整合素αvβ3在前列腺癌的表达及临床意义

目的 探讨整合素αvβ3在前列腺癌(Pca)中的表达及意义.方法 应用免疫组织化学链酶抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法(S-P法)检测整合素αvβ3在41例前列腺癌中的表达,另20例正常前列腺组织作对照.结果 免疫组织化学发现:在前列腺癌组织中整合素αvβ3表达上调, 正常组织与肿瘤组织表达差异有统计学意义(P＜0.01).整合素αvβ3在前列腺癌组织的表达随着Pca的病理分级、临床分期增加其表达上调(P＜0.05),与Pca的病理分化程度呈负相关(P＜0.01).在各术前血清PSA值组中,整合素αvβ3的表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 整合素αvβ3可能在前列腺癌的发生、发展及恶性进展过程中起重要作用,检测整合素αvβ3有助于对Pca的恶性程度、转移潜能和预后的判断.     

大鼠牙齿移动中整合素αvβ3表达的实验研究

目的 研究大鼠牙齿移动中整合素αVβ3表达的不同,为研究靶向封闭整合素αVβ3提供时相支持.方法 建立大鼠正畸牙齿移动模型,分为成幼鼠两组.拉上颌一侧第一磨牙向近中移动,另一侧为空白对照.分别于0 d(未加力时)、加力后3 d、1周、3周、4周、6周、8周后将每组5只大鼠处死,行免疫组化技术和计算机图像分析技术比较分析.结果 整合素αVβ3两个亚单位的表达峰值在幼鼠出现于第1周,成鼠出现于第3周.3 d、1周时幼鼠整合素αVβ3两个亚单位的表达均显著强于成鼠(P<0.05),在3,4,6周和8周时则明显弱于成鼠(P<0.05).结论 成幼鼠整合素αVβ3表达具有不同的时相性变化规律.     

整合素β3亚基真核表达载体的构建及αvβ3的表达

目的：构建人整合素β3亚基真核表达载体，并探讨如何使人整合素αvβ3在CHO细胞表面有效表达．方法：构建编码人整合素β3真核表达载体pcDNA3．1-β3；将其与编码人整合素αv亚基真核表达载体分别及共转染至中国仓鼠卵巢(China hamster ovary，CHO)细胞中进行表达；采用间接免疫荧光法(IFA)检测外源基因的表达．结果：共转染组目的蛋白呈高效的细胞膜表达；pcDNA3．1-β3单独转染组β3亚基细胞膜表达较共转染组弱；而pcDNA3-αv单独转染组则未见有效的细胞膜表达．结论：人整合素αvβ3在CH0细胞表面的有效表达需要2个亚基共同参与。     

高度近视糖尿病豚鼠视网膜中骨桥蛋白及整合素αvβ3受体的表达

目的:通过观察糖尿病豚鼠视网膜中骨桥蛋白(OPN)及整合素αvβ3受体的表达水平受高度近视的影响情况,初步探讨高度近视影响糖尿病视网膜病变进展的机制。方法:选取出生1周龄雄性豚鼠90只,随机分为正常对照组(Ⅰ组)、高度近视组(Ⅱ组)、糖尿病组(Ⅲ组)、糖尿病合并高度近视组(Ⅳ组)。Ⅰ组18只,余3组每组24只。Ⅱ组为半透明眼罩遮盖右眼20周;Ⅲ组为饲养8周时左下腹腔注射链脲佐菌素(STZ) 280 mg/kg;Ⅳ组为半透明眼罩联合注射STZ。每组随机选择18只完成实验测量,摘除眼球后行HE染色、免疫组化染色,观察视网膜组织形态,并对OPN和整合素αvβ3受体阳性细胞率完成计数。结果:各组豚鼠均造模成功。HE染色观察Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组的视网膜组织形态,与Ⅰ组相比均有组织学差异,Ⅲ、Ⅳ组可见发生糖尿病视网膜改变,Ⅳ组较Ⅲ组程度轻。免疫组化染色观察,有糖尿病组(Ⅲ组、Ⅳ组)与无糖尿病组(Ⅰ组、Ⅱ组)比较,OPN、整合素αvβ3受体表达增高,差异有统计学意义(P<0.05)。另Ⅳ组与Ⅲ组相比,OPN及整合素αvβ3受体阳性表达率降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:OPN及整合素αvβ3受体在糖尿病合并高度近视豚鼠视网膜组织中的表达较其在糖尿病模型中表达低,可能在高度近视影响DR进程中新生血管的发展中发挥作用。     

慢性盆腔炎性不孕患者体内子宫内膜整合素αvβ3表达

盆腔炎不孕占不孕冈素的30％～40％，虽慢性盆腔炎所致不孕与病原菌感染有关，但并非生殖道感染均导致不孕。     

胎盘人整合素αvβ3蛋白的纯化及其鉴定

目的 从人胎盘组织中纯化整合素αvβ3蛋白,研究其免疫原性。方法 采用溴化氰活化的Sepharose-4B为基质,通过交联经蛋白G柱纯化的单克隆抗体,用亲和层析的技术纯化整合素αvβ3蛋白。SDS-PAGE鉴定纯化的蛋白。并用ELISA检测整合素αvβ3蛋白的免疫反应性。结果 利用单抗-Sephamse-4B亲和层析柱,从人胎盘组织中纯化得到了整合素αvβ3,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳证实纯化蛋白的为α和β两个亚基所组成,分子量约为125KD和110KD,ELISA结果显示整合素αvβ3具有良好的抗原结合活性。从胎盘组织中纯化整合素αvβ3抗原的收获率约为700μg／胎盘。结论 从人胎盘组织中成功获取整合素αvβ3抗原,为后续研究奠定了基础。     

整合素α5及整合素β3在子宫内膜异位症中表达的研究

目的探讨整合素α5、β3在子宫内膜异位症(EM)患者在位和异位内膜中的表达. 方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,对18例EM患者在位内膜、异位内膜(研究组)和18例非EM患者子宫内膜(对照组)行整合素α5、β3 mRNA检测.同期放射免疫法测定EM患者体内雌二醇(E2)、孕酮(P)、糖类抗原125(CA125)水平,对EM患者术中行美国生殖学会评分系统(AFS-r)评分. 结果整合素α5 mRNA在EM患者在位内膜、异位内膜及对照组子宫内膜中表达水平分别为0.773±0.113、1.077±0.032、0.924±0.120,各组间比较差异具有统计学意义(P＜0.05);整合素β3 mRNA在EM患者在位内膜、异位内膜及对照组子宫内膜中表达水平分别为0.653±0.080、0.963±0.132和0.763±0.090,各组间比较差异具有统计学意义(P＜0.05).EM组血清E2水平与异位内膜整合素α5、β3 mRNA表达均呈正相关(P<0.05),相关系数分别为0.793、0.917;而P水平与异位内膜整合素α5、β3 mRNA表达均无相关(P>0.05).CA125水平与异位内膜整合素α5、β3 mRNA表达均呈正相关(P<0.05),相关系数分别为0.763、0.754,AFS-r评分与异位内膜整合素α5、β3 mRNA表达均呈正相关(P<0.05),相关系数分别为0.801、0.773. 结论EM异位内膜组织中整合素α5、β3高表达可能与EM黏附发生有关,整合素α5、β3表达受雌激素调控.     

整合素αvβ5的研究进展

整合素作为细胞表面粘附受体,由α亚基和β亚基以非共价形式结合形成。它可与细胞外基质(ECM)及细胞膜表面特异性结合,进而介导细胞与ECM间的粘附,参与细胞与细胞内外信号的转导。在肿瘤中研究较多,但目前有研究表明整合素αvβ5与系统性硬化症、受精卵的着床、脾窦内皮细胞及哮喘有关,本文就整合素αvβ5与非肿瘤性报道做一汇总。     

整合素αvβ3与肿瘤关系的研究进展

在我国,恶性肿瘤已经成为导致居民死亡的主要原因之一,但其发生发展机制尚未完全阐明,并且急需找出新的治疗靶点和手段。整合素（integrin, ITG）是一种能够介导细胞与细胞之间、细胞与基质之间相互黏附的一类细胞膜上的跨膜糖蛋白。研究证明,整合素是由α与β两个亚基组成的一种在肿瘤新生血管中特异性高表达、而在正常组织血管中低表达甚至不表达的异二聚体。近年来,国内外大量的研究证明,在肿瘤的发生发展过程中,整合素αvβ3的表达与其密切相关,并且在肿瘤的治疗及诊断中具有重要意义。本文主要就整合素αvβ3与肿瘤的关系进行概述。     

正常早孕及稽留流产患者NK细胞中整合素αvβ3的表达分析

目的分析正常早孕妇女和稽留流产患者外周血及蜕膜组织中CD56+CD16-和CD56+CD16+自然杀伤(NK)细胞比率以及细胞表面整合素αvβ3的表达。方法分别采集15例正常早孕妇女和7例稽留流产患者外周血和蜕膜组织,Ficoll密度梯度离心法分离单个核细胞悬液,流式细胞术检测样本CD56+CD16-和CD56+CD16+NK细胞的比率以及其细胞表面αvβ3表达。结果 与早孕妇女外周血相比,蜕膜组织中CD56+CD16-NK细胞比率增高而CD56+CD16+NK细胞的比率却降低(P<0.01);正常早孕妇女及稽留流产患者外周血和蜕膜组织中CD56+CD16-和CD56+CD16+NK细胞的比率均无差异(P>0.05)。与正常早孕妇女相比,稽留流产患者蜕膜组织CD56+CD16-NK细胞表面αvβ3阳性表达率降低而其平均荧光强度(GM)值却增高(P<0.05)。结论 NK细胞及其所表达的整合素αvβ3在早孕期胚胎植入及胎盘形成过程中发挥重要作用,稽留流产患者NK细胞表面整合素αvβ3的表达异常,可能是稽留流产发生的免疫致病因素。     

子宫肉瘤组织中肾上腺髓质素表达的研究

目的探讨子宫肉瘤组织中肾上腺髓质素（ADM）的表达及其与血管生成和预后的关系。方法应用免疫组织化学染色方法检测正常子宫肌层组织（20例）、子宫平滑肌瘤组织（30例）、子宫肉瘤组织（46例）中肾上腺髓质素的表达及微血管密度（MVD）。结果（1）子宫平滑肌瘤与正常子宫肌层组织比较、子宫肉瘤与子宫平滑肌瘤组织比较、ADM表达均有显著性差异（P〈0．01,P〈0．05）;（2）ADM高表达组与ADM低表达组的MVD平均值比较,差异有统计学意义（P〈0．01）;子宫肉瘤组织ADM表达与MVD呈正相关（P〈0．05）;（3）子宫肉瘤ADM阳性表达与核分裂相呈正相关,且预后差。结论肾上腺髓质素是一种重要的子宫肉瘤组织血管生成调节因子,有可能成为一个新指标,用于临床判断子宫肉瘤患者预后,并为子宫肉瘤抗血管生成治疗提供新的分子靶点。     

整合素αvβ6在卵巢癌中的表达和生物学意义

目的探讨黏附分子整合素αvβ6与卵巢癌进展及转移的关系。方法①用免疫组织化学方法检测5例正常卵巢组织,10例卵巢良性肿瘤,64例卵巢癌中整合素αvβ6的表达,并分析其与临床病理特征间的关系;②用免疫组织化学方法和流式细胞术分别定性和定量分析卵巢癌原发灶及其相应转移灶中的整合素αvβ6表达,并进行比较。结果①整合素αvβ6定位于卵巢癌细胞的胞膜及胞浆中,64例卵巢癌原发灶中有不同程度的表达,其中阳性表达率为46.88%(30/64),而正常卵巢和良性卵巢上皮肿瘤不表达。②整合素αvβ6的表达与年龄、分级、组织学类型无关(P>0.05);早期卵巢癌(FIGOⅡ期)整合素αvβ6阳性表达率为14.29%,显著低于晚期(FIGOⅢ~Ⅳ期)的56.00%(P<0.05);进展期患者阳性表达率为63.63%,显著高于无进展患者的10.00%(P<0.05)。③免疫组织化学结果表明,原发灶中整合素αvβ6阳性表达率为46.88%,显著低于转移灶中整合素αvβ6的阳性表达率71.88%(P<0.05)。④流式细胞术检测原发灶整合素αvβ6的FI值为(1.13±0.14),显著低于转移灶的FI值(1.98±0.19)(P<0.05)。结论整合素αvβ6表达上调与卵巢癌的不良预后和高转移性有关,提示其参与了卵巢癌细胞的侵袭与转移。     

整合素αvβ3小分子抑制剂的设计及活性测定

目的 通过计算机虚拟筛选，寻找整合素αvβ3的小分子抑制剂，并对其活性进行测定。方法 基于整合素αvβ3的胞外区及其配体复合物三维晶体结构，用DOCK（分子对接）对小分子三维数据库进行筛选。通过细胞黏附抑制实验对挑选出的化合物进行生物活性测定，然后挑选高活性的化合物进一步进行损伤迁移实验和人脐静脉内皮细胞管腔样结构形成抑制实验，验证化合物对整合素αvβ3的作用。分子图像学方法分析高活性化合物和受体之间的作用模式。结果用DOCK程序对三维化合物库筛选后挑选出得分高的前1000个化合物，按化学特性和类药性的不同将化合物分类，最终选择并购买了50个代表性化合物进行进一步生物学活性测定。50个化合物中7个化合物显著抑制细胞黏附活性，其中2个化合物的半数抑制浓度（IC50）在100μmol／L以下。选择其中活性最高的取代苯基双胍类化合物进一步进行研究，结果显示此类化合物能够剂量依赖性地抑制高表达整合素αvβ3的M21细胞在玻璃体黏连蛋白上的损伤迁移，并显著抑制碱性成纤维细胞生长因子诱导的人脐静脉内皮细胞管腔样结构的形成。分子图像学结果显示高活性化合物的双胍部分以“舒展”的方式伸入到金属离子依赖性结合位点中，并能够和其中的第220位谷氨酸（Glu）形成稳定的氢键。结论通过计算机虚拟筛选结合生物活性测试，得到了一类靶向整合素αvβ3的全新的先导化合物。     

整合素αvβ6和CD44v6在胃癌中的表达意义

目的 观察整合素αvβ6和CD44v6在胃癌中的表达变化,探讨其临床病理意义。方法 采用免疫组织化学EnVision法分别检测72例胃癌组织、20例癌旁正常胃黏膜组织中整合素αvβ6和CD44v6的表达情况,分析二者在胃癌患者分化程度,淋巴结转移方面的相关性。结果 胃癌组αvβ6的阳性表达率63.8%显著高于癌旁正常胃黏膜组13%,有淋巴结转移者68.2%显著高于无淋巴结转移者38.0%（P<0.05）;胃癌组织CD44v6的阳性表达率45.6%显著高于癌旁胃黏膜0%,有淋巴结转移者48.0%显著高于无淋巴结转移者22.7%（P<0.05）;胃癌组织中αvβ6与CD44v6的表达呈正相关（P<0.05）。结论 整合素αvβ6和CD44v6在胃癌中的表达呈正相关,二者在胃癌浸润转移过程中发挥协同作用,联合检测整合素αvβ6和CD44v6的表达对胃癌的预后判断有重要的临床病理意义。     

结直肠癌中整合素αvβ3表达的意义及其评估预后的价值

目的探讨结直肠癌中整合素αvβ3表达的意义及其评估预后的价值。方法采用原位杂交方法检测正常结直肠黏膜及结直肠癌组织中整合素αvβ3的表达。结果结直肠癌组织中整合素αvβ3的阳性表达率为55.9%,高于正常结直肠黏膜中的阳性表达率(8.3%),差异有统计学意义(P<0.05);组织学分化差、有淋巴结转移、临床分期高者整合素αvβ3的阳性表达率增高(P<0.05);整合素αvβ3阳性表达的患者5年生存率为42.1%,低于阴性表达患者的5年生存率(85.7%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论整合素αvβ3高表达与结直肠癌的浸润和转移密切相关,其可以作为预测结直肠癌预后的指标之一。     

脑膜瘤整合素α3的表达与侵袭性的相关研究

目的探讨整合素α3在脑膜瘤细胞侵袭过程中的作用.方法用免疫组化方法检测43例脑膜瘤、5例正常硬脑膜及5例蛛网膜中整合素α3及Ki-67的表达.结果侵袭性与非侵袭性脑膜瘤整合素α3的阳性表达率分别为40.00%和81.82%,有明显差异(P＜0.05).正常硬脑膜及蛛网膜中,整合素α3呈弱、中阳性表达,Ki-67呈阴性表达.结论整合素α3参与脑膜瘤的侵袭生长过程,随着整合素α3表达的降低,肿瘤细胞的恶性程度增加,侵袭性增强.     

整合素αvβ3在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的 研究正常晚期妊娠以及子痫前期(preeclampsia,PE)胎盘组织中αvβ3基因和蛋白表达的差异,探讨αvβ3与子痫前期的关系.方法 采用免疫组化及Western blot方法检测25例PE患者(其中轻度PE组10例,重度PE组15例)和20例正常足月孕妇(对照组)胎盘组织中αvβ3蛋白表达水平.采用RT-P...     

糖尿病大鼠肾组织足细胞数和整合素αvβ3表达的变化

目的 观察糖尿病大鼠肾小球足细胞数和整合素αvβ3表达的变化,探讨肾小球足细胞数及整合素αvβ3与糖尿病肾病(DN)的关系.方法 链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病大鼠模型,分为对照组(n=10)和实验组(n=14).造模6周后,透射电镜下观察肾脏超微结构变化.采用免疫组化法检测肾脏上皮细胞整合素αvβ3的表达.结果 与对...     

整合素αvβ3在乳腺癌中的表达及与骨髓微转移的关系

目的：研究整合素αvβ3在乳腺癌中的表达及抗整合素αvβ3抗体LM 609在乳腺癌骨髓微转移中的作用.方法：免疫组织化学SABC法检测69例女性乳腺癌患者肿瘤组织整合素αvβ3表达及RT-PCR法检测乳腺癌骨髓微转移状况.流式细胞仪检测人乳腺癌细胞株MCF7、MDA-MB-231、MDA-MB-435s整合素αvβ3的表达.建立BALB/c裸鼠乳腺癌骨髓微转移模型.实时荧光定量RT-PCR检测抗整合素αvβ3抗体LM609对裸鼠乳腺癌骨髓微转移模型的影响.结果：乳腺癌标本免疫组化结果,整合素αvβ3阳性患者30例,占43.5%;阴性患者39例,占56.5%.乳腺癌骨髓微转移RT-PCR检测阳性患者22例,占31.9%,阴性患者占68.1%.卡方检验,χ^2=9.564,P＜0.05.两者有显著相关关系.MCF-7细胞膜上整合素αvβ3受体为阴性,MDA-MB-231、MDA-MB-435s细胞膜上整合素αvβ3受体阳性.在由整合素αvβ3受体阳性细胞制作的裸鼠乳腺癌骨髓微转移模型中,经LM609处理后,可显著减少乳腺癌骨髓微转移的肿瘤细胞（P＜0.05）.结论：整合素αvβ3在乳腺癌中高表达与骨髓微转移有显著相关关系,用抗整合素αvβ3抗体可抑制乳腺癌的骨髓微转移.     

Galectin-3及整合素αvβ3mRNA在脑胶质瘤细胞中的表达及其意义

目的:探讨半乳糖凝集素-3 (Galectin-3)及整合素αvβ3 mRNA在胶质瘤细胞中的表达及二者在胶质瘤的发生及恶性进展中的作用.方法:采用原位杂交法检测5例正常脑组织及40例不同级别胶质瘤中Galectin-3mRNA、整合素αvβ3 mRNA的表达情况,并分析二者之间的关系.结果:正常脑组织中Galectin-3 mRNA、整合素αvβ3mRNA的表达均为阴性.Galectin-3 mRNA主要表达于脑胶质瘤细胞的胞浆中,在23例Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤标本中阳性2例、弱阳性4例、阴性17例,阳性表达率为29.09％(6/23),阳性指数(LI)值为(4.80±3.22)％;在17例Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤标本中强阳性4例、阳性6例、弱阳性1例、阴性6例,阳性表达率为64.71％(11/17),LI值为(27.30±22.72)％,Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤Galectin-3 mRNA阳性表达率低于Ⅲ-Ⅳ级(P＜0.05).整合素αvβ3mRNA主要表达于脑胶质瘤细胞的胞浆中,在23例Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤标本中阳性3例、弱阳性4例、阴性16例,阳性表达率为34.43％(7/23),LI值为(5.35±3.79)％;在17例Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤标本中强阳性4例、阳性6例、弱阳性3例、阴性4例,阳性表达率为76.47％(13/17),LI值为(29.24±21.10)％,Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤整合素αvβ3 mRNA阳性表达率低于Ⅲ-Ⅳ级(P＜0.05).直线相关分析结果显示,Galectin-3 mRNA与整合素αvβ3 mRNA的阳性细胞表达率呈正相关(r=0.718,P＜0.05).结论:Galectin-3 mRNA、整合素αvβ3mRNA的表达在Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤组明显低于Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤组,提示Galectin-3及整合素αvβ3mRNA检测可作为从分子水平判定人脑胶质瘤恶性生物学行为的指标.