.31±2.23)%,经两两比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论鸦胆子油乳与顺铂联合对宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制有协同作用;鸦胆子油乳联合顺铂诱导HeLa细胞凋亡可能与降低Survivin蛋白表达和增强Caspase-3蛋白表达有关。     

藏红花素对人宫颈癌Hela细胞顺铂耐药性的影响

目的 探讨藏红花素对人宫颈癌Hela细胞顺铂耐药性的影响.方法 将对数生长期耐顺铂人宫颈癌Hela/DDP细胞随机分为空白对照组、藏红花素组、顺铂组及联合组.藏红花素组细胞以含终质量浓度400 mg·L-1藏红花素的培养基培养,顺铂组细胞以含终质量浓度5 mg·L-1顺铂的培养基培养,联合组细胞以含终质量浓度400 m...     

木樨草素对宫颈癌Hela细胞增殖抑制作用的实验研究

目的 探讨木樨草素对宫颈癌Hela细胞增殖的影响.方法 将宫颈癌细胞株传代培养至对数生长期,分组加入不同浓度的木樨草素,并设空白对照组.用MTT比色法观察木樨草素对体外培养的宫颈癌细胞生长的抑制作用,在光学显微镜下观察细胞形态学变化.结果 MTT比色法测定显示,木樨草素作用于宫颈癌Hela细胞后可以抑制其增殖且呈剂量依赖性.结论 木樨草素能抑制体外培养的宫颈癌Hela细胞的增殖.     

苦参碱诱导宫颈癌Hela细胞的凋亡作用

目的:研究不同浓度的苦参碱(Mat)对宫颈癌Hela细胞株的体外增殖抑制作用。方法:采用体外细胞培养技术,以不同浓度的Mat作用于宫颈癌Hela细胞,相同条件下培养24h、48h、72h后,倒置显微镜观察细胞形态变化;MTT法测定Mat对Hela细胞的增殖抑制率;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率。结果:不同浓度Mat在体外均能不同程度抑制宫颈癌Hela细胞增殖,并且作用呈现时间-剂量依赖性;苦参碱诱导Hela细胞凋亡率增加。结论:Mat有抑制宫颈癌Hela细胞的增殖,诱导其凋亡作用。