505株分枝杆菌的耐药性分析

目的了解我院近两年就诊患者分枝杆菌对10种药物的耐药状况,为临床化疗方案的选择提供科学依据。方法将收集到的痰标本进行分离培养,然后利用噻吩-2-羧酸肼(TCH)培养基生长试验、硝酸还原试验以及烟酸试验对其进行菌种鉴定,并同时采用绝对浓度法对10种抗结核药物进行药敏试验。结果结核分枝杆菌(包括人型和牛型)共377株,对4种一线抗结核药的总耐药率为15.11%(57/377),耐多药结核(MDR-TB)有3株(0.8%)。非结核分枝杆菌128株,对4种一线抗结核药的总耐药率为66.9%(97/128),对10种药物全耐药的有22株(17.1%)。结论分枝杆菌(尤其是非结核分枝杆菌)对常用抗结核药物的耐药率高,应加强抗结核药物的耐药性监测,并根据药敏结果选择科学有效的化疗方案。     

两种不同方法测定分支杆菌药敏试验的比较

分枝杆菌药敏试验通常是在固体罗氏培养基中按要求加入各种药物 ,根据细菌在培养基上的生长情况来判断药敏试验的结果。采用 BACTEC MGIT 96 0测定仪检测分枝杆菌药敏试验是目前比较先进的方法 ,其主要是采用连续检测接种标本的培养管所显示的荧光强度来判断分枝杆菌生长的情况。本实验对 80份住院初、复治结核病患者的痰标本 ,进行分离培养出的分枝杆菌 ,做上述两种方法的药敏试验 ,观察两种方法对 4种常用结核药物的符合率 ,现将结果报告如下。材料与方法1.标本来源均为我院 2 0 0 1年 5月至今分枝杆菌培养阳性的菌种。2 .试剂　　 M…     

145株非结核分枝杆菌对10种药物的耐药性分析

目的了解我院非结核病患者分离的非结核分枝杆菌对10种药物的耐药状况。方法用MB/Bact 240分枝杆菌培养仪和改良罗氏管对患者的多种标本进行分枝杆菌分离培养鉴定,对分离到的分枝杆菌采用绝对浓度法对10种抗结核药物,利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素,利福喷丁、丙硫异烟肼、氧氟沙星、卷曲霉素、卡那霉素和对氨基水扬酸进行药物敏感性试验。结果 1722例患者的标本非结核分枝杆菌培养阳性145株,对10种药总耐药率97.2%（141/145）,单耐药率最高为异烟肼、链霉素和对氨基水扬酸,最低为氧氟沙星。结论非结核分枝杆菌耐药情况十分严重,应加强抗结核药物的耐药性监测;根据药敏试验选择科学有效的化疗方案。     

23株非结核分枝杆菌药物敏感性试验分析

目的 对自贡市临床分离鉴定的23株非结核分枝杆菌分别进行26种抗生素的药物敏感试验,了解非结核分枝杆菌对不同抗生素的耐药性,为非结核分枝杆菌病临床治疗提供依据。方法 采用微孔板阿尔玛蓝测定法(microplate Alamarblue assay,MABA)测试每种药物对每株非结核分枝杆菌的最低抑菌浓度(MIC值),通过MIC值判断该菌对此种抗生素是否耐药。结果 非结核分枝杆菌对大部分抗结核药物耐药,并且对部分药物的耐药存在种间差异。其中脓肿分枝杆菌耐药率达84.6%,鸟分枝杆菌与胞内分枝杆菌分别达53.8%与52.3%,堪萨斯分枝杆菌耐药率最低为38%。结论 对临床非结核分枝杆菌肺病,快速菌株鉴定及药敏试验是治疗的关键。     

187例结核性胸膜炎胸膜结核分枝杆菌药敏检测探讨

目的了解结核性胸膜炎患者结核分枝杆菌的耐药情况,为指导临床制定合理化疗方案提供科学依据。方法采用胸膜活检技术获取胸膜组织接种在改良罗氏培养基内进行结核分枝杆菌的培养及药物敏感性测定。结果306例结核性胸膜炎胸膜组织结核分枝杆菌培养阳性者187例,阳性率61.1%。187例药敏测定结果对6种抗结核药物均敏感者148例,敏感率79.1%;耐药39例,耐药率20.9%。结论结核性胸膜炎与肺结核都同样存在着初始耐药性和继发耐药性的问题,同样必须高度重视其化疗原则和管理水平。     

抗结核药物对非结核分枝杆菌菌种鉴定的试验

报告２２种非结核分枝杆菌典型株对１２种抗结核药物的敏感性试验结果,２２种非结核分枝杆菌在食ＴＨ１３２１,ＴＢ１,ＰＡＳ,ＩＮＨ培养其呈现不同程度耐药性,胞内分枝杆菌等１３种非结核分枝杆菌在含ＳＭ,ＥＭＢ,ＲＦＰ培养基呈现不同程度耐药性,鸟分枝杆菌等６种非结核分支杆菌在含ＮＦＬＸ,ＯＦＬＸ,ＣＦＬＸ培养基呈现不同程度耐药性,海分枝杆菌等３种非结核分枝杆菌在含ＣＰＭ培养其呈现不同程度耐药性,龟分枝杆菌     

结核分支杆菌耐药性检测进展

自从抗结核药物诞生以来,化学疗法在控制结核病的流行中发挥了巨大作用。但是,随着化疗药物的临床应用,结核杆菌的耐药性也不断上升。由于化疗效果的好坏与结核分支杆菌（ＭＴＢ）的耐药性密切相关,因此耐药性测定尤为重要。本文就耐药性测定方法研究进展综述如下。１常规耐药性检测方法进展１．１绝对浓度法：每种药物需制备二种不同浓度的含药培养基,同时用不含药培养基作对照,接种菌液最终浓度为１０－３ｍｇ／ｍｌ,３７℃培养４周观察结果,判断标准为对照培养基上细菌生长良好,含量培养基上菌落＞２０个判为耐药。该法是我国普…     

以脂肪酸合成酶FabH为靶标的化合物体外抗结核作用的初步研究

目的研究结核分枝杆菌脂肪酸合成酶FabH为靶标的化合物的体外抗结核活性,研制新的高效、安全的抗结核药物。方法以平板滤纸法测定化合物对草分枝杆菌的抑菌圈,以试管抑菌法检测化合物对结核分枝杆菌药物敏感株和耐多药分离株的抑制作用。结果18种化合物在500μmol/L浓度时对草分枝杆菌的抑菌圈为1.82.4 cm,其中7种化合物在250μmol/L和125μmol/L浓度时对草分枝杆菌的抑菌圈为1.52.2 cm。结核分枝杆菌H₃₇Rv标准株在分别含3mmol/L的18种化合物的培养基上培养2周时,绝大多数含化合物培养基上未见细菌生长;培养4周时,No.115、No.131、No.128、No.129、No.137化合物的抑菌作用较明显。结核分枝杆菌耐多药分离株HB240在分别含3mmol/L的11种化合物的培养基上培养2周和4周时,No.115化合物均显示明显的抑菌作用。结论以脂肪酸合成酶FabH为靶标的大多数化合物在体外都具有不同程度的抗结核活性,尤其是No.115化合物对草分枝杆菌、结核分枝杆菌敏感株和耐药株都具有明显的抑制作用。     

临床结核病耐药性变化趋势的动态监测

目的探讨结核病患者对一线和二线药物耐药情况的变化,了解其耐药分布特征。方法收集结核病患者各类标本结核杆菌培养阳性菌株2936株,采用绝对浓度法对4种一线药物和3种二线药物进行药物敏感试验。结果2936株菌株中,结核分枝杆菌复合群2824株（占96．2％）。2824株中,769株耐药,总耐药率为27．2％（769／2824）。其中耐多药菌株率为11．8％（334／2824）,广泛耐药菌株率为1．9％（54／2824）。结核病患者耐药性的发生更趋向于对链霉素、异烟肼、利福平等主要一线抗结核药,作为耐多药结核病治疗的核心二线药物左氧氟沙星单耐药率逐年升高。结论结核分枝杆菌对多种药物的耐药性有差异,结核分枝杆菌耐药性流行水平有上升趋势。     

广东省广州市2001—2004年分枝杆菌初步菌种鉴定与药物敏感性试验结果分析

目的了解广州市2001—2004年3年间分枝杆菌菌种的分布状态和抗结核药物的耐受性情况,为临床诊断和治疗结核病提供可靠的科学依据。方法对2001年9月—2004年3月从1 459例患者中共分离出的2 154株分枝杆菌进行菌种鉴定,并采用绝对浓度间接法对结核分枝杆菌和部分非结核分枝杆菌进行4种抗结核药物的敏感性试验。结果非结核分枝杆菌的分离率由1998年7月—2001年9月的16.5%上升至20.3%;对2 154株分枝杆菌中的1 703株结核分枝杆菌复合群菌株进行的药物敏感性试验结果显示:原始耐药率由1998年7月—2001年9月的14.4%上升至20.3%。继发耐药率则由原来的35.4%下降至32.3%;而非结核分枝杆菌对抗结核药物基本上呈现高度的原始耐受性。结论对临床分离出的阳性标本,有必要进行分枝杆菌的菌种鉴定和药物敏感性试验。     

广东省广州市2001-2004年分枝杆菌初步菌种鉴定与药物敏感性试验结果分析

目的了解广州市2001-2004年3年间分枝杆菌菌种的分布状态和抗结核药物的耐受性情况,为临床诊断和治疗结核病提供可靠的科学依据.方法对2001年9月-2004年3月从1 459例患者中共分离出的2 154株分枝杆菌进行菌种鉴定,并采用绝对浓度间接法对结核分枝杆菌和部分非结核分枝杆菌进行4种抗结核药物的敏感性试验.结果非结核分枝杆菌的分离率由1998年7月-2001年9月的16.5%上升至20.3%;对2 154株分枝杆菌中的1 703株结核分枝杆菌复合群菌株进行的药物敏感性试验结果显示：原始耐药率由1998年7月-2001年9月的14.4%上升至20.3%.继发耐药率则由原来的35.4%下降至32.3%;而非结核分枝杆菌对抗结核药物基本上呈现高度的原始耐受性.结论对临床分离出的阳性标本,有必要进行分枝杆菌的菌种鉴定和药物敏感性试验.     

以脂肪酸合成酶FabH为靶标的化合物体外抗结核作用的初步研究

目的研究结核分枝杆菌脂肪酸合成酶FabH为靶标的化合物的体外抗结核活性，研制新的高效、安全的抗结核药物。方法以平板滤纸法测定化合物对草分枝杆菌的抑菌圈，以试管抑菌法检测化合物对结核分枝杆菌药物敏感株和耐多药分离株的抑制作用。结果18种化合物在500μmol／L浓度时对草分枝杆菌的抑菌圈为1．8～2．4cm，其中7种化合物在250μmol／L和125μmol／L浓度时对草分枝杆菌的抑菌圈为1．5～2．2cm。结核分枝杆菌H37Rv标准株在分别含3mmol／L的18种化合物的培养基上培养2周时，绝大多数含化合物培养基上未见细菌生长；培养4周时，No．115、No．131、No．128、No．129、No．137化合物的抑菌作用较明显。结核分枝杆菌耐多药分离株HB240在分别含3mmol／L的11种化合物的培养基上培养2周和4周时，No．115化合物均显示明显的抑菌作用。结论以脂肪酸合成酶FabH为靶标的大多数化合物在体外都具有不同程度的抗结核活性，尤其是No．115化合物对草分枝杆菌、结核分枝杆菌敏感株和耐药株都具有明显的抑制作用。     

噬菌体生物扩增法快速测定结核分枝杆菌左氧氟沙星耐药性

目的建立快速测定结核分枝杆菌左氧氟沙星耐药性的噬菌体生物扩增法,并探讨其在耐药性测定中的应用价值。方法应用噬菌体生物扩增法测定456株结核分枝杆菌左氧氟沙星耐药性。并与绝对浓度法结果进行比较,对不符合的菌株采用BactecMGIT960测定其最低抑菌浓度(MIC)。结果噬菌体测定456株结核分枝杆菌临床分离株左氧氟沙星敏感267株,耐药189株,绝对浓度法敏感279株,耐药177株。两法测定均为敏感257株,均为耐药167株。在32株噬菌体法与绝对浓度法测定结果不符合的菌株中30株噬菌体法与MIC测定结果相符。如以绝对浓度法药敏结果判断标准,则噬菌体法测左氧氟沙星耐药性的敏感性为94.35%,特异性为92.11%,阳性预测值为88.36%。阴性预测值为96.26%,准确性为92.98%。结论噬菌体生物扩增法测定左氧氟沙星耐药性需2d,操作简便.不需要特殊仪器设备,可作为结核分枝杆菌左氧氟沙星耐药性的快速筛选方法。     

DNA微阵列芯片法检测耐药结核分枝杆菌的价值探讨

目的评价DNA微阵列芯片法快速检测耐药结核分枝杆菌的效果。方法对125份结核分枝杆菌痰涂片阳性标本和40份结核分枝杆菌传统培养阳性菌株样本,采用DNA微阵列芯片法进行异烟肼(isoniazid,INH)、利福平(rifampin,RFP)耐药性快速检测。同时以传统结核杆菌药物敏感试验方法作为金标准,对DNA微阵列芯片法检测结核分枝杆菌耐药性的一致率进行评价分析。结果 DNA微阵列芯片法检测结核分枝杆菌对INH耐药的敏感度为87.5%,特异度为100%,与传统药物敏感法的一致率为98.8%。DNA微阵列芯片法检测结核分枝杆菌对RFP耐药的敏感度为83.3%,特异度为100%,与传统药物敏感法的一致率为99.4%。DNA微阵列芯片法检测结核分枝杆菌耐多药的敏感度为100%,特异度为100%,与传统药物敏感法的一致率为100%。结论 DNA微阵列芯片法检测结核分枝杆菌的耐药性与传统药物敏感法有较高的一致率,较为可靠,且检测所需时间短,可以作为临床肺结核耐药性的快速筛查方法。     

噬菌体生物扩增法快速测定结核分枝杆菌利福平耐药性

目的　建立快速测定结核分枝杆菌利福平耐药性的噬菌体生物扩增法 ,并探讨其在结核分枝杆菌利福平耐药性测定中的应用价值。方法　应用噬菌体生物扩增法测定 5 2 4株结核分枝杆菌利福平耐药性 ,并与绝对浓度法结果进行比较 ,对不符合的菌株采用BactecMGIT 96 0测定其最低抑菌浓度 (MIC)。结果　噬菌体法测定 5 2 4株结核分枝杆菌临床分离株利福平敏感 30 1株、耐药 2 2 3株 ,绝对浓度法敏感 313株、耐药 2 11株 ;两法测定均为敏感 2 88株、均为耐药 198株。在 38株噬菌体法与绝对浓度法测定结果不符的菌株中 ,35株噬菌体法与MIC测定结果相符合。如以绝对浓度法药敏结果为判断标准 ,则噬菌体法测定利福平耐药性的敏感性为 93 8%、特异性为 92 0 %、阳性预测值为88 8%、阴性预测值为 95 7%、准确性为 92 7%。结论　噬菌体生物扩增法测定利福平耐药性只需 2天时间 ,操作简便 ,不需特殊仪器设备 ,可作为结核分枝杆菌利福平耐药性的快速筛选方法。     

比例法与绝对浓度法测试结核分枝杆菌药物敏感性探讨

目的探讨比例法与绝对浓度法测试结核分枝杆菌药物敏感性结果的一致性。方法用绝对浓度法和比例法同时对2946株结核分枝杆菌进行4种抗结核药物（RFP、EMB、SM、INH）的耐药性测定。结果RFP、EMB、SM、INH用绝对浓度法与比例法药敏测试结果一致率分别为：97.8%、96.7%、94.3%、92.3%。经统计学检验,两种方法测试2946株菌株4种药物敏感性结果差异有统计学意义（P<0.05）。结论绝对浓度法与比例法进行结核分枝杆菌测定总的一致率较高,但差别有统计学意义,在进行耐药性评价时应考虑药敏方法是否一致。     

微孔板Alamar blue显色法检测结核分枝杆菌氧氟沙星耐药性的研究

目的 评价微孔板Alamar blue显色法检测结核分枝杆菌氧氟沙星耐药性的可行性。方法 用微孔板Alamar blue显色法对78株结核分枝杆菌检测氧氟沙星的最小抑菌浓度,记录获得结果时间,利用ROC曲线确定氧氟沙星的最佳耐药阈值,并和传统的药物敏感性实验罗氏培养基比例法进行比较。结果 微孔板Alamar blue显色法获得结果平均时间为8 d,氧氟沙星的最佳耐药阈值为2 μg/mL,以罗氏培养基比例法为金标准,氧氟沙星的灵敏度和特异度分别为88.6%和94.1%。结论 微孔板Alamar blue显色法是一种简便、敏感、快速的药物敏感性检测方法,可用于结核分枝杆菌氧氟沙星耐药性的快速检测。     

宜昌市2002—2006年间住院肺结核患者耐药状况及趋势分析

结核病是当今最具威胁传染病之一,耐药结核病增加是疫情上升重要因素之一。对本院2002—2006年期间住院结核病患者进行了耐药性检测,报告如下。资料与方法1.检测对象:2 380例患者来自宜昌市辖区,均为2002—2006年本院收治的住院肺结核患者。其中男1 870例,女510例,年龄13~85岁之间,平均年龄41.7岁。肺结核选例标准:(1)初始病例:从未用过结核药物或用过结核药物史小于1个月者。(2)获得性病例:为抗结核治疗史1个月以上者。2.方法:留取治疗前痰标本,2002年1月—2006年1月期间检测应用BACTEC460系统,将处理病人痰标本接种至BBLTMMGITTM快速培养检测试剂管(试剂管为美国BD公司生产)。对培养阳性菌株进行分枝杆菌菌群鉴定,在试剂瓶中加入NAP试剂,观察GI指数,如继续生长为非结核分枝杆菌,如生长受到抑制为结核分枝杆菌。对确定为结核分枝杆菌采用绝对浓度间接法进行耐药检测,采用罗氏培养基按常规进行药敏试验并记录各菌株药敏试验的结果和时间。共进行了6种药物耐药性检测,耐药浓度界限分别为异烟肼(H)1μg/ml,利福平(R)50μg/ml,对氨水杨酸钠(P)1μg/ml,链霉素(...     

噬菌体生物扩增法快速测定结核分枝杆菌卷曲霉素耐药性的研究

目的建立快速测定结核分枝杆菌卷曲霉素耐药性的噬菌体生物扩增法,并探讨其在结核分枝杆菌卷曲霉素耐药性测定中的应用价值。方法应用噬菌体生物扩增法测定112株结核分枝杆菌卷曲霉素耐药性,并与绝对浓度法结果进行比较,对不符合的菌株采用Bactec MGIT 960测定其最低抑菌浓度(MIC)。以细菌接种量为10-3mg/ml,药物浓度5μg/ml、37℃作用24 h为药敏试验条件。结果噬菌体法测定112株结核分枝杆菌临床分离株卷曲霉素敏感91株、耐药21株,绝对浓度法敏感92株、耐药20株;两法测定均为敏感89株、均为耐药18株。在5株噬菌体法与绝对浓度法测定结果不符的菌株中,3株噬菌体法与MIC测定结果相符合。如以绝对浓度法药敏结果为判断标准,则噬菌体法测定卷曲霉素耐药性的敏感性为90%(18/20),特异性为96.7%(89/92),阳性预测值为85.7%(18/21),阴性预测值为97.8%(89/91),准确性为95.5%(107/112)。结论噬菌体生物扩增法测定卷曲霉素耐药性简便快速,只需2 d时间,操作不需特殊仪器设备,具有很高的敏感性和特异性,可作为MTB的卷曲霉素耐药性快速筛选方法,建议临床推广应用...     

微量MIC法和罗氏比例法对结核分枝杆菌药敏检测比对分析

目的评价微量液体培养基最低抑菌浓度(MIC)法和比例法在结核分枝杆菌药敏试验中的临床应用价值,确定一种快速准确的药敏试验方法。方法收集经菌种鉴定为结核分枝杆菌的菌株,采用微量MIC法和比例法对一线抗结核药物异烟肼(H)、利福平(R)、乙胺丁醇(E)和二线抗结核药物卡那霉素(Km)、氧氟沙星(Ofx)、卷曲霉素(Cm)进行药物敏感性试验,采用Kappa检验比较两种方法的一致性。结果 102株结核分枝杆菌经微量MIC法和比例法进行药物敏感性检测,符合率均在80%以上,以比例法为金标准,微量MIC法的灵敏度和特异度分别是INH 91. 11%和96. 49%,RFP 100%和95. 38%,EMB 69. 56%和94. 94%,KM 100%和89. 77%,OFX 76. 47%和92. 94%,CPM 47. 16%和90. 59%。结论微量MIC法和比例法对结核分枝杆菌药敏检测结果除了CPM外均具有较好的一致性,可以为结核患者一、二线药敏检测提供快速有效且廉价的诊断方法。