重组人粒细胞集落刺激因子对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的治疗作用

目的观察重组人粒细胞集落刺激因子（recombinant human granulocyte colony stimulating factor,rhG CSF）对实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE）小鼠的治疗效果并探讨相关机制。方法将40只小鼠随机分为2组,对照组10只不作处理,30只用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55（纯度＞95%）多肽诱发建立EAE小鼠模型,死亡6只,剩余24只随机分为模型组和治疗组,各组12只,治疗组皮下注射rhG-CSF,模型组给予同等量的生理盐水。治疗期间对3组小鼠进行神经功能评分和体重检测;治疗2周后,取脑和脊髓制作标本行病理观察,劳克坚劳蓝染色进行脱髓鞘评分;流式细胞仪检测调节性T细胞和自然杀伤细胞比例的变化;蛋白质印迹法检测EAE小鼠胶质纤维酸性蛋白和髓鞘碱性蛋白的表达。结果与模型组相比,治疗组小鼠神经功能评分显著降低,髓炎性细胞浸润评分和脱髓鞘评分降低;调节性T细胞显著增加,自然杀伤细胞显著减少;蛋白质印迹法的结果提示治疗组小鼠胶质纤维酸性蛋白表达量下降,而髓鞘碱性蛋白表达量明显高于模型组。结论rhG-CSF对EAE具有显著治疗效果。     

依达拉奉联合巴曲酶治疗脑梗死的疗效观察

目的探讨依达拉奉联合巴曲酶治疗脑梗死的临床疗效。方法选取我院2009年7月～2011年8月收治的150例急性脑梗死患者,随机分为治疗组（75例）和对照组（75例）,对照组患者采用单药巴曲酶治疗,治疗组患者采用依达拉奉联合巴曲酶治疗,在治疗第28d对两组患者进行神经功能缺损评分及日常生活能力（ADL）评分,在第3、7、14、21d对患者进行纤维蛋白原（Fib）测定。比较两组患者神经功能缺损评分、ADL评分及Fib变化情况。结果治疗组患者神经功能缺损评分、ADL评分、Fib改善均优于对照组,两组患者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论依达拉奉联合巴曲酶治疗急性脑梗死具有较好的临床疗效及安全性,效果满意。     

依达拉奉对急性脑梗死患者血清磷脂酸与溶血磷脂酸含量及神经功能转归的影响

目的观察依达拉奉对急性脑梗死患者血清磷脂酸（PA）、溶血磷脂酸（LPA）含量的影响及临床疗效。方法选择急性脑梗死患者89例，随机分为依达拉奉组（45例）和对照组（44例）。治疗组在对照组治疗的基础上，加用依达拉奉30mg静脉滴注，2次／d，共10d。分别于治疗前和治疗后10d取静脉血4ml测定PA、LPA水平，并于治疗后15d应用欧洲卒中量表（ESS）进行功能转归评价。结果对照组与依达拉奉组治疗10d后PA、LPA水平均较治疗前显著降低（P〈0．01），ESS评分亦显著改善（P〈0．05），与对照组相比，依达拉奉组上述指标改善更明显（P〈0．01）。结论依达拉奉能降低PA、LPA的含量、清除自由基、改善脑梗死的预后。     

依达拉奉治疗急性脑出血的疗效观察

目的观察依达拉奉治疗急性脑出血的临床疗效。方法将急性脑出血患者80例,随机分为两组,对照组39例和实验组41例。对照组采用常规基础治疗,实验组在常规治疗基础上应用依达拉奉,对两组患者临床疗效和神经缺失功能评分进行比较分析。结果与对照组相比,实验组的基本痊愈率和总有效率明显提高（P〈0．05）;两组治疗后神经功能缺失评分均有所降低,与对照组相比,实验组治疗后7、14、21、28d的神经缺失评分均明显降低（P〈0．05）。结论依这拉奉可促进脑出血患者的神经功能康复,为治疗急性脑出血的有效药物。     

依达拉奉联合低分子肝素治疗脑梗死临床疗效的研究

目的：观察依达拉奉联合低分子肝素治疗脑梗死的临床疗效。方法92例脑梗死患者根据随机数字表法分为观察组与对照组两组各46例,观察组患者采用依达拉奉联合低分子肝素治疗,对照组患者采用辛伐他汀治疗。结果观察组患者总有效率为91．3％,对照组为79．3％,两组相比差异有统计学意义（ P＜0．05）。观察组患者的神经功能缺损评分低于对照组,两组相比差异有统计学意义（ P＜0．05）。结论依达拉奉联合低分子肝素治疗脑梗死疗效显著,能显著的改善患者神经功能缺损情况,具有临床推广应用价值。     

基金项目:江苏省卫生厅重大科研课题资助项目(K200406);苏州大学医学发展基金资助项目(EE123504)作者单位:215004苏州大学附属第二医院神经科［陈应柱(现在江苏省苏北人民医院)、包仕尧、鲍欢、张志琳］,肿瘤放疗科(田野)通讯作者:包仕尧,Email:baoshyao@hotmail.com依达拉奉对少突胶质细胞放射性反应的保护作用研究

目的观察大鼠单次全脑照射后脑内少突胶质谱系细胞的变化，以及新型自由基清除剂依达拉奉对少突胶质细胞放射性反应的影响。方法将雄性SD大鼠120只随机分为假照射组、照射组、依达拉奉组。采用10Gy单次全脑照射模型，制模后依达拉奉组大鼠分别按剂量0．3、1．0和3．0mg／kg依达拉奉腹腔注射；构建放射性脑损伤大鼠脑组织芯片，用免疫组织化学法检测皮质A285、少突胶质细胞表面标志物4（O4）、2’，3＇-环磷核苷酸水解酶（CNPase）蛋白表达变化。结果与假照射组比较，照射后1d皮质A285阳性细胞数目即开始增多，照射后1周最多（P〈0．01），1个月时差异无统计学意义；而O4与CNPase阳性细胞数在照射后1d时显著减少，以O4阳性细胞数减少为甚（P〈0．01），1周后差异无统计学意义。与照射组比较，依达拉奉干预后A285阳性细胞数有不同程度减少，O4、CNPase阳性细胞数有不同程度增加（1．0mg／kg，P〈0．05；3．0mg／kg，P〈0．01）。结论大鼠全脑照射后脑皮质少突胶质前体细胞反应性增多，呈时程性变化；一定剂量的依达拉奉对少突胶质细胞放射性反应有保护作用，呈现剂量依赖性。     

依达拉奉对大鼠急性脊髓损伤后bcl-2/bax表达及细胞凋亡的实验研究

目的观察依达拉奉对大鼠急性脊髓损伤后bcl-2/bax表达及细胞凋亡率的影响,探讨其对急性脊髓损伤后脊髓组织的保护作用。方法成年SD雄性大鼠60只,随机分成对照组和依达拉奉组,均采用改良Allen’s撞击法,致伤力为50gcf（10g×5cm）损伤T9～10制作动物模型,术后实验组给予依达拉奉3mg/kg,对照组给予等量生理盐水。每组分别于6h、12h、24h、72h、7d5个时间点处死动物取材,每个时间点6只大鼠,对受损脊髓部位进行免疫组织化学检测神经细胞凋亡因子bcl-2和bax基因的表达及用原位末端标记法（TUNEL法）标记神经元凋亡细胞。结果与对照组相比,依达拉奉组bcl-2蛋白表达水平显著提高,bax蛋白表达水平明显下降。对照组检测到较高的细胞凋亡率。依达拉奉组细胞凋亡率较对照组明显下降。结论依达拉奉可能通过清除氧自由基、上调bcl-2和下调bax蛋白表达来抑制大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡,从而保护大鼠神经组织。     

奥扎格雷钠与依达拉奉联合治疗急性脑梗死（附48例疗效观察）

目的：观察依达拉奉联合奥扎格雷钠治疗急性脑梗死（AC I）的临床疗效。方法：将发病48 h内的AC I患者93例,随机分成治疗组（48例）和对照组（45例）。治疗组给予奥扎格雷钠80 mg＋生理盐水250 mL静脉滴注,2次/d,同时给予依达拉奉30 mg加入生理盐水100 mL静脉滴注,2次/d,连用14 d;对照组仅用同剂量、同疗程的奥扎格雷钠,共14 d。两组患者治疗前及治疗后21 d时均进行临床神经功能缺损程度评分及临床疗效评定。结果：治疗组总有效率95.8%,对照组总有效率73.3%,差异具有显著性（P〈0.05）。治疗组治疗后神经功能缺损程度评分较对照组显著改善（P〈0.05）,且无明显不良反应。结论：依达拉奉联合奥扎格雷钠治疗AC I患者疗效及安全性均较好。     

依达拉奉联合灯盏花素治疗急性脑梗死的临床观察

目的比较依达拉奉，灯盏花素单药以及它们联合用药对急性脑梗死（ACI）治疗的效果。方法选取发病在24h以内的ACI患者81例。随机分3组：依达拉奉联合灯盏花素治疗组（治疗组30例），依达拉奉治疗组（对照1组28例）和灯盏花素治疗组（对照2组23例）。治疗纽用依达拉奉注射液30mg静脉滴注，每天2次，共14天。同时联用灯盏花素注射液20ml静脉滴注，也连用14天。对照l组单用依达拉奉，对照2组单用灯盏花素。根据欧洲卒中评分量表（Eurpean Stroke Seale，ESS）和日常生活能力评分（ADL）进行疗效评定，并检测治疗前后全血黏度，纤维蛋白原，血小板，血细胞比容，出凝血时间，肝肾功能。结果3周后治疗组基本痊愈率（36．7％）及显著进步率（46．7％．）均明显高于（P〈0．05）对照1组的基本痊愈率（32．1％）及显著进步率（32．1％）和对照2组的基本痊愈率（26．1％）及显著进步率（34．8％）．治疗组治疗后的全血黏度，纤维蛋白原较前有明显下降（P〈0．01），血小板，血细胞比容，出凝血时间，肝肾功能无明显改变，并且没有明显不良反应。结论依达拉奉联合灯盏花素治疗ACI是安全有效的。     

依达拉奉联合降纤酶治疗脑梗死的临床研究

目的观察依达拉奉联合降纤酶治疗急性脑梗死的临床疗效及安全性。方法78例患者随机分为2组，分别采用单用降纤酶及依达拉奉联合降纤酶治疗。以临床疗效、治疗前后神经功能缺损程度评分（NDS）、血浆纤维蛋白原（Fg）含量变化标准观察疗效。结果治疗后，治疗组有效率（78．9％）、NDS减分幅度与对照组比较均有显著性差异，两组Fg水平亦较治疗前明显降低俨均〈0．01），且未见明显不良反应。结论依达拉奉联合降纤酶治疗急性脑梗死安全、有效，能显著改善患者的预后。     

Experimental autoimmune encephalomyelitis in the rat spinal cord: lesion detection with high-resolution MR microscopy at 17.6 T

BACKGROUND AND PURPOSE: Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) is an inflammatory demyelinating disorder of the CNS and an animal model of multiple sclerosis. We used high-field MR microscopy at 17.6 T to image spinal cord inflammatory lesions in the acute stage of chronic relapsing rat EAE. We sought to compare lesions detected on MR imaging with histopathologic findings and to quantify the inflammatory lesion load. METHODS: Imaging of fixed spinal cord specimens was performed by using a 3D gradient-echo sequence with a spatial resolution of 35 x 35 x 58 microm3 and a total imaging time of 5.5 hours. Histopathologic analysis was performed by staining axial sections with hematoxylin-eosin or Luxol fast blue to identify cellular infiltration and demyelination. RESULTS: Clinical signs of EAE occurred on days 10-14 after immunization. On day 22, healthy white matter and gray matter were differentiated by high contrast on T2*-weighted images, with white matter lesions appearing as hyperintense areas in the normal-appearing white matter. Inflammatory lesions identified on histopathologic evaluation were readily detected with MR imaging and vice versa. MR imaging and histopathologic analysis had excellent correlation regarding the extent of white matter lesions. Inflammatory infiltrates of gray matter were not detectable with MR imaging. Using a semiautomatic segmentation of the acquired MR data, we could quantify white matter lesion load. CONCLUSION: Ex vivo high-resolution MR microscopy of the spinal cord at 17.6 T allows rapid and highly accurate determination of CNS inflammation by demonstrating virtually all histologically detectable white matter inflammatory lesions.     

Magnetic resonance imaging of blood-spinal cord barrier disruption in mice with experimental autoimmune encephalomyelitis.

Inflammation, demyelination, and blood-spinal cord barrier (BSB) breakdown occur in experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE), an animal model of multiple sclerosis. The purpose of this study was to evaluate the utility of MRI for detecting lesions and BSB disruption in vivo during EAE in the mouse lumbar spinal cord, to determine how MR features of BSB disruption change during the course of disease, and to relate such changes to clinical signs and histological features of disease. Following induction of EAE in C57BL/6 mice, contrast-enhanced (CE) T(1)-weighted MR images were acquired to detect BSB disruption in the lumbar spinal cord at the early stage of disease, at peak disease, and at remission, and T(2)-weighted images were obtained to monitor spinal cord morphology. Following imaging the spinal cords were assessed in situ for general features of inflammation, BSB leakage, activated macrophages/microglia, and demyelination. No focal lesions were evident on T(2)-weighted MR images. BSB disruption was greatest at the onset of signs of disease, and decreased progressively thereafter. Inflammation and demyelination were pronounced at the initial stage of disease and at peak disease, and were decreased at remission. Nonuniform contrast enhancement indicated that breakdown of the BSB occurred predominantly within the white matter (WM) of the spinal cord.     

高压氧对大鼠脊髓损伤后炎症因子的影响

目的 观察高压氧对大鼠脊髓损伤后外周血中炎症细胞因子及其运动功能恢复的影响。方法采用改良Allen’s法制作大鼠脊髓损伤模型。75只SD大鼠,随机分为三组：假手术组（n=15）,对照组（n=30）和高压氧组（n=30）。分别于治疗后4h、12h、1d、3d及5d时间点,利用BBB评分法对大鼠进行运动功能评分,同时应用放射免疫检测技术测定各时间点大鼠外周血中TNF-α、IL-6、IL-8及IL-10的含量。结果对照组和高压氧组的各炎性细胞因子水平,较假手术组均有不同程度升高（P〈0．05）;高压氧组BBB评分较对照组升高（P＜0．05）;高压氧组外周血中上述炎性细胞因子在各时间点均较对照组降低（P＜0．01）。结论高压氧可抑制外周血中炎性细胞活性,降低各炎性细胞因子水平,促进损伤恢复,具有保护受损脊髓组织的作用。     

依达拉奉对实验性急性脊髓损伤后细胞凋亡的影响

目的观察依达拉奉（MCI-186）对脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响。方法选择SD雄性大鼠40只,随机分成对照组和MCI-186组,均采用改良的Allen打击（WD）法制成150gcf（克厘米势能）中度急性脊髓损伤模型,术后实验组给予MCI-186,3mg/kg对照组给予等量生理盐水。分别于术后6h、12h、24h、72h、7d处死动物取材,采用流式细胞仪检测损伤段脊髓细胞凋亡的情况。结果对照组和MCI-186组均发现凋亡细胞,均在1d达到高峰,但MCI-186组凋亡细胞比率显著低于对照组（P〈0．05）。结论MCI-186通过有效地清除氧自由基,可明显抑制急性脊髓损伤后的脂质过氧化反应及降低神经细胞的凋亡,从而达到保护其神经组织的作用。     

咯利普兰治疗脊髓损伤的实验研究

目的研究咯利普兰对SD大鼠脊髓神经丝蛋白（NF）、突触素（SYP）表达变化和运动功能的影响，探讨咯利普兰治疗脊髓损伤的可行性。方法SD成年雌性大鼠30只，体重220±20g，随机分成3组：即假损伤组；脊髓挫伤组（SCI组）及咯利普兰（ROL）组，用改良的Allen装置造成T12脊髓节段挫裂伤。在手术前及术后每天对大鼠进行BBB评分。手术后，脊髓挫伤后以0．4μmol·kg^-1·h^-1计算24小时ROL总量，分4次腹腔注射（每次间隔6h），持续10天。所有动物在伤后4周处死。术后置于25．5℃的温室内（以电暖气升温）。以4％多聚甲醛固定液灌注固定大鼠，取损伤节段上、下长约0．5cm脊髓入4％多聚甲醛后同定、修块、沉底。连续冰冻切片，片厚25μm，间隔取片后分别以抗神经丝蛋白、突触素抗体行免疫组化ABC染色。在光学显微镜下观察各组NF、SYP在SD大鼠脊髓的表达分布情况，进行统计学分析。结果ROL组轴突数目明娃多于SCI组，但仍低于似损伤组，差异显著（P〈0．05）。相应损伤节段SYP灰度值比较中，ROL组SYP灰度值明显低于SCI组．差异显著（P〈0．01）。SCI组、ROL组所有动物在术后第1天BBB评分为0。SCI后4周ROL组较SCI组神经学功能均显著提高，差异具有显著性（P〈0.05）。结论咯利普兰在脊髓损伤中后期明显促进其损伤后的再生，具有中远期疗效。     

二十二碳六烯酸-磷脂对小鼠睡眠的改善作用

目的：研究二十二碳六烯酸-磷脂（ DHA-PC ）对小鼠睡眠的改善作用。方法小鼠随机分为正常对照组、溶剂对照组、DHA鱼油＋卵磷脂联合用药（DHA＋Lecithin）（60＋200）mg/kg（阳性对照）、DHA-PC 50、100、200 mg/kg组,每组10只。正常对照组小鼠自由饮食饮水,溶剂对照组小鼠按0．2 ml/10 g的体积灌胃给予生理盐水, DHA＋Lecithin（60＋200）mg/kg组和DHA-PC 50、100、200 mg/kg组小鼠均按0．2 ml/10 g的体积灌胃给药,1次/d,连续30 d。通过测定小鼠直接睡眠时间、戊巴比妥钠诱导睡眠时间、阈下剂量睡眠发生率及巴比妥钠诱导睡眠潜伏时间,观察DHA-PC对小鼠睡眠的作用。结果3种剂量的DHA-PC对小鼠体质量均无影响。直接睡眠实验结果表明,3种剂量的DHA-PC对小鼠直接睡眠无影响。戊巴比妥钠诱导睡眠实验结果表明, DHA-PC 50、100、200 mg/kg组小鼠戊巴比妥钠诱导睡眠时间分别为（56．2±13．7）,（57．9±25．4）及（64．1±18．4）min,明显高于溶剂对照组（32．9±10．8） min （ P ＜0．05）;DHA ＋Lecithin （60＋200） mg/kg 组小鼠的戊巴比妥钠睡眠时间为（38．6±11．7）min,高于溶剂对照组小鼠（32．9±10．8）min,但无明显差异;DHA-PC 200mg/kg组明显高于DHA＋Lecithin （60＋200）mg/kg组（P＜0．05）。协同戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验结果表明,DHA-PC 200 mg/kg组小鼠协同戊巴比妥钠阈下剂量催眠入睡率（70％）明显高于溶剂对照组（10％）（P＜0．05）;DHA＋Lecithin （60＋200） mg/kg组小鼠协同戊巴比妥钠阈下剂量催眠入睡率（60％）明显高于溶剂对照组（10％）（ P＜0．05）。巴比妥钠诱导睡眠潜伏期实验结果表明,DHA-PC 200 mg/kg和DHA＋Lecithin （60＋200） mg/kg组小鼠巴比妥钠诱导睡眠潜伏时间分别为（22．9±4．1）和（19．5±2．7）min,明显低于溶剂对照组（31．3±6．9）min（P＜0．01）,且DHA＋Leci-thin（60＋200）mg/kg组小鼠巴比妥钠诱导睡眠潜伏时间为（19．5±2．7）min,明显低于DHA-PC 50和100 mg/kg组,二者分别为（27．3±2．4）和（26．9±4．2）min。结论 DHA-PC具有改善小鼠睡眠的作用。     

磁共振扩散张量成像在颈髓病变中的应用

目的：探讨磁共振扩散张量成像（DTI）技术在颈髓病变诊断中的临床应用。方法：应用1.5T磁共振机器对39例颈髓病变患者和15例健康志愿者行MRI常规和DTI检查,测定病变区和对照部位的FA值、ADC值并进行对照分析,并重建白质纤维束图。结果：健康志愿者颈髓的FA值为0.66±0.06,ADC值为（0.96±0.14）×10^-3mm^2/s。颈椎病病例FA值为0.47±0.05、ADC值为（1.16±0.28）×10^-3mm^2/s;与对照组统计学分析FA值明显降低（P〈0.01）,ADC值明显增高（P〈0.01）。颈髓急性损伤病例FA值为0.38±0.08、ADC值为（0.89±0.25）×10^-3mm^2/s;与对照组统计学分析FA值明显降低（P〈0.01）,ADC值与对照组无明显差异（P=0.130〉0.05）。颈髓炎症：FA值为0.40±0.06、ADC值为（1.25±0.40）×10^-3mm^2/s;与对照组统计学分析FA值明显降低（P〈0.01）,ADC值明显增高（P〈0.01）。所有病例通过DTI技术成功显示了白质纤维束在病变区变形、移位及中断等改变。结论：DTI可以探测到颈髓病变中常规MR未能发现的病灶;白质纤维束成像可以显示白质束的受损情况。     

高压氧对大鼠脊髓损伤后脂质氧化过程的影响

目的观察大鼠脊髓损伤后高压氧（HBO）对脊髓损伤（SCI）又氧自由基引起的脂质氧化过程和功能的影响,探讨高压氧对脊髓继发性损伤的保护作用。方法SD大鼠30只随机分为3组,一组椎板切除不损伤脊髓,另两组采用改良Allen法制备大鼠SCI模型,一组术后两小时内进行高压氧治疗,治疗时间共90分钟,1天1次,连续进行5天;另一组不进行任何处理。分别于术后第2、5天尾静脉取血,测定血清中超氧化物歧化酶（SOD）、脂质过氧化产物丙二醛（MDA）。结果高压氧组与非高压氧组相比较,高压氧组血清中SOD升高（P〈0.01）,MDA降低（P〈0.01）,与假手术组相比,SOD和MDA变化不明显,无统计学意义（P〉0.01）。结论高压氧具有抗氧化、清除自由基功能,能有效抑制SCI受损引起脂质过氧化反应,对SCI具有保护和治疗作用,并能促进神经功能的恢复。     

壳聚糖复合絮凝剂选择性絮凝双黄连水提取液的工艺研究

摘 要：目的 优化壳聚糖复合絮凝剂用于双黄连水提取液选择性絮凝的最佳工艺条件。方法 以绿原酸和黄芩苷保留率、鞣质脱除率为考察指标,分别考察复合絮凝剂制备工艺、絮凝剂用量、絮凝时间以及壳聚糖性能指标对絮凝效果的影响,优化选择性絮凝工艺条件。结果 双黄连水提取液絮凝的优化工艺条件：膨润土经 450 ℃灼烧 4 h 改性后负载壳聚糖制备复合絮凝剂,絮凝剂用量 60 g/L,絮凝时间 24 h,所用壳聚糖最佳性能指标：脱乙酰度 95%、黏度 60 cps。结论 经高温改性的膨润土负载壳聚糖所制备的复合絮凝剂具有良好的选择性絮凝性能,絮凝效果显著优于《中国药典》2010 年版方法。