Giα介导的胰岛素信号转导在烫伤大鼠胰岛素抵抗中的作用

目的：探讨Giα介导的胰岛素信号转导在烫伤大鼠胰岛素抵抗中的作用，初步阐明烫伤后发生胰岛素抵抗的信号转导分子机理。方法：①Western杂交检测严重烫伤大鼠肝脏细胞Giα含量的变化规律，并检测烫伤3d大鼠肝脏细胞IRS-1的酪氨酸磷酸化。②血糖仪和放射免疫法检测烫伤大鼠血糖及胰岛素水平，并统计分析与Giα表达水平的关系。结果：①烫伤后1-6d肝细胞Giα明显降低，以伤后第3天最为明显。同步检测IRS-1的酪氨酸磷酸化，发现在胰岛素刺激下IRS-1不能发生酪氨酸磷酸化。②烫伤大鼠血糖和胰岛素水平均明显升高。对烫伤3d的血糖和Giα进行相关分析，发现Giα的表达水平和血糖呈明显的负相关。结论：Giα表达减少可能是烫伤大鼠IRS酪氨酸磷酸化障碍及产生胰岛素抵抗的一个重要机制。     

烧伤后胰岛素抵抗的实验研究

目的:探讨大鼠烧伤后葡萄糖耐量,胰岛素敏感性指数和正常血糖高胰岛素钳夹的变化情况,证实烧伤后存在胰岛素抵抗.方法:6周龄SD大鼠(体质量160～170 g)随机分为假烫伤组和烫伤组,每组8只.烫伤组大鼠制成烧伤面积为30%的Ⅲ度烫伤模型,伤后第3天禁食12 h后采血,用自动血糖仪测定血糖;用大鼠胰岛素ELISA试剂盒测血浆胰岛素水平和胰岛素敏感性指数(ISI);测0、30、60、90、120 min血糖值,观察葡萄糖耐量的变化;伤后第4天观察正常血糖高胰岛素葡萄糖钳夹技术10%葡萄糖总输注率的变化情况.结果:与假烫伤组相比,大鼠烫伤后第3天血糖和血浆胰岛素水平显著升高[血糖(8.94±2.22)vs(6.10±0.62)mmol/L,血浆胰岛素浓度(3.14±1.08)vs(1.06±0.45)ng/ml,P＜0.01],而ISI显著下降[(0.58±0.23)vs(1.23±0.16),P＜0.01].烫伤后第3天葡萄糖耐量实验显示烫伤大鼠对于外源性葡萄糖耐受性在各时间点均明显降低.烫伤后第4天正常血糖高胰岛素钳夹技术检测显示10%葡萄糖输注率较假烫伤组显著下降[(7.23±1.35)vs(12.31±0.54)mg/(kg·min),P＜0.01].结论:大鼠烧伤后可引起糖代谢异常并导致胰岛素抵抗发生.     

严重烫伤大鼠肝细胞跨膜信号传导的研究

本文研究３０％体表皮肤全层烫伤大鼠的肝细胞膜胰岛素受体结合性质变化和对肝细胞膜腺苷酸环化酶活性调节，探讨跨膜信号传导在烫伤后胰岛素抵抗中的作用。结果证明烫伤后肝细胞膜胰岛素受体结合容量降低，胰岛素对腺苷酸环化酶抑制的敏感性下降。提示烫伤后肝膜信号传递障碍可能影响糖代谢异常和引起胰岛素抵抗。     

胰岛素受体底物1在烧伤后胰岛素抵抗中的作用

目的:观察烧伤后胰岛素受体底物1(IRS-1)及其丝氨酸307和酪氨酸磷酸化的变化,探讨烧伤后胰岛素抵抗的分子机制.方法:6周龄SD大鼠(体质量160～170g)随机分为假烫伤组(n=8)和烫伤组(n=8),烫伤组大鼠制成烧伤面积为30%的Ⅲ度烫伤模型,伤后第4天,禁食5 h后的大鼠,进行正常血糖高胰岛素钳夹技术实验,实验后颈动脉放血处死,立即采集肌肉和脂肪标本,采用免疫沉淀和免疫印迹方法分析IRS-1及其丝氨酸307和酪氨酸磷酸化的变化情况.结果:烫伤后肌肉和脂肪组织中IRS-1上丝氨酸307磷酸化水平显著升高[假烫伤组光密度值设定为1,进行对照比较;骨骼肌:(3.78±1.58)vs(1.00±0.16),P＜0.01;脂肪组织:(2.09±0.44)vs(1.00±0.18),P＜0.05],而IRS-1上酪氨酸磷酸化水平显著降低[骨骼肌:(0.66±0.32)vs(1.00±0.34),P＜0.05;脂肪组织:(0.62±0.27)vs(1.00±0.24),P＜0.05].烫伤后IRS-1含量无显著性改变[肌肉组织:(0.87±0.05)vs(1.00±0.17),P＞0.05;脂肪组织:(0.93±0.01)vs(1.00±0.16),P＞0.05].结论:烧伤后IRS-1丝氨酸307磷酸化升高和酪氨酸磷酸化降低可能是烧伤后胰岛素抵抗发生的重要分子机制之一.     

TNF—α与烧伤后胰岛素抑抗相关性的研究

目的：确证ＴＮＦ－α在烧伤后胰岛素抵抗发生中的作用。方法：利用３０％ＴＢＳＡⅢ°烫伤小鼠模型，检测伤后不同时相点血浆ＴＮＦ－α血糖，胰岛素，乳酸和胰高血糖素的动态变化并进行要关性分析。同时用重组人ＴＮＦ－α（ｒｈ－ＴＮＦ－α）注射下沉小鼠和单克隆抗体（ＴＮＦ－ＭｃＡｂ）注射烫伤小鼠，观察上述相关指标的变化。结果：严重烫伤小鼠３ｈ后出现胰岛素抵抗指标增高并被ＴＮＦ－ＭｃＡｂ减轻。结论：烧伤后机体ＴＮ     

胰岛素介体对烫伤大鼠cAMP磷酸二酯酶的调节

由经胰岛素诱导的大鼠肝细胞质膜分离出一种分子量为３－３．５ｋＤ的胰岛素化学介体，可以刺激激大鼠脂肪细胞的ｃＡＭＰ依赖的磷酸二酯酶。刺激作用呈剂量依赖关系。这种胰岛素介体刺激正常大鼠ｃＡＭＰ－ＰＤＥ活性升高６倍，但对烫伤大鼠ｃＡＤＥ－ＰＤＥ活性只增加１．２４倍，两者差异明显，表明烫伤大鼠ｃＡＭＰ－ＰＤＥ对胰岛素介体刺激的反应性降低可能涉及胰岛素抵抗的受体后信号传递缺陷。     

烧伤后胰岛素受体信号传导缺陷机理的研究

目的：为了探索烧伤后胰岛素受体信号传递缺陷的机理，以阐明烧伤胰岛素抵抗的分子基础。方法：采用ＷＧＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层杆纯化大鼠肝脏和肌肉细胞膜胰岛素受体，通过胰岛素受体蛋白γ－３２Ｐ磷酸化的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ放射自显影和外源底物磷酸化，观察烫伤大鼠早期胰岛素受体β－亚基自身磷酸化和受体酪氨酸蛋白激酶（ＩＲ－ＴＰＫ）活性变化。结果：３０％ＴＢＳＡⅢ°烫伤３ｄ大鼠肝和肌肉胰岛素受体β－亚基自身磷酸化能力明显下降；胰岛素受体ＴＰＫ活性亦明显降低并对胰岛素刺激的反应性明显减退。结论：胰岛素受体信号偶联障碍可能是烧（创）伤后胰岛素抵抗发生的分子基础。     

烧伤后胰岛素受体信呈传导缺陷机理的研究

目的：为了探索烧伤后胰岛素受体信号传递的缺陷的机理，以阐明烧伤胰素抵抗的分子基础，方法：采用ＷＧＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层杆纯化大鼠肝脏和肌肉细胞膜胰岛纱受体，通过胰岛素受体蛋白γ－＾３２Ｐ磷酸化的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ放射自显影和外源底物磷酸化，观察烫伤大鼠早期胰岛素受体β－亚基自身磷酸化和受体酪氨酸蛋白激酶（ＩＲ－ＴＰＫ）活性变化，结果３０％ＴＢＳＡⅢ°烫伤３ｄ大鼠肝和肌肉胰岛素受体β－亚基自     

严重烫伤小鼠TNF—α表达及其在胰岛素抵抗中作用的研究

目的：阐明TNF-α超表达在烧伤胰岛素抵抗中的作用机制。方法：观察全层体表面积30%（30%TBSA）烫伤小鼠肝脏TNF-α-mRNA表达的动态变化和肝脏及肌肉部分纯化的胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶（Insulin receptor tyrosine protein kinase,InsR-TPK)活性变化和肝脏及肌肉部分纯化的胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶（Insulin receptor tyrosine protein kinase,InsR-TPK)活性变化以及注射TNF-McAb后InsR-TPK活性恢复情况。结果：（1）严重烫伤小鼠肝脏TNF-α-mRNA表达，伤后3h开始升高，24h略有下降，随后又升高，一直持续到第5天。（2）严重烫伤小鼠肝脏和肌肉InsR-TPK活性降低。注射TNF-McAb，烫伤小鼠肌肉InsR-TPK活性恢复而肝脏InsR-TPK活性变化不明显。结论：严重烫伤后TNF-αmRNA表达增强，血中TNF-α水平升高，抑制InsR-TPK活性，引起InsR信号传递障碍是烧（创）伤胰岛素抵抗主要环节和分子基础。     

西罗莫司对大鼠烧伤后IRS-1 Ser307磷酸化和胰岛素抵抗的作用

目的:探讨西罗莫司对大鼠烧伤后胰岛素受体底物1丝氨酸307(IRS-1 Ser307)磷酸化和胰岛素抵抗的作用.方法:6周龄SD大鼠(体质量160～170g)随机分为假烫伤组(n=8)、烫伤组(n=8)和烫伤 西罗莫司组(n=8).烫伤组和烫伤 西罗莫司组大鼠制成烫伤面积为30%的Ⅲ度烫伤模型,伤后第4天禁食5 h后的大鼠腹腔注射西罗莫司(0.4mg/kg)2h后,进行正常血糖高胰岛素葡萄糖钳夹技术实验,实验后颈动脉放血处死,立即采集肌肉和脂肪标本,采用免疫沉淀和免疫印迹方法分析IRS-1及其磷酸化丝氨酸307和酪氨酸活性的变化,通过免疫组化观察各组肌肉组织中磷酸化哺乳类西罗莫司靶点激酶(mTOR)表达的差异.结果:正常血糖高胰岛素葡萄糖钳夹技术实验中假烫伤组、烫伤组和烫伤 西罗莫司组10%葡萄糖输注率分别为(12.33±0.42)、(6.61±0.27)和(10.35±0.63)mg/(kg·min),烫伤组和其他2组比较差异具有统计学意义(P＜0.01).烫伤大鼠肌肉和脂肪组织中IRS-1 Ser307活性较假烫伤组明显升高(P＜0.05),而IRS-1磷酸化酪氨酸活性较假烫伤组明显降低(P＜0.05).西罗莫司明显降低烫伤大鼠IRS-1 Ser307活性而明显增加IRS-1磷酸化酪氨酸活性(P＜0.05).免疫组化显示烫伤后磷酸化mTOR活性升高,西罗莫司显著抑制了mTOR活化.结论:西罗莫司通过抑制mTOR磷酸化作用从而降低了IRS-1磷酸化丝氨酸307活性,至少部分减轻烧伤后胰岛素抵抗的发生.     

Effects of insulin receptor tyrosine protein kinase on insulin resistance after scalding in rats

Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｉｎｓｕｌｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒｔｙｒｏｓｉｎｅｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅｏｎｉｎｓｕｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅａｆｔｅｒｓｃａｌｄｉｎｇｉｎｒａｔｓ￥（毛旭虎）（许霖水）ＭａｏＸｕｈｕ，ＸｕＬｉｎｓｈｕｉ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢ...     

Changes of the binding capacity of insulin receptors and activities of adenylate cyclase in hepatocytes after scalding in rat

Ｃｈａｎｇｅｓｏｆｔｈｅｂｉｎｄｉｎｇｃａｐａｃｉｔｙｏｆｉｎｓｕｌｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒｓａｎｄａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆａｄｅｎｙｌａｔｅｃｙｃｌａｓｅｉｎ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓａｆｔｅｒｓｃａｌｄｉｎｇｉｎｒａｔｓＸｕＡｉｍｉｎ（徐爱民）；Ｘｕｌ...     

严重烫伤大鼠脂肪组织胰岛素抵抗机制的研究

30％TBSA Ⅲ°烫伤大鼠,伤后第4天,脂肪组织胰岛素受体最大结合容量明显减少。胰岛素敏感的低Km值cAMP-磷酸二酯酶(PDE)对胰岛素激活的敏感性降低;最大反应性正常,但反应剂量曲线右移,ED_(50)增大。脂肪细胞FFA和cAMP含量变化不明显,超生理剂量(30nM)胰岛素抗脂解效应存在。     

胰岛素信号转导与胰岛素抵抗

胰岛素通过与其受体结合可在不同组织细胞内激活不同的信号途径而产生不同的作用，因而信号转导的不同环节出现异常均可能导致胰岛素抵抗。近年来，胰岛素受体、胰岛素底物系列及磷脂酰肌醇-3-激酶等已成为在分子水平上研究胰岛素抵抗的热点。本文就这几方面文献报道作一综述。     

Studies on the mechanism of insulin resistance of adipose tissue after scalding in rats

Ｓｔｕｄｉｅｓｏｎｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｉｎｓｕｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆａｄｉｐｏｓｅｔｉｓｓｕｅａｆｔｅｒｓｃａｌｄｉｎｇｉｎｒａｔｓ￥ＸｕＬｉｎｓｈｕｉ（许霖水），ＷｕＸｉｇｕｉ（吴喜贵）．（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆｂｉｏｃｈｅｍｉｓ...     

中国人葡萄糖兴奋胰岛素分泌的特点

目的 探讨中国人不同糖耐量状态下的葡萄糖兴奋胰岛素分泌的特点。方法 634例受试者分成两类亚组：1、以体块指数（BMI）25为切割点,分为正常体重组（NW）与超重/肥胖组（OW/OB）,并按空腹血糖水平的不同各分为7个亚组。2、根据BMI和糖耐量,把所有受试者分为以下6个亚组;正常体重、正常糖耐量组（NW-NGT）、正常体重-空腹血糖减损/糖耐量减退组（NW-IFG/IGT）、正常体重-糖尿病组（NW-DM）、超重/肥胖-正常糖耐量组（OW/OB-DM）。以口服葡萄糖耐量试验（OGTT）0-120min的平均胰岛素水平评价葡萄糖兴奋的胰岛素分汔功能,采用稳态模式评估法（HOMA）评价胰岛素抵抗（HOMA-IR）。结果 1、中国人空腹血糖与总体胰岛素分泌呈倒U字型曲线,正常体重者中总体胰岛素分泌高峰的空腹血糖值为5.9mmol/L;2、超重/肥胖伴正常糖耐量的个体总体胰岛素分泌最高;3、超重/肥胖个体伴IGT时,总体胰岛素分泌减退及胰岛素抵抗指数的持续升高。结论 1、中国人空腹血糖与总体胰岛同素分泌最高;3、超重/肥胖个体伴IGT时,总体胰岛素分泌减退,并伴胰岛素抵抗指数升高;4、超重/肥胖伴糖尿病时,同时存在进行性的总体胰岛素分泌功能的减退及胰岛素抵抗指数的持续升高。结论 1、中国人空腹血糖与总体胰岛素分泌呈倒U了型曲线,高峰较白种人前移,总体胰岛素分泌达峰值的空腹血糖水平比白种人低;2、中历人超重/肥胖个体中,NGT、IGT及DM三个亚组的总体胰岛同素分泌依次减退并伴有胰岛素抵抗的逐渐增强。     

Chronic Hyperinsulinism Induced Down—regulation of Insulin Post—Receptor Signaling Transduction in Hep G2 Cells

Insulin initiates its biological effects first bybinding to its cellular receptor,thereby activatingthe tyrosine kinase in theβ- subunit of the insulinreceptor ( IRβ) .This leads to tyrosine phosphory-lation of several insulin receptor protein substrates( IRS) ,especially IRS- 1 [1,2 ] .Phosphorylated IRS-1 plays a critical role in divergence of the insulinsignal.Phosphorylated IRS- 1 associates with SH2domain proteins,such as the p85 subunit of phos-phatidylinositol 3- kinase ( PI 3-…     

高脂饮食肥胖大鼠胰岛细胞胰岛素抵抗机理的探讨

目的探讨高脂饮食诱导的肥胖大鼠在具有外周胰岛素抵抗(IR)的情况下,胰岛胰岛素、胰高血糖素的分泌和合成功能,高糖刺激下胰高血糖素和胰岛素的分泌以及胰岛内胰岛素信号转导分子的改变。方法30只雄性Wistar大鼠随机分为高脂饲料喂养的肥胖组和普通饲料喂养的对照组,每组各15只,共喂养20周。采用胰腺组织匀浆,检测胰岛素和胰高血糖素的含量;胰岛细胞表面灌注检测高糖状态胰岛素和胰高血糖素的动态分泌变化;免疫组织化学染色及图像分析检测胰岛素受体(IRc)及胰岛素受体底物1、2(IRS1、IRS2)在两组大鼠胰岛的表达。结果(1)肥胖组胰岛素敏感指数(ISI)明显低于对照组,肥胖组血胰高血糖素水平和胰岛内的胰高血糖素水平均显著高于对照组(362pg/ml±58pg/mlvs291pg/ml±35pg/ml,P<0.05;442pg/ml±56pg/mlvs287pg/ml±48pg/ml,均P<0.05)。(2)肥胖组葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)受损,16.7mmol/L葡萄糖可显著抑制对照组胰岛α细胞胰高血糖素的分泌,而在肥胖组这种抑制作用消失。(3)胰岛存在IRc、IRS1和IRS2的表达。肥胖组胰岛IRc、IRS2的表达较对照组胰岛分别低28%和22%(均P<0.01)。结论高脂饮食诱导的肥胖大鼠胰岛细胞的胰岛素信号转导通路受损,即在有外周IR的同时也具有胰岛内的IR,这可能是肥胖状态下胰岛细胞功能障碍的内在机制之一。     

胰岛素受体底物1与肝硬化胰岛素抵抗的研究进展

肝硬化与胰岛素抵抗密切相关,临床表现为高糖血症、高胰岛素血症、高脂血症以及各种细胞因子的异常增高,其病理机制目前尚不明确。近来研究发现,肝硬化胰岛素抵抗与胰岛素受体底物有关,而胰岛素受体底物是胰岛素信号传导通路中的关键信号分子,它可通过表达上调或下调、翻译后修饰,以及亚细胞定位来改变胰岛素信号的传导,其中翻译后修饰中的磷酸化/去磷酸化显得尤为重要且较为复杂。再者,不同病因的肝硬化胰岛素受体底物的作用途径并不相同。