穴位埋线对肥胖模型大鼠脂联素及其受体的影响

目的：探讨穴位埋线对单纯性肥胖的作用机理。方法：采用高脂饮食喂养建立肥胖模型大鼠,将造模成功大鼠进行埋线治疗干预后,观察大鼠体重、体长、Lee’s指数的变化及检测血清脂联素及其受体的含量。结果：经治疗后,埋线组大鼠的体重、Lee’s指数均明显低于对照组而高于正常组(P<0.01,P<0.05)。雌雄埋线组大鼠治疗前后体重差值的比较,其结果显示雄性大鼠减肥疗效优于雌性(P<0.01)。对照组、埋线组大鼠血清ADP、AdipoR1的含量均明显低于正常组(P<0.01),而AdipoR2的含量高于正常组(P<0.01);经埋线治疗后,肥胖大鼠血清ADP、AdipoR1的含量升高(P<0.01,P<0.05),而AdipoR2的含量降低(P<0.01)。结论：穴位埋线对肥胖机体脂联素及其受体水平的良性调节作用可能是埋线疗法减肥的作用机制之一。     

藏药柳茶提取物调节肥胖大鼠脂代谢的作用机制研究

目的:探讨藏药柳茶调节单纯性肥胖大鼠脂质代谢的作用机制。方法:复制单纯性肥胖大鼠模型,以藏药柳茶提取物高、中、低不同剂量灌胃给药8 w后,剥离肾周脂肪制作组织切片,显微镜下观察脂肪细胞数量及形态。实时荧光定量RT-PCR法检测脂肪组织中脂联素(Adiponectin)、脂联素受体2(AdipoR2)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(Peroxisome Proliferator-activated Recep-torsγ,PPARγ)mRNA水平变化。用Western Blot检测脂肪组织AMPK蛋白表达情况。结果:与模型组比较,使用柳茶提取物8 w后400倍显微镜下全视野范围内脂肪细胞直径减小、数量增加。脂肪组织中Adiponectin、AdipoR2、AMPK、PPARγmRNA水平均有不同程度升高。柳茶中剂量组大鼠脂肪组织AMPK蛋白表达量显著高于模型组。结论:藏药柳茶的减肥作用机制可能是通过脂联素的信号转导途径来完成的。     

针刺对高脂大鼠主动脉脂联素受体1和2蛋白表达的影响

[目的]探讨高脂饮食对SD大鼠主动脉脂联素信号的影响以及针刺对脂联素信号的调节。[方法]刚断乳的SD大鼠高脂喂养12周后检测血脂、髓过氧化物酶(MPO)和一氧化氮(NO),根据体质量随机分为模型组和针刺组,干预4周后用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测血清脂联素(APN),用Western blotting法检测主动脉脂联素受体(AdipoR)1和2蛋白表达,设普食对照组。[结果]高脂饮食12周后SD大鼠甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、MPO明显升高,NO明显降低;干预4周后模型组大鼠血清APN、主动脉AdipoR1/2蛋白含量均明显低于对照组,针刺组血清APN水平和主动脉AdipoR2含量明显增加,AdipoR1呈上升趋势。[结论]通过针刺能够增加血清APN水平和主动脉AdipoR蛋白,调整主动脉APN信号的转导,Adipo R2在其中发挥了重要作用。     

脂联素受体在正常SD大鼠乳鼠心肌细胞的分布和表达

目的通过体外培养SD大鼠乳鼠心肌细胞,研究脂联素受体1（AdipoR1）、脂联素受体2（AdipoR2）及T-钙黏蛋白（Tcadherin）三种脂联素受体在大鼠乳鼠心肌细胞上的分布和表达。方法采用酶消化法原代培养乳鼠心肌细胞,通过a-肌动蛋白免疫荧光法对原代培养的心肌细胞进行鉴定,并在倒置相差显微镜下观察细胞生长状态。选用原代培养96h的单层心肌细胞进行实验,使用RT—PCR和细胞免疫组织化学方法检测AdipoR1、AdipoR2、Tcadherin的mRNA和蛋白在心肌细胞中的表达情况。结果在SD大鼠乳鼠心肌细胞上均检测到了AdipoR1、AdipoR2、T—cadherin的mRNA和蛋白表达,其中以AdipoR1和Tcadherin的mRNA和蛋白表达量高,与AdipoR2的表达量相比差异有统计学意义（P〈0．01）。结论脂联素受体1、脂联素受体2和T钙黏蛋白,三种脂联素受体在SD大鼠乳鼠心肌细胞上均有表达,并以脂联素受体1和T-钙黏蛋白的表达为主,脂联素受体2表达量较少。     

大黄素对非酒精性脂肪性肝炎模型大鼠作用及对脂联素、脂联素受体的影响

目的探讨大黄素对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)模型大鼠的治疗作用及对脂联素、脂联素受体的影响。方法雄性SD大鼠40只,随机分为空白组,模型组,大黄素高(40 mg·kg^-1)、低剂量(20 mg·kg^-1)组。空白组予普通饲料,其余各组予高脂饲料建模,时间共10周。造模后,处死动物,取材。观察各组大鼠体质量、肝湿重、肝指数,化学发光法检测大黄素对NASH模型大鼠谷丙转氨酶(glutamic pyruvic transaminase,ALT)、谷草转氨酶(millet straw transaminase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、谷氨酰转肽酶(glutamyl transpeptidase,GGT)、甘油三酯(triglycerides,TG)、胆固醇(cholesterol,TC)的影响,制作石蜡切片行苏木素-伊红染色(HE),油红O染色检测大黄素对NASH大鼠肝组织炎症损伤、脂肪变的影响,Western-blot检测各组大鼠肝脏内脂联素(adiponectin,ADPN)、脂联素受体2(adiponectin receptor-2,AdipoR2)蛋白表达,荧光定量PCR检测各组大鼠肝脏内ADPN,AdipoR2 mRNA表达。结果与模型组相比,大黄素能有效改善NASH模型大鼠肝脏脂质沉积,减轻炎症细胞浸润,减轻大鼠体质量,肝指数;大黄素高剂量组ALT、AST、ALP、GGT、TG、TC均有不同程度下降(P<0.05);相对模型组,大黄素高剂量组大鼠肝组织ADPN,AdipoR2蛋白,mRNA水平升高(P<0.05)。结论大黄素能通过上调NASH模型大鼠ADPN,AdipoR2表达,有效改善肝功能、血脂,改善NASH大鼠肝组织脂肪变程度,减轻肝脏炎症。     

中药复方益糖康对糖尿病大鼠白色脂肪中脂联素、脂联素受体1基因表达的影响

目的:观察中药复方"益糖康"对糖尿病大鼠白色脂肪脂联素(Adiponectin)和脂联素受体1(adiponectin receptor1,AdipoR1)的基因表达的影响。方法:大鼠高脂饲料饲养4周后,一次性腹腔注射链尿佐菌素(STZ)造模,将造模成功的大鼠用随机数字表法将其随机分为模型组和益糖康治疗组。空白对照组和模型组以蒸馏水灌胃,治疗组的大鼠用益糖康煎剂灌胃,4周后3组大鼠睾周白色脂肪组织放入液氮中保存,用RT-PCR法检测脂肪中脂联素和脂联素受体1mRNA表达。结果:治疗组的脂肪组织脂联素mRNA含量与空白对照组比较,没有显著差异,模型组较治疗组明显降低(P<0.01)。脂联素受体1mRNA表达与空白对照组的比较没有显著差异,模型组较空白对照组明显降低(P<0.01)。结论:推测中药复方"益糖康"具有上调白色脂肪脂联素和脂联素受体1基因表达的作用,这可能是益糖康治疗糖尿病早期大血管病变的机制之一。     

大黄提取片对高脂饮食诱导肥胖大鼠能量代谢的影响

目的观察大黄提取片对高脂饮食诱导肥胖大鼠骨骼肌解偶联蛋白3(UCP3)及能量代谢的影响,以探讨大黄的减肥作用机制。方法给饮食诱导肥胖大鼠灌服低、中、高剂量大黄提取片(200、400、800mg·kg-·1d-1),测定大鼠肥胖指标,显微镜下观察脂肪细胞大小,应用Real-timePCR和Westernblot检测大鼠骨骼肌UCP3表达量,高效液相色谱法(HPLC)测定大鼠骨骼肌细胞能荷值(EC)。结果大黄提取片呈剂量依赖性的增强减肥作用,高剂量大黄提取片能明显减轻饮食诱导肥胖大鼠腹腔脂肪重量和体重(P<0.05),降低Lee’s指数(P<0.05),减小脂肪细胞最大直径与最小直径(P<0.05),明显增加骨骼肌UCP3表达(P<0.05),并降低骨骼肌细胞能荷水平(P<0.05)。结论大黄提取片可能通过增加肥胖大鼠骨骼肌中UCP3表达﹑促进细胞能量代谢而有效减肥。     

艾灸“神阙”“足三里”穴对痴呆大鼠脂联素及受体表达的影响

目的:通过比较艾灸不同腧穴对阿尔茨海默病(AD)大鼠血清及脂肪组织中脂联素及脂联素受体的影响,探讨艾灸"神阙""足三里"对AD大鼠脂质代谢的作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、神阙组、足三里组、神阙-足三里组,每组10只。大鼠腹腔注射D-半乳糖、氢溴酸东莨菪碱复制AD模型,各治疗组艾灸相应腧穴,每日治疗1次,每次每穴艾灸3壮,连续5周。用Morris水迷宫定位航行实验检测大鼠记忆能力,用酶联免疫吸附法检测大鼠血清中脂联素的水平,用荧光定量PCR和Western blot法分别检测大鼠脂肪组织中脂联素mRNA及脂联素受体的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠首次水迷宫定位航行实验的逃避潜伏期显著延长,说明造模成功。干预结束后,与正常组比较,模型组大鼠血清中脂联素含量显著降低(P0.01),脂肪组织中脂联素mRNA显著降低(P0.01),脂肪组织中脂联素受体表达显著下降(P0.01)。与模型组比较,各艾灸组大鼠逃避潜伏期显著缩短(P0.05),血清中脂联素含量明显升高(P0.01),脂肪组织中脂联素mRNA表达明显增多(P0.05),脂肪组织中脂联素受体表达明显升高(P0.01),。各治疗组之间差异无统计学意义(P0.05)。结论:艾灸"神阙""足三里"穴或两穴合用都能提高AD大鼠血清及脂肪组织中脂联素及脂联素受体水平,进而改善AD的学习记忆能力。     

针刺对高脂大鼠主动脉脂联素受体基因表达的影响

目的探讨AdipoR的不同亚型在高脂饮食机体主动脉表达的变化以及针刺对该变化的影响。方法将高脂喂养12周的SD大鼠检测血脂、一氧化氮（NO）和髓过氧化物酶（MPO）,根据体重随机分为模型和针刺组,干预4周后检测血脂、NO、MPO、主动脉AdipoR1和AdipoR2基因表达,并设普食对照组。结果干预前,与对照组比较,模型组和针刺组大鼠TG、TC、MPO明显升高,NO明显降低。干预后,模型组TG、TC、MPO、NO无明显变化,主动脉AdipoR1和AdipoR2基因表达明显降低;针刺后TG、TC和MPO明显降低,NO明显回升,主动脉AdipoR2基因表达明显上调,AdipoR1基因表达无明显变化。结论高脂饮食造成机体主动脉AdipoR1和AdipoR2基因表达低下,影响了脂联素信号对主动脉的保护作用;针刺能够上调脂联素信号保护高脂对主动脉的损伤,其作用主要通过AdipoR2介导的。     

泽泻丹明饮对高脂血症大鼠血脂、脂联素水平的影响

目的:观察泽泻丹明饮对高脂血症大鼠血脂、脂联素水平的影响。方法:以高脂饮食喂养14 d建立高脂血症大鼠模型。分别以泽泻丹明饮高剂量生药(4.0 g.kg-1)、中剂量(2.0 g.kg-1)、低剂量(1.0 g.kg-1)及血脂康(20 mg.kg-1)进行干预,共21 d。监测血清甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)和脂联素(ADP)水平,并在光镜下观察大鼠肝脏病理变化。结果:泽泻丹明饮高剂量组与模型组比较,TC,TG显著降低(P<0.01),LDL-C明显降低(P<0.05),HDL-C有升高趋势,血清ADP水平显著升高(P<0.01)。中剂量组与模型组比较血清ADP水平明显升高。结论:泽泻丹明饮中、高剂量组可调节血脂、脂联素水平,具有良好的改善血脂紊乱作用。     

脂联素球状结构域真核表达载体pcDNA3.0-gAd的构建

目的构建脂联素球状结构域（globular adiponectin,gAd）的真核表达载体,为研究gAd对糖尿病、动脉粥样硬化等疾病的治疗奠定基础。方法从健康人全血中提取基因组DNA,PCR法获得脂联素球状结构域基因,经EcoRⅠ和XhoⅠ酶切后与pcDNA3.0真核表达载体重组得到pcDNA3.0-gAd,分别用PCR法和DNA测序法鉴定pcDNA3.0-gAd。结果以从健康人全血中提取出的高纯度基因组DNA为模板,PCR扩增出gAd基因,真核载体pcDNA3.0经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后与gAd基因进行体外重组,PCR法筛选出阳性克隆,DNA测序显示重组质粒pcDNA3.0-gAd的gAd基因与基因库中报道的脂联素基因序列（Gen-Bank：EU420013.1）中gAd序列完全一致,说明成功构建了pcDNA3.0-gAd,且序列正确。结论本研究为进一步从分子水平探究gAd基因和蛋白质的功能、深入探讨其生物作用机制创造了条件。     

脂联素与肾脏疾病的研究进展

脂联素（Adiponectin）是近年来发现的一种由脂肪细胞特异性分泌的蛋白质。研究发现脂联素与肥胖、胰岛素抵抗、2型糖尿病、动脉粥样硬化等有一定相关性，且在这些疾病的发生发展中起着重要的作用。脂联素与肾脏疾病的关系,也很密切，不仅在肾脏疾病的发生发展中起着独特的作用，而且在各种肾脏病中亦有变化。     

血清瘦素、脂联素与冠心病病变程度的相关性研究

目的探讨血清瘦素、脂联素（APN）水平与冠心病（CHD）病变程度的相关性。方法应用ELISA法对稳定型心绞痛（SA）组（21例）、不稳定型心绞痛（UA）组（23例）、急性心肌梗死（AMI）组（24例）和正常对照（CO）组（20例）进行血清瘦素、脂联素水平检测,并进行统计学分析。结果血清瘦素水平冠心病各组明显高于正常对照组（P〈0.05）,UA组及AMI组高于SA组（P〈0.05）,AMI组高于UA组（P〈0.05）,血清瘦素水平与冠心病病变程度呈正相关（r=0.60,P〈0.05）;血清APN水平UA组及AMI组明显低于SAP组和对照组（P〈0.05）,冠心病各组与正常对照组比较有统计学意义（P〈0.05）,AMI组与UA组比较有统计学意义（P〈0.05）,脂联素与冠心病病变程度呈负相关（r=-0.59,P〈0.05）。结论血清瘦素、脂联素与冠心病发病密切相关,冠心病患者血清瘦素水平升高,血清瘦素水平与冠心病病变程度呈正相关。冠心病患者血清APN水平下降,血清脂联素与冠心病病变程度呈负相关。     

脂联素调控序列荧光素酶报告基因荧光素酶活性的分析

目的:通过将1 100 bp长度的人脂联素(adiponectin,AD)启动子上游的调控基因(包括启动子,-1066 To+4 bp)插入荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic中,构建成含启动子调控序列的荧光素酶报告基因(pGL3-Basic-ADI1100),用于脂联素在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中的表达调控研究。方法:利用PCR技术扩增1 100 bp长度AD启动子片段,与PUC19T载体连接,将PUC19T-ADI1100质粒,及荧光素酶报告基因pGL3-Basic质粒转染大肠肝菌(DH5a)后扩增,提取并纯化PUC19T-ADI1100和pGL3-Basic;分别以KpnI,XhoI酶切pGL3-Basic;电泳并回收ADI1100片段和pGL3-Basic酶切大片段,在T4 DNA连接酶的作用下,将ADI1100片段插入荧光素酶报告基因pGL3-Basic中,并转染CHO细胞,检测荧光素酶报告基因活性。结果:通过酶切及基因测序的方法证实所构建质粒含有脂联素启动子上游调控序列;瞬时转染实验显示AD启动子在CHO细胞中的转录表达随时间的变化而升高,转染后48 h的双报告基因活性是pGL3-Basic的30倍。结论:该荧光素酶报告基因构建成功,为后续筛选有抑制肥胖作用的中药提供基础。     

原发性高血压合并高血脂症患者血清瘦素及脂联素水平及其相关性研究

目的探讨原发性高血压合并高血脂症(EH+HLP)患者血清瘦素和脂联素水平及其与血压、血脂等因素的相关性。方法应用放射免疫分析和ELISA法对61例EH+HLP患者进行血清瘦素和脂联素测定,并与40例正常健康人进行比较。结果 EH+HLP患者血清瘦素水平明显高于健康人,其中EH 3级与EH 1级、EH 2级比较均有显著性差异,EH1级与EH 2级间无显著性差异。EH+HLP患者血清脂联素水平明显低于健康人(P<0.001),不同血压级别高血压病患者血清脂联素比较无显著性差异。瘦素与性别相关,女性高于男性;与BMI、SP呈正相关,回归方程相关系数R=0.791。脂联素与TG呈负相关,回归方程相关系数R=0.479。结论血清瘦素、脂联素水平与EH合并HLP的发生有密切关系。     

2型糖尿病肾病患者血清脂联素检测的临床意义

目的：探讨血清脂联素（ADPN）在2型糖尿病肾病（T2DN）发生发展中的作用.方法：根据24h尿微量白蛋白排泄率（uAER/24h）设单纯糖尿病组（SDM组）、早期糖尿病肾病组（EDN组）和临床糖尿病肾病组（CDN组）各50例,同设对照组（Nc组）50例,分别测定血清ADPN水平.结果：SDM、EDN和CDN3组血清ADPN水平高于Nc组（P＜0.05）;EDN和CDN组血清删水平高于SDM组（P＜0.05）;CDN组血清ADPN水平高于EDN组（P＜0.05）.结论：血清ADPN与T2DN的发生、发展有关,血清ADPN水平检测对评估糖尿病肾病有较好的价值.     

丹参酮ⅡA对大鼠心肌缺血预适应保护中脂联素表达的影响

目的:建立大鼠缺血预处理模型,观察丹参酮ⅡA在心肌缺血预处理中的保护作用及其对脂联素表达的影响。方法:大鼠建立IPC模型及心肌梗死模型,随机分为空白对照组、MI组、IPC组、TSN干预组,分别采用ELISA酶联免疫吸附法(ELISA)法和免疫组化法检测血清及心肌组织APN浓度的表达。结果:IPC组大鼠心肌梗死面积明显小于MI组,其血浆及心肌组织脂联素表达均高于MI组。TSN干预组脂联素表达高于MI组及IPC组,心肌梗死面积减少。结论:丹参酮ⅡA干预可以增加大鼠缺血预适应中的保护作用,其机制可能与增加脂联素表达有关。