Bcl-2/Bax基因表达对隐睾生殖细胞凋亡的影响

为探讨Ｂｃｌ－２／Ｂａｘ基因表达对隐睾生殖细胞凋亡的影响。采用ＳＤ雄性大鼠日龄２２天时复制单侧隐睾模型;用生物素－ｄＴＵＰ／酣标亲和素测定法检测睾丸生殖细胞凋亡;用免疫组织化学ＳＰ法检测Ｂｃｌ－２／Ｂａｘ基因表达。结果发现术后第７天,与对侧正常睾丸相比,隐睾侧睾丸发生凋亡的生殖细胞显著增加（Ｐ〈０．０１）;Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ表达均有显著差异（Ｐ〈０．０１）。提示手术诱导的隐睾生殖细胞凋亡增加;Ｂｃ     

一氧化氮合酶基因表达对实验性大鼠隐睾生殖细胞凋亡的影响

目的　研究诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)及其mRNA表达与实验性大鼠隐睾生殖细胞发育、凋亡的关系。方法　 (1)采用SD雄性健康大鼠 16只 ,日龄 2 2天时复制单侧隐睾模型。 (2 )采用生物素 dUTP/酶标亲和素测定法检测睾丸生殖细胞凋亡。 (3)采用免疫组织化学方法检测大鼠睾丸生殖细胞中iNOS基因表达。 (4 )采用原位杂交法检测大鼠生殖细胞中iNOSmRNA的表达。结果　 (1)术后第 7天 ,与自身对侧正常睾丸相比 ,隐睾侧睾丸发生凋亡的生殖细胞数显著增加 (P <0 .0 1)。 (2 )单侧隐睾模型建立术后第 7天 ,在双侧睾丸的间质细胞、支持细胞和初级精母细胞中均可见iNOS蛋白及iNOSmRNA的弱阳性表达 ,在隐睾侧睾丸曲细精管中脱落的生殖细胞中可见iNOS蛋白及iNOSmRNA的强阳性表达。术后第 7天 ,与自身对侧正常睾丸相比 ,隐睾侧睾丸生殖细胞中iNOSmRNA表达显著增加 (P <0 .0 1)。结论　 (1)实验性大鼠隐睾可以导致睾丸生殖细胞凋亡增加。 (2 )iNOS蛋白及其mRNA的表达增加是隐睾生殖细胞凋亡增加的分子机制之一     

大鼠隐睾生殖细胞发育和凋亡与eNOS蛋白与mRNA表达

目的　探讨内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)蛋白及其mRNA表达与实验性大鼠隐睾生殖细胞发育和凋亡的关系。　方法　采用生物素 dUTP/酶标亲和素测定法检测SD大鼠单侧隐睾模型睾丸生殖细胞凋亡 ,免疫组化方法检测大鼠睾丸生殖细胞中eNOS基因表达 ,原位杂交法检测大鼠生殖细胞中eNOSmRNA的表达。　结果　术后第 7天隐睾侧睾丸发生凋亡的生殖细胞数与对侧正常睾丸相比显著增加 (P <0 .0 1)。术后第 4 0天 ,对侧正常睾丸的精子细胞中可见eNOS基因表达。术后第 3、7天 ,隐睾侧睾丸生殖细胞中eNOSmRNA表达与对侧正常睾丸相比无明显变化 (P >0 .0 5 )。　结论　在大鼠青春前期 ,eNOS基因表达与雄激素生成和生殖细胞发育有关 ;在成年期 ,eNOS基因表达可能仅与精子的成熟及活力有关而与生殖细胞凋亡无关。     

Ν-硝基-L-精氨酸甲酯对大鼠隐睾生殖细胞凋亡的保护作用

目的 :探讨一氧化氮合酶 (NOS)抑制剂N 硝基 L 精氨酸甲酯 (L NAME)对大鼠隐睾生殖细胞凋亡的保护作用。　方法 :用 2 2dSD雄性大鼠复制单侧隐睾模型。实验分假手术组、隐睾组、隐睾 +L NAME组 [术后腹腔注射L NAME ,10mg/(kg·d) ],每组大鼠各 10只。术后 7d ,用生物素 dUTP/酶标亲和素测定法检测睾丸生殖细胞凋亡 ,用硝酸还原酶法测定睾丸组织中N0含量 ,用化学比色法测定睾丸组织中NOS活性。　结果 :术后第 7d ,与假手术组睾丸相比 ,隐睾组睾丸发生凋亡的生殖细胞数显著增加 ,隐睾 +L NAME组睾丸发生凋亡的生殖细胞数比隐睾组显著减少 (P <0 .0 1) ,隐睾 +L NAME组睾丸组织中NO含量及NOS活性与隐睾组相比显著降低 (P<0 .0 1)。　结论 :隐睾组织中NO和NOS升高是隐睾生殖细胞凋亡增加的病理机制之一 ,L NAME通过抑制NOS活性、减少NO的产生来降低睾丸组织生殖细胞的凋亡发挥其保护作用。     

一氧化氮、总抗氧化能力对大鼠隐睾生殖细胞凋亡的影响

目的 :探讨一氧化氮 (nitricoxide,NO)、总抗氧化能力 (totalantioxidecapacity ,T AOC)对大鼠隐睾生殖细胞凋亡的影响。　方法 :健康SD雄性大鼠 2 0只 ,日龄 2 2d时复制单侧隐睾模型。生物素 dUTP/酶标亲和素测定法检测睾丸生殖细胞凋亡 ,采用硝酸还原酶法测定睾丸组织中NO含量 ,化学比色法测定睾丸组织中T AOC。　结果 :术后第 7d ,与对侧正常睾丸相比 ,隐睾侧睾丸发生凋亡的生殖细胞数显著增加 (P <0 .0 1) ;T AOC显著下降 ;NO含量显著上升 (P <0 .0 1)。　结论 :实验性大鼠隐睾可导致睾丸生殖细胞凋亡增加 ,且与睾丸组织中NO升高及T AOC下降密切相关     

总抗氧化能力、一氧化氮、丙二醛对大鼠隐睾生殖细胞凋亡的影响

目的 探讨一氧化氮(NO)、总抗氧化能力(T—AOC)对大鼠隐睾生殖细胞凋亡的影响。方法 采用SD雄性健康大鼠20只，鼠龄22d时复制单侧隐睾模型。采用生物素—dUTP／酶标亲和素测定法检测睾丸生殖细胞凋亡。采用化学比色法测定大鼠组织中丙二醛(MDA)、T—AOC。采用硝酸还原酶法测定睾丸组织中NO含量。结果 术后第7天，与对侧正常睾丸相比，隐睾侧睾丸发生凋亡的生殖细胞数显著增加(P＜0．01)；T—AOC显著下降；No和MDA含量显著上升(P＜0．01)。结论 大鼠隐睾可导致睾丸生殖细胞凋亡增加，且与睾丸组织中No和MDA升高及T—AOC下降密切相关。     

抗Fas配体抗体和CTLA4 Ig诱导同种胰岛移植耐受

我们通过应用抗ＦａｓＬ抗体及ＣＴ ＬＡ4Ｉｇ ,探讨其在同种胰岛移植耐受中的作用 ,现将结果报道如下。一、材料和方法采用Ｗｉｓｔａｒ大鼠作为供体 ,ＳＤ大鼠为受体。抗ＦａｓＬ抗体及ＣＴＬＡ4Ｉｇ剂量相同 ,移植前给药 1次 ,剂量 2 0 0μｇ/ｋｇ体重 ,移植次日起持续 7ｄ给药 ,阴茎背静脉或尾静脉注入 ,剂量 10 0μｇ/ｋｇ体重。受体ＳＤ大鼠随机分为 4组 :(1)无任何处理组 (ｎ=6 ) ,即移植前后未给予特殊处理 ;(2 )抗ＦａｓＬ抗体(ＳａｎｔａＣｒｕｚＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ公司 )处理组(ｎ =5 ) ;(3)ＣＴＬＡ4Ｉｇ处理组(ｎ =6 )…     

N-硝基-L-精氨酸甲酯对大鼠隐睾生殖细胞凋亡的保护作用

目的探讨一氧化氮合酶(NOS)抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对大鼠隐睾生殖细胞凋亡的保护作用.方法用22 d SD雄性大鼠复制单侧隐睾模型.实验分假手术组、隐睾组、隐睾+L-NAME组[术后腹腔注射L-NAME,10 mg/(kg·d)],每组大鼠各10只.术后7 d,用生物素-dUTP/酶标亲和素测定法检测睾丸生殖细胞凋亡,用硝酸还原酶法测定睾丸组织中NO含量,用化学比色法测定睾丸组织中NOS活性.结果术后第7 d,与假手术组睾丸相比,隐睾组睾丸发生凋亡的生殖细胞数显著增加,隐睾+L-NAME组睾丸发生凋亡的生殖细胞数比隐睾组显著减少(P＜0.01),隐睾+L-NAME组睾丸组织中NO含量及NOS活性与隐睾组相比显著降低(P＜0.01).结论隐睾组织中NO和NOS升高是隐睾生殖细胞凋亡增加的病理机制之一,L-NAME通过抑制NOS活性、减少NO的产生来降低睾丸组织生殖细胞的凋亡发挥其保护作用.     

诱生型一氧化氮合成酶基因在隐睾中的表达及意义

目的：探讨隐睾中诱生型一氧化氮合成酶（ｉＮＯＳ）基因表达与生殖细胞凋亡的关系。方法：选取日龄为２２ｄ的ＳＤ雄性大鼠２０只，建立单侧隐睾模型，用生物素－ｄＵＴＰ／酶标亲和素测定法检测睾丸生殖细胞凋亡，用免疫组织化学ＳＰ法检测ｉＮＯＳ基因表达。结果：隐睾生殖细胞凋亡指数在术后７ｄ内随时间的延长而增加；从术后第４天起，与对侧正常睾刃相比，隐睾发生凋亡的生殖细胞显著增加（Ｐ〈０．０１）；在正常的睾丸组织中     

Fas/FasL和C-myc基因表达与隐睾生殖细胞凋亡的关系

目的：探讨Fas／FasL和C—myc基因表达与隐睾生殖细胞凋亡的关系，以及C—myc与Fas／FasL介导的细胞凋亡途径之间的关系。方法：采用22d龄SD雄性大鼠建立单侧隐睾模型，运用生物素—dUTP／酶标亲和素测定法检测睾丸生殖细胞凋亡，运用免疫组织化学SP法检测Fas／Fasl和C—myc基因表达。结果：①与对侧睾丸相比，术后第3天隐睾侧睾丸发生凋亡的生殖细胞无显著增加(P＞0．05)，Fas／FasL和C—myc基因表达亦无显著增加(P＞0．05)；第7天隐睾侧睾丸发生凋亡的生殖细胞显著增加(P＜0．01)；Fas／FasL和C—myc基因表达均有显著增加(P＜0．01)。②实验性隐睾术后第3天和第7天，C—myc基因表达与相应Fas／FasL基因表达间均存在着正相关关系。结论：手术诱导的隐睾生殖细胞凋亡增加；Fas／FasL和C—myc基因表达上调可能是生殖细胞发生凋亡的重要原因之一；隐睾生殖细胞凋亡可能是通过与C—myc相偶联的Fas／FasL细胞凋亡途径调控的。     

大鼠单侧隐睾对侧睾丸的损害与抗氧化酶mRNA的表达

目的　从基因表达水平探讨单侧隐睾对侧睾丸损害机制。方法　 3 0只SD雄性大鼠分为对照组与隐睾组 ,每组各 15只。采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测对侧睾丸中谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH PX)、铜 /锌超氧化物岐化酶 (Cu/Zn SOD)、过氧化氢酶 (CAT)mRNA的表达 ;化学比色法测定丙二醛 (MDA)的含量 ;生物素 dUTP/酶标亲和素法检测睾丸生殖细胞的凋亡。结果　术后 2周 ,与对照组比较 ,隐睾组GSH PX和SODmRNA表达明显下降 ,MDA和生殖细胞凋亡明显升高 (P <0 .0 1) ,而CATmRNA表达无明显改变 (P >0 .0 5 )。结论　单侧隐睾对侧睾丸存在GSH PX和SODmRNA表达降低 ,氧自由基升高和生殖细胞过度凋亡。     

Gene expression of inducible nitric oxide synthase in injured spinal cord tissue

ＮＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｒｔｈｏｐｅｄｉｃｓ ,ＺｈｕｊｉａｎｇＨｏｓｐｉｔａｌ,ＴｈｅＦｉｒｓｔＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ,Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ 5 10 2 82 ,Ｃｈｉｎａ (ＬｉｕＣＬ ,ＪｉｎＡＭ ,ＺｈｏｕＣＳａｎｄＣｈｅｎＢ)ＴｈｉｓｗｏｒｋｗａｓｓｕｐｐｏｒｔｅｄｂｙｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎａ (Ｎｏ :3980 0 16 6 )ｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ (ＮＯ) ,ａｈｉｇｈｌｙ ａｃｔｉｖａｔｅｄｍｏｌｅｃｕｌｅ ,ｉｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎ…     

休克大鼠外周血白细胞表面粘附分子的表达

细胞内粘附分子 (ｉｎｔｅｒｃｅｌｌｕｌａｒａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ ,ＩＣＡＭ 1)又名ＣＤ5 4,是淋巴细胞功能相关抗原 1(ｌｙｍｐｈｏ ｃｙｔｅｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄａｎｔｉｇｅｎ 1,ＬＦＡ 1)可诱导的细胞表面配基 ,作用非常活跃。为观察烧伤性休克时白细胞表面ＬＦＡ 1、ＩＣＡＭ 1表达的变化 ,笔者进行了此项实验。材　料　与　方　法1.取雄性ＳＤ大鼠 12只 ,体重 180～ 2 30 ｇ ,随机分为正常对照组 (5只 )和烧伤休克组 (7只 )。大鼠用质量浓度为133ｇ/Ｌ的乌拉坦和 5ｇ/Ｌ氯醛糖麻醉 (0 6ｍｌ/ 10 0 …     

肝癌和肝硬化组织中凋亡信号蛋白的表达

凋亡信号蛋白表达异常 ,往往会影响肝细胞凋亡 ,从而引起肝癌。众所周知 :肝硬化同肝癌关系密切。我们采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ免疫印迹法检测凋亡信号蛋白 :Ｆａｓ相关死亡区域蛋白 (ＦＡＤＤ)、肿瘤坏死因子受体相关死亡区域蛋白(ＴＲＡＤＤ)、ＦａｓＬ、Ｆａｓ和核因子 κＢ (ＮＦ κＢ)在肝癌 (ＨＣＣ)和肝硬化 (ＬＣ)组织中的表达 ,探讨它们的表达同ＨＣＣ和ＬＣ的关系。一、对象和方法1.标本 :本院 2 0 0 0年 1月～ 2 0 0 1年4月间 35例原发性肝癌手术切除标本 ,病理诊断均为肝细胞性肝癌。 35例门静脉高压症患者术中肝硬化活检标…     

Pedicale screw system plus ACPC perfusion to treat fractures of thoracolumbar vertebrae

ＩＯｒｔｈｏｐａｅｄｉｃｓＤｅｐａｒｔｍｅｎｔ,ＺｈｅｊｉａｎｇＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＣｏｒｐｓＨｏｓｐｉｔａｌ,ＣｈｉｎｅｓｅＰｅｏｐｌｅ ｓＡｒｍｅｄＰｏｌｉｃｅＦｏｒｃｅｓ ,Ｊｉａｘｉｎｇ3140 0 0 ,Ｃｈｉｎａ (ＺｅｎｇＺＹ ,ＪｉｎＣＹ ,ＬｕＪＲ ,ＷａｎｇＢａｎｄＸｕＡＢ)ＥａｓｔＣｈｉｎａＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ,Ｓｈａｎｈａｉ2 0 0 2 37,Ｃｈｉｎａ (ＬｉｕＣＳ)ｎｒｅｃｅｎｔｙｅａｒｓｔｈｅｐｅｄｉｃｌｅｓｃｒｅｗｓｙｓｔｅｍｈａｓｂｅｅｎｗｉｄｅｌｙｕ…     

Wistar鼠隐睾生殖细胞DNA分析

Ｗｉｓｔａｒ鼠隐睾生殖细胞ＤＮＡ分析陈永田，赖晓峰，张霨泽选择Ｗｉｓｔａｒ幼鼠复制单侧隐睾模型，在不同日龄处死，取睾丸，检测隐睾和对侧已降睾丸（ＣＤＴ）生殖细胞ＤＮＡ变化．材料和方法分组、手术方法：（１）未手术组２９只，在日龄２８天（１０只）、５０天...     

单侧隐睾对侧睾丸生精上皮保护作用的实验研究

目的探讨单侧隐睾鼠对侧睾丸生殖细胞和Sertoli细胞变化和还原型谷胱甘肽(GSH)对对侧睾丸的保护作用。方法30只SD雄性大鼠分为对照组(A组)、隐睾组(B组)、隐睾加GSH组(C组),每组各10只。采用化学比色法测定对侧睾丸GSH、丙二醛(MDA)含量;生物素-dUTP/酶标亲和素法检测睾丸生殖细胞的凋亡;透射电镜观察Sertoli细胞的超微结构。结果术后2周,与A组比较,B组对侧睾丸GSH明显降低,MDA和细胞凋亡明显增加(P<0.01),Ser-toli细胞线粒体和滑面内质网扩张。C组这种变化则明显减轻(P<0.01),与A组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论外源性GSH对单侧隐睾鼠对侧睾丸生殖细胞和Sertoli细胞有保护作用。     

Fas介导肝细胞凋亡在肝硬化大鼠肝缺血再灌注损伤中的研究

肝脏缺血再灌注 (Ｉ/Ｒ)损伤常见于临床上入肝血流阻断肝切除术和肝移植。我们通过复制肝硬化大鼠肝Ｉ/Ｒ模型 ,测定Ｆａｓ凋亡途径上游Ｆａｓ ｍＲＮＡ表达和下游Ｃａｓｐａｓｅ 3活性及不同Ｉ/Ｒ条件下的肝细胞凋亡 ,探讨Ｆａｓ是否参与了肝Ｉ/Ｒ条件下的肝细胞凋亡。一、材料与方法1.实验动物及肝硬化模型的复制[1] :7～ 8周龄雄性ＳＤ大鼠 (中山医科大学动物中心提供 ) ,40只体重 2 0 0～2 3 0 ｇ。腹腔内注射硫代乙酰胺 (中国医药上海化学试剂公司 ,剂量为 2 0 0ｍｇ/ｋｇ体重 ) ,隔天 1次 ,共 10周 ,大鼠自由进食。造模成功后 2周开始…     

总抗氧化能力和一氧化氮合酶对大鼠隐睾生殖细胞凋亡的影响

目的：探讨总抗氧化能力（T－AOC）和一氧化氮（NO）合物（NOS）对隐睾生殖细胞凋亡的影响。方法：SD雄性大鼠日龄22d时复制单侧隐睾模型。用生物素－dUTP/酶标亲和素测定法检测睾丸生殖细胞凋亡；用硝酸还原酶法测定睾丸组织中NO含量；用化学比色法测定睾丸组织中T－AOC、NOS活性。结果：术后第7天，与对侧睾丸相比，隐睾发生凋亡的生殖细胞数显著增加，NO含量及NOS活性显著上升（P＜0．01），在隐睾组织中两者呈正相关（γ3=0.890,P＜0．01）；T－AOC显著降低（P＜0．01）。结论：隐睾组织中NO和NOS升高、T－AOC下降是隐睾生殖细胞凋亡增加的生化机制之一。     

胰岛与Fas配体阳性睾丸细胞共同移植产生免疫豁免

目的通过胰岛与睾丸细胞共同移植诱导胰岛移植物长期生存。方法胶原酶、胰蛋白酶、Ｄｎａｓ酶消化制备睾丸ｓｅｒｔｏｌｉ细胞培养４８小时;纯化的供体（Ｗｉｓｔａｒ大鼠）胰岛５００个培养后的睾丸ｓｅｒｔｏｌｉ细胞共同移植,移植前后不用全身性免疫抑制剂,ＴＵＮＥＬ法标记胰岛移植物周围凋亡的淋巴细胞,ＳＡＢＣ法测定共同移植物ＦａｓＬ稳定表达情况。结果胰岛与１×１０７个睾丸ｓｅｒｔｏｌｉ细胞共同移植可以纠正链脲酶素所至的糖尿病高血糖状态达６０天（有效率达１００％,６／６）,单纯的胰岛移植或与１×１０５个睾丸ｓｅｒｔｏｌｉ细胞共同移植,移植物仅能存活５～６天。移植物周围可见明显的凋亡的淋巴细胞存在。结论胰岛与Ｆａｓ配体阳性睾丸细胞共同移植可以诱导局部免疫豁免,使移植物长时间存活。