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用查菲埃立克体P28融合蛋白作免疫印迹诊断犬埃立克体感染 总被引:2,自引:1,他引:1
目的 建立以查菲埃立克体P28融合蛋白为抗原的诊断犬埃立克体感染的免疫印迹。方法 诱导PinPoint^TMXa-3/P28重组质粒在E coli细胞内高效表达查菲埃立克体P28融全蛋白,以该重组蛋白作抗原与犬血清行免疫印迹。结果 P28融合蛋白与书籍的3份犬埃立克体感染血清呈阳性反应,与正常犬血清反应为阴性,在165份来自犬埃立克体病疫区的待检犬血清中有43份(26%)与P28反应阳性。结论 查菲埃立克体P28融合蛋白可作为犬埃立克体感染的特异性诊断抗原,以其建立的免疫印迹可用于犬埃立克体病的诊断。 相似文献
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埃立克体病是由埃立克体属微生物引起的一类人兽共患急性传染病,其特征为高热、头疼、贫血、白细胞减少、消瘦和黄疸等。查菲埃立克体是埃立克体属中代表性的蜱媒人畜共患病病原体,对人、畜均有较强致病性,在人体引起人单核细胞埃立克体病(HME)。本文较为全面地总结了查非埃立克体和HME的病原学、流行病学、临床表现、诊断和防治等方面的研究进展。 相似文献
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广东部分县市犬埃立克体抗体调查 总被引:4,自引:1,他引:3
埃立克体是一类专性细胞内寄生的革兰氏阴性球菌 ,能感染人和多种动物 ,引起埃立克体病。蜱是埃立克体的主要传播媒介。犬埃立克体病曾在世界上多个国家发生流行 ,造成大批军警犬死亡。 1998年广州市郊某养犬基地发生犬埃立克体病流行 ,2 0多条成年工作犬染病 ,死亡 6条〔1〕。 1999年广州市内另一警犬繁殖场暴发犬埃立克体病 ,36条 1~ 2月龄小犬染病 ,死亡 2 4条 ,经济损失很大。为了解犬埃立克体在我省的感染情况 ,及时控制该病的暴发流行 ,1999年 4月起 ,我们对广州周边几个县市部分犬场犬血清抗体进行调查 ,现将结果报告如下。1 材料… 相似文献
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我国埃立克体的研究进展 总被引:8,自引:0,他引:8
温博海 《中国人兽共患病杂志》2003,19(5):110-112
埃立克体(Ehrlichiae)是一类严格细胞内寄生的革兰氏阴性菌,主要寄生在单核细胞、粒细胞、或血小板内,引起动物和人的感染——埃立克体病(Ehrlichiosis)。埃立克体分为3个基因群,除腺热埃立克体群外,犬埃立克体群和嗜吞噬埃立克体群均是由蜱传播。长期以来人们认为蜱传埃立克体仅感染动物,而不感染人。然而1987年美国首次报 相似文献
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人粒细胞埃立克体病研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
人粒细胞埃立克体病(human granulocytic ehrli-chiosis,HGE)是近年来新发现的蜱媒自然疫源性疾病,为一种危害较大的传染性疾病,初步认为其危害程度仅次于莱姆病,而且其分布与莱姆病亦有某些方面的相似性。自1993年发现本病以来,报告病例逐渐增多,病例分布范围不断扩大,相关研究逐步增多。本文综述国外人粒细胞埃立克体病研究进展。 相似文献
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查菲埃立克体(Ehrlichia chaffeensis)是一种侵染人单核细胞的专性细胞内寄生的革兰氏阴性菌。其所致疾病为人单核细胞埃立克体病(Human Monocytotropic Ehrlichiosis, HME),是一种经蜱传播的人兽共患病。查菲埃立克体通过受体介导的吞噬作用侵入宿主细胞,在细胞质空泡中生存和繁殖。其缺乏编码肽聚糖和脂多糖生物合成的基因,影响多种促炎细胞因子的产生,从而抑制宿主的天然或获得性免疫应答。其通过抑制吞噬体溶酶体融合、抑制宿主细胞凋亡、逃避宿主自噬清除、参与蛋白质翻译后修饰等多种方式逃避宿主杀伤而导致持续感染。本文对查菲埃立克体致病机制研究进展进行综述,为进一步了解其与宿主相互作用模式、持续感染机制提供新的研究思路。 相似文献
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内蒙古大兴安岭林区人埃立克体病自然疫源地的调查 总被引:4,自引:0,他引:4
目的人粒细胞埃立克体病和人单核细胞埃立克体病都是近10年来发现的2种经蜱传播的自然疫源性疾病。这2种病的公共卫生学意义已受到了许多国家的关注。由于病原体是专性细胞内寄生菌,直接培养和纯化较为困难。我们根据这2种埃立克体的16S rRNA基因序列,构建了一系列PCR引物对,对采自我国大兴安岭等北方地区的蜱、动物脏器和人血标本进行PCR扩增,并对扩增出的产物进行DNA序列分析,以期查清有可疑蜱媒地区是否存在埃立克体感染,并通过这次调查为今后进一步开展系统研究提供参考。方法与结果本研究采用半巢式PCR检测蜱标本2种埃立克体的带菌率。结果首次从内蒙古大兴安岭采集的全沟硬蜱和森林革蜱,新疆精河采集的全沟硬蜱和草原革蜱中扩增出390bp的特异和人单核细胞埃立克体16S rRNA基因片段;同时检测的大兴安岭的嗜群血蜱和北京灵山采集的长角血蜱均未扩增出相应的片段。大兴安岭莫尔道嘎林业局采集的全沟硬蜱携带此基因的阳性率为39.06%(25/64),森林革蜱为 10.00%(7/70),2种蜱的带菌率有显著差异(x~2=15.53,P<0.01)。新疆精河采集的蜱携带EC率也是全沟硬蜱(11组/190,最小阳性率为5.79%)高于森林革蜱(1组/60,最小阳性率为1.67%),但差别不显著(x~2=1.30,P>0.25)。还从大兴安岭林区捕捉的一只大林姬鼠的脏器中检测到这一16S rRNA基因片段。对一只从莫尔道嘎采集的全沟硬蜱蜱标本进行近1500bp的人单核细胞埃立克体 16S rRNA全基因扩增与序列分析,结果扩增出的序列与美国一株人单核细胞埃立克体(GenBank注册号U23503)的相应序列完全相同。同样应用半巢式PCR和序列分析技术,从蜱标本中扩增出441bp的特异的人粒细胞埃立克体16SrRNA基因片段。内蒙古大兴安岭莫尔道嘎采集的全沟硬蜱和森林革蜱人粒细胞埃立克体的阳性率分别是 6.25%(4/64)和 2.86%(2/70);内蒙古大兴安岭乌尔旗汗采集的全沟硬蜱和嗜群血蜱的阳性率分别为3.81%(最小阳性率,8组/210)和2%(1/50);新疆精河采集的全沟硬蜱和草原革蜱最小阳性率分别为3.16%(6组/190)和1.67%(1组/60)。这是首次在亚洲从蜱标本中检测到人粒细胞埃立克体。同时检测的北京灵山采集的长角血蜱未扩增出相应的片段。对一只从莫尔道嘎采集的全沟硬蜱标本进行近1500bp的人粒细胞埃立克体 16S rRNA全基因分析,结果扩增出的序列与美国一株人粒细胞埃立克体(GenBank注册号U02125)的相应序列完全相同,一个碱基不差。另外还从内蒙古大兴安岭采集的森林工人血标本中扩增出特异的EC和人粒细胞埃立克体16SrRNA基因片段。这是首次在亚洲从人血中扩增出人埃立克体DNA。对一份人血标本进行近1500bp的人粒细胞埃立克体 16S rRNA全基因分析,结果仅在第81位与美国这株人粒细胞埃立克体差一个碱基,相差的位置正好位于高变区。结论根据检测结果,本研究建立的系列半巢式PCR扩增方法可以快速、灵敏地检测蜱、脏器、血等标本中的EC和人粒细胞埃立克体,并能较快地分析出其16S rRNA全基因。据报道,莱姆病的流行区往往也是人埃立克体病的流行区。为此我们在大兴安岭林区进行了人埃立克体病和莱姆病的流行病学调查。血样检测发现了人粒细胞埃立克体和 EC 16S rRNA基因阳性的病例共6名,病例均有近期蜱咬史,有埃立克体病的临床表现,潜伏期也相符;血清抗体检测发现检测人群中有HGE阳性抗体。2种病例的发现均为亚洲之首次。通过莱姆病螺旋体感染流行因素的单因素和多因素Logistic回归分析,发现在调查的流行因素中,职业和蜱咬史是影响该疫区人群感染莱姆病螺旋体的主要危险因素。这一调查结果也为该地区人埃立克体病和其他蜱传病的防治提供了参考。 相似文献
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目的 研究人埃里希体病的流行病学和临床特点.方法 回顾性分析21例人埃里希体病临床诊断病例的流行病学、临床表现、实验室检查、治疗以及预后.结果 本次人埃里希体病流行地区位于湖北、河南两省交界区,疫区蜱活动性高.病例均为农民,年龄最大69岁,最小19岁,中位数为50岁,男女比约为2∶3.病例均无类似病例接触史,3例在起病前1周有明确蜱咬史.常见症状包括发热、腹泻、咳嗽、恶心呕吐、腹痛和咳痰;并发症包括出血、中毒性脑病、急性肾功能不全、继发感染和呼吸衰竭.常见实验室异常包括PLT减少,嗜酸粒细胞减少,血清乳酸脱氢酶、肌酸激酶和转氨酶升高,WBC减少,蛋白尿.9例患者行外周血涂片检查,其中1例中性粒细胞胞质中发现包涵体;17例行血清学检查,其中埃里希体抗体阳性5例.经多西环素和对症支持治疗,痊愈14例,病死7例,死亡病例平均年龄56岁.结论 人埃里希体病是一种蜱传急性自然疫源性疾病,可累及多器官,高龄病例易发生并发症,预后较差. 相似文献
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J E Dawson C D Paddock C K Warner P W Greer J H Bartlett S A Ewing U G Munderloh S R Zaki 《The American journal of tropical medicine and hygiene》2001,65(5):603-609
In the United States, human ehrlichiosis is a complex of emerging tick-borne diseases caused by 3 distinct Ehrlichia species: Ehrlichia chaffeensis, Ehrlichia ewingii, and the human granulocytotropic ehrlichiosis agent. Ehrlichioses are characterized by a mild to severe illness, and approximately 4% of cases are fatal. Because these obligate intracellular bacteria are difficult to resolve with routine histologic techniques, their distribution in tissues has not been well described. To facilitate the visualization and detection of ehrlichiae, immunohistochemistry (IHC), in situ hybridization (ISH), and polymerase chain reaction (PCR) assays were developed by use of tissues from 4 fatal cases of E. chaffeensis infection. Evidence of E. chaffeensis via IHC, ISH, and PCR was documented in all 4 cases. Abundant immunostaining and in situ nucleic acid hybridization were observed in spleen and lymph node from all 4 patients. Significantly, in 2 of these patients, serologic evidence of infection was absent. Use of IHC, ISH, and PCR to visualize and detect Ehrlichia in tissues can facilitate diagnosis of ehrlichial infections. 相似文献
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目的了解广西南宁某警犬养殖训练基地蜱虫及病原体携带情况。方法 2013年7月在广西南宁某警犬养殖训练基地,采用逆毛式检蜱法采集犬体表以及犬舍墙壁的蜱虫,用巴贝虫属18S rRNA通用引物的巢式PCR、原核生物16S rRNA及真核生物线粒体16S rRNA通用引物的PCR和序列测定方法,鉴定蜱虫体内的病原体感染情况和蜱虫种类。结果从警犬体表及犬舍墙壁共计采集5只饱血蜱和13只饥饿蜱;经PCR鉴定均为血红扇头蜱(Rhipicephalus sanguineus)。蜱虫体内扩增到田鼠巴贝虫(Babesia microti)、伯纳特氏立克次氏体(Coxiella burnetii)、假单胞球菌(Pseudomonas sp.)、甲基杆菌(Methylobacterium sp.)DNA序列,阳性率分别为27.8%(5/18)、22.2%(4/18)、11.1%(2/18)、11.1%(2/18)。结论南宁某警犬养殖训练基地蜱虫存在一定比例的田鼠巴贝虫、伯纳特氏立克次氏体、假单胞球菌、甲基杆菌感染阳性率,对接触人员、及其他牲畜有潜在感染的风险,应加强预防和控制。 相似文献
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小品系卫氏并殖吸虫童虫在终宿主体内生长发育的动态分析 总被引:1,自引:0,他引:1
本文对小品系卫氏并殖吸虫(P.Westermani)童虫在试验狗体内的转移途径,生长速度和发育程度进行动态分析。(1)移行途径基本与前人报道相似,但未发现经肝脏移行。(2)用虫体体长的环比及定基比表示其生长速度,则肺脏童虫最快,胸腔童虫次之,腹腔童虫最慢,而同生活环境的童虫其生长速度与虫龄成正比。(3)以每只虫体的平均总分表示其发育程度,则肺脏虫体发育最佳,胸腔童虫次之,腹腔童虫最差。就器官而言,卵黄腺的发育最慢而且只有移行到肺脏的虫体才能完全发育成熟。 相似文献
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目的筛选与贝氏柯克斯体感染血清反应的贝氏柯克斯体毒力相关蛋白。方法以贝氏柯克斯体标准株九里株为模板,采用PCR扩增包括IV型分泌系统、分泌性蛋白和膜蛋白在内的毒力及毒力相关的基因,将扩得目的基因片段与原核表达质粒pET32a重组,将重组质粒转化大肠杆菌,用贝氏柯克斯体实验感染小鼠血清与转化大肠杆菌作免疫印迹。结果设计173对引物共扩增出170个目的基因,经PCR及酶切鉴定,有155个基因与pET32a质粒重组成功,SDS-PAGE电泳分析发现,共有104个转化菌表达目的蛋白,在104个重组蛋白中,筛选到32个与贝氏柯克斯体感染小鼠血清反应的重组蛋白。结论这些与贝氏柯克斯体感染血清反应的毒力相关蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性。 相似文献
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用SDS-PAGE对5株Q热立克次体LPS进行分析,发现七医、新桥和Ys8等国内分离的3个Ⅰ相株与国外Ⅰ相参考株Henzerling的LPS图象相似,而国外Ⅱ相参考株Grita的LPS图象与它们有明显的差异。我国分离株之间的SDS-PAGE分析也显示多糖结构的差异,新桥株与Henzerling株的LPS图象最相似,具有最完整的带型,七医株和Ys8株则与新桥株有所不同,特别是在蛋白酶K消化后的WCP电泳中均有顶部区带下移现象,七医株63和59K带较为细小,而Ys8株则无30K而有40K带等,有类似Grita株之处。免疫印迹发现,用Ⅰ相McAbB_5与LPS作免疫印迹,Ys8株和Grita株显示类似在多克隆抗体免疫印迹中的指纹状印迹(在17.5K下),而七医株仅显一14K带,新桥和Henzerling两株则无印迹。用Ⅰ相McAb与蛋白酶K消化后的WCP作免疫印迹的结果与上述基本一致。 相似文献
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Structural heterogeneity of faecal alpha 1 antitrypsin shown by immunoblot analysis in patients with Crohn's disease.
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Faecal alpha 1 antitrypsin was determined in 34 patients with Crohn's disease and in 19 healthy subjects by immune nephelometry. A structural analysis of faecal alpha 1 antitrypsin was carried out using immunoblot analysis under non-reducing conditions. Native serum alpha 1 antitrypsin migrated with an apparent molecular weight of 45 kDa. Proteolytic alpha 1 antitrypsin fragments (5-42 kDa) were specifically immunostained in 13/19 and 22/34 stool samples from control subjects and from patients with Crohn's disease respectively. There was a weak correlation (r = 0.47; p less than 0.02) between the molecular weight of fragmented alpha 1 antitrypsin and the faecal concentration in both groups, indicating that alpha 1 antitrypsin inhibits its own proteolysis by intestinal proteases in a dose dependent way. The incidence of polymeric forms (greater than 45 kDa) was similar in patients (10/34) and control subjects (5/19). In only one case in each group was the native serum form of alpha 1 antitrypsin found in faeces. We conclude that faecal alpha 1 antitrypsin differs structurally from the native serum form. Immunochemical measurements, therefore, reflect rather than represent faecal concentrations of alpha 1 antitrypsin. The controversial results in published reports may be partly explained by these findings. The molecular heterogeneity of faecal alpha 1 antitrypsin is not specifically associated with Crohn's disease. 相似文献
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Petit A Ragu C Soler G Ottolenghi C Schluth C Radford-Weiss I Schneider-Maunoury S Callebaut I Dastugue N Drabkin HA Bernard OA Romana S Penard-Lacronique V 《Haematologica》2012,97(3):379-387