乙型肝炎患者血清病毒复制与HGF水平的关系

目的观察乙型肝炎患者血清病毒复制与HGF水平的关系。方法选择HBsAg／HBeAg／抗-HBc阳性患者血清120份和健康体检者血清30份，用荧光定量PCR法检测HBV DNA，应用ELISA法检测血清HGF水平。结果在HBV DNA为10^2、10^3、10^4、10^5、10^6和10^7拷贝／毫升的血清中，HGF水平依次为0．19±0．04ng／ml、0．30±0．06ng／ml、0．38±0．04ng/ml、0．49±0．07ng／ml、0．51±0．07ng／ml和0．53±0．06ng/ml，与正常健康人血清HGF水平（0．18±0．04ng／ml）比，HBV DNA在10^4拷贝／毫升以上的血清HGF水平显著升高（P〈0．05）。结论乙型肝炎患者血清HBV DNA与HGF水平存在一定的关系。     

799例重型肝炎患者的临床病原学与实验室分析

目的探讨乙型重型肝炎患者乙型肝炎病毒(HBV)DNA定量、e抗原表达与病死率的相关性,为重型肝炎临床治疗提供参考。方法统计我院2000-2004年各型重型肝炎的发病率,进一步应用荧光定量多聚酶链反应方法检测乙型重型肝炎患者血清HBV DNA,应用微粒子方法检测乙型肝炎e抗原表达情况,并分析其与病死率及抗病毒治疗的临床疗效间的关系。结果(1)重型肝炎中乙型肝炎占83．50％,慢性重型肝炎中乙型肝炎占96．77％;(2)5年间慢性乙型重型肝炎患者HBV DNA定量大于1×10,拷贝／ml组,总病死率为53．25%,小于1×105拷贝／ml组,病死率为34．50％,差异有统计学意义(P<0．01);e抗原表达对病死率无影响;(3)2004年,慢性乙型重型肝炎患者HBV DNA定量大于1×105拷贝／ml病例加用拉米夫定抗病毒治疗,病死率由2000年的54．64%下降至2004年的30．38%,差异有统计学意义(P<0．01)。结论重型肝炎以慢性乙型重型肝炎为主,病毒载量高是高病死率关键因素之一,抗病毒治疗可以降低患者的病死率。     

江西乙型肝炎病毒基因型分布及其与临床的相关性

目的了解江西慢性乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒（HBV）基因型的分布情况及HBV基因型与临床的关系。方法选择HBV DNA阳性的慢性乙型肝炎患者血清150份,患者分别诊断为慢性HBV携带者、慢性肝炎轻度、中度、重度和慢性重型肝炎,每组30例,采用多对型特异性引物巢式PCR法检测HBV基因型。结果本组慢性乙型肝炎患者HBV基因分型结果为B型118例（78．7％）,C型31例（20．7％）,D型1例（0．6％）;在上述5组患者中C型比例分别为0％,16．7％,26．7％,30．0％和30．0％,其中慢性HBV携带者与其他组比,差异有统计学意义（P〈0．05）;B、C两基因型患者HBeAg阳性率分别为83．9％（99／118）和90．3％（28／31）,HBeAb阳性率分别为16．1％（19／118）和9．7％（3／31）,差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论江西地区HBV优势基因型以B型为主,C型次之,有少量的D型感染者。     

三种乙型肝炎病毒DNA定量聚合酶链反应试剂比较及其假阴性原因分析

乙型肝炎e抗原（HBeAg）是乙型肝炎病毒（HBV）复制的一个标志，乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阳性、HBeAg阳性、抗-HBc阳性的患者体内HBV DNA亦较高。有报道所有该类标本均可检测到HBV DNA，且绝大部分（83．33％）的HBV DNA滴度高于10^6拷贝／ml。然而，我们在对临床标本进行HBV DNA定量检测中发现，相当一部分该类血清标本不能检测到HBV DNA或检测结果低于试剂盒检测下限。为了排除所用试剂盒缺陷造成的可能，我们对目前国内医疗机构常用的三种HBV DNA荧光定量聚合酶链反应（PCR）试剂进行了比较与分析。     

干扰素治疗慢性乙型肝炎时e抗原血清学转换的相关因素

目的探讨HBeAg阳性慢性乙型肝炎在聚乙二醇干扰素α-2a（PEG-IFN α-2a）治疗过程中HBeAg血清学转换和病毒学应答的相关因素，HBeAg血清学转换与HBV DNA应答的相关性。方法患者采用PEG-IFNα-2a每次180μg，皮下注射，每周1次，共治疗48周，治疗结束后随访24周。用Abbott公司生产的第三代HBV血清学检测试剂和AXSYM自动酶标检测仪检测血清HBeAg、抗-HBe，实时荧光定量PCR检测HBVDNA载量，分析不同治疗阶段和随访结束的病毒学应答率（HBV DNA〈1．0×10^5拷贝／ml），HBeAg血清转换率及变化规律和影响病毒学应答和HBeAg血清转换的因素。结果治疗12周和随访结束时HBeAg血清转换组和非转换组的ALT水平比较，差异有统计学意义。病毒学应答无论在治疗期还是随访结束时，应答组与非应答组之间的ALT水平差异均有统计学意义。HBeAg血清学转换与非转换组之间的HBV DNA载量之间在治疗12周、治疗结束和随访结束时，差异无统计学意义。治疗期间病毒学应答与非应答组的HBV DNA载量之间的差异有统计学意义，但持续病毒学应答与HBV DNA载量无显著相关性。治疗12、24周和48周获得病毒学应答组的HBeAg血清转换率分别为43．8％、21．4％和18．9％。治疗12、24周和48周时病毒学应答组，在随访结束时的HBeAg的血清转换率分别为42．9％、33．3％和27．6％。多因素分析显示，治疗72周的HBeAg血清转换与治疗结束时的HBV DNA阴转显著相关（OR=2．15，95．0％CI=1．744-2．664，P〈0．01）。结论治疗12周和持续HBeAg血清学转换以及病毒学应答均与ALT基线水平相关，HBeAg血清学转换与基础HBV DNA载量无关，但与治疗过程中病毒学应答相关。     

基线病毒载量对阿德福韦酯治疗HBeAg阴性慢性乙型肝炎疗效的影响

目的：探讨不同基线病毒载量HBeAg阴性慢性乙型肝炎（CHB）使用阿德福韦酯（ADV）抗病毒治疗的疗效。方法：将49例HBeAg阴性CHB患者根据基线HBV DNA分为低病毒载量组（A组,HBV DNA〈10。拷贝／ml）26例及高病毒载量组（B组,HBV DNA≥10^6拷贝／ml）23例,均采用ADV治疗,每12周复查HBV DNA、HBV标志物及ALT,选取治疗12、24、48周的检验数据进行比较分析。结果：治疗12、24、48周A组HBV DNA下降幅度（1g值）分别是2．8±1．1、3．1±0．7、3．3±0．6,B组下降幅度则分别是3．8±1．4、4．3±1．4、4．7±1．1,各阶段B组下降幅度更显著（P〈0．05）。A组各阶段完全病毒学应答率（〈100拷贝／ml）65．4％、76．9％、92．3％、B组分别为34．8％、39．1％、65．2％,A组均优于B组（P〈0．05）。生物化学应答率A组分别是57．7％、69．2％、92．3％,B组为60．9％、65．2％、87．0％,各阶段差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论：基线病毒栽量较高的病例使用ADV治疗,虽然其HBV DNA下降较明显,但完全病毒学应答率较低。基线病毒载量可作为疗效预测的重要参考依据。     

343例老年病毒性肝炎病原学分析

目的：探讨老年患者甲～戊型肝炎病毒感染、HBVDNA阳性相应乙型肝炎病毒标志物（HBV-M）表现形式和重型肝炎病原学。方法：检测我院2001年1月至2005年12月住院343例老年病毒性肝炎患者血清肝炎病原学指标。结果：甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病毒感染分别为3例（0．87％）、115例（33．53％）、35例（10．20％）、1例（O．29％）、91例（26．53％）；乙和／或戊丙甲丁重叠感染59例（17．21％），其中乙戊重叠40例（11．67％），未定型41例（11．95％）。HBVDNA阳性但HBeAg（-）占80．48％（33／41）。重型肝炎中以HBV感染为主，占72．41％（21／29）。结论：近5年老年病毒性肝炎住院率7．51％，依次为HBV、HEV、HCV、HAV、HDV感染，HEV感染显著上升，尤其是HBV和HEV重叠感染，应引起高度重视。     

乙型肝炎病毒前S1蛋白在血清学诊断乙肝病毒复制中的研究

目的：探讨前S1蛋白（Pre—S1）在血清学诊断乙肝病毒复制中的意义。方法：选择慢性乙型肝炎患者血清250例。分别测定每份患者血清中HBV标志物、前S1蛋白和HBV DNA。结果：HBeAg（＋）组中前S1蛋白阳性率97．2％（70／72），HBV DNA阳性率100％（72／72）。HBeAg（-）组中前S1蛋白阳性率60．1％（107／178），HBV DNA阳性率63．5％（113／178）。前S1蛋白和HBV DNA的总符合率为89．6%（224／250），2者差异无统计学意义（P〉0．05）。HBeAg和HBV DNA的总符合率为54．8％（137／250），2者差异有统计学意义（P〈0．01）。HBsAg（-）中检出前S1蛋白阳性2例。结论：前S1蛋白比HBeAg更敏感地反映HBV复制情况，且可弥补由于HBsAg基因编码区突变造成的漏诊。     

慢性乙型肝炎患者外周血HBsAg与HBV DNA相关性分析

目的探讨HBeAg（＋）和HBeAg（-）慢性乙型肝炎患者外周血HBsAg与HBV DNA的关系。方法定量检测HBeAg（＋）55例和HBeAg（-）36例慢性乙型肝炎患者血清HbsAg和HBV DNA的水平。结果 HBeAg（＋）患者血清HBV DNA、ALT和AST水平较HBeAg（-）患者高（P〈0.05）;HBeAg（＋）患者血清HBsAg水平较HBeAg（-）患者低（P〈0.05）;高水平血清HbsAg患者血清HBV DNA水平低（F=10.096,P〈0.01）;HBeAg（＋）慢性乙型肝炎患者HBsAg与HBV DNA存在负相关（r=-0.796,P〈0.01）,而HBeAg（-）慢性乙型肝炎患者HBsAg与HBV DNA无相关性（r=0.289,P〉0.05）。结论定量检测慢性乙型肝炎患者血清HBsAg水平有一定的临床意义。     

乙型肝炎病毒e抗原及DNA载量对慢性乙型重型肝炎预后的影响

目的探讨乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)阳性、阴性及乙型肝炎病毒(HBV)DNA载量对慢性乙型重型肝炎预后的影响。方法回顾性分析2002年7月至2004年12月在北京地坛医院住院的慢性乙型重型肝炎患者206例,以HBeAg阳性、阴性及HBV DNA载量和其他可能影响预后的因素做单因素分析和多因素分析。结果 x2单因素分析显示HBeAg阳性、阴性对慢性乙型重型肝炎预后无影响(x2=0．440,OR=0．777,95％ CI 0．424～1．425,P=0．50),HBV DNA载量对预后影响显著,HBV DNA低载量组和高载量组,好转率分别为53．1％和27．O％(x2=9．806,OR=3．055,95％ CI 1．554～6．007,P=0．002)。经Logistic多元回归分析筛选出肝硬化,肝肾综合征,肝性脑病,凝血酶原时间活动度<20％,总胆红素>513μmol／L,白蛋白<30 g／L, 总胆固醇<1．6 mmol／L,血小板<5×109／L和较高载量HBV DNA(HBeAg阴性者>3×104拷贝／ml,HBeAg 阳性者>1×105拷贝／ml)等9个因子对慢性乙型重型肝炎预后有重大影响,回归系数分别是1．539、21．356、 1．398、1．650、2．440、2．266、1．738、2．631和2．656。其中HBV DNA载量对预后影响的回归系数为2．656, Wald值为7．768,P=0．005,回归系数期望值为14．235,期望值95．O％ CI为2．199～92．133。提示HBV DNA 载量在其他重要因子存在时仍是影响慢性乙型重型肝炎预后的重要因子,其重要程度仅次于肝肾综合征及Ⅱ度以上肝性脑病。结论HBeAg阳性、阴性对慢性乙型重型肝炎预后无影响,HBV DNA载量为预测慢性乙型重型肝炎预后的重要因子,HBV DNA低载量者预后较好。     

乙型肝炎病毒载量与抗原抗体模式的关系

目的探讨乙型肝炎病毒载量与抗原抗体模式的关系,为乙型肝炎的诊治、预防提供科学依据. 方法用实时荧光定量聚合酶链反应和ELISA检测HBV DNA和抗原抗体,统计分析不同抗原抗体模式的HBV DNA量. 结果在HBsAg和HBeAg阳性模式中,HBV DNA拷贝数＞103/ml者占87.3%,其中＞107/ml者占66.7%;在HBsAg阳性,抗-HBe阳性模式中,HBV DNA拷贝数＜103/ml者占74.5%,＞107/ml者占8.3%;在HBsAg阳性,抗-HBc阳性模式中,HBV DNA拷贝数＞103/ml者占48.0%,＞107/ml者占29.1%.HBeAg阳性模式HBV 载量显著高于HBeAg阴性模式(P＜0.01).抗-HBe阴性模式HBV载量显著高于抗-HBe阳性模式(P＜0.01).在HBsAg阴性模式中,HBV DNA拷贝数＞103/ml占7.9%,1例拷贝数高达1.59×109/ml. 结论 HBeAg阳性模式HBV 载量显著高于HBeAg阴性模式,抗-HBe 阴性模式病毒载量显著高于抗-HBe阳性模式,HBeAg阳性模式中的少数人HBV载量很低,HBeAg阴性模式中少数人HBV载量很高,HBsAg阴性模式中少数人存在病毒复制,因此,对于一具体患者来说,根据抗原抗体模式,难以准确地判断病毒复制程度及其传染性的强弱.     

拉米夫定治疗e抗原阴性慢性乙型肝炎的早期预测指标分析

目的 评价拉米夫定(LAM)治疗e抗原阴性慢性乙型肝炎患者治疗前基线ALT、HBsAg、HBV DNA水平以及治疗4周和12周时HBV DNA<1×10~3拷贝/ml对其治疗104周时抗HBV疗效的预测价值. 方法 127例成年e抗原阴性慢性乙型肝炎患者均接受LAM 100 mg/d治疗,且均完成≥104周的治疗.治疗期间定期复查肝功能、HBV标志物(HBsAg、抗-HBs,HBeAg、抗-HBe、抗-HBc)及HBV DNA水平.分别比较和分析不同基线ALT、HBsAg、HBV DNA水平及治疗4周和12周时不同HBV DNA水平与治疗104周时疗效的关系.数据采用x~2检验及多元逐步Logistic回归分析.结果 基线ALT<5×正常值上限(ULN)和ALT≥5×ULN两组患者,治疗104周血清HBV DNA<1×10~3拷贝/ml的比例分别为50.0%和86.8%(P<0.01).基线HBsAg<2000 COI和HBsAg≥2000 COI两组患者,治疗104周时HBsAg<500 COI的比例分别为19.1%和17.5%(P>0.05);HBsAg/抗-HBS血清学转换率分别为2.1%和2.5%(P>0.05),血清HBV DNA<1×10~3拷贝/ml的比例分别为61.7%和67.5%(P>0.05).基线HBV DNA<1×10~6拷贝/ml和HBV DNA≥1×10~6拷贝/ml两组患者,至治疗4周和12周时HBV DNA<1×10~3拷贝/ml的比例差异均有统计学意义(P值均<0.01),但至治疗104周时HBV DNA<1×10~3拷贝/ml的比例分别为62.7%和67.1%,差异无统计学意义(P>0.05).治疗4周时HBVDNA<1×10~3拷贝/ml和HBV DNA≥1×10~3拷贝/ml两组患者,104周时HBV DNA<1×10~3拷贝/ml的比例分别为70.7%和60.9%(P>0.05);治疗12周时HBV DNA<1×10~3拷贝/ml和HBV DNA≥1×10~3拷贝/ml两组患者,104周时HBV DNA<1×10~3拷贝/ml的比例分别为78.8%和38.1%(P<0.01).结论 基线ALT≥5×ULN和治疗12周HBV DNA<1×10~3拷贝/ml的e抗原阴性慢性乙型肝炎患者用LAM继续治疗至104周时可以取得较好的病毒学应答.治疗前不同基线HBsAg水平对治疗104周时HBsAg的水平、HBsAg/抗-HBs血清学转换率和HBV载量的预测价值不大;基线HBV DNA水平对104周时是否获得病毒学应答的预测价值也不大.     

慢性乙型肝炎患者血清前S1抗原检测的意义

目的探讨PreS1抗原检测的临床价值。方法采用酶联免疫吸附试验法检测421例慢性乙型肝炎患者血清PreS1抗原和HBV标记物;采用荧光定量PCR法检测HBVDNA。结果在421例慢性乙型肝炎患者中,HBVDNA阳性者367例,其中PreS1Ag阳性者188例(51.2%),HBeAg阳性者119例(32.4%),后两者有显著性差异(P0.01);在高HBVDNA载量(105～107copies/ml和107copies/ml)组患者中,PreS1Ag阳性率(60.2%,60.0%)显著高于HBVDNA阴性组(33.3%)和低载量(103～105copies/ml)组(41.9%,P0.01);但在421例患者中,PreS1Ag阳性率(48.9%)低于HBVDNA(87.2%,P0.01)。结论 PreS1Ag能够较HBeAg更好地反映HBV在体内的复制状态,但尚不能代替HBVDNA的检测。     

替比夫定持续治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者病毒学应答随访报告

目的 探讨替比夫定持续治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎3年时病毒学指标变化情况。方法 选择91例HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者,给予替比夫定600mg口服,1次/d,持续治疗3年,随访观察患者治疗前后病毒学指标的变化及其相关影响因素。结果 91例患者均接受替比夫定持续治疗3年,结果血清HBV DNA检测不出率为86.8%,血清HBeAg转阴率为70.3%,HBeAg血清学转换率为34.1%;经分层分析,46例治疗24周时血清HBV DNA＜500拷贝/毫升的患者治疗3年时血清HBV DNA检测不出率达100.0%,而45例血清HBV DNA＞500拷贝/毫升的患者则为73.3%（P＜0.05）,且前者血清HBeAg转阴率和HBeAg血清学转换率亦分别明显高于后者（P＜0.05）;治疗3年时,41例＜30岁、37例女性患者分别较50例＞30岁和54例男性患者获得了更高的HBeAg血清学转换率（P＜0.05）,年龄和性别为治疗3年时HBeAg血清学转换率的独立预测因素（P＜0.05）。结论 替比夫定持续治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎3年能够显著抑制HBV复制,治疗24周时血清HBV DNA水平低、年龄轻、女性可能为疗效较好的预测因素。     

慢性乙型肝炎患者HBVDNA载量与肝组织炎症及纤维化程度的相关性分析

目的研究慢性乙型肝炎(CHB)患者血清HBV DNA载量与肝组织炎症及纤维化程度间的相关性。方法将169例CHB患者根据血清HBeAg分为HBeAg阳性组(110例)和HBeAg阴性组(59例),回顾性分析血清HBV DNA载量与肝组织病理炎症分级、纤维化分期之间关系。结果 HBeAg阳性组与HBeAg阴性组血清HBV DNA载量分别为(6.9±1.3)log10拷贝/ml和(4.7±1.8)log10拷贝/ml,两组比较差异有统计学意义(P=0.024)。HBeAg阳性组患者肝组织炎症活动度G1组为9例、G2组为80例、G3~4组为21例,其血清HBV DNA载量分别为(5.7±1.4)log10拷贝/ml、(6.4±1.8)log10拷贝/ml、(7.2±1.1)log10拷贝/ml,3组患者血清HBV DNA载量比较,差异无统计学意义(P=0.069)。肝组织纤维化程度S1组为28例、S2组为50例、S3~4组为32例,其血清HBV DNA载量分别为(6.9±1.1)log10拷贝/ml、(6.9±1.4)log10拷贝/ml、(6.8±4.2)log10拷贝/ml,3组患者血清HBV DNA载量比较,差异无统计学意义(P=0.079)。HBeAg阴性组患者肝组织炎症活动度G1组为6例、G2组为19例、G3~4组为34例,其血清HBV DNA载量分别为(2.2±1.9)log10拷贝/ml、(4.9±1.5)log10拷贝/ml、(5.4±1.8)log10拷贝/ml,3组患者血清HBV DNA载量比较,差异有统计学意义(P=0.014);肝组织纤维化程度S1组为12例、S2组为30例、S3~4组为17例,其血清HBV DNA载量分别为(2.6±4.1)log10拷贝/ml、(5.3±1.3)log10拷贝/ml、(5.6±1.7)log10拷贝/ml,3组血清HBV DNA载量比较,差异有统计学意义(P=0.026)。结论 HBeAg阳性CHB患者血清HBV DNA载量与肝组织炎症及纤维化程度无显著相关。HBeAg阴性CHB患者血清HBV DNA载量较高者,其肝组织炎症及纤维化程度较高。     

慢性乙型肝炎患者HBV DNA载量与血清IL-2、IL-6、IL-8、IL-13水平的相关性研究

目的探讨慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染患者血浆HBV DNA载量与乙肝血清标志物的关系及与白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、白细胞介素13(IL-13)含量变化的相关性。方法选取60例慢性HBV感染者(疾病组),采用免疫发光法定量检测乙型肝炎标志物;实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测HBV DNA载量,并以5.0×102copies/ml为临界点分为高载量组、低载量组;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-2、IL-6、IL-8、IL-13含量;并与20名健康对照者(正常对照组)比较。结果疾病组血浆HBV DNA载量5.0×102copies/ml时,以HBs Ag、抗-HBe、抗-HBc 3项指标升高为主要表现,阳性检出率为95%,IL-2、IL-6、IL-8、IL-13水平显著高于正常对照组(P0.05);血浆HBV DNA5.0×102copies/ml时,以HBs Ag、HBe Ag、抗-HBc 3项指标升高为主要表现,疾病组阳性检出率为70%,抗-HBe阳性检出率为30%;疾病组血清IL-2、IL-6、IL-8、IL-13水平显著高于对照组(P0.05),并显著高于血浆HBV DNA低载量组(P0.05)。结论 HBV DNA载量和细胞因子水平的变化可反应机体免疫活动状况,对临床观察疗效具有重要意义。     

慢性乙型肝炎重度和慢加急性肝衰竭患者MELD评分与HBV DNA载量的变化

目的了解慢性乙型肝炎重度和肝衰竭患者极期与缓解期HBV DNA载量的变化。方法观察并比较51例慢性乙型肝炎重度和56例慢加急性肝衰竭患者病情极期和缓解期的MELD评分和HBV DNA载量变化。结果慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者极期和缓解期MELD评分分别为20.5±4.4分和12.2±6.1分,HBV DNA载量为6.2±1.5log10 copies/ml和4.5±1.5log10 copies/ml,而慢性乙型肝炎重度患者极期和缓解期MELD评分则分别为11.9±3.2分和6.4±3.1分,HBV DNA载量为6.5±1.5log10 copies/ml和4.9±1.8log10 copies/ml。慢加急性乙型肝炎肝衰竭和慢性乙型肝炎重度患者极期和缓解期之间MELD评分和HBV DNA载量均存在差别(t=6.692～13.215,P均0.000)。结论不论慢加急性乙型肝炎肝衰竭还是慢性乙型肝炎重度患者,随着肝病的缓解,其MELD评分明显下降,HBV DNA载量出现显著的自发性下降。     

免疫清除期相同肝实质细胞体积分摊的血清HBV DNA载量与肝组织炎症分级的关系

目的 阐明慢性乙型肝炎自然病程中免疫清除期相同肝实质细胞体积分摊的血清HBVDNA载量水平与肝组织炎症分级的关系. 方法 使用荧光多聚酶链反应分别检测和比较慢性乙型肝炎免疫清除期患者肝组织病理炎症分级1、2、3、4级的血清HBV DNA载量,以及肝组织炎症分级1、2,3、4级所在肝纤维化分期用相同肝实质细胞体积分摊的血清HBV DNA载量.多组资料两两比较采用ANOVA检验分析. 结果 176例处于免疫清除期慢性乙型肝炎患者肝组织病理学炎症分级1、2、3、4级血清HBV DNA载量分别为(8.20×10~5±9.11×10~1)拷贝/ml、(16×10~6±5.96×10~1)拷贝/ml、(8.12×10~5±8.01×10~1)拷贝/ml和(2.08×10~6±3.69×10~1)拷贝/ml,差异无统计学意义(P>0.05).然而,肝组织病理炎症1、2、3、4级所在肝纤维化分期用相同肝脏实质细胞体积分摊后的血清HBV DNA载量分别为(9.24×10~8±9.35×10~2)拷贝/ml、(5.33×10~9±7.56×10~2)拷贝/ml、(1.06×10~(10)±1.77×10~3)拷贝/ml、(3.31×10~(11)± 5.18×10~2)拷贝/ml,差异有统计学意义(P<0.05).结论 在HBV感染的自然病程中,从免疫耐受期进入免疫清除期后,肝细胞反复出现炎症,坏死,同时伴纤维组织增生.不同肝纤维化分期中相同肝实质细胞体积分摊的血清HBV DNA载量水平与肝组织炎症分级有关.     

High-throughput quantitative analysis of hepatitis B virus DNA in serum using the TaqMan fluorogenic detection system

Reproducible quantitative assays to detect viral nucleic acids have proven useful in defining disease progression and following response to therapy in a wide variety of viral infections. We describe the development of a quantitative assay to detect hepatitis B virus (HBV) DNA using real-time fluorescent-probe polymerase chain reaction (PCR) (TaqMan). The assay is highly reproducible, highly automated, and much more sensitive than the currently used branched-chain DNA (bDNA) assay for HBV. The quantitative PCR assay accurately detected samples ranging from 10 to 10(9) copies of HBV DNA per milliliter. Of 157 serum samples submitted for HBV quantitation, 119 were positive by TaqMan PCR versus only 55 by bDNA (P <.001). All 55 bDNA-positives were positive by TaqMan. Of the 77 samples with detectable HBV-DNA titers below 3.75 x 10(5) copies by TaqMan, only 13 were detected by bDNA. We tested 119 patients negative for all HBV serologic markers, and all tested negative in the TaqMan assay. HBV DNA was detected by TaqMan in 164 of 195 (84%) of hepatitis B surface antigen (HBsAg)-positive samples. Among hepatitis B e antigen (HBeAg)-positive samples, median titers were 4. 3 x 10(6) copies/mL versus 322 copies/mL in HBeAg-negative samples (P =.012). The TaqMan assay for HBV DNA is highly sensitive and reproducible and thus appears useful in accurately defining levels of viral replication among persons with HBV infection.