肝癌微环境中CD4~+CD25~+调节性T细胞与T细胞免疫的关系

目的:探讨肝细胞癌组织中CD4 CD25 调节性T细胞(CD4 CD25 regulartory Tcell,Treg)与肿瘤微环境T细胞免疫的关系。方法:对52例肝细胞癌组织和癌旁组织用CD4、CD25双重酶标免疫组化染色和用CD8 EnVision法染色,对癌组织中Treg细胞和CD4 T、CD8 T、CD4 T/CD8 T比值进行相关性分析。结果:正常肝脏组织中未发现Treg细胞,肝癌和癌旁组织中Treg细胞单个高倍视野平均数分别为(7.6±2.84)、(5.2±1.67),两组比较有显著差异(P<0.01);肝癌及癌旁组织中CD4 T细胞单个高倍视野平均数分别为(18.2±3.57)、(25.9±3.36),两组比较有显著差异(P<0.01);肝癌及癌旁组织中CD8 T细胞单个高倍视野平均数分别为(49.9±6.61)、(49.5±6.43),两组比较无明显差异;肝癌及癌旁组织中CD4 T/CD8 T比值分别为(0.37±0.08)、(0.53±0.09),两组比较有显著差异(P<0.01);肝癌组织中Treg细胞的数量与其浸润性CD4 T淋巴细胞的数量及CD4 T/CD8 T比值呈显著负相关(P<0.01),而与浸润性CD8 T淋巴细胞的数量分布无明显相关性。结论∶Treg细胞在肝癌微环境中可能通过抑制CD4 T淋巴细胞的增殖来抑制肿瘤局部免疫。     

冷冻消融对肝癌患者外周血CD4+CD25+调节T细胞影响的初步研究

目的探讨氩氦冷冻对肝癌外周血CD4 CD25 调节T细胞的影响及临床意义.方法原发性肝癌患者20例.其中Ⅱ期14例、Ⅲ期6例,分别采集氩氦冷冻治疗术前及术后1个月外周血,采用流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群(CD3 T、CD4 T、CD8 T、CD4 T/CD8 T、NK细胞)及Treg细胞.结果肝癌Ⅲ期患者外周血Treg细胞占CD4 T细胞比例明显高于Ⅱ期患者(6.5%±1.2%、9.1%±2.0%,P=0.013).与氩氦冷冻治疗前比较治疗后1个月Treg细胞一定程度降低(8.2%±1.1%、7.7%±1.0%),但差异无显著性(P=0.052);CD4 T、CD4 T/CD8 T、NK细胞明显升高,CD8 T细胞降低(P＜0.05).结论肿瘤负荷可显著促进肝癌患者外周血Treg细胞分化.肝癌氩氦冷冻治疗后短期内Treg细胞比例轻度下降,T淋巴细胞亚群分布异常得到一定改善.     

外周血T淋巴细胞亚群与不同分子分型乳腺癌患者无病生存的相关性研究

  目的  观察不同分子分型浸润性乳腺癌患者外周血T淋巴细胞亚群的表达情况, 分析乳腺癌患者免疫状态与不同分子分型乳腺癌的相关性。  方法  选取2008年1月至2009年8月初诊于天津医科大学肿瘤医院乳腺中心的患者372例。均对入组患者采血, 采用流式细胞术分析外周血的T淋巴细胞的亚群CD4+T细胞、CD8+T细胞、调节性T细胞(Treg细胞)及自然杀伤(NK)细胞水平。分析CD4+/CD8+比值的大小、调节性T细胞、自然杀伤细胞的免疫相关指标与乳腺癌不同分子分型Luminal A、Luminal B、HER-2过表达型以及三阴性乳腺癌患者临床病理特征之间的相关性。  结果  372例乳腺癌患者中, Luminal A型为133例(35.8%)、Luminal B型为124例(33.3%)、HER-2过表达型为48例(12.9%)、三阴性为67例(18.0%)。在三阴性乳腺癌中外周血CD4+/CD8+比值越高, 患者的无病生存时间越长(P < 0.05), Treg细胞含量越低, 患者的无病生存时间也越长(P < 0.05), 但CD4+/ CD8+比值与Treg细胞含量并非三阴性乳腺癌无病生存的独立预后因素。而其他三种类型的乳腺癌中, CD4+/CD8+比值、Treg细胞含量与患者无病生存率无关(P>0.05)。NK细胞含量与以上4种分子分型乳腺癌患者的无病生存率并无明显的相关性(P>0.05)。  结论  外周血CD4+/CD8+比值、Treg细胞含量可有效预测三阴性乳腺癌的无病生存率, 但并非其独立的预后因素。      

急性白血病患者外周血淋巴细胞亚群和调节性T细胞的检测及临床意义

目的:研究急性白血病患者外周血淋巴细胞亚群、调节性T细胞水平的变化及临床意义.方法: 采用流式细胞仪对60例急性白血病(AL)患者[急性髓细胞性白血病(AML)30例、急性淋巴细胞性白血病(ALL)30例]及40例正常人外周血淋巴细胞亚群及调节性T细胞水平进行检测.结果: 初诊AL组与正常对照组比较,CD3+ T淋巴细胞百分比、CD4+T淋巴细胞百分比、CD4+/CD8+ 比值及CD16+/56+ NK细胞百分比均明显降低( P<0.05) ;CD8+ T 淋巴细胞百分比与CD19+ B淋巴细胞百分比均明显升高(P均 <0.01).ALL组CD4+T淋巴细胞百分比及CD4+/CD8+ 比值明显低于AML组( P<0.01).与对照组相比较,初诊AL患者外周血CD4+CD25+ T细胞和CD4+CD25high Treg 细胞均明显升高(P<0.01).结论: AL患者细胞免疫功能明显异常;与AML患者相比,ALL患者细胞免疫功能更为低下.CD4+CD25 high Treg细胞增多可能是AL患者免疫功能受抑的重要原因之一.淋巴细胞亚群及调节性T细胞水平检测在评价AL疗效及判断预后方面具有一定的临床价值.     

冷冻消融对晚期前列腺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋调节T细胞影响的临床观察

目的:分析探讨氢氦冷冻治疗对前列腺癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的影响及临床意义.方法:前列腺癌患者40例,分别于氩氦冷冻治疗术前、术后3个月、6个月采取外周血.放射免疫法检测外周血PSA,流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群(CD3+T、CD4+T、CD8+T、CD4+T/CD8+T、NK细胞、Treg细胞)变化情况.结果:前列腺癌患者冷冻后外周血PSA较冷冻前明显下降(P<0.01).与治疗前比较,治疗后3个月、6个月CD3+T、CD4+T、CIM+T/CD8+T、NK细胞比例明显增高,CD8+T细胞比例降低(P<0.05),Treg细胞比例较治疗前降低(P<0.05).冷冻后6月与冷冻后3月比较,Treg细胞无明显变化(P>0.05).相关性分析结果表明:经氩氦冷冻治疗后Treg细胞比例变化与PSA下降呈正相关(r=0.76,P<0.01).结论:前列腺癌氩氦冷冻治疗后外周血T淋巴细胞亚群分布异常得到一定改善,Treg细胞比例变化与肿瘤负荷大小有关.     

CD133在肝细胞癌表达的临床意义

目的 检测肿瘤干细胞标志物CD133在原发性肝细胞癌患者癌组织和外周血中的表达,分析CD133+表达与肿瘤进展的关系.方法 采集65例肝癌患者癌组织和外周静脉血,免疫组织化学SP法检测癌组织中CD133表达,流式细胞术检测外周血CD45-CD133+细胞百分数,另采集10例正常肝组织和外周血作对照.结果 肝癌组织中CD133阳性表达率为6.4%,外周血中CD45-CD133+细胞百分数为2.0%,正常肝组织和外周血中未见CD133阳性表达.差片有统计学意义(P<0.01);CD133阳性细胞含量与门静脉癌栓、肿瘤包膜完整性、病理组织分级、TNM分期显著相关(P值均<0.01).与肿瘤直径、AFP值无相关性(P值均0.05);CD133在癌纽织和外周血中的表达有相关性,二者挈正相关(r=0.36,P<0.01).结论 肝癌CD133+细胞数与肿瘤进展密切相关,检测肝癌组织和外周血的CD133表达对肝癌诊断和预后评估有临床实用价值.     

CD133在肝细胞癌表达的临床意义

目的 检测肿瘤干细胞标志物CD133在原发性肝细胞癌患者癌组织和外周血中的表达,分析CD133+表达与肿瘤进展的关系.方法 采集65例肝癌患者癌组织和外周静脉血,免疫组织化学SP法检测癌组织中CD133表达,流式细胞术检测外周血CD45-CD133+细胞百分数,另采集10例正常肝组织和外周血作对照.结果 肝癌组织中CD133阳性表达率为6.4%,外周血中CD45-CD133+细胞百分数为2.0%,正常肝组织和外周血中未见CD133阳性表达.差片有统计学意义(P<0.01);CD133阳性细胞含量与门静脉癌栓、肿瘤包膜完整性、病理组织分级、TNM分期显著相关(P值均<0.01).与肿瘤直径、AFP值无相关性(P值均0.05);CD133在癌纽织和外周血中的表达有相关性,二者挈正相关(r=0.36,P<0.01).结论 肝癌CD133+细胞数与肿瘤进展密切相关,检测肝癌组织和外周血的CD133表达对肝癌诊断和预后评估有临床实用价值.     

胃癌患者外周血CD4+CD25highCD127low/-调节性T细胞达临床意义分析

目的:研究CD4+ CD25high CD12low/-调节性T细胞(Treg)在胃癌患者外周血中的表达水平,探讨其在肿瘤发病机制及治疗中的作用.方法:采用流式细胞术检测法检测90例胃癌患者(35例为早中期胃癌,55例为晚期胃癌)和3(名健康体检者外周血中CD4+ CD25high CD127low/-Treg的表达水平.结果:90例胃癌患者外周血CD4+T细胞中CD4+CD25highCD127low/-Treg含量为(11.60±5.99)％,高于健康体检者(5.19±1.72)％,t=5.610,P=0.007;Ⅲ+Ⅳ期患者外周血CD4+T细胞中CD4+ CD25high CD127low/-Treg含量为(12.55±6.59)％,明显高于Ⅰ+Ⅱ期患者(10.39±4.68)％(t=4.113,P=0.04)和健康体检者(5.19±1.72)％(t=5.923,P=0.001).手术后胃癌患者CD4+ CD25high CD127low/-Treg水平为(6.12±2.13)％,明显低于手术前(11.25士5.63)％,t=5.237,P=0.04.结论:胃癌患者外周血CD4+ CD25highCD127low/-Treg数量增多且与病程分期相关,手术后Treg数量明显减少,Treg可能参与了胃癌的发生发展.     

CD133在肝细胞癌表达的临床意义

目的 检测肿瘤干细胞标志物CD133在原发性肝细胞癌患者癌组织和外周血中的表达,分析CD133+表达与肿瘤进展的关系.方法 采集65例肝癌患者癌组织和外周静脉血,免疫组织化学SP法检测癌组织中CD133表达,流式细胞术检测外周血CD45-CD133+细胞百分数,另采集10例正常肝组织和外周血作对照.结果 肝癌组织中CD133阳性表达率为6.4%,外周血中CD45-CD133+细胞百分数为2.0%,正常肝组织和外周血中未见CD133阳性表达.差片有统计学意义(P<0.01);CD133阳性细胞含量与门静脉癌栓、肿瘤包膜完整性、病理组织分级、TNM分期显著相关(P值均<0.01).与肿瘤直径、AFP值无相关性(P值均0.05);CD133在癌纽织和外周血中的表达有相关性,二者挈正相关(r=0.36,P<0.01).结论 肝癌CD133+细胞数与肿瘤进展密切相关,检测肝癌组织和外周血的CD133表达对肝癌诊断和预后评估有临床实用价值.     

CD133在肝细胞癌表达的临床意义

目的 检测肿瘤干细胞标志物CD133在原发性肝细胞癌患者癌组织和外周血中的表达,分析CD133+表达与肿瘤进展的关系.方法 采集65例肝癌患者癌组织和外周静脉血,免疫组织化学SP法检测癌组织中CD133表达,流式细胞术检测外周血CD45-CD133+细胞百分数,另采集10例正常肝组织和外周血作对照.结果 肝癌组织中CD133阳性表达率为6.4%,外周血中CD45-CD133+细胞百分数为2.0%,正常肝组织和外周血中未见CD133阳性表达.差片有统计学意义(P<0.01);CD133阳性细胞含量与门静脉癌栓、肿瘤包膜完整性、病理组织分级、TNM分期显著相关(P值均<0.01).与肿瘤直径、AFP值无相关性(P值均0.05);CD133在癌纽织和外周血中的表达有相关性,二者挈正相关(r=0.36,P<0.01).结论 肝癌CD133+细胞数与肿瘤进展密切相关,检测肝癌组织和外周血的CD133表达对肝癌诊断和预后评估有临床实用价值.     

肝细胞癌Ｔｒｅｇ和ＦＯＸＰ３的表达及其临床意义

目的　研究肝细胞癌（ＨＣＣ）患者外周血ＣＤ４＋ＣＤ２５＋调节性Ｔ细胞（Ｔｒｅｇ）和肝癌组织叉状头／翅膀状螺旋转录因子（ＦＯＸＰ３）的表达,并分析其与肝细胞癌临床病理的关系。方法　采用流式细胞仪对ＨＣＣ患者和健康志愿者外周血ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔｒｅｇ细胞进行检测,免疫组化、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ法检测ＦＯＸＰ３蛋白表达水平,并结合ＨＣＣ患者临床病理特征进行分析。结果　ＨＣＣ患者外周血ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔｒｅｇ表达率为（１６.７６±５.５３）％,较健康志愿者的（６.０４±２.０１）％显著增高（Ｐ＜０.０１）。免疫组化染色肿瘤组织ＦＯＸＰ３阳性细胞数为（１０３.９５±３４.３１）个／ｍｍ２,高于癌旁组织的（２９.６１±４.６５）个／ｍｍ２（Ｐ＜０.０５）,相应肿瘤组织ＦＯＸＰ３蛋白表达也增高。ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔｒｅｇ细胞水平与肿瘤多灶性有关。结论　ＨＣＣ患者的外周血ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔｒｅｇ细胞表达增高,ＦＯＸＰ３蛋白在肿瘤组织中表达与ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔｒｅｇ细胞的变化相平行,可能与肿瘤多灶性有关。     

肝癌微环境中CD4+CD25+Treg细胞与肿瘤免疫细胞的关系

[目的]探讨肝癌微环境中Treg细胞的数量增多与HCC临床分期晚的可能原因。[方法]双重酶标免疫组织化学方法检测52例HCC组织中CD4^＋CD25＋Treg细胞以及CD4^＋CD25-T（CD4^＋T）细胞分布，免疫组化EnVision法检测20例HCC组织中CD8＋T细胞分布。[结果]正常肝脏组织中未发现Treg细胞。HCC组织中Treg细胞数量较癌旁组织明显增多（P=0．000），且肝癌组织中Treg细胞的数量与其浸润性CD4＋T淋巴细胞的数量以及CD4＋T/CD8^＋T比值呈显著负相关（r=-0．539，P=0．014；r=-0．545，P=0．000），而与浸润性CD8^＋T淋巴细胞的数量无明显相关性（f=-0．403，P=0．078）。[结论]Treg细胞在体内可能通过细胞接触的方式抑制CD8^＋T淋巴细胞的增殖来抑制肿瘤局部的免疫，去除或减少HCC微环境中浸润件Tree细胞数量可能提高肿瘤局部免疫治疗效果。     

117例肝癌患者外周血调节T细胞水平及其临床意义

背景与目的:CD4 CD25 T细胞又称为调节性T细胞(Treg),是一群具有免疫抑制功能的T细胞亚群.近来的研究表明Treg能够显著地抑制免疫反应,导致肿瘤细胞的免疫耐受.然而,Treg在肝癌临床中的意义目前尚未阐明.本研究旨在探讨Treg水平与肝癌临床病理特征及预后的关系.方法:采用前瞻性研究设计,117例原发性肝癌患者于1999年1月至2000年12月住院且首次行肝癌根治性手术切除,术前用流式细胞仪检测其外周血Treg水平.术后随访至2005年12月30日.分析外周血Treg水平与肝癌临床病理特征及生存率的关系.40例正常对照来自健康献血者.结果:肝癌患者外周血中Treg的水平为(12.54±4.69)%,正常对照组为(8.81±1.98)%,两者比较差异有显著统计学意义(P＜0.01).全组1、3、5年生存率分别为83.8%、49.6%、35.9%.在单个病灶的患者中,Treg水平与肿瘤的边界有关,肿瘤边界不清楚者Treg水平显著增高;外周血Treg水平与其它临床病理特征无关.外周血Treg水平增高的患者预后差.结论:肝癌患者外周血Treg比例升高是影响预后的独立危险因素.     

Correlation between CD4+CD25+Treg Cells and CCR4 in Nasopharyngeal Carcinoma

OBJECTIVE CD4+CD25+ T regulatory (Treg) cells are a population of T cells which suppress an overactive immune system. CCR4 is a chemokine receptor involved in the recruitment of lymphocytes. Nasopharyngeal carcinoma (NPC) is resistant to immunosurveillance, owing to the increased number of tumor-infiltrating Treg cells which are recruited to the tumor by CCR4.METHODS The percentage of CD4+CD25+Treg cells and CCR4+ cells in tissue or peripheral blood (PB) lymphocytes of patients with untreated NPC or normal subjects was analysed by flow cytometry. RESULTS In both tissue and PB lymphocytes, the percentage of CD4+CD25+ Treg cells and CCR4+ cells was significantly elevated in patients with NPC in comparison with that in the normal tissue of controls. Furthermore, in the patients with NPC, a higher percentage of CD4+CD25+ Treg cells was found in the tumor-infiltrating (T1) lymphocyte population than in the PB population. In the NPC patient group, a general trend towards an increased percentage of Tl Treg cells was found in the patients with advanced stage NPC. The number of CD4+CD25+ Treg cells was positively related to the number of CCR4+ cells in the tumor and in the PB of the patients with NPC, while the number of CD4+CD25+ Treg cells was negatively related to the number of CD4+CD25- T cells.CONCLUSION Immunosuppression was observed in NPC, especially at the tumor sites. CD4+CD25+ Treg cells may suppress CD4+CD25- T cells. CCR4 may have an important role in the recruitment of CD4+CD25+ Treg cells to tumor sites, thus causing resistance to immunosurveillance.     

化疗对肺癌患者外周血中CD4~＋ CD25~＋调节性T细胞数目的影响及意义

目的研究化疗药物对肺癌患者外周血中Treg（CD4＋ CD25＋调节性T细胞）的影响及意义。方法采集60例肺癌术后患者化疗前1天及化疗后第10天外周静脉血,应用流式细胞技术检测外周血中Treg细胞以及CD3＋、CD4＋、CD8＋T、NK细胞占T淋巴细胞百分比,CD4＋T/CD8＋T比值。结果化疗前NSCLC患者外周血CD4＋ CD25＋调节T细胞比率明显高于健康对照组（P〈0.05）;且Ⅳ期患者调节T细胞比率明显高于Ⅲ期患者（P〈0.05）。化疗后NSCLC患者外周血CD4＋ CD25＋调节T细胞较化疗前显著降低（P〈0.05）。化疗前后不同病理分型患者外周血中CD4＋CD25＋细胞变化差异无统计学意义。化疗后CD8＋T细胞占T淋巴细胞比例（28.129±10.900）%较化疗前（24.876±6.631）%升高（P〈0.05）。化疗后CD4＋/CD8＋（1.506±0.691）较化疗前（1.680±0.704）降低（P〈0.05）。结论肿瘤负荷可显著促进肺癌患者外周血Treg细胞分化,化疗后肺癌患者Treg细胞比例下降。     

Increased populations of regulatory T cells in peripheral blood of patients with hepatocellular carcinoma

Hepatocellular carcinoma (HCC) is the fifth most common cancer worldwide with a poor prognosis and one for which immunotherapy remains a viable option. Experimental tumor models have shown that regulatory T cells, a functionally unique subset of T cells, can suppress effective antitumor immune responses. This suppression might explain the poor outcome of some of the immunotherapy protocols currently being used. A better understanding of the role of regulatory T cells in HCC is important for design of future immunotherapy-based clinical protocols. We have studied regulatory T cells from 84 patients with HCC and 74 controls, including healthy donors, patients with chronic hepatitis B virus and hepatitis C virus infection and nonviral liver cirrhosis. Regulatory T cells were identified by fluorescence-activated cell sorting using a panel of antibodies and by real-time PCR analysis for Foxp3 expression. Functional studies were done to analyze their inhibitory role. Finally, regulatory T cells were analyzed in tumors and ascites from patients with HCC. Patients with HCC have increased numbers of CD4+CD25+ regulatory T cells in their peripheral blood, which express high levels of HLA-DR, GITR, and low or no CD45RA. These cells were anergic toward T-cell receptor stimulation and, when cocultured with activated CD4+CD25- cells, potently suppressed their proliferation and cytokine secretion. There were also high numbers of regulatory T cells in tumor-infiltrating lymphocytes of HCC patients comparable with the increase in their peripheral blood. Our data suggest that the increase in frequency of regulatory T cells might play a role in modulation of the immune response against HCC and could be important in design of immunotherapeutic approaches.     

卵巢癌患者腹水及外周血CD4+ CD25+调节性T细胞含量及抑制功能的研究

  目的   研究卵巢癌患者腹水及外周血单个核细胞（PBMC）中CD4+ CD25+调节性T细胞（Treg）的表达差异、免疫调节功能及其含量与化疗、复发的关系,探究其在卵巢癌腹腔微环境中发挥免疫调节的具体作用及意义。   方法   采用流式细胞术分别检测27例卵巢癌患者腹水及28例卵巢癌患者PBMC中CD4+ CD25+/CD4+ T细胞百分比,并根据收集标本时患者临床特征进行分组,比较处于初治（PD）、化疗后（AC）及复发（RD）3个阶段卵巢癌患者腹水及PBMC中Treg含量的差异。应用免疫磁珠分选卵巢癌患者腹水及外周血Treg,与经羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯（carboxyfluorescein succinimidylester,CFSE）标记的自CD4+CD25- T细胞按不同比例（0:1,1:1,1:2及1:4）共培养,检测Treg免疫抑制功能。   结果   卵巢癌患者腹水中CD4+ CD25+/CD4+ T细胞百分比（28.25±14.06）%较PBMC中（14.6±4.74）%显著增高（P < 0.000 1）。卵巢癌患者PD、AC及RD 3个阶段腹水及PBMC中Treg含量均显示为AC>RD>PD,且均有显著统计学意义（P < 0.000 1）。体外实验结果显示,卵巢癌患者腹水中CD4+ CD25+ Treg可有效抑制CFSE标记的自体CD4+ CD25- T细胞增殖,且抑制功能较外周血显著增强（P < 0.01）。   结论   卵巢癌腹腔微环境中存在CD4+ CD25+Treg,且其含量及免疫抑制功能较外周血PBMC显著增高,提示卵巢癌腹腔内更易发生免疫逃逸作用。卵巢癌患者化疗后及复发阶段腹水及PBMC中CD4+ CD25+ Treg含量均大于原发阶段,提示化疗可能促进卵巢癌患者体内Treg含量升高,而Treg升高可能参与促进肿瘤复发。       

氩氦冷冻消融对晚期肾癌外周血调节性T 细胞的影响*

目的:研究氩氦冷冻消融治疗对晚期肾癌患者外周血CD4 +CD 25+ 调节性T 细胞（Treg ）的影响及临床意义。方法:回顾性分析本院32例晚期肾癌患者临床资料,所有患者均于氩氦冷冻消融治疗术前、术后1～6 个月分别取外周血,应用流式细胞仪检测外周血T 淋巴细胞亚群（CD3 + T、CD4 + T、CD8 + T、CD4 +T/CD 8 +T、NK细胞、Treg 细胞）变化情况。术后1 个月采用增强MRI或CT评价肿瘤坏死情况,影像学显示肿瘤无强化区即认为肿瘤坏死,根据Cavalieri 方法计算肿瘤坏死率,进而评价肿瘤负荷。结果:冷冻消融治疗术后,Treg 细胞比例由术前（4.18± 1.58）% 逐渐下降至第3 个月达最低值（1.96± 0.54）% ,二者差异有统计学意义（P=0.001）。 CD3 +T、CD4 +T、CD4 +T/CD 8 +T、NK细胞比例分别由术前（19.26± 7.52）% 、（43.54± 12.99）% 、（1.15± 0.57）% 、（17.49±8.36）% 逐渐上升至第3 个月达最大值（30.83± 5.69）% 、（49.58± 10.76）% 、（1.84± 0.12）% 、（27.63± 8.20）% ,差异均有统计学意义（P=0.000,P=0.003,P=0.02,P=0.001）。 CD8 + T由术前（40.86± 8.89）% 逐渐下降至第3 个月达最低值（26.74± 4.29）% ,差异具有统计学意义（P=0.000）。 冷冻治疗后3～6 个月CD3 +T、CD4 +T、CD4 +T/CD 8 +T、NK、CD8 + T、Treg 细胞比例虽略有改变但差异均无统计学意义（P>0.05）。相关性分析结果表明:经氩氦冷冻治疗后Treg 细胞比例变化与肿瘤负荷下降程度呈正相关（r=0.793,P<0.01）。结论:肾癌氩氦冷冻治疗后外周血T 淋巴细胞亚群分布异常得到一定改善,抗肿瘤免疫反应增强,Treg 细胞比例变化与肿瘤负荷有关。      

Associations Between Infiltrating Lymphocyte Subsets and Hepatocellular Carcinoma

Aims: We aimed to analyze the phenotype of tumor-infiltrating lymphocytes (TILs) and non-tumor infiltrating lymphocytes (NILs) in HCC and non-tumor tissues, and evaluate relationships between changes in these cells and the prognosis of HCC. Methods: Lymphocytes were isolated from HCC and corresponding non-tumor tissues and tested by flow cytometry. For comparison, clinical parameters were analyzed. Results: Compared with the non-tumor tissue, tumor tissue had a lower intensity of NK, NKT andCD8+T cell infiltration. TILs had higher intensity of CD4+CD25+Foxp3+regulatory T cell (Treg cells) infiltration compared with that in NILs. The prevalence of Treg cells was associated with fewer CD8 + T lymphocytes in the HCC immune microenvironment. The frequencies of NK cells and CD8+T cells in TILs of HCC patients with metastasis less than 12 months were lower than those without metastasis. However, the frequency of Treg cells was higher than those without metastasis. Conclusion: These results suggest that the frequencies of CD8+T, NK and NKT cells as well as Treg cells in the tumor tissue of HCC are significantly associated with patient survival, and could be applied as predictive indicators for HCC prognosis.     

CD133在肝细胞癌表达的临床意义

目的 检测肿瘤干细胞标志物CD133在原发性肝细胞癌患者癌组织和外周血中的表达,分析CD133+表达与肿瘤进展的关系.方法 采集65例肝癌患者癌组织和外周静脉血,免疫组织化学SP法检测癌组织中CD133表达,流式细胞术检测外周血CD45-CD133+细胞百分数,另采集10例正常肝组织和外周血作对照.结果 肝癌组织中CD133阳性表达率为6.4%,外周血中CD45-CD133+细胞百分数为2.0%,正常肝组织和外周血中未见CD133阳性表达.差片有统计学意义(P<0.01);CD133阳性细胞含量与门静脉癌栓、肿瘤包膜完整性、病理组织分级、TNM分期显著相关(P值均<0.01).与肿瘤直径、AFP值无相关性(P值均0.05);CD133在癌纽织和外周血中的表达有相关性,二者挈正相关(r=0.36,P<0.01).结论 肝癌CD133+细胞数与肿瘤进展密切相关,检测肝癌组织和外周血的CD133表达对肝癌诊断和预后评估有临床实用价值.