4—Di—2—ASP一种染活性神经末梢的荧光染料

实验选用了神经末梢活性荧光染料４－Ｄｉ－２－ＡＳＰ，观察了不同浓度的染料溶液对蛇腹横肌标本神经肌接头微终板电位发放的影响。结果表明：蛇腹横肌标本在１０μｍ浓度下，３分钟即可着色，并可在荧光显微镜下观察到神经末梢的外形结构，且对神经肌接头微终板电位发放无影响。     

荧光染料CFSE作为细胞标记的特性研究

探讨荧光染料CFSE在作为细胞标记时的特性。方法 :应用激光共聚焦扫描显微术 ,观察CFSE在细胞中的准确定位。利用MTT比色法测定CFSE标记的细胞及未标记细胞的增殖情况 ;通过细胞计数和流式细胞仪 (FCM) ,测定细胞在不加任何刺激及诱导的情况下细胞数及平均荧光强度的变化趋势。结果 :在共聚焦显微镜下 ,可见CFSE标记的细胞的细胞膜、细胞核及细胞质中都带有绿色荧光 ,以胞核荧光最强。利用MTT比色法测定标记及未标记细胞的A值无显著差异。连续 6d记录的细胞数与FCM测定的平均荧光强度呈负相关。结论 :CFSE可作为细胞的标记物 ,用于细胞移植的体内检测、细胞增殖试验及细胞分裂周期的估算等研究     

一种荧光碳量子点的绿色合成方法及其应用研究

本研究探索一种可用于生物医学成像的绿色、高效的荧光碳量子点合成方法,以天然淀粉和水为原料,采用水热法合成碳量子点(carbon quantum dots,CQDs).利用透射电镜和原子力显微镜表征CQDs形貌;紫外光谱、拉曼光谱等方法表征其光学性能,共聚焦显微镜检测其在金黄色葡萄球菌和肺癌A549细胞中的生物成像能力,...     

精子发育阶段的荧光染色观察

根据文献报道7690-Xu荧光染色法可显示细胞的分化程度,分化程度低的细胞呈蓝色荧光,分化程度越低蓝色荧光越深,分化程度高的细胞胞质为黄色荧光,核为桔黄-桔红色荧光[1]。实验证明,淡蓝色或黄色荧光的小淋巴细胞可转化为淋巴母细胞,这种返幼的淋巴母细胞呈深蓝色荧光[2]。精子是由睾丸生精小管产生,但尚无主动运动能力和受精能力,必须在附睾中停留一段时间,才能达到功能上的成熟。近年大量研究证明精子在附睾中的成熟发育发生了一系列形态结构和生理代谢等方面的变化[3],应用荧光染色方法对其进行观察尚未见报道,本文利用荧光染色法进行了…     

利用荧光染色法判断矽肺组织中铝的存在研究

用冰冻切片桑色素荧光染色法观察矽肺大鼠肺组织中的铝元素。经腹腔注射柠檬酸铝后可见肺组织切片中铝的荧光色淀明显增加,而矽肺大鼠和正常大鼠肺组织中则基本观察不到铝的色淀沉着。说明注射铝剂后经血流可以到达矽肺组织。在石英混悬液中加入柠檬酸铝后,同样可观察到在石英颗粒表面包绕着铝的荧光色淀。     

一种新的检测胃黏膜幽门螺杆菌荧光定量PCR法

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)是全球最常见的人类感染菌之一,其被认为是慢性胃炎、消化性溃疡的主要原因,且与胃癌的发生密切相关[1,2]。WHO将HP列为第1类致病因子。因此快速准确地检测HP感染对大众健康具有重要意义。实时荧光定量PCR(fluorogenic quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)技术具有高灵敏度和高特异性的优点,并能对细菌进行定量,国内外已有多项研究应用FQ-PCR法检测HP不同的基因片段。本文以HP尿素酶     

脉冲染料激光治疗良性皮肤色素损害

皮肤科和整形外科医师对常见浅表良性皮肤色素损害的常规治疗方法很多，如擦皮法、除色素霜法和各种类型的激光器，这些方法缺乏特异性，也就是说，正常的色素沉着，甚至无色素结构，和过多多色素沉着一样全被无区别地破坏了。结果，有些病例除形成瘢痕外，还产生了各种各样的色素减退和色素过多。     

一种新的精液脱落细胞染色方法的探讨

随着社会的发展 ,科技的进步 ,现在男性学的研究工作不断开展新的检查项目 ,评价男性生育力的各项检测手段日益更新 ,沿用九十年代的精液常规检查已经不适用今天的医疗。尤其是镜检把精液内脱落细胞一律视为白细胞很显然是不科学的。很多病人经抗感染治疗几个月无效 ,延误了诊断和治疗。所以 ,对精液脱落细胞正确检查就象分析血细胞那样对精子发生感染 ,抗精子免疫等生殖道状况作出比较详细的了解 ,对发生在睾丸、附睾和附性腺等不同性质疾病能反应出来。另一方面 ,对睾丸病变所进行的睾丸活检是一次手术 ,会给病人带来创伤和感染的机会 ,不…     

一种新的质粒介导的IMI-1型碳青霉烯酶

目的　确立亚胺培南耐药阴沟肠杆菌对亚胺培南的耐药机制。方法　采用Etest测定抗菌药物最低抑菌浓度 (MIC) ,通过等电点聚焦电泳 (IEF)、三维试验、接合试验、Southern杂交、聚合酶链反应 (PCR)、克隆测序对酶的活性及编码基因进行研究。结果　阴沟肠杆菌产碳青霉烯酶 ,等电点为 8.1。该酶能被克拉维酸抑制 ,不被氯唑西林、EDTA抑制 ,存在 2f类酶的某些特性 ,其耐药基因位于 80kb左右的质粒上。克隆测序显示与染色体介导的IMI 1有 99%的同源性。结论　阴沟肠杆菌对亚胺培南耐药是由一种新的质粒介导的与染色体介导的IMI 1类似的碳青霉烯酶所致。     

一种新的超微量免疫分析技术—时间分辨荧光免疫分析

<正> 放射免疫分析(RIA)自它产生以来在生物、医学领域内获得了广泛应用。RIA虽然灵敏度高、精密度好,但它有两个主要缺点:操作带放射性和放置时间较短。近年来非同位素标记的免疫分析技术得到了迅速发展,其中酶免疫分析(EIA)已取得相当成功的应用。但EIA中的标记酶容易变化,甚至变     

荧光染料双染法观察汉防己对胸腺细胞的作用

目的观察防己（Radix Stephaniae Tetrandrae）对小鼠胸腺细胞增殖的影响。方法取昆明种小鼠的胸腺细胞,分为对照组和药物组,药物组用100μg／ml汉防己煎剂对胸腺细胞分别作用1h、6h、12h、24h后,采用DNA荧光染料双染法观察胸腺细胞增殖的影响。结果实验组可见典型凋亡细胞,对照组细胞大小比较均一,无明显形态学变化。随着药物作用时间的延长,凋亡小体的比例显著增加。结论防己可以诱导小鼠胸腺的细胞的凋亡。     

两种荧光染料-CFSE与碘化丙啶染色方法检测细胞杀伤能力

细胞杀伤能力在评估细胞毒T细胞（CTL）及NK细胞的杀伤能力中起到重要的作用。我们采用两种荧光染料染色的方法检测脾细胞对同种异体细胞的杀伤能力。将实验小鼠分为4组，见表1。     

介绍一种新的复合免疫标记技术—光镜荧光免疫标记结合电镜免疫金标记

荧光免疫细胞化学已广泛应用于病理学、临床检验学等许多方面,尤其在各类白血病细胞的免疫分型诊断中发挥了重要的作用.许多学者认为该技术虽有一定的灵敏性和特异性,但仍有某些缺点,例如荧光标本不能长期保存,且要在性能较好的荧光显微镜下观察,对有些荧光标记比较弱的样品,不能明确诊断.因此常常需要另做其它指标,     

一种新的国产逆行荧光标记物

逆行荧光标记法是70年代后期发展起来追踪神经联系的新研究方法。它简便、有效、容易与荧光组化技术相结合,还可进行双或三标记研究,已为我国神经解剖学工作者所重视并开始有这方面研究的报导。目前文献中所提到的逆行荧光标记物已有数种,但它们均分别存在某些缺点和不足,有些能使注射部位神经组织产生坏死,另一些则自标记的神经细胞和轴突向外弥散至其周围,还有一些逆行运送量少,距离短。此外,除少数标记     

PCR基因芯片上荧光PCR反应的研究

目的探讨能否在基因芯片上进行不同的荧光掺入PCR反应并根据基因芯片上荧光的变化判断基因的变异.方法利用健康外周血,正常脐血DNA,X连锁遗传性铁粒幼细胞贫血(XLSA)家系成员6人外周血DNA做PCR-SSCP,并测序确定.设计检测此点突变的Taqman探针进行荧光PCR反应,在芯片上进行同样的反应,与上述反应结果进行对照.利用4步位点特异PCR结合SYBR荧光染料初筛HLAA2,并在芯片上进行同样的反应,与上述反应结果进行对照.结果PCR-SSCP分析与测序确定X连锁遗传性铁幼粒细胞贫血家系两患者的ALAS2基因第5外显子有G514A点突变,母亲、外祖母为杂合子携带者.设计Taqman探针时此家系中六位成员DNA与二份正常男性脐血DNA检测与预期结果相符.将上述结果中同样的样本移入芯片进行PCR反应,结果与常规荧光PCR反应的结果一致.SYBR荧光染料PCR反应与芯片上SYBR荧光染料PCR反应的结果与预期完全相符.结论利用TaqMan探针与SYBR Green荧光染料可以在PCR基因芯片上顺利进行PCR反应,根据基因芯片上荧光的变化检测出点突变与单核苷酸多态性.为基因芯片的临床应用打下了基础.     

一种水溶性稀土上转换荧光纳米探针及其活体荧光成像研究

目的制备一种水溶性稀土上转换荧光纳米探针NaYF4∶Yb3＋/Er3＋,用于动物活体荧光成像。方法采用三氟乙酸盐热分解法合成油溶性稀土上转换荧光纳米探针NaYF4∶Yb3＋/Er3＋,然后选用柠檬酸或L-半胱氨酸作为修饰剂,置于油-水两相中加热到100℃进行配体交换,离心纯化得到水溶性产物。并对所制备的上转换荧光纳米微粒进行X射线衍射测试（XRD）、X射线光电子能谱分析（XPS）、透射电子显微镜及红外和荧光光谱等表征,确定稀土上转换荧光纳米探针的组成、形态及修饰后该纳米探针的性质。最后将修饰后的水溶性稀土上转换荧光纳米探针作为探针应用于小鼠的活体成像。结果制备的稀土上转换荧光纳米探针NaYF4∶Yb3＋/Er3＋为立方相、平均粒径约21.3 nm的多边形结构,分别在540 nm和660 nm处发出荧光。用柠檬酸或L-半胱氨酸修饰后的稀土上转换荧光纳米探针可以稳定地分散在水中;并且修饰后的稀土上转换荧光纳米探针的粒径、晶相及荧光性质没有发生改变;红外光谱表明,该纳米探针的表面成功引入了修饰剂;该荧光纳米探针用于小鼠活体成像荧光信号清晰可见。结论研制出了一种用柠檬酸或L-半胱氨酸表面修饰的、水溶性稀土上转换荧光纳米探针NaYF4∶Yb3＋/Er3＋,表现出了较好的动物活体成像应用前景。     

明胶墨汁与荧光微球显示大鼠视网膜微血管灌流效果的对比研究

目的:比较明胶墨汁灌注与荧光微球灌注对大鼠视网膜微血管灌流情况的显示效果。方法:12只成年健康SD大鼠随机分成荧光微球组(6只)和明胶墨汁组(6只)。明胶墨汁组分两步经左心室灌注明胶墨汁40ml。荧光微球组经股静脉注射荧光微球0.5ml。视网膜行铺片和切片,观察荧光微球和改良墨汁灌注显示的微血管灌流情况;两组视网膜切片还进行NeuN、Parvalbumin和GFAP的免疫组化染色。结果:荧光微球零散分布于视网膜铺片周边部和中央部视的网膜血管中;不能显示铺片的血管轮廓和切片中的血管截面。荧光微球与NeuN、Parvalbumin或GFAP免疫组化双标不能在同一组织中准确显示视网膜血管与神经细胞的紧密空间关系。改良墨汁灌注能清晰显示大鼠视网膜铺片中周边部和中央部的血管网,以及切片中的血管截面,而且此方法与NeuN、Parvalbumin或GFAP免疫组化双标能在同一组织中准确显示视网膜血管与神经细胞的紧密空间关系。结论:改良明胶墨汁灌注在显示大鼠视网膜微血管灌流情况方面优于荧光微球,适宜于在视网膜疾病研究中广泛使用。     

一种稀土荧光化合物的合成及光谱性质研究

目的 研制新型时间分辨荧光免疫分析螯合剂.方法 以4,4'-二溴-6,6'-二溴甲基-2,2'-联吡啶为起始反应原料设计合成出一种新型化合物4,4'-二(对氨基苯乙炔基)-6,6'-二(N,N-二(叔丁氧基羰甲基)氨甲基)-2,2'-联吡啶,并对其结构进行确认.结果 将该化合物与铕离子结合形成的稀土荧光化合物的荧光性质进行研究,表明其主要发射波长为595 nm(5D0-7F1)、618nm(5D0-7F2),荧光寿命为643μs.当荧光溶液放置72h,荧光强度值无明显变化.在该荧光体系下,Eu3+浓度分析检测范围为10-5～10-11 mol/L.结论 该荧光化合物结构有较好的稳定性,为固相时间分辨免疫体系奠定了基础,具有广泛的应用前景.     

一种新的测定血管壁通透性的方法

给ＳＤ大鼠静脉注射荧光标记白蛋白，通过检测其肺、肾组织匀浆中荧光标记白蛋白的含量，定量分析其血管壁通透性变化。该方法与伊文氏蓝方法相比，能更准确反映血管壁对大分子物质的通透性的变化，又避免了使用核素标记白蛋白时放射性的污染，为进一步研究血管壁通透性的变化提供了一种更准确而又方便的新方法。本实验还测定了烫伤１２ｈ后大鼠肺、肾血管壁通透性的变化。