ADAM28反义核酸对人牙乳头细胞内ADAM28表达的影响

目的：探讨金属蛋白酶解离素28（ADAM28）反义核酸对人牙乳头细胞（HDPC）内ADAM28蛋白表达的影响。方法：应用反义核酸技术,设计并合成与ADAM28mRNA特异序列互补的AS-ODN和正义对照S-ODN转染HDPC后,通过免疫细胞化学、PCR和Westernblot检测细胞中ADAM28的表达差异。结果：ADAM28AS-ODN转RT-染HDPC后,在转录、翻译和蛋白水平细胞内ADAM28的表达均明显减弱,统计学分析有显著性差异（P〈0.01）。结论：应用ADAM28AS-ODN可有效封闭HDPC内ADAM28的表达,为进一步研究反义核酸在牙胚组织和细胞中的功能提供实验和理论依据。     

ADAM28反义核酸对人牙乳头细胞增殖、分化和凋亡的影响

目的研究金属蛋白酶解离素28（ADAM28）反义核酸（AS-ODN）对人牙乳头细胞（HDPC）增殖、分化、凋亡等生物学特性的影响并分析可能的作用机制。方法采用细胞培养、基因转染、四唑盐（MTr）比色法、酶动力学法和流式细胞术（FCM）检测ADAM28反义核酸转染HDPC后对细胞生物学特性的影响。结果ADAM28 AS-ODN组HDPC的增殖活性、增殖指数、碱性磷酸酶（ALP）分泌活性显著降低,凋亡细胞百分比明显上升。结论ADAM28反义核酸可显著抑制HDPC的增殖和ALP的活性,显著诱导HDPC的凋亡并影响细胞周期的变化。     

ADAM28反义核酸对人牙囊细胞内ADAM28表达的影响

目的探讨金属蛋白酶解离素28(ADAM28)反义核酸对人牙囊细胞(HDFC)内ADAM28蛋白表达的影响。方法应用反义核酸技术,设计并合成与ADAM28 mRNA特异序列互补的AS-ODN和正义对照S-ODN转染HDFC后,通过免疫细胞化学、RT-PCR和Western blot检测细胞中ADAM28的表达差异。结果ADAM28 AS-ODN转染HDFC后,在转录、翻译和蛋白水平细胞内ADAM28的表达均明显减弱,统计学分析有显著性差异(P<0.01)。结论ADAM28 AS-ODN可有效封闭HDFC内ADAM28的表达。     

ADAM28反义核酸对人牙龈成纤维细胞生物学功能的影响

目的 研究金属蛋白酶解离素28（a disintegrin and metalloproteinase 28, ADAM28）反义核酸（antisense oligodeoxynucleotide, AS-ODN）对人牙龈成纤维细胞（human gingival fibroblasts, HGFs）增殖、分化、凋亡的影响,并分析可能的作用机制。方法 采用细胞培养、基因转染、四甲基唑蓝（MTT）比色法、酶动力学法和流式细胞术（FCM）检测ADAM28反义核酸转染HGFs后对细胞生物学特性的影响。采用SPSS16.0软件包中的SNK检验对数据进行统计学分析。结果 ADAM28 AS-ODN组HGFs的增殖活性显著降低。AS-ODN组HGFs处于S期的细胞百分比显著低于S-ODN组和未转染组,G₂+M期的细胞百分比显著低于未转染组,AS-ODN组的细胞增殖指数（PI=S+G₂M）显著低于其他2组,差异显著。AS-ODN组碱性磷酸酶（ALP）分泌活性、凋亡细胞百分比显著升高。结论 ADAM28 反义核酸可显著抑制HGFs的增殖,并影响细胞周期的变化,促进其分化,显著诱导HGFs的凋亡。     

ADAM28反义核酸治疗牙根发育不良疾病的实验研究

目的:探讨金属蛋白酶解离素28(ADAM28)反义核酸(AS-ODN)治疗牙根发育不良疾病(CHTR)的可行性和效果。方法:应用反义核酸技术、基因重组、动物实验和酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测ADAM28 AS-ODN、S-ODN和真核质粒对CHTR的不同效应。结果:用药后AS-ODN组患牙松动度明显减轻,牙周袋深度显著变浅,COL-Ⅱ、IL-1β、PGE2水平均显著下降,呈现炎症愈合趋势;S-ODN组和真核质粒组各项检测结果正相反,炎症呈显著上升趋势。结论:应用ADAM28 AS-ODN(200μmol/L)可有效治疗牙根发育不良疾病,但最佳药物浓度和用药时间还需进一步探讨。     

ADAM28反义核酸对人牙囊细胞增殖和碱性磷酸酶的影响

目的:研究ADAM28反义核酸(AS-ODN)对人牙囊细胞(HDFCs)增殖和碱性磷酸酶(AKPase)活性的影响。方法:采用细胞培养、基因转染、四唑盐(MTT)比色法和酶动力学方法,检测ADAM28反义核酸对牙囊细胞增殖、分化和影响碱性磷酸酶活性的可能机制。实验数据采用单因素方差分析的q检验(SNK)进行统计学分析。结果:ADAM28反义核酸成功转染人牙囊细胞,MTT和AKPase活性检测显示:ADAM28AS-ODN组细胞增殖和AKPase活性均显著低于S-ODN组和空白对照组,其中MTT检测的组间P值分别为0.0002、0.0001,P均<0.01;AKPase检测的组间P值分别为0.0007、0.0003,P均<0.01,即ADAM28反义核酸可显著抑制HDFCs的增殖和AKPase的活性。结论:ADAM28可能通过参与Notch信号途径来促进牙囊细胞的增殖和分化。     

ADAM28反义核酸对人牙周膜干细胞增殖、分化和凋亡的影响

目的:探讨金属蛋白酶解离素28(ADAM28)反义核酸(AS-ODN)对人牙周膜干细胞(HPDISC)增殖、分化、凋亡特性的影响和可能的作用机制.方法:体外分离培养、鉴定HPDISC,将设计合成的ADAM28反义核酸和正义对照(S-ODN)分别转染HPDLSC,应用四唑盐(MTT)比色法、酶动力学法和流式细胞术(FCM)检测ADAM28反义核酸对HPDLSC生物学特性的影响.采用SPSS13.0软件包中的SNK检验进行统计学分析.结果:ADAM28 AS-ODN组HPDLSC的增殖活性、增殖指数显著低于S-ODN组和未转染组,碱性磷酸酶(ALP)分泌水平及凋亡细胞百分比明显上升,差异显著(P<0.01).结论:ADAM28 AS-ODN可显著抑制HPDLSC的增殖并影响细胞周期的变化,促进ALP的分泌活性,显著诱导HPDLSC的凋亡.     

金属蛋白酶解离素28对人牙乳头细胞生物学特性的影响

目的:探讨金属蛋白酶解离素28(ADAM28)基因对人牙乳头细胞(HDPC)增殖、分化、凋亡的影响,并分析其可能的作用机制.方法:应用细胞培养、基因转染、MTT、流式细胞术(FCM)和酶动力学等方法,探讨ADAM28基因对HDPC生物学特性的影响,采用SPSS12.0软件包中的SNK检验进行统计学分析.结果:成功转染ADAM28真核质粒,真核质粒转染组HDPC的增殖活性、增殖指数、碱性磷酸酶(ALP)分泌活性显著高于空载体组、未转染组,而凋亡细胞百分比显著低于两对照组,P<0.01.结论:ADAM28可显著促进HDPC的增殖和ALP的分泌,显著抑制HDPC的凋亡.     

牙齿发育相关基因ADAM28在人牙乳头细胞中的定位分布研究

目的探讨牙齿发育相关基因金属蛋白酶解离素28(a disintegrin and metalloproteinase28,ADAM28)在人牙乳头细胞(human dental papilla cells,HDPC)中的定位分布及作用。方法应用基因重组技术构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-ADAM28,通过细胞培养、基因转染HDPC后,采用免疫荧光、RT-PCR及Western blot检测ADAM28在HDPC中的表达分布。结果成功构建并鉴定ADAM28真核质粒,瞬时转染HDPC72h后,HDPC的胞质和胞膜上均表达ADAM28蛋白,而两对照组均无表达。结论ADAM28在HDPC内能被正确地翻译、表达,可能作为一种胞质蛋白调控着牙源性间充质细胞的增殖和分化。     

ADAM28反义核酸对人牙髓干细胞生物学特性的影响

目的：探讨金属蛋白酶解离素28（ADAM28）反义核酸（AS-ODN）对人牙髓干细胞（HDPSCs）增殖、分化、凋亡特性的影响并分析可能的作用机制。方法：体外分离培养、鉴定HDPSCs,将FITC荧光标记的ADAM28反义核酸（AS-ODN）和正义对照（S-ODN）分别转染HDPSCs,用半定量反转录聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白印迹法（Westernblot）检测ADAM28AS-ODN转染48h后的封闭效率,应用四唑盐（MTT）比色法、酶动力学法和流式细胞术（FCM）分别检测实验各组HDPSCs的增殖活性、碱性磷酸酶（AKP）的分泌活性以及细胞周期分布和凋亡百分比。采用SPSS13.0软件包的SNK检验进行统计学分析。结果：AS-ODN转染组ADAM28mRNA和蛋白的表达水平均明显下调（P〈0.05）,细胞增殖活性、增殖指数明显降低（P〈0.05）,碱性磷酸酶（AKP）分泌水平和细胞凋亡率显著增高（P〈0.05）。结论：ADAM28AS-ODN可显著抑制HDPSCs的增殖并影响细胞周期的变化,促进AKP的分泌活性并诱导HDPSCs的凋亡。     

ADAM28反义核酸对人牙囊细胞生物学特性的影响

目的：研究ADAM28反义核酸（As—ODN）对人牙囊细胞（HDFC）增殖、分化、凋亡等生物学特性的影响。方法：采用细胞培养、基因转染、四唑盐（MTT）比色法、酶动力学方法和流式细胞术（FCM）检测ADAM28反义核酸转染HDFC后对细胞生物学特性的影响。结果：ADAM28AS—ODN组HDFC的增殖活性、增殖指数、碱性磷酸酶（ALP）分泌活性显著降低，凋亡细胞百分比明显上升。结论：ADAM28反义核酸可显著抑制HDFC的增殖和ALP的活性，显著诱导HDFC的凋亡并影响细胞周期的变化。     

ADAM28在小鼠牙胚发育中的时空表达

目的:研究ADAM28在小鼠牙胚发育中的时空分布。方法:采用免疫组织化学方法和图像分析技术观察ADAM28在小鼠牙胚发育各期的表达分布及差异。结果:ADAM28在牙胚发育各时期均有不同程度的表达。帽状期开始即在口腔上皮及成釉器星网层细胞、基底膜、牙乳头细胞和牙囊细胞表达强阳性,到钟状晚期,成釉细胞、釉基质、上皮根鞘和牙乳头细胞阳性表达;至冠根硬组织发育期,成釉细胞、成牙本质细胞、上皮根鞘、成牙骨质细胞、牙乳头细胞、牙囊细胞阳性表达。结论:ADAM28作为上皮和间充质间重要的信号分子,参与了从蕾状期到钟状晚期、从基质分泌到硬组织形成的牙冠、牙根形态发生过程,它可能在牙源性间充质细胞的早期形成、增殖与分化启动中发挥重要作用。