海参皂苷单体Echinoside A在大鼠体内的消化吸收特性初步研究

本文以大鼠为动物模型研究了海参皂苷单体Echinoside A(EA)在体内的消化吸收特性。Wistar大鼠适应饲养1周后,按体重分为10组,每组3只。禁食不禁水12h后,给大鼠分别按照30mg/kg?BW灌胃配置好的海参皂苷EA溶液1mL,分别在灌胃后0、0.5、1、2、3、4、7、9、11、24hr取血,建立并优化血清中海参皂苷EA的HPLC-MS检测方法,检测不同时间节点大鼠血中EA含量。实验结果显示,海参皂苷单体EA液质检测的定量限为3ng,0.3-20μg/mL浓度范围线性良好(R₂=0.9946)。海参皂苷EA灌胃后在血中迅速出现,在3hr出现最高峰值,浓度达到0.83μg/mL,之后在7hr出现另一个较小峰,9hr后恢复至4hr水平(约0.24μg/mL),直至24hr。本文建立了血清中海参皂苷EA的液相色谱-质谱联用检测方法,发现海参皂苷单体EA可经消化道吸收,该结果为海参皂苷在保健食品及药物中的应用提供了科学依据。     

人参皂苷Rh2 对荷Lewis 肺癌小鼠抗肿瘤作用

目的观察人参皂苷Rh2（ginsenoside Rh2,G-Rh2）对荷Lewis肺癌小鼠抗肿瘤作用并探讨其作用机制。方法建立Lewis肺癌实体瘤模型,观察G-Rh2的抗肿瘤作用、观察肿瘤内血管密度（MVD）,以及免疫组化法观察瘤体血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果 0.3 mg·kg^-1、1.0 mg·kg^-1和3.0 mg·kg^-1G-Rh2组对Lewis肺癌小鼠实体瘤均有抑制作用（P〈0.05）;1.0 mg·kg^-1和3.0 mg·kg^-1 G-Rh2组MVD明显低于对照组（P〈0.05）;免疫组化结果显示,0.3 mg·kg^-1、1.0 mg·kg^-1和3.0 mg·kg^-1 G-Rh2组瘤组织内的VEGF蛋白表达阳性率均低予对照组（P〈0.05）。结论 G-Rh2可抑制Lewis肺癌生长及抑制肿瘤新生血管生成的作用,可能是通过降低VEGF表达来实现的。     

海参岩藻聚糖硫酸酯抑制小鼠肿瘤生长和转移及其作用机制的研究

目的探讨海参岩藻聚糖硫酸酯(sea cucumber fu-coidan,SC-FUC)对小鼠肿瘤生长和转移的抑制作用及其机制。方法建立C57 BL/6J小鼠Lewis肺癌自发性肺转移模型,连续腹腔注射给药21 d,剥离原位肿瘤和双侧肺,分别称瘤重和计数肺表面转移灶结节数;采用RT-PCR法检测肿瘤组织中缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、乙酰肝素酶(heparanase,HPA)和基质金属蛋白酶-2/9(matrix metalloproteinase-2/9,MMP-2/9)mRNA的表达。结果 SC-FUC可以抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,其平均抑制率为45.5%,并可以减少肺表面转移灶结节数(P<0.01),平均抑制率为66.0%。SC-FUC可以降低荷瘤小鼠肿瘤组织中HIF-1α、VEGF、HPA、MMP-2/9 mRNA的表达(P<0.05,P<0.01)。结论 SC-FUC能抑制肿瘤细胞在小鼠体内的生长和转移,其机制可能与抑制肿瘤血管新生,降低肿瘤细胞的迁移能力有关。     

革皮氏海参皂苷抑制血管新生作用

目的以革皮氏海参中分离得到的三萜皂苷ho-lothurin A1(HA)和24-dehydroechinoside A(DA)为研究对象,比较研究其抗血管新生的作用。方法采用MTT法和AO/EB染色法检测不同剂量HA和DA对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和凋亡的影响;采用小管形成实验观察HA和DA对HUVEC分化形成小管能力的影响;细胞黏附实验比较研究HA和DA对HUVEC与肝癌细胞HepG2的黏附能力的影响;鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管新生模型,观察HA和DA抑制CAM血管新生的情况。结果 HA和DA均具有抑制HUVEC增殖的活性(48 h的IC50值分别为4.80、3.82μmol.L-1),并能促进内皮细胞的凋亡;在体外能抑制内皮细胞小管形成,可抑制HUVEC与HepG2细胞间(P<0.01)的黏附,能使CAM新生血管明显减少,其中DA抑制血管新生活性优于HA。结论海参皂苷HA和DA具有抑制血管新生的作用,其活性与其结构相关。     

金属蛋白酶抑制剂BB-94抑制Lewis肺癌生长和转移的实验研究

在肿瘤侵袭和转移过程中,癌细胞要多次穿越基底膜侵入周围组织。因此,对包括基底膜在内的细胞外基质的降解是肿瘤侵袭和转移的关键步骤之一。在这一复杂的过程中,绝非只是靠形态结构的改变所能完成,有多种蛋白水解酶参与降解基底膜及细胞外基质。其中基质金属蛋白酶(ＭＭＰ)发挥了极其重要的作用,促进了肿瘤的侵袭和转移。ＢＢ94(ｂａｔｉｍａｓｔａｔ)是新近研制的一种人工合成基质金属蛋白酶抑制剂,其化学结构与ＭＭＰ胶原底物酶切点附近3个氨基酸的基本结构相似,可对ＭＭＰ起到竞争抑制作用。文献[1～3]报道,ＢＢ94能够抑制癌细胞生长和…     

海参中海参烷型皂苷的研究进展

本文综述了2000年以来海参烷型海参皂苷研究的新进展,列举了从21种海参中鉴定的59种新化合物的结构并分析了其结构特点,简要介绍了相应药理活性研究结果.     

海参硫酸软骨素抑制小鼠黑色素瘤肺转移作用的研究

目的海参硫酸软骨素(sea cucumber chondroitin sul-fate,SC-CHS)由美国肉参中分离所得,研究其结构及对小鼠黑色素瘤B16-F10细胞实验性肺转移模型的抑制作用。方法采用MTT法检测了SC-CHS对B16-F10细胞生长的影响;细胞黏附实验研究了SC-CHS对B16-F10细胞黏附能力的影响;体内实验,预先腹腔给药5 d后,建立实验性肺转移模型,继续腹腔注射SC-CHS 20d后,检测小鼠肺转移灶形成,血清中唾液酸的含量、γ-谷氨酰转肽酶活力和肺组织中羟脯氨酸、氨基己糖、糖醛酸的含量。结果实验结果显示SC-CHS体外对B16-F10细胞的生长没有影响,但可以明显降低B16-F10细胞同基质和血管内皮细胞的黏附能力(P<0.05)。SC-CHS剂量组小鼠的肺转移灶数量明显减少(P<0.01),平均转移抑制率为62.66%,血清唾液酸含量和γ-谷氨酰转肽酶活力明显降低(P<0.01),肺组织中羟脯氨酸、氨基己糖、糖醛酸的含量明显下降(P<0.01)。结论 SC-CHS能抑制肿瘤细胞在小鼠体内的转移和生长,其机制可能与降低肿瘤细胞与基质的黏附能力和细胞的转移能力有关。     

博来霉素A5抑制血管生成和抗肿瘤转移作用的实验研究

目的：证实博来霉素Ａ５抑制血管生成和抗肿瘤转移作用。方法：将含有０．５μｇ博来霉素Ａ５的载体置于胚龄７ｄ的鸡胚绒毛尿囊膜（ＣＡＭ）上,４８ｈ后观察抑制血管生成情况。Ｌｅｗｉｓ肺癌皮下接种Ｃ５７ＢＬ／６小鼠６ｄ后,在移植瘤周围及其基底部多处局部注射博来霉素Ａ５,每鼠每次０．６ｍｇ,每５天１次,共３次,接种后２５ｄ处死小鼠,观察皮下移植瘤血管生成抑制民政部和对肺转移的抑制作用。     

革皮氏海参总皂苷致畸和致突变作用的研究

目的 对革皮氏海参（Pearsonothuria graeffei,P. graeffei）总皂苷的生殖毒性和遗传毒性进行评价。方法 采用Ames试验法,分别检测不同浓度海参皂苷对组氨酸缺陷型鼠伤寒沙门氏菌TA97、TA98、TA100和TA102回复突变菌落数的影响;健康性成熟雌、雄大鼠2:1同笼过夜,将孕鼠随机分为正常组、不同浓度海参皂苷剂量组,剂量组大鼠给予灌胃海参皂苷的剂量分别为17.2、68.8、275 mg?(kg?bw)-1,正常组灌胃生理盐水。于妊娠第20 d处死孕鼠,记录总胎数、活胎数、死胎数和吸收胎数;称子宫重、胎盘重和胎鼠重;测量胎鼠体长和尾长;检查胎数的外观、内脏和骨骼。结果 不同剂量组海参皂苷都没有引起试验菌株回变菌落数的明显增加,结果为阴性;与正常组相比,各剂量组对胚胎形成、生长发育、外观、骨骼及内脏各指标均无显著性差异。结论 在该实验剂量与条件下,海参总皂苷无致突变作用,对孕鼠生长和胚胎发育亦无致畸作用。     

川芎嗪对小鼠Lewis肺癌的治疗作用

目的:研究中药川芎嗪(TMP)对实体肿瘤的疗效及其可能的作用机理。方法:本研究运用Lewis肺癌小鼠模型,观察TMP对小鼠Lewis肺癌的疗效、免疫功能、生存质量及不良反应的影响。结果:TMP治疗小鼠Lewis肺癌能抑制肿瘤的生长,稳定病灶,提高荷瘤小鼠的生存质量,改善免疫功能。结论:TMP对小鼠Lewis肺癌有明显疗效,其作用机理与其本身对Lewis肺癌实体瘤有抑制作用和提高荷瘤小鼠免疫功能有关。     

茯苓多糖对Lewis肺癌小鼠自发肺转移的抑制作用及其机制研究

目的 研究茯苓多糖对Lewis肺癌小鼠自发肺转移的影响,并探讨其作用机制。方法 C57BL/6小鼠右腋皮下接种Lewis肺癌细胞,分为茯苓多糖高（0.50 mg/只）、低（0.33 mg/只）剂量组,顺铂组（顺铂0.04 mg/只）,模型组（生理盐水）,接种瘤细胞后第2天开始尾iv给药,隔天一次。观察小鼠一般状态,造模后第7天开始,隔天测量肿瘤体积。造模后21 d取肺,计数肺表面转移灶个数,HE染色检测肺微小转移灶个数,检测外周血白细胞数量及脾质量、脾指数。结果 茯苓多糖高、低剂量对实体瘤无明显抑制,茯苓多糖高剂量可减少肺表面转移灶个数,增加白细胞CD11bmRNA表达,不影响外周血白细胞数、脾质量及脾指数,一般状况较好;茯苓多糖低剂量对肺表面转移灶个数、外周血白细胞数、脾质量及脾指数无明显影响,可增加白细胞CD11b、CD18mRNA表达,一般状况较好。结论 茯苓多糖对Lewis肺癌小鼠实体瘤无明显抑制作用,但能够抑制其自发肺转移,对外周血白细胞数量、脾质量及脾指数无明显影响,可增加外周血白细胞CD11b、CD18mRNA表达,活化外周血白细胞可能是茯苓多糖抑制肿瘤转移的机制之一。     

Inhibitory effect of topiramate on Lewis lung carcinoma metastasis and its relation with AQP1 water channel

AIM: To study the effect of topiramate on tumor metastasis and its relation with aquaporin 1 (AQP1) water channel. METHODS: Lewis lung carcinoma metastatic model was used to determine the effect of topiramate on tumor growth and metastasis. Colorimetric estimation was used to investigate the action of topiramate on carbonic anhydrase (CA) activity. Western blotting and immunohistochemical analysis were used to study the influence of topiramate on AQP1 water channel expression in lungs or tumor tissues of mice bearing Lewis lung carcinoma.     

鸦胆子油乳对肺癌细胞A549的抑制作用及其机制

目的研究鸦胆子油乳对肺癌细胞A549的抑制作用,并初步探讨其相关作用机制。方法以不同终质量浓度的鸦胆子油乳(0.50,1.25,2.50 g·L^-1)作用于肺癌细胞A549,并将其作为低、中、高3个质量浓度实验组,同时设置对照组(给予等量0.9%NaCl)。用4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色法检测各组肺癌细胞A549凋亡的形态学变化,用噻唑蓝(MTT)法和免疫印迹法检测各组肺癌细胞A549增殖抑制情况及凋亡抑制蛋白Survivin表达情况。结果干预24 h后,对照组及低、中、高3个质量实验组肺癌细胞A549增殖抑制率分别为(0.31±0.19)%,(37.24±6.21)%,(49.33±5.96)%,(61.25±6.23)%,干预48 h后,增殖抑制率分别为(0.32±0.21)%,(58.14±6.33)%,(65.28±5.79)%,(73.46±5.37)%,干预72 h后,增殖抑制率分别为(0.38±0.23)%,(68.58±5.87)%,(76.35±6.02)%,(83.97±5.64)%。与对照组比较,实验组肺癌细胞A549增殖抑制率显著升高(P<0.01),且随着鸦胆子油乳质量浓度增大和作用时间延长,肺癌细胞A549增殖抑制率呈逐渐升高趋势(P<0.05或P<0.01)。对照组和低、中、高3个质量浓度实验组Survivin蛋白灰度值分别为0.95±0.07,0.83±0.10,0.66±0.12,0.51±0.09;对照组和实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01),且随鸦胆子油乳质量浓度增加,Survivin蛋白表达量呈逐渐降低趋势(P<0.01)。结论鸦胆子油乳可显著抑制肺癌细胞A549增殖,并诱导其凋亡,相关作用机制可能是其可有效抑制肺癌细胞A549中凋亡抑制蛋白Survivin的表达。     

塞来昔布联合吉西他滨对Lewis肺癌皮下移植瘤的抑制作用

目的研究塞来昔布(CEL)与吉西他滨(GEM)联用对Lewis肺癌皮下移植瘤的抑制效应。方法 40只小鼠随机分为对照组(A组)、GEM组(B组)、CEL组(C组)和CEL/GEM联用组(D组),每组10只。A、B组给予普通饲料;C、D组自接种后第2天给予含CEL 1mg/g的饲料喂养。B、D组于肿瘤接种后第7天,给予GEM 100mg/kg溶液0.2ml腹腔注射;A、C组给予等量生理盐水。每周注射1次,连续3周。实验期间测量肿瘤长短径,并绘制肿瘤生长曲线,4周后处死,称量瘤重,计算抑瘤率;检测移植瘤组织血管内皮生长因子(VEGF)表达、微血管密度(MVD)和肿瘤细胞的凋亡。结果 B、C和D组抑瘤率分别为54.18%、49.52%和88.59%;D组移植瘤组织的VEGF表达及MVD低于A、B和C组(P<0.05),而凋亡指数高于A、B和C组(P<0.05)。结论 CEL和GEM均能抑制Lewis肺癌移植瘤的生长,两者联用通过抑制肿瘤微血管生成及诱导肿瘤细胞凋亡发挥协同抗肿瘤效应。     

羧甲基壳聚糖对人高转移肺癌细胞——95-D增殖能力和体外转移能力的抑制作用

目的评价羧甲基壳聚糖对人高转移肺癌细胞——95-D增殖能力和体外转移能力的抑制作用.方法用软琼脂克隆形成实验、创伤实验、黏附实验和transwell小室实验来评价羧甲基壳聚糖对95-D细胞的影响.结果羧甲基壳聚糖浓度在0～150 μg·ml-1范围内,剂量依赖性地抑制95-D细胞的增殖能力、移动能力、浸润能力、黏附能力和克隆形成能力.结论羧甲基壳聚糖能有效抑制95-D细胞的增殖能力和体外转移能力.     

乙酰唑胺抑制肿瘤转移及荷瘤小鼠肺相关蛋白质的表达

目的:研究乙酰唑胺对肿瘤转移的抑制及相关蛋白质的表达.方法:以 Lewis肺癌为肿瘤转移模型,观察乙酰唑胺对肿瘤转移的影响;用SDS/PAGE、 Western blot、IEF和肽质量指纹谱的方法观察相关蛋白质的变化.结果:乙酰唑胺可以显著抑制肿瘤转移,肺转移抑制率为83.9％.荷瘤小鼠肺组织中水通道蛋白-1和肌动蛋白表达明显增高,用乙酰唑胺治疗后水通道蛋白-1表达降低.结论:乙酰唑胺具有抗肿瘤转移作用,其机制可能与抑制水通道蛋白-1的表达有关;水通道蛋白-1和肌动蛋白可望成为肿瘤肺转移诊疗的新靶标.     

海参中总皂苷含量测定方法的研究

目的 建立一种海参中总皂苷含量的测定方法.方法 以海参三萜皂苷Echinoside A作为标准品,采用香草醛-高氯酸作为显色体系,以60%乙醇提取,正丁醇萃取得海参样品中总皂苷,利用标准曲线测定了11种市售海参样品的总皂苷含量,并采用.皂蛋比(皂苷/蛋白质)作为指标讨论了海参品种、生长环境、加工方法等因素对皂苷含量的影响.结果 确定测定波长为560nm,标准曲线为y=1.3414x-0.0077,该方法在0～0.5 mg范围内呈现良好的线性关系(R2=0.9994).本测定方法的加样回收率为(99.01±2.82)%,RSD为4.68%.结论 方法简便,重现性好,可作为海参中总皂苷含量测定的方法.     

Inhibitory effect of a biscoclaurine alkaloid, cepharanthin, on lung metastasis of Lewis lung carcinoma

The antimetastatic effect of cepharanthin with or without 5-fluorouracil (5-FU) was examined in an experimental model of lung metastasis induced by Lewis lung carcinoma (3LL) in C57BL/6crSlc mice. Injection of cepharanthin i.p. after removal of the implanted primary tumor inhibited the development of lung metastases. Combination therapy with cepharanthin plus 5-FU inhibited significantly the lung metastases. Lung metastases were inhibited by i.v. injection of peritoneal macrophages activated with cepharanthin. Cepharanthin depressed aniline hydroxylase and aminopyrine demethylase activities of the hepatic microsomal drug-metabolizing system in tumor-bearing mice. Moreover, the concentration of 5-FU in the tissues (lung, liver, kidney, spleen and blood) was increased significantly by coadministration of cepharanthin. A possible mechanism of the inhibition of lung metastases by treatment with cepharanthin may be that this drug acts through macrophage activation and depression of the hepatic microsomal drug-metabolizing system. These findings raise the possibility that combination therapy with cepharanthin plus 5-FU may have clinical value in the prevention of cancer metastasis.     

Inhibitory effect of Cordyceps sinensis on spontaneous liver metastasis of Lewis lung carcinoma and B16 melanoma cells in syngeneic mice

We investigated the effect of the water extract of Cordyceps sinensis (WECS) on liver metastasis of Lewis lung carcinoma (LLC) and B16 melanoma (B16) cells in mice. C57BL/6 mice were given a s.c. injection of LLC and B16 cells and sacrificed 20 and 26 days after tumor inoculation, respectively. WECS was daily administered p.o. to the mice in a dose of 100 mg/kg body weight (wt.) in the experiment of LLC and in a dose of 100 or 200 mg/kg body wt. in the experiment of B16 from one week before tumor inoculation to one day before the date of sacrifice. The tumor cells increased in the thigh in LLC-inoculated mice and in the footpad in B16-inoculated mice. The relative liver wt. of the tumor-inoculated mice significantly increased as compared to that of the normal mice due to the tumor metastasis, as verified by the hematoxylin-eosin staining pathological study in the LLC experiment. The relative liver wt. of the WECS-administered mice significantly decreased relative to that of the control mice in both the LLC and B16 experiments. WECS showed a strong cytotoxicity against LLC and B16 cells, while cordycepin (3'-deoxyadenosine), an active component of WECS, was not cytotoxic against these cells. These findings suggest that WECS has an anti-metastatic activity that is probably due to components other than cordycepin.