SCRN1在口腔鳞状细胞癌肿瘤相关成纤维细胞中的表达及对HSC3细胞株生物学特性的影响

目的:探究胞吐作用相关蛋白(SCRN1)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)中的表达及对CAFs分泌MMP2功能的影响,进一步研究CAFs对HSC3细胞株迁移、侵袭能力的影响。方法:通过免疫组织化学染色(IHC)检测SCRN1在OSCC组织及癌旁组织中的表达。原代培养、分离、纯化、验证正常成纤维细胞(NFs)和CAFs,用免疫细胞化学染色法(ICC)、蛋白免疫印迹(WB)、qRT-PCR检测NFs、CAFs中SCRN1的表达情况。CCK-8、Transwell实验检测NFs、CAFs及CAFs-shSCRN1增殖、迁移及侵袭能力。收集NFs、CAFs上清并用ELISA和明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶2(MMP2)水平及活性,然后分别与HSC3细胞株共培养,探究两种上清共培养对HSC3细胞株迁移、侵袭能力的影响。沉默CAFs的SCRN1基因后,收集CAFs、CAFs-shSCRN1和CAFs-Vector上清并检测MMP2水平及活性,然后分别与HSC3共培养,探究三种上清培养条件对HSC3细胞株迁移、侵袭能力的影响。结果:SCRN1在OSCC组织中阳性表达率及表达水平...     

我国口腔鳞癌的治疗现状

口腔颌面部鳞癌在口腔颌面部恶性肿瘤构成中占有极高的比例,鳞癌的诊治在口腔颌面部肿瘤的临床工作中具有重要地位。本文试对目前国内口腔颌面部鳞癌的临床诊治现状作一综述。     

HPV感染在口腔鳞癌中的研究进展

口腔鳞状细胞癌(OSCC)是头颈部最常见的恶性肿瘤,预后较差,整体5年生存率较低,世界卫生组织预计在未来十几年中OSCC的发病率将持续上升。除了烟草、槟榔、饮酒等因素,人乳头瘤病毒(HPV)感染也被确定为危险因素,HPV的感染与OSCC的发生及预后有着密切的关系,目前研究表明,HPV感染逐渐成为OSCC的主要致病因素。HPV感染引起的OSCC可能会成为OSCC中一种发病机制、肿瘤微环境、生物学行为和预后都相对独特的一种类型。笔者通过广泛查阅文献,围绕HPV在OSCC中作用机制、HPV阳性OSCC的特征及HPV与OSCC治疗和预防的相关性的研究进展进行总结。     

口腔鳞癌细胞增殖特性与其ras癌基因产物P21的关系

应用流式细胞术及细胞免疫荧光染色技术，对３６例口腔鳞癌细胞增殖特性及其与ｒａｓ癌基因产物Ｐ２１表达的关系进行了分析。结果显示，Ｐ２１表达阳性的口腔鳞癌其ＰⅠ、Ｇ２Ｍ期细胞百分比均显著高于表达阴性组。Ｐ２１表达阳性的肿瘤，临床上多表现为生长较快，肿瘤最大表面直径也多在较大范围。ＤＮＡ倍体也与Ｐ２１表达密切相关，异倍体肿瘤表达阳性率明显高于二倍体肿瘤。表明Ｐ２１表达阳性的口腔鳞癌有更旺盛的增殖活动。本研究显示，对口腔鳞癌ｒａｓ癌基因产物Ｐ２１的定量研究，有助于了解其临床生物学行为及增殖特性。     

变蓝菌素对口腔鳞癌组织内源性脂肪酸合成活性的影响

[目的]了解谱蓝菌素对口腔鳞癌及口腔正常粘膜内源性脂肪酸合成活性的抑制特点。[方法]切除口腔鳞癌患者新鲜手术标本的癌组织及正常口腔粘膜组织块,将组织块剪成细块,分变蓝菌素处理组与对照组。用[U－^14C]乙酸钠示踪,液体闪烁计数^14C的参入量,以显示脂肪酸合成活性。[结果]口腔鳞癌组织块在变蓝菌素处理1h时脂肪酸合成活性约下降19％,2h下降约64％,4h下降约87％;对照组轻度上升。口腔粘膜在变蓝菌素处理后脂肪酸合成活性略下降,至4h时仅下降20％;对照组略微上升。[结论]变蓝菌素能明显抑制口腔鳞癌组织的内源性脂肪酸合成,但对口腔正常粘膜组织作用轻微,提示口腔鳞癌脂肪酸合成途径有可能成为研发抗肿瘤治疗药物的靶目标。     

口腔鳞癌颈淋巴结转移分子机制的研究进展

口腔鳞癌的颈淋巴转移是一个多步骤、多因素参与调控、连续复杂的生物学过程,该过程涉及肿瘤细胞出芽、肿瘤细胞迁移、进入微循环系统、到达靶器官定植新克隆的形成。口腔癌淋巴转移的过程、方式及其机制已成为近年来研究的热点,但是,目前其确切的分子机制仍不明了,本文就口腔癌淋巴结转移的分子生物学研究进展予以综述。     

早期口腔鳞癌颈部淋巴结转移的研究进展

口腔鳞癌具有较高的隐匿性颈淋巴结转移率,然而,临床上对早期患者颈部淋巴结的处理还存在较大争议.从肿瘤原发灶浸润厚度、影像学方面探讨早期口腔鳞癌颈部淋巴结转移的因素.对肿瘤原发灶浸润厚度>4 mm的患者,结合肿瘤影像学检查,建议行选择性颈部淋巴结清扫术.     

肿瘤干细胞标记物在口腔颌面部鳞癌中的研究进展

口腔颌面部鳞状细胞癌大约占癌症死亡率的第6位。目前临床上主要以手术和放射疗法为主,但这些治疗手段仍然不够令人满意。肿瘤生物学研究进一步发现,肿瘤细胞中的一小部分具有干细胞的特性,具有无限增殖和自我更新的特性,即肿瘤干细胞,而其它肿瘤细胞不具有此特点。针对肿瘤干细胞的靶向治疗的研究尤为重要。口腔鳞状细胞癌研究也发现肿瘤干细胞的存在,研究主要集中在口腔鳞癌肿瘤干细胞表面标志物的识别和鉴定方面,例如标志物CD44和CD133等。这些研究对口腔鳞癌的治疗和预防都提供了可以预见的乐观前景。     

癌相关成纤维细胞的分化来源

癌相关成纤维细胞(CAF)是肿瘤微环境重要的组成部分,甚至有研究者提出CAF可能作为抗肿瘤治疗的新靶点.然而研究的难点在于CAF分化来源的多样性,包括宿主成纤维细胞、上皮细胞、内皮细胞、间质细胞和干细胞等,而不同的来源决定了CAF不同的表型和功能.全面了解CAF的分化来源,将为抗肿瘤治疗提供新思路.     

双氢青蒿素通过诱导自噬抑制口腔鳞状细胞癌细胞增殖

目的 探讨双氢青蒿素（DHA）对人口腔鳞癌细胞增殖能力的影响及其作用机制。方法 用不同浓度的双氢青蒿素干预CAL27细胞,采用CCK-8法检测其细胞增殖活力,集落形成实验检测细胞克隆形成能力;基于网络药理学和生物信息学筛选DHA抑制口腔癌生物学行为的潜在靶点;不同浓度的DHA干预CAL27细胞后,Western blot检测增殖相关蛋白PCNA和自噬相关蛋白Beclin-1、LC3的表达;联合自噬阻断剂3-甲基腺嘌呤和自噬诱导剂雷帕霉素与双氢青蒿素共处理细胞后,检测细胞增殖活力、克隆形成能力和增殖及自噬相关蛋白的表达。结果 双氢青蒿素显著降低了CAL27细胞的增殖活力及克隆形成能力,且呈现浓度依赖性,PCNA的表达量也显著下降。网络药理学结合生物信息学发现DHA抑制口腔癌的靶点涉及自噬相关通路。DHA干预可升高细胞内自噬相关蛋白Beclin-1、LC3的表达,DHA联合自噬阻断剂共处理CAL27后,细胞的增殖活力及克隆形成能力降低,PCNA的表达升高、Beclin-1、LC3的表达降低。结论 双氢青蒿素可在体外抑制口腔鳞癌细胞的增殖能力,其作用机制可能与诱导细胞自噬相关。     

Immunohistochemical expression of EGFR and p-EGFR in oral squamous cell carcinomas

Epidermal growth factor receptor (EGFR) is a tyrosine kinase receptor of the ErbB family, which is expressed or highly expressed in a variety of solid tumors, including oral cancers. High EGFR expression has been correlated with tumor size, metastasis and survival. In recent years, EGFR has been considered a promising target for monoclonal antibody therapy. A total of 52 patients with oral squamous cell carcinoma (OSCC) were selected for EGFR and phosphorylated EGFR (p-EGFR) detection. Immunohistochemical staining was performed to evaluate EGFR and p-EGFR expression. Positive EGFR and p-EGFR staining was present in 92.3% (48/52) and 98.0% (51/52) of all cases, respectively. High EGFR and p-EGFR expression was present in 63.4% (33/52) and 69.2% (36/52) of all cases, respectively. EGFR and p-EGFR expression did not correlate with the clinical factors tumor stage, regional lymph node metastasis, or distant metastasis. However, a statistically significant correlation was identified between high EGFR expression and the pathologic factor tumor invasion. As a conclusion, the majority of OSCCs highly express EGFR and p-EGFR, indicating the importance of studying the efficacy of anticancer therapy targeting these signal factors.(Pathology Oncology Research Vol 12, No 2, 87–91)     

Constitutive activating mutation of the FGFR3b in oral squamous cell carcinomas

A G to T mutation at nucleotide position 2128 in the human FGFR3b coding region resulting in a Cys for Gly substitution (G697C) in the tyrosine kinase domain was observed in 62% (44/71) of oral squamous cell carcinomas (OSCC) examined. Immunostained FGFR3b was found in the cytoplasm of prickle cells in normal epithelia, and FGFR3b was localized in the cytoplasm and nucleus in non-FGFR3b mutant OSCC. Overexpressed FGFR3b protein on plasma membranes was noted in OSCC bearing the FGFR3b mutation. Enhanced tyrosine kinase activity of G697CFGFR3b was confirmed. Our results indicate that G697C is an activating mutation causing constitutive ligand-independent FGFR3b signaling. This mutation may be involved in the progression of OSCC and thus the FGFR3b coding sequence may have diagnostic or prognostic value for OSCC.     

埋植式动脉泵化疗与口腔鳞癌的综合治疗

目的:探讨埋植式动脉泵在口腔鳞癌化疗中的效果及在口腔鳞癌综合治疗中的应用价值。方法:采用ZW埋植式动脉泵经颈外动脉插管治疗口腔鳞癌29例,观查化疗效果及其与手术、放疗综合应用的可行性。结果:埋植式动脉泵给药治疗口腔鳞癌的有效率87.5%,未出现明显毒副作用。结论:埋植式动脉泵是口腔鳞癌化疗给药方法的较好选择,可作为多药物、多周期单一化疗;术前诱导及术后辅助化疗;化疗与放疗联合应用,多手段综合治疗中化疗最佳途径,可在临床广泛应用。     

埋植式动脉泵化疗与口腔鳞癌的综合治疗

目的：探讨埋植式动脉泵在口腔鳞癌化疗中的效果及在口腔鳞癌综合治疗中的应用价值。方法：采用ZW埋植式动脉泵经颈外动脉插管治疗口腔鳞癌29例,观查化疗效果及其与手术、放疗综合应用的可行性。结果：埋植式动脉泵给药治疗口腔鳞癌的有效率87.5%,未出现明显毒副作用。结论：埋植式动脉泵是口腔鳞癌化疗给药方法的较好选择,可作为多药物、多周期单一化疗;术前诱导及术后辅助化疗;化疗与放疗联合应用,多手段综合治疗中化疗最佳途径,可在临床广泛应用。     

乳腺癌肿瘤相关成纤维细胞对MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、黏附及侵袭的影响

目的:研究乳腺癌肿瘤相关成纤维细胞(carcinoma-associated fibroblasts,CAFs)对乳腺癌细胞增殖、凋亡、黏附和侵袭能力的影响.方法:首先,从6例乳腺癌病人肿瘤及癌旁正常乳腺组织块分别分离培养成对的CAFs和正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs).然后,通过Transwell小室将CAFs或NFs与乳腺癌MDA-MB-231细胞体外共培养,进行增殖(MTT)、侵袭、黏附实验及流式细胞仪细胞凋亡检测.结果:MDA-MB-231与CAFs或NFs共培养后乳腺癌细胞的增殖活性显著增强(P＜0.05).与NFs相比,这种差异在同CAFs共培养组更为明显(P =0.011).与CAFs共培养之后,MDA-MB-231的早期凋亡显著减少(P=0.026);而与NFs共培养之后则无显著差异.CAFs或NFs对MDA-MB-231细胞的细胞周期和晚期凋亡无明显影响.与CAFs或NFs共培养24小时后,MDA-MB-231细胞的侵袭、黏附能力明显增强,黏附数目为(34.7±4.84)个/视野(CAFs)和(20.16±0.09)个/视野(NFs),(P =0.000);侵袭数为(89±4.62)个/视野(CAFs)和(81.6±6.08)个/视野(NFs),(P＜0.05).结论:CAFs能促进乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖、减少其早期凋亡;同时对乳腺癌细胞的黏附和侵袭能力有促进作用.可是NFs的作用较CAFs为弱.有关CAFs影响乳腺癌肿瘤细胞的生物学特性的机制有待于进一步研究.     

口腔鳞癌中心体扩增与p53 STK15蛋白表达相关性

  目的  分析STK15及p53蛋白表达与口腔鳞状细胞癌（OSCC）中心体扩增相关性,探讨OSCC中心体扩增可能分子调控机制。  方法  8例正常口腔黏膜及43例OSCC石蜡包埋组织,采用间接免疫荧光双重染色了解OSCC中心体数目扩增状况,采用免疫组织化学方法检测相应组织p53、STK15蛋白表达情况,并分析其与中心体扩增相关性。  结果  中心体扩增可见于76.74%（33/43）OSCC中。OSCC中STK15阳性率为67.44%（29/43）,STK15阳性率在p53阳性组高于p53阴性组（P < 0.05）。OSCC中心体扩增发生率在STK15/p53阳性共表达组高于STK15/ p53阴性组（P < 0.05）,Spearman相关分析显示STK15/ p53阳性共表达与OSCC中心体扩增之间存在相关关系（r=0.356,P=0.019）。  结论  中心体扩增是OSCC常见异常现象,p53/STK15转激活-非依赖通路可能参与中心体异常的形成,与之共同参与OSCC的发生。      

Activation of MMP-2 and MMP-9 in patients with oral squamous cell carcinoma

BACKGROUND AND OBJECTIVES: Oral cancer accounts for one third of all malignancies in India where habit of tobacco consumption is the major etiologic factor, which causes field cancerization in oral mucosa. Multiple molecular events in oral mucosa due to field cancerization may be the cause of local and regional lymph node involvement in oral cancer resulting into low overall survival, high recurrence rate, and poor prognosis. Several matrix metalloproteinases (MMPs) have been shown to play an important role in the invasion and metastasis of oral squamous cell carcinoma (SCC). MMP-2 and MMP-9 are capable of degrading type-IV collagen, which is a major component of basement membrane. Therefore, we studied MMP-2 and MMP-9 activation by gelatin zymography, which is cost effective alternate to ELISA method, in patients with oral SCCs to predict their role in metastatic potentials. MATERIALS AND METHODS: Thirty-nine patients of oral SCCs were classified as non-metastatic (n = 28), and metastatic (n = 11) according to regional lymph node involvement. Malignant and adjacent normal tissues of the patients were collected at the time of surgery. Gelatin zymography was carried out using 7.5% polyacrylamide gel under non-denaturing and non-reducing conditions. Zymograms were analyzed densitometrically. Latent and active forms of MMP-2 and MMP-9 were expressed as ng/50 microg of protein. RESULTS: Latent and active forms of MMP-2 and MMP-9 were significantly elevated in malignant tissues as compared to their adjacent normal tissues (P < 0.05). Total MMP-2 and MMP-9 activities were also significantly elevated in malignant tissues as compared to adjacent normal tissues (P = 0.005 and P = 0.028, respectively). Activation ratio of MMP-2 and MMP-9 were significantly elevated in malignant tissues as compared to adjacent normal tissues. Activation of MMP-2 was prominent (11%) than MMP-9 (5%) in malignant tissues. Activation ratio of MMP-2 was significantly elevated in patients with lymph node metastasis than patients without lymph node metastasis (P = 0.005). Receiver's operating characteristic (ROC) curve analysis revealed that activation ratio of MMP-2 discriminate better than and activation ratio of MMP-9 between patients with and without lymph node metastasis. Activation ratio of MMP-2 could predict risk of lymph node metastasis development in patients without lymph node involvement. CONCLUSION: The study concluded that activation of MMP-2 and MMP-9 was significantly higher in malignant tissues as compared to adjacent normal tissues. Further, activation ratio of MMP-2 was significantly elevated in patients with lymph node metastasis as compared to patients without lymph node metastasis, which could predict risk of lymph node metastasis development in node negative patients.     

早期舌鳞癌的隐匿性淋巴结转移与治疗

目的：研究18例I期和Ⅱ期舌鳞癌的颈部隐匿性转移和挽救治疗的效果。方法：18例病以前均未接受过治疗。原发灶经口腔切除,并密切随访观察颈部。结果：手术切缘均呈阴性。11%（2/18）的病人原发灶处有复发,局部控制率是89%（16/18）。50%（9/18）的病人在随访期中发现锁骨上淋巴结转移。在原发灶已控制的情况下,淋巴结转移率是44%（7/16）。总的五年生存率是67%（12/18）。颈部隐匿性转移的病人五年生存率是27%（3/7）。结论：舌癌颈部隐匿性转移率较高,挽救成功率较低。因此,我们建议对早期舌鳞癌应施行选择性颈清扫术或预防性放射治疗,以提高生存率。     

长链非编码RNA H19对外阴鳞癌细胞A431增殖、迁移及凋亡的影响

目的:探讨长链非编码RNA H19在外阴鳞癌细胞系A431、人正常表皮细胞Hacat中的表达,及沉默H19表达后细胞增殖、迁移及凋亡的变化.方法:采用qRT-PCR方法检测A431细胞中H19的表达水平;用siRNA瞬时转染A431细胞,采用CCK8法、Transwell小室及Annexin V-FITC/PI双标记实验分别检测H19对A431细胞增殖、迁移及凋亡的影响.结果:H19在外阴鳞癌细胞系A431中的表达明显高于人正常表皮细胞Hacat,A431细胞中H19的表达下调能够抑制A431细胞的增殖及迁移能力,并且促进凋亡.结论:H19-siR-NA下调H19的表达,抑制A431细胞的增殖、迁移能力,促进凋亡,提示H19在外阴鳞癌中可能发挥促癌作用,其异常表达可能与外阴鳞癌的发生发展密切相关.     

口腔鳞癌细胞增殖和细胞凋亡的相关性研究

目的：通过观察口腔鳞癌中细胞增殖和细胞凋亡之间的关系,探讨细胞凋亡在口腔鳞癌发生中的作用。方法：利用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）技术及增殖细胞核抗原（PC—NA）免疫组织化学染色,对69例（维族36例、汉族33例）口腔鳞癌中的凋亡细胞和增殖细胞进行原位观察和比较。结果：口腔鳞癌不同组织学分级比较,高分化口腔鳞癌与中低分化口腔鳞癌之间增殖指数及凋亡指数均有显著性差异（P〈0．05）,不同部位的口腔鳞癌其增殖指数无显著差异,而舌癌组凋亡指数低于唇癌组和牙龈癌组（P〈0．05）,增殖指数与凋亡指数在口腔鳞癌中呈负相关关系（r=-0．663,P〈0．05）。结论：口腔鳞癌癌变过程不仅存在活跃的细胞增殖,而且存在细胞凋亡之异常,细胞增殖和细胞凋亡平衡失调在舌癌发病中可能起重要作用。